Processo para separação de vírus cítricos CTV e CSDAV

A invenção se refere a um processo para separação de CTV e CSDaV utilizando citometria de fluxo. Trata-se de um processo rápido de baixo custo e eficiente, relacionado ao principal setor do agronegócio brasileiro, que é a citricultura. Através do produto obtido no trabalho podem-se gerar diagnósticos no sentido aplicado, além de auxiliar no isolamento de outros agentes patógenos dos citros ou outras espécies de plantas.

Aplicação foliar de indutor de resistência em feijoeiro comum: efeito sobre desempenho da cultura, qualidade fisiológica e sanitária das sementes

Pós-graduação em Agronomia - FEIS

Avaliação da função macrofágica na hanseníase virchowiana: marcadores de superfície, receptores TLR e NLR e mediadores inflamatórios

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Virulence genes in Escherichia coli isolated from feces and urine of cats

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Taxonomic studies of laelapid mites (Acari: Mesostigmata: Laelapidae) and their use in combination with entomopathogenic nematodes (Rhabditida: Steinernematidae, Heterorhabditidae) to control Frankliniella occidentalis (Thysanoptera: Thripidae)

Pós-graduação em Agronomia (Entomologia Agrícola) - FCAV

Descrição morfo-histológica dos testículos de Amblyomma cajennense em jejum e alimentados

Os carrapatos são ectoparasitas hematófagos de grande importância epidemiológica, pois são vetores de muitos patógenos. Esses animais pertencem ao Filo Arthropoda, Classe Arachnida, Subclasse Acari, são classificados em três famílias: Ixodidae, Argasidae e Nutalliellidae, apresentam ampla distribuição geográfica e podem parasitar grande variedade de vertebrados, inclusive o homem. O carrapato da espécie Amblyomma cajennense, popularmente conhecido como carrapato-estrela, carrapato do cavalo ou rodoleiro, tem grande importância médica por ser vetor da bactéria Rickettsia rickettsii, causadora da febre maculosa brasileira (FMB), que pode levar o hospedeiro a óbito. Apesar das crescentes pesquisas com esses animais, ainda existem lacunas na literatura acerca de alguns de seus processos reprodutivos. Dessa forma, esse trabalho teve por objetivo estudar o desenvolvimento dos testículos dessa espécie por meio da descrição da morfologia e histologia dos testículos de indivíduos em jejum e alimentados, identificando a dinâmica do processo de espermatogênese e se a alimentação influencia nesse processo. Os resultados obtidos mostraram que os testículos são estruturas pares e tubulares arranjadas dorsolateralmente no opistossoma, sendo que a região proximal está conectada às vesículas seminais pelos ductos deferentes, semelhante ao observado em outras espécies de ixodídeos. Associado ao aparelho genital masculino encontra-se um complexo de glândulas acessórias multilobuladas. Foi constatado que a alimentação tem papel fundamental no desenvolvimento do sistema reprodutor, visto que nos indivíduos em jejum as vesículas seminais e o complexo de glândulas acessórias foram menores e menos desenvolvidos do que nos animais alimentados. Além disso, as espermátides alongadas, precursoras dos espermatozoides no trato reprodutor... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)

Estudo dos mixozoários (Myxozoa : Myxosporea) parasitos dos peixes characiformes Acestrorhynchus lacustris (Lütken, 1875) e Steindachnerina insculpta (Fernández-Yépez, 1948) coletados no Rio do Peixe, médio Rio Tietê, SP, Brasil

