Analysis of proteins from membrane and soluble fractions of Giardia duodenalis trophozoites of two Brazilian axenic strains

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Avanços tecnológicos em hematologia laboratorial

O recente avanço científico e tecnológico direcionado à identificação imuno-hematológica de produtos celulares (ex.: citocinas, interleucinas, interferons, entre outros) sintetizados por determinadas células sanguíneas, bem como na identificação de antígenos de membrana de leucócitos e células progenitoras hematopoiéticas, promoveram excepcional desenvolvimento no diagnóstico laboratorial de diversas doenças hematológicas. Somam-se a esse fato as aplicações das técnicas de biologia molecular que se tornam cada vez mais instrumentos laboratoriais de grande definição no diagnóstico e na prevenção de doenças hematológicas, notadamente aquelas de origem hereditária. O presente artigo teve o objetivo de expor as principais aplicações de novas tecnologias que deverão ser adotadas rapidamente pela moderna hematologia laboratorial, bem como a de sensibilizar os profissionais hematologistas, clínicos e laboratoriais, para a necessidade de se atualizarem numa nova ciência, a dos produtos celulares.

Detecção de anticorpo anticoração em camundongos Balb/c imunizados com Streptococcus mutans

Anticorpos para antígenos cardíacos foram analisados por ELISA em 14 soros de camundongos Balb/c hiperimunizados com Streptococcus mutans, inativado pelo formaldeído. Os níveis de anticorpos da classe IgG anticoração e antimiosina elevaram-se significativamente nos animais imunizados quando comparados com os controles, especialmente no grupo A, imunizado e reestimulado com antígenos solúveis de S. mutans. Neste grupo, os resultados do Western Blot mostraram reatividade com miosina cardíaca e uma banda de 35 kDa. A análise histológica dos corações dos animais do grupo B, imunizado e reestimulado com antígenos de superfície do microrganismo, demonstrou a presença de degeneração celular, tipo hidrópica e hialina e focos inflamatórios constituídos de linfócitos e macrófagos no miocárdio e pericárdio. Os resultados deste trabalho reforçam a hipótese da existência de mimetismo antigênico entre tecido cardíaco e S. mutans e chamam a atenção para o risco de desenvolvimento de anticorpos reativos com antígenos próprios induzidos por vacina anticárie com componentes estreptocócicos.

Catalase activity of different Candida species after exposition to specific antiserum

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

O movimento ortodôntico não induz reabsorção cervical externa ou O movimento ortodôntico não altera cor, volume e nem induz inflamação gengival

Nesse trabalho, procurou-se explicar - anatômica e funcionalmente - como se estrutura e se organiza a região cervical dos dentes, para fundamentar os seguintes questionamentos: 1) Por que ocorre Reabsorção Cervical Externa na dentição humana?; 2) Por que na gengivite e na periodontite não se tem Reabsorção Cervical Externa?; 3) Por que depois do traumatismo dentário e da clareação interna pode ocorrer a Reabsorção Cervical Externa?; 4) Por que o movimento ortodôntico não altera a cor e o volume gengival durante o tratamento?; 5) Por que o movimento ortodôntico não induz Reabsorção Cervical Externa, mesmo sabendo-se que a região cervical pode ser muito exigida? A existência de antígenos sequestrados na dentina, a presença de janelas de dentina na região cervical de todos os dentes, a reação do epitélio juncional e a distribuição dos vasos sanguíneos gengivais podem justificar por que a Reabsorção Cervical Externa não ocorre e nem a cor e o volume gengival são alterados no movimento ortodôntico.

