Niveles de expresión de citocromos P450 (CYP6AA7, CYP4C52v1, CYP6BY3, CYP9J34, CYP9M10, CYP9J40 y CYP9AL1) determinados por RT-qPCR en larvas de Culex quinquefasciatus expuestas a diversos insecticidas.

En el presente trabajo, se describen los niveles de expresión de siete transcritos de Culex quinquefasciatus que codifican para citocromos P450, estos medidos por qPCR en larvas expuestas a dos concentraciones del insecticida permetrina (0.51 y 0.71 mg) comparadas con un grupo control sin exponer, las cuales fueron colectadas en distintas localidades del noreste de México. Debido a que los genes analizados no se encontraban reportados, fue necesario diseñar oligonucleótidos utilizando secuencias trazas producto de la secuenciación del genoma del mosquito antes mencionado. Con los oligonucleótidos diseñados y utilizando DNA complementario, sintetizado a partir de RNA total de las larvas fueron amplificados por PCR los mensajeros, se procedió a clonar cada uno de estos genes en nueve poblaciones analizadas, posteriormente fueron secuenciados y éstas fueron comparadas para deducir los porcentajes de similitud. Se diseñaron sondas taqman en segmentos conservados, y utilizando el DNA complementario previamente sintetizado fueron deducidos los niveles de expresión de cada uno de los genes analizados bajo las condiciones citadas anteriormente para las poblaciones. Con el trabajo realizado, reportamos las secuencias nucleótidicos y aminoacídicas de cada uno de los genes analizados de cada una de las poblaciones estudiadas y sus niveles de expresión. Concluimos que los genes analizados son una herramienta potente para ahondar en el estatus de resistencia que han desarrollado las poblaciones silvestres de Culex quinquefasciatus en localidades del noreste de México.

Genetic diversity of Cryptosporidium identified in clinical samples from cities in Brazil and Argentina

The identification and characterisation of Cryptosporidium genotypes and subtypes are fundamental to the study of cryptosporidiosis epidemiology, aiding in prevention and control strategies. The objective was to determine the genetic diversity of Cryptosporidium in samples obtained from hospitals of Rio de Janeiro, Brazil, and Buenos Aires, Argentina. Samples were analysed by microscopy and TaqMan polymerase chain reaction (PCR) assays for Cryptosporidium detection, genotyped by nested-PCR-restriction fragment length polymorphism (RFLP) analysis of the 18S rRNA gene and subtyped by DNA sequencing of the gp60 gene. Among the 89 samples from Rio de Janeiro, Cryptosporidium spp were detected in 26 by microscopy/TaqMan PCR. In samples from Buenos Aires, Cryptosporidium was diagnosed in 15 patients of the 132 studied. The TaqMan PCR and the nested-PCR-RFLP detected Cryptosporidium parvum , Cryptosporidium hominis , and co-infections of both species. In Brazilian samples, the subtypes IbA10G2 and IIcA5G3 were observed. The subtypes found in Argentinean samples were IbA10G2, IaA10G1R4, IaA11G1R4, and IeA11G3T3, and mixed subtypes of Ia and IIa families were detected in the co-infections. C. hominis was the species more frequently detected, and subtype family Ib was reported in both countries. Subtype diversity was higher in Buenos Aires than in Rio de Janeiro and two new subtypes were described for the first time.

El Do como praxis didáctica en el entrenamiento Zen y su aplicación en las artes tradicionales japonesas

La presente tesis doctoral tiene por objeto el estudio de la enseñanza en los entornos Zen y su aplicación a los ámbitos de las artes japonesas denominadas por el término – Dô. Demostrar esta conexión abriría la posibilidad de considerar que la influencia del Zen en las artes japonesas se ha dado tanto en el plano didáctico como en el estético. Esta idea se ha concretado en la siguiente hipótesis: La noción de Dô en un arte tradicional implica que este arte ha asimilado al Zen entendiéndolo fundamentalmente como una praxis didáctica. A la hora de poder desarrollar esta tesis se ha adoptado como método el análisis de contenidos en casos relevantes aplicado en distintos bloques que permitan confirmar la validez de la hipótesis. Pese a que la tesis presenta una disposición formal de carácter deductivo, el proceso de desarrollo del estudio ha sido de tipo hipotético-deductivo, ya que el examen de los materiales en los momentos iniciales de la investigación fue el que dio lugar a la hipótesis. Las cuestiones metodológicas y formales se tratan en un primer bloque bajo el epígrafe “Introducción”. En el segundo bloque se aborda el diseño y la construcción de la matriz de análisis, centrándose inicialmente en establecer la conexión de la idea de –Dô y su origen taoísta con la enseñanza en el Zen, mediante un rápido análisis de las implicaciones del término Dô (道) y un breve estudio acerca de la influencia del Taoismo en el Zen. Establecida esta conexión, se plantea la cuestión acerca de si se puede hablar de un método común entre las dos corrientes principales dentro del Zen: el Sôtô y el Rinzai..