The São Paulo State has as one of its main rivers the Tietê, which is an extremely important source because of its biodiversity, use in navigation and mainly as direct supplier of water for thousands of people in the region. Currently, the biodiversity of marine and freshwater ecosystems has been threatened, primarily by environmental problems resulting from the degradation of ecosystems, an example is the stretch of the Middle Tietê River, where the Barra Bonita dam (SP) focused virtually the whole load organic effluents from the metropolitan region of São Paulo, leading to eutrophication with the loss of water quality. This basin is located in the Peixe’s River, a tributary of the Barra Bonita whose sources are on the slopes of the Cuesta de Botucatu, presenting an altitudinal gradient in a good state of conservation and water quality. From another perspective, the studies related to parasites and other pathogens of aquatic organisms have considerably increased the relevance, especially those hosts with potential for growing and marketing, given the significant increase these activities in Brazil and worldwide. Among the agents responsible for diseases in fish are the myxosporean, which can cause major economic damage, with high mortality ratios. Based on the above, this study evaluated the biodiversity of myxosporean parasites of two species of fish Acestrorhynchus lacustris and Steindachnerina insculpta. During the period January to November 2012, 40 specimens of Acestrorhynchus lacustris and 33 specimens of Steindachnerina insculpta were collected from the Peoxe’s river at four different points. The necropsies were performed and all organs were analyzed looking for myxosporean. Only the species Steindachnerina insculpta had their gills parasitized by two species of the genus Henneguya

Ação da IL-18 sobre a expressão do receptor dectina-1 e produção de citocinas por monócitos humanos desafiados com diferentes cepas de Paracoccidioides brasiliensis

Estudos têm demonstrado que o reconhecimento inicial de microrganismos é mediado por receptores celulares expressos em células da imunidade inata denominados receptores de reconhecimento de padrões (PRRs). Assim, a interação entre moléculas de superfície dos patógenos e receptores homólogos presentes na membrana celular de monócitos, modula a fagocitose, a ativação da célula e conseqüentemente a produção de citocinas. Trabalhos têm demonstrado a importância da estimulação de receptores toll-like 2 e 4 (TLR2 e TLR4), receptores de manose (MR) e dectina-1 de monócitos, tanto em infecções bacterianas como fúngicas, culminando com indução de produção de várias citocinas. A IL-18 é uma citocina indutora de IFN-g e possui uma ação extremamente importante, por ser capaz de promover tanto uma resposta do tipo Th1 ou Th2, dependendo do contexto de estimulação e do microambiente de citocinas. Em trabalho recente demonstramos que a IL-18 possui uma ação importante sobre o aumento da expressão de MR em monócitos humanos, e o reconhecimento do Paracoccidioides brasiliensis via esse receptor causaria aumento do crescimento fúngico no interior da célula. Dessa forma, os objetivos do presente projeto foram: 1) Avaliar a ação da IL- 18 sobre a expressão do receptor dectina-1 por monócitos humanos desafiados in vitro com diferentes cepas do P. brasiliensis; b) Avaliar a participação da dectina-1 na indução da produção de IL-18, TNF-a e IL-10 por monócitos desafiados in vitro com diferentes cepas do P. brasiliensis. Assim, monócitos de indivíduos normais tratados in vitro com IL-18 foram desafiados com diferentes de cepas do P. brasiliensis, e a expressão do receptor dectina-1 foi avaliada pela técnica de citometria de fluxo. A dosagem de IL-18, TNF-a e IL-10 no sobrenadante de cultura de monócitos desafiados com P. brasiliensis foi realizada utilizando a técnica de ELISA . Os resultados mostraram que a ...

Comparação morfo - fisiológica dos tipos celulares encontrados na hemolinfa de carrapatos Rhipicephalus sanguineus (Ixodidae) e Ornithodoros rostratus (Argasidae)