Caracterização eletroforética e análise de subgrupo de rotavírus em rebanhos bovinos leiteiros do Estado de São Paulo

Foi realizado um estudo para determinar a ocorrência de infecção por rotavírus em rebanhos bovinos leiteiros. Foram analisadas 375 amostras de fezes de bezerros, na faixa etária 1 a 45 dias, provenientes de animais pertencentes a nove propriedades rurais, situadas em seis municípios da região nordeste do Estado de São Paulo. Destas, 193 pertenciam a animais com diarréia e 182 foram obtidas de animais clinicamente sadios. As técnicas utilizadas para a detecção de rotavírus foram o ensaio imunoenzimático (EIE) e a eletroforese em gel de poliacrilamida (EGPA). Por meio do EIE foram detectadas 11,2% (42/375) de amostras positivas, 15% delas (29/193) obtidas de animais com diarréia e 7,1% (13/182) colhidas de animais sem diarréia. A análise do perfil do genoma indicou a presença de seis eletroferótipos distintos, característicos de rotavírus do grupo A. Um único eletroferótipo foi detectado em três rebanhos, o qual permaneceu constante durante o período de amostragem. em dois rebanhos diferentes eletroferótipos foram detectados, embora com maior prevalência de um dado perfil. A caracterização das amostras positivas em subgrupos foi realizada por meio do EIE com duplo sanduíche, utilizando-se anticorpos monoclonais (MAb) específicos para antígenos de subgrupo (I e II). Foram caracterizadas como subgrupo I 52,4% (22/42) das amostras testadas, nenhuma reagiu com MAb de subgrupo II, enquanto as demais, 47,6% (20/42), não reagiram com nenhum dos dois subgrupos.

Superficial acral fibromyxoma of the thumb: a case report

The authors report a case of superficial acral fibromyxioma (SAF) in a 74-year-old male who presented with a painless mass in a periungual dorsoradial region of the right thumb. It is a rare benign neoplasm, which was recently described, that arouse on the skin and subcutaneous tissue of the hands and feet, especially in the proximity to the ungual region of male adults. Surgical treatment was performed with the excision in blocks of the margins of the lesion and fragmentation of the nail and nail matrix, according to the literature recommendation. Although there may be local recurrence in 22% of the cases, the patient presents no symptoms, deformities or functional limitations. In addition, there was no sign of tumor recurrence 18 months after the surgery. We are not aware of a similar case report in the Brazilian literature

Teste imunoenzimático (enzyme-linked immunosorbent assay) para diagnóstico da cisitcercose bovina e estudo da cinética de produção de anticorpos contra-Cysticercus bovis

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Caracterização de rizóbios (Bradyrhizobium japonicum) e produtividade da soja

Fez-se um estudo de campo sobre a competição e a dinâmica de ocupação de sítios de nodulação de estirpes de Bradyrhizobium japonicum naturalizadas ou inoculadas em sementes. O ensaio foi instalado em Latossolo Vermelho Escuro utilizando blocos ao acaso, com 8 repetições dos seguintes tratamentos: A) controle sem inoculante; B) controle sem inoculante, com adubação nitrogenada; C) inoculante com cerca de 107 rizóbios/g (8g/kg de semente); D) inoculação com cerca de 1010 rizóbios/g (8g/kg de semente). Os inoculantes foram preparados com as estirpes recomendadas na ocasião, SMS - 314 (= SEMIA 587) e SMS - 463 (= SEMIA 5019 = 29W). A identificação das estirpes formadoras dos nódulos foi realizada em amostras coletadas aos 10, 42 e 70 dias após a germinação. Realizou-se também a colheita dos grãos para avaliação da produção e de N-total. A tipificação sorológica foi feita com antissoro preparado a partir de antígenos constituídos pelas seguintes estirpes de Bradyrhizobium japonicum: SEMIA 587, SEMIA 5019 e SEMIA 5052 (= USDA 6), utilizando-se da técnica immunodot. A caracterização das estirpes dos nódulos revelou um pequeno aumento (6,2 a 8,7%), na ocorrência de nódulos formados pelas estirpes recomendadas, nas três épocas de amostragem. Houve expressiva participação da estirpe 5052 (= sorogrupo USDA 6) na formação dos nódulos. Verificou-se que as estirpes naturalizadas podem contribuir de forma diferente na formação dos nódulos durante o ciclo, dependendo da amostragem.