Efficacy of entecavir and tenofovir in chronic hepatitis B under treatment in the public health system in southern Brazil

There are about 350 million hepatitis B virus (HBV) carriers worldwide and chronic HBV is considered a major public health problem. The objective of the present study was to assess the effectiveness of the nucleos(t)ide analogues tenofovir (TDF) and entecavir (ETV) in the treatment of chronic HBV. A cross-sectional study was carried out from March-December 2013, including all patients with chronic HBV, over 18 years of age, undergoing therapy through the public health system in southern Brazil. Only the data relating to the first treatments performed with TDF or ETV were considered. Retreatment, co-infection, transplanted or immunosuppressed patients were excluded. Six hundred and forty patients were evaluated, of which 336 (52.5%) received TDF and 165 (25.8%) ETV. The other 139 (21.7%) used various combinations of nucleos(t)ide analogues and were excluded. The negativation of viral load was observed in 87.3% and 78.8% and the negativation of hepatitis B e antigen was achieved in 79% and 72% of those treated with ETV or TDF, respectively. Negativation of hepatitis B surface antigen was not observed. There was no occurrence of adverse effects. This is a real-life study demonstrating that long-term treatment with ETV and TDF is both safe and effective.

A non-enteric adenovirus A12 gastroenteritis outbreak in Rio de Janeiro, Brazil

A gastroenteritis outbreak that occurred in 2013 in a low-income community in Rio de Janeiro was investigated for the presence of enteric viruses, including species A rotavirus (RVA), norovirus (NoV), astrovirus (HAstV), bocavirus (HBoV), aichivirus (AiV), and adenovirus (HAdV). Five of nine stool samples (83%) from patients were positive for HAdV, and no other enteric viruses were detected. Polymerase chain reaction products were sequenced and subjected to phylogenetic analysis, which revealed four strains and one strain of non-enteric HAdV-A12 and HAdV-F41, respectively. The HAdV-A12 nucleotide sequences shared 100% nucleotide similarity. Viral load was assessed using a TaqMan real-time PCR assay. Stool samples that were positive for HAdV-A12 had high viral loads (mean 1.9 X 107 DNA copies/g stool). All four patients with HAdV-A12 were < 25 months of age and had symptoms of fever and diarrhoea. Evaluation of enteric virus outbreaks allows the characterisation of novel or unique diarrhoea-associated viruses in regions where RVA vaccination is routinely performed.

Estudo da associação dos genes GGR, GGPPS2 e GGPPS6 em Arabidopsis thaliana L. (Brassicaceae) a compostos alelopáticos

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Departamento de Botânica, Programa de Pós-Graduação em Botânica, 2016.

Characterization of polymorphisms of genes ADH2, ADH3, ALDH2 and CYP2E1 and relationship to the alcoholism in a Colombian population

Objective: Identify and characterize polymorphisms of genes ADH2, ADH3, ALDH2 and CYP2E1 in a Colombian population residing in the city of Bogotá and determine its possible relationship to the alcoholism. Methods: ADH2, ADH3, ALDH2, and CYP2E1 genotypes a population of 148 individuals with non-problematic alcohol and 65 individuals with alcoholism were determined with TaqMan probes and PCR-RFLP. DNA was obtained from peripheral blood white cells. Results: Significant difference was found in family history of alcoholism and use of other psychoactive substances to compare alcoholics with controls. When allelic frequencies for each category (gender) were considered, frequency of A2 allele carriers in ADH2 was found higher in male patients than controls. In women, the relative frequency for c1 allele in CYP2E1 was lower in controls than alcoholics. The ALDH2 locus is monomorphic. No significant differences in allele distributions of the loci examined to compare two populations were observed, however when stratifying the same trend was found that these differences tended to be significant. Conclusions: This study allows us to conclude the positive association between family history of alcoholism and alcoholism suggesting that there is a favorable hereditary predisposition. Since substance dependence requires interaction of multiple genes, the combination of genotypes ADH2*2, CYP2E1*1 combined with genotype homozygous ALDH2*1 found in this study could be leading to the population to a potential risk to alcoholism.