Os carrapatos são ectoparasitas hematófagos que apresentam grande importância econômica e médico-veterinária por transmitirem patógenos para os diversos hospedeiros, bem como por causarem redução na qualidade da carne, couro e leite devido à sua ação espoliativa. A espécie Rhipicephalus sanguineus (Ixodidae), conhecida popularmente como “carrapato do cão” tem ampla distribuição geográfica e é a principal responsável pela transmissão de patógenos aos cães domésticos, além de ser potencial transmissora destes para a espécie humana. A espécie Ornithodoros rostratus (Argasidae) conhecida como “carrapato do chão” é encontrada principalmente na região centro-oeste do Brasil e tem causado problemas, tais como grandes hematomas na pele do hospedeiro, principalmente dos suínos e dos animais silvestres, além de humanos, devido a sua fixação. O tecido fluído desses animais é a hemolinfa, a qual é composta por plasma linfático e por diversos tipos de células, ainda pouco estudadas. A hemolinfa é responsável pelo transporte de diversas substâncias importantes para a sobrevivência do animal, tais como enzimas, hormônios e resíduos a serem excretados pelo organismo. O objetivo deste trabalho foi o de realizar uma descrição comparativa e detalhada das células encontradas na hemolinfa das duas espécies de carrapatos citadas

Metodologia microbiológica convencional e reação em cadeia pela polimerase (PCR) na detecção de Salmonellasp. a partir de caldos de enriquecimento – Tetrathionato e Rappaport-Vassiliadis

The progressive increase in consumption and production of poultry meat in later years comes forth with an increase of the occurrence of foodborne diseases, including salmonellosis. Salmonellosis is caused by the ingestion of contaminated products, mainly by the consumption of poultry meat which processing and preparation for consumption were not effective to eliminate pathogens. Thus, there is a need for the development of faster more sensitive methods of detection of pathogens as a way to ensure the quality of the food offered to consumers. The goal of this essay was to evaluate the effect of enrichment broths on naturally contaminated poultry meat samples. A total of 65 samples was collected, these samples were rinsed with 370 mL of buffered peptone water (BPS) 1% according with the traditional methodology. All of the samples were enriched with both Tetrathionate (TT) and Rappaport-Vassiliadis (RV) and all were analyzed by the convencional identification method and polimerasis chain reaction (PCR). Of the 65 analized samples, 34 (52%) were positive when analized by the conventional method, while 45 (69%) were positive when analized by the PCR. Amongst the 45 positive PCR samples, 44 samples were positive when enriched with TT, while just 32 samples were positive when enriched by RV. Of the 34 positive conventional samples, 29 samples were positive when enriched by TT and 31 were positive when enriched by RV

Fungos fitopatógenos associados às formigas cortadeiras (Formicidae: Tribo Attini)

The ants of genus Atta belong to the Attine tribe (order Hymenoptera, family Formicidae, subfamily Myrmicinae) and are commonly known as leaf-cutting ants for having the habit of cutting several vegetable species used as substrate for growing mutualistic fungus (Agaricales: Lepiotaceae). Recent studies showed that, in addition to that, other fungi may occur in the nests in a dorment state or participate in the functioning dynamic of this symbiosis. Researches related to surveys of fungus biodiversity in nests of different Atta species have found important phytopathogenic representatives. In Brazil, studies about integrated management of plagues, developed by Embrapa Meio Ambiente (Embrapa Environment), point out the need of higher investments in projects that involve the phytopathogenic transmission by insects in order to reduce costs to control them or minimize environmental impact. The purpose of this study was to broaden the knowledge about the ecology of these fungi, isolating and identifying species associated with Attine tribe ants, thus understanding the scope of pathogenic and phytopathogenic species spread by these ants. For that reason, gynes were collected from Atta laevigata and Atta capiguara anthills located at Unesp Botucatu (São Paulo, Brazil) campus. In order to isolate the fungus, the mineral oil floating technique was used. The identification of the isolated fungi was done based on microscopic and molecular characteristics using DNA ribosomal sequencing. The most highly abundant genera found so far were: Cladosporium, Exophiala, Penicillium, Acremonium, Phialophora and Teratosphaeria. Representatives of the genera Exophiala, Phialophora and Cladosporium may be human pathogens, whereas Teratosphaeria and Penicillium are related to diseases in Eucalyptus and citric fruits, respectively. The results show that these ants may host important fungal species besides the ones already... (Complete abstract click electronic access below)