Imunoglobulinas e C3 no granuloma paracoccidióidico

Utilizou-se o modelo experimental de paracoccidioidomicose, em camundongos, induzida pela inoculação endovenosa de suspensão de formas cerebriformes do P. brasiliensis (cepa Bt2; 1x10(6) formas viáveis/animal), para avaliar, após 2, 4, 8, 16 e 20 semanas: 1. A presença de imunoglobulinas e C3 nos granulomas pulmonares, por imunofluorescência direta; 2. A resposta imune humoral (imunodifusão) e celular (teste do coxim plantar), e 3. A histopatologia das lesões. Os camundongos apresentaram resposta imunocelular positiva desde a 2a. semana, com depressão transitória na 16a. semana, e anticorpos desde a 4a. semana, com pico na 16a. semana. Os granulomas pulmonares foram epitelióides, com numerosos fungos e microabscesses; a extensão das lesões foi progressiva até a 16a. semana, com regressão discreta na 20a. semana. Desde a 2a. semana, houve deposição de IgG e C3 na parede dos fungos no interior dos granulomas e a presença de células IgG positivas no halo linfomononuclear periférico; estes achados foram máximos entre a 4a. e 16a. semanas. Não se detectou depósito de IgG e C3 no interstício dos granulomas. IgG e C3 parecem exercer papel precoce e importante na defesa do hospedeiro contra o P. brasiliensis, contribuindo possivelmente para a destruição dos fungos e bloqueando a difusão de antígenos para fora dos granulomas.

Evaluation of different immunization protocols with P. brasiliensis antigens in Guinea pigs

O objetivo deste trabalho foi desenvolver protocolo eficiente e reprodutível de imunização em cobaias com antígenos de P. brasiliensis, visando a obtenção de modelo experimental para futuros estudos de mecanismos de proteção imunológica. Testaram-se três diferentes antígenos (particulado, solúvel e composto) e seis protocolos nos quais foram avaliadas as influências dos seguintes fatores: presença ou ausência de adjuvante completo de Freund, número de doses imunizantes e intervalo de tempo entre a última dose imunizante e o desafio. A eficiência do protocolo de imunização foi estudada pela avaliação da resposta imune celular e humoral anti-P. brasiliensis, utilizando teste cutâneo e teste de inibição da migração do macrófago, e imunodifusão, respectivamente. Observou-se que: 1. Três doses imunizantes de antígeno induziram melhor resposta do que duas doses; 2. Maior resposta imune foi conseguida com a utilização de adjuvante completo de Freund; 3. Animais desafiados depois de longo tempo (6 semanas) da última dose imunizante mostraram melhor resposta imune anti-P. brasiliensis; 4. Os antígenos solúvel e composto foram igualmente eficientes induzindo maior resposta imune humoral e celular anti-P. brasiliensis enquanto que o antígeno particulado provocou menor reatividade

HORMONAL AND METABOLIC STUDY OF A CASE OF ADIPOSIS-DOLOROSA (DERCUMS DISEASE)

A case of a 43-year-old nonobese woman with adiposis dolorosa (Dercum's disease) is reported. Muscle glucose uptake and oxidation before and after ingestion of 75 g of glucose were similar to control group values, although a greater insulin release (16,578 vs 6,242 +/- 1,136 muU/3 h) occurred simultaneously. In vitro studies of abdominal normal and painful subcutaneous adipose tissue of the patient revealed lower responsiveness to norepinephrine and lack of response to the antilipolytic effect of insulin in the painful adipose tissue (0.98 vs 1.43 muM FFA/10(6) cells at 5.0 muM of norepinephrine). The disease was not correlated with the HLA system and there were no alterations in hormonal secretion at the pituitary, adrenal, gonadal, and thyroid levels. These findings indicate the presence of peripheral insulin resistance in this patient with adiposis dolorosa.