Characterization of polymorphisms of genes ADH2, ADH3, ALDH2 and CYP2E1 and relationship to the alcoholism in a Colombian population

Objective: Identify and characterize polymorphisms of genes ADH2, ADH3, ALDH2 and CYP2E1 in a Colombian population residing in the city of Bogotá and determine its possible relationship to the alcoholism. Methods: ADH2, ADH3, ALDH2, and CYP2E1 genotypes a population of 148 individuals with non-problematic alcohol and 65 individuals with alcoholism were determined with TaqMan probes and PCR-RFLP. DNA was obtained from peripheral blood white cells. Results: Significant difference was found in family history of alcoholism and use of other psychoactive substances to compare alcoholics with controls. When allelic frequencies for each category (gender) were considered, frequency of A2 allele carriers in ADH2 was found higher in male patients than controls. In women, the relative frequency for c1 allele in CYP2E1 was lower in controls than alcoholics. The ALDH2 locus is monomorphic. No significant differences in allele distributions of the loci examined to compare two populations were observed, however when stratifying the same trend was found that these differences tended to be significant. Conclusions: This study allows us to conclude the positive association between family history of alcoholism and alcoholism suggesting that there is a favourable hereditary predisposition. Since substance dependence requires interaction of multiple genes, the combination of genotypes ADH2*2, CYP2E1*1 combined with genotype homozygous ALDH2*1 found in this study could be leading to the population to a potential risk to alcoholism.

Protein expression and gene polymorphism of CXCL10 in patients with colorectal cancer

Chemokines (chemotactic cytokines) promote leukocyte attraction to sites of inflammation and cancer. Certain chemokines promote and regulate neoplastic progression, including metastasis and angiogenesis. One such chemokine, CXCL10, was found to be expressed in colorectal cancer (CRC) tissue. To gain insight into the prognostic significance of CXCL10, we investigated whether the levels of this chemokine were altered in the colorectal tissue or plasma of CRC patients. Using Luminex technology for protein analyses, we observed a significantly higher CXCL10 protein level in cancer tissue compared to that in paired normal tissue. Moreover, significantly higher plasma levels of CXCL10 were detected in patients compared to those in control subjects and the plasma levels of CXCL10 in disseminated disease were found to be significantly higher compared to those in localized disease. The single‑nucleotide polymorphism rs8878, which has been described in exon 4 in the 3'‑untranslated region of the CXCL10 gene, was investigated using a TaqMan system. There were significant differences in genotype distribution and allelic frequencies between CRC patients and control subjects. In conclusion, altered CXCL10 protein concentrations in CRC tissues or plasma and the rs8878 genotype variant of CXCL10 may contribute to the prediction of clinical outcome.

Evaluación del desempeño de pruebas diagnósticas de tuberculosis en pacientes VIH positivo en dos hospitales públicos de Bogotá

La tuberculosis TB es una de las principales causas de muerte en el mundo en individuos con infección por VIH. En Colombia esta coinfección soporta una carga importante en la población general convirtiéndose en un problema de salud pública. En estos pacientes las pruebas diagnósticas tienen sensibilidad inferior y la enfermedad evoluciona con mayor frecuencia hacia formas diseminadas y rápidamente progresivas y su diagnóstico oportuno representa un reto en Salud. El objetivo de este proyecto es evaluar el desempeño de las pruebas diagnósticas convencionales y moleculares, para la detección de TB latente y activa pacientes con VIH, en dos hospitales públicos de Bogotá. Para TB latente se evaluó la concordancia entre las pruebas QuantiFERON-TB (QTF) y Tuberculina (PPD), sugiriendo superioridad del QTF sobre la PPD. Se evaluaron tres pruebas diagnósticas por su sensibilidad y especificidad, baciloscopia (BK), GenoType®MTBDR plus (Genotype) y PCR IS6110 teniendo como estándar de oro el cultivo. Los resultados de sensibilidad (S) y especificidad (E) de cada prueba con una prevalencia del 19,4 % de TB pulmonar y extrapulmonar en los pacientes que participaron del estudio fue: BK S: 64% E: 99,1%; Genotype S: 77,8% E: 94,5%; PCRIS6110 S: 73% E: 95,5%, de la misma forma se determinaron los valores predictivos positivos y negativos (VPP y VPN) BK: 88,9% y 94,8%, Genotype S: 77,8% E: 94,5%; PCRIS6110 S: 90% y 95,7%. Se concluyó bajo análisis de curva ROC que las pruebas muestran un rendimiento diagnóstico similar por separado en el diagnóstico de TB en pacientes con VIH, aumentando su rendimiento diagnostico cuando se combinan

Evaluation of the theranostic use of miRNAs in correlation to the radiopharmaceutical 64CuCl2 in glioblastoma

B:Glioblastoma multiforme(GBM) is one of the most prevalent and aggressive malignant primary brain tumors in adult patients. 64CuCl2 is an innovative radiopharmaceutical investigated as theranostic agent in GBM patients. The therapeutic scheme is still under evaluation, therefore the research focused on the possibility of radioresistance development. The actors responsible for modulating radioresistance could be miRNAs, thus their potential use was investigated both in radioresistant cell lines and in GBM patients plasma samples. M:Radioresistant cell lines were generated by exposing U87MG, U373MG lines to increasing doses of radiation for 32 weeks. Cell membrane permeability alterations and DNA damage were assessed to characterize the lines. Moreover, 64Cu cell incorporation and subcellular distribution were investigated measuring gamma-radiation emission. miRNA expression was evaluated: in parental and radioresistant cell lines, both in cell pellet and media exosomes; in plasma samples of GBM patients using TaqMan Array MicroRNA Cards. R:Radioresistant lines exhibited reduction in membrane permeability and in DNA DSBs indicating the capability to skip the drug killing effect. Cell uptake assays showed internalization of 64Cu both in the sensitive and radioresistant lines. Radioresistant lines showed a different miRNA expression profile compared to the parental lines. 5 miRNAs were selected as possible biomarkers of response to treatment (miR-339-3p, miR-133b, miR-103a-3p, miR-32-5p, miR-335-5p) and 6 miRNAs as possible predictive biomarkers of response to treatment (let-7e-5p, miR-15a-5p, miR-29c-3p, miR-495, miR-146b-5p, miR-199a-5p). miR-32-5p was selected as possible molecule to be used to restore 64CuCl2 responsiveness in the radioresistant cell lines. C: This is the first study describing the development and characterization of 64CuCl2 radioresistant cell lines useful to implement the approach for dosimetric analysis to avoid radioresistance uprising. miRNAs could bring to a better understanding of 64CuCl2 treatment, becoming a useful tool both in detection of treatment response and both as molecule that could restore responsiveness to 64CuCl2 treatment.

Drive up electrochemical and electrochemiluminescence signal through biosensing mechanism optimization

Biomarkers are biological indicators of human health conditions. Their ultra-sensitive quantification is of cardinal importance in clinical monitoring and early disease diagnosis. Biosensors are some worldwide simple and easy-to-use analytical devices as a matter of fact, biosensors using electrochemiluminescence (ECL) are one of the most promising biosensors that needs an ever-increasing sensitivity for improving its clinical effectiveness. The principal aspiration of this project is the investigation of the ECL generation mechanisms for enhancing the ECL intensity and the development of an ultrasensitive sensor, the use of metal-oxide materials (Mox) and the substitution of metal-free dyes. Novel dyes such as BODIPY, TADF are used to improve the sensitivity of ECL techniques thanks to their advantageous and tunable properties, enhancing the signal and also the ECL efficiency. Additionally, the use of Mox could be beneficial for the investigation of two different ECL mechanisms, which occur simultaneously. In this thesis, the investigation of size and distance effects on electrochemical (EC) mechanisms was carried out through the innovative combination of a standard detection system using different size of micromagnetic beads (MBs). That allowed the discovery of an unexpected and highly efficient mechanistic path for electrochemical generation at small distances from the electrode’s surface. The smallest MBs (0.1μm) demostrate an enhancement of electrochemical signal than the bigger one (2.8μm) until 4 times of magnitude. Finally, a novel ultrasensitive sensor, based on the coreactant-luminophores mechanism, was developed for the determination of whole viral genome specific for cardiac HBV and COVID-19 virus. In conclusion, the ECL and the use of EC techniques (such as amperometry), improved the understanding of mechanisms responsible for the ECL/EC signal led to a great enhancement in the signal.