Epstein-Barr virus (EBV) nuclear antigen (EBNA)-4 mutation in EBV-associated malignancies in three different populations

Different ethnic groups with a high human leukocyte antigen (HLA)-A11 prevalence have been shown to experience a high rate of Epstein-Barr virus (EBV) infection, EBV-associated malignancies, and Epstein-Barr nuclear antigen (EBNA)-4 mutations. The epitopes 393-408 and 416-424 of EBNA-4 are major antigenic epitopes that elicit an HLA-A11 cytotoxic T lymphocyte (CTL) response to EBV infection. Mutations selectively involving one or more nucleotide residues in these epitopes affect the antigenicity of EBNA-4, because the mutant EBV strains are not recognized by the HLA-A11-restricted CTLs. To investigate these mutations in common EBV-associated malignancies occurring in different populations, we studied the mutation rate of epitopes 393-408 and 416-424 of EBNA-4 in 25 cases of EBV-associated Hodgkin's disease (HD), nine cases of AIDS-related non-Hodgkin's lymphoma, and 37 cases of EBV-associated gastric carcinoma (GC) from the United States, Brazil, and Japan. We found one or more mutations in these two epitopes in 50% (6/12) of United States HD, 15% (2/13) of Brazilian HD, 50% (6/12) United States GC and 28% (7/25) Japanese GC, and 22% (2/9) of United States AIDS-lymphoma. Similar mutations were found in 30% (3/10) of United States reactive, 0% (0/6) of Brazilian reactive, and 25% (2/8) Japanese reactive tissues. The most frequent amino acid substitutions were virtually identical to those seen in previously reported isolates from EBV-associated nasopharyngeal carcinomas and Burkitt's lymphomas occurring in high prevalence HLA-A11 regions. However, only 2/28 (7%) mutations occurred in HLA-A11-positive patients. Our studies suggest that: 1) EBNA-4 mutations are a common phenomenon in EBV-associated HD, GC, and AIDS-lymphoma; 2) the mutation rate does not vary in these geographic areas and ethnic groups; 3) EBNA-4 mutations in EBV-associated United States and Brazilian HD, United States and Japanese GC, and United States AIDS lymphomas are not related to patients' HLA-A11 status.

Human leukocyte antigen-G expression after kidney transplantation is associated with a reduced incidence of rejection

HLA-G is a non-classic Human Leukocyte Antigen (HLA-G) Class I of low polymorphism and restricted tissue distribution that displays tolerogenic functions. In heart transplantation and in combined liver/renal allograft transplantation, the expression of HLA-G has been associated with a lower incidence of acute graft rejection episodes and absence of chronic dysfunction. Since the expression of HLA-G in renal biopsies has been investigated only in few patients who received a combined kidney and liver transplant, in this study we performed a cross-sectional study, systematically comparing the expression of HLA-G in post-transplanted renal grafts, stratifying patients according to the presence or absence of rejection.Patients and Methods: Seventy-three renal specimens (10 with acute rejection and 13 with chronic allograft nephropathy, and 50 with no signs of rejection) were immunohistochemically evaluated for HLA-G expression.Results: In the group as a whole, HLA-G molecules were detected in 40 cases (54.8%). Among specimens that presented HLA-G expression, 2 out of 40 (5%) exhibited acute rejection, 2 (5%) exhibited chronic allograft nephropathy, and the remaining 36 (90%) exhibited no signs of rejection. The comparison between patients with rejection and those without rejection showed that the expression of HLA-G was significantly increased in specimens exhibiting no signs of rejection (p<0.0001). Considering only patients with acute rejection, 8 out of 10 patients showed no HLA-G expression in their kidney biopsies when compared to patients exhibiting no signs of rejection and absence of HLA-G was observed in 14 out of 50 (p=0.0032). Similarly, considering only patients with chronic allograft nephropathy, absence of HLA-G expression was observed in I I out of 13 specimens, whereas in patients without rejection absence of HLA-G was observed in 14 out of 50 (p=0.003). Therapy with tacrolimus was significantly associated with the expression of HLA-G and a better graft prognosis. Conclusions: Our results suggest that HLA-G expression in the kidney allograft and the use of tacrolimus are associated with a lower frequency of acute renal rejection and chronic allograft nephropathy. (c) 2007 Elsevier B.V. All rights reserved.