Biossegurança em odontologia

Os profissionais da odontologia estão constantemente em contato com um ambiente que pelas suas peculiaridades, possibilita que o ar seja uma via potencial de transmissão de microorganismos. Isso acontece por meio das gotículas e dos aerossóis, que podem contaminar diretamente esses profissionais ao atingirem a pele e a mucosa, por inalação e ingestão, ou indiretamente, quando contaminam as superfícies. Também é comum a manipulação de sangue e outros fluidos orgânicos, que são as principais vias de transmissão do HIV e dos vírus das hepatites B (HBV) e C (HCV). Com isso, vem aumentando significativamente o índice de contaminação cruzada nas equipes de saúde bucal e nos usuários. Por isso, é de suma importância que o cirurgião dentista e a equipe tenham conhecimento sobre a necessidade de adoção de normas de biossegurança para minimizar esse índice. O objetivo deste trabalho foi elaborar uma revisão narrativa sobre biossegurança em odontologia, visando minimizar a contaminação cruzada entre equipe e usuários na equipe de saúde bucal da Estratégia de Saúde da Família do Canabrava, localizada no município de Coração de Jesus. Essas normas incluem: correta lavagem das mãos; proteção pessoal do usuário; uso do equipamento de proteção individual em todos da equipe; adequadas limpeza de superfícies, desinfecção e esterilização; imunização dos profissionais e correto manuseio dos resíduos de saúde para conseguimos reduzir significativamente o risco de se contrair doenças no consultório odontológico.

Melhoria da Atenção ao Pré-Natal e Puerpério na UBS Francisco Maiarino Maia, Miguel Alves - PI

Melhoria da atenção ao Pré-natal e Puerpério na UBS Francisco Maiarino Maia, Miguel Alves/PI. 2015. 76f. Trabalho de Conclusão de Curso (Curso de Especialização em Saúde da Família) - Departamento de Medicina Social, Faculdade de Medicina, Universidade Federal de Pelotas, Pelotas, 2015. A atenção ao pré-natal e puerpério são ações muito importantes em qualquer contexto da atenção primária à saúde porque devemos garantir que ao final da gestação cada usuária tenha uma criança saudável, além de um bem-estar materno e neonatal. Este trabalho foi realizado com a finalidade de melhorar a atenção à saúde do pré-natal e puerpério na Unidade Básica de Saúde (UBS) Francisco Mairino Maia no município de Miguel Alves/PI. A intervenção foi conduzida de acordo com o protocolo do Ministério da Saúde (BRASIL, 2012). Os dados foram coletados com ajuda da planilha de coleta de dados e ficha espelho fornecidos pelo curso. A intervenção foi realizada de Fevereiro – Abril do ano 2015, contemplando ações em quatro eixos de atuação: organização e gestão do serviço, qualificação da prática clínica, engajamento público e monitoramento e avaliação. A partir dos resultados, foram cadastradas ao final da intervenção 14 gestantes e 6 puérperas. Em relação ao pré-natal, no primeiro mês foram cadastradas 11 gestantes (78,6%), no segundo mês 13 (92,9%), no terceiro mês 14 (100%) gestantes. Algumas variações foram observadas em relação às usuárias captadas no primeiro trimestre de gestação. No 1°mês tivemos 8 gestantes(72,7%), no 2° mês 10 (76,9%), no 3° mês 11 (78,6%). Ainda temos que continuar trabalhando para melhorar este indicador. Em relação às puérperas, cadastramos no primeiro mês 4 (100%) puérperas, no segundo mês 5 (100%), no terceiro 6 (100%) . Portanto, atingimos a totalidade de cobertura de atenção ao puerpério nos 3 meses de intervenção. As puérperas que ficaram faltosas receberam busca ativa pelos Agentes Comunitários de Saúde (ACS), médica da área ou pela enfermeira. No primeiro e segundo mês tudo transcorreu sem dificuldades, todas compareceram a consulta programada. No terceiro mês uma puérpera ficou faltosa, mas recebeu busca ativa através de visitas domiciliares.A intervenção propiciou ampliação da cobertura da atenção de gestantes e puérperas, conseguindo atingir a cobertura proposta. Possibilitou melhorar os registros e a qualificação da atenção com destaque para a ampliação do exame das mamas, ginecológicos, do abdômen e laboratoriais. Também conseguimos melhorar a classificação de risco destes grupos e a relação da equipe com as usuárias, tornando os serviços como rotina da UBS.A partir dos próximos meses pretendemos manter uma boa cobertura das gestantes e puérperas. Além disso, tomaremos este projeto como exemplo para implementar outros programas como hipertensão, diabetes, saúde das crianças, câncer de mama e colo uterino, sendo de muita importância para a comunidade porque assim conseguiremos melhorar a saúde do povo. Palavras-Chave:Saúde da família; Atenção Primária à Saúde, Saúde da Mulher; Pré-natal; Puerpério; Saúde Bucal.

Melhora da Atenção ao Controle de Câncer de Colo do Útero e de Mama na ESF Central Periférica Zona Oeste, São Gabriel, RS

COBAS Guerra, Acralys. Melhora a atenção ao controle e prevenção do câncer de colo de útero e de mama na ESF Central Periférica Zona Oeste, São Gabriel/RS. Trabalho de conclusão de Curso (Curso de Especialização em Saúde da Família) - Departamento de Medicina Social, Faculdade de Medicina, Universidade Federal de Pelotas, Pelotas, 2015. A Equipe nº5 da ESF Central Periférica Zona Oeste, São Gabriel/RS no período de 12 semanas desenvolveu uma intervenção na comunidade que,fez que o equipe interagiu diretamente com as pessoas da comunidade , com o objetivo de melhorar a atenção ao controle e prevenção do câncer de colo de útero e de mama das mulheres entre 24 e 69 anos da área de abrangência. A intervenção teve ações contempladas em quatro eixos pedagógicos: organização e gestão dos serviços, qualificação da prática clínica, engajamento público e monitoramento e avaliação. Os dados para monitoramento e avaliação foram coletados com ajuda da Planilha de Coleta de Dados e Ficha Espelho elaboradas pela UFPel. Como não tínhamos dados para o preenchimento do CAP tivemos dificuldade para a análise situacional frente a esta ação programática e nisto adotamos para avaliação dos indicadores de cobertura as estimativas da Planilha de coleta de dados que eram de 3820 de mulheres na faxia etária entre 24 e 64 anos e 1535 entre 50 e 69 anos. Ainda assim adotamos como meta ampliação da cobertura de detecção precoce de câncer de colo de útero das mulheres entre 25 e 64 anos para 85%, e do câncer de mama das mulheres entre 50 a 69 anos para 95% da área de abrangência. Durante a intervenção foram acompanhadas 130 mulheres entre 25 e 64 anos, e 31 mulheres entre 50 e 69 anos. As mulheres cadastradas estão com exame clínico em dia de acordo com o protocolo para câncer de mama e útero. Para todas as mulheres na fazia etária entre 24 e 69 anos cadastradas, alcançamos as metas: capacitação de todos os temas de Câncer de colo de útero e Câncer de mama e DST feita para os agentes comunitários e enfermeiros. Mesmo não dispondo de sala reservada para os nossos treinamentos, conseguimos local na unidade que foi utilizado para as reuniões e capacitações. Fizemos atividades com as mulheres na faixa etária compreendida entre os 24 e 69 anos. Na UBS e na comunidade. Realizamos os exames de mamas em todas as mulheres na faixa etária entre50 e 69 anos, durante as consultas. Mediante esta intervenção a comunidade ganhou um atendimento organizado e sistematizado de acordo com o protocolo adotado. A equipe conseguiu um maior vínculo com a comunidade e estas ações e metas priorizadas durante a intervenção estão no cotidiano de trabalho da equipe.