Análise da susceptibilidade de leveduras isoladas de insetos sociais aos antifúngicos

A frequência de micoses invasivas causadas por fungos oportunistas, incluindo leveduriformes, vem aumentando significativamente nas últimas décadas e atinge principalmente indivíduos imunocomprometidos. A tribo Attini possui cerca de 230 espécies de formigas e todas possuem o hábito de cultivar e se alimentar de fungos. Algumas espécies cultivam o fungo mutualista em nódulos poligonais sólidos com 0,25 a 0,50mm de diâmetro, aproximadamente. No interior desses nódulos, encontram-se células na forma de leveduras, que quando semeadas em meio de cultura se desenvolvem como fungo filamentoso. Este tipo de fungicultura está restrito a algumas espécies do gênero Cyphomyrmex. Neste trabalho, isolamos 30 leveduras dos nódulos de oito ninhos de Cyphomyrmex transversus da região de Ilhéus (BA), e analisamos a susceptibilidade aos seguintes antifúngicos: Anfotericina B (AMB), Fluconazol (FCZ), Voriconazol (VCZ) e Itraconazol (ITZ). A caracterização das estirpes foi feita através de métodos morfológicos e moleculares, incluindo-se o sequenciamento dos domínios D1/D2 do rDNA. A avaliação da atividade antifúngica foi realizada através do método de microdiluição, de acordo com a norma M27-A2 (CLSI, 2002). Candida parapsilosis ATCC 22019 e Candida krusei ATCC 6258 foram utilizadas como controle. Os resultados foram interpretados segundo os pontos de corte (breakpoints) aplicados ao gênero Candida. As estirpes foram identificadas como Trichosporon asahii (18), T. coremiiforme (4), Candida carpophila (syn. C. guilliermondii) (4), Galactomyces candidum (syn. Geotrichum candidum) (3) e Cryptococcus laurentii (1). Todas as espécies são conhecidas por possuírem representantes que já foram relatados como patógenos oportunistas. Elas foram sensíveis aos azóis FCZ, VCZ e ITZ, com exceção de G. candidus, cujas estirpes apresentaram sensibilidade dose-dependente a FCZ e ITZ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)

Modelagem matemática para a dispersão de fungos fitopatogênicos via autômatos celulares

Brazil is a major world producer and exporter of agricultural products like soybeans, sugar, coffee, orange and tobacoo. However, the action of phytopathogenic fungi has been one of the largest challenges encountered in the field as they are responsible for approximately 25 to 50 per cent of losses in crops of fruits and vegetables. The presence of these pathogens is always a problem, because the damage on the tissues and organs promote lesions which decreses growth vegetation and often leads the individual (host) to death. Therefore, it is crucial to understand the process of spreading of these pathogens in the field to develop strategies which prevent the epidemics caused by them. In this study, the dispersal of fungi phytopathogenic in the field was modeled using the automata cellular formalism. The growth rate of infected plants population was measured by the radius of gyration and the influence of host different susceptibility degrees into the disease spread was assessed. The spatial anisotropy related to the plant-to-plant space and the system’s response to distinct seasonal patterns were also evaluated. The results obtained by a mean field model (spatially implicit models) emphasized the importance of the spatial structure on the spreading process, and dispersal patterns obtained by simulation (using a cellular automata) were in agreement with thse observed in data. All computational implementation was held in language Cl

Organogênese direta do ipê-branco

O ipê-branco é uma espécie de difícil propagação por sementes devido à sua curta longevidade. A cultura de tecidos tem possibilitado a melhor propagação de diversas espécies, tendo como base o crescimento de células, tecidos e órgãos em condições assépticas, possibilitando a rápida multiplicação da planta selecionada, obtendo mudas livres de patógenos. A primeira etapa da cultura de tecidos está baseada na desinfestação das sementes para obter as mudas in vitro, possibilitando as posteriores etapas do processo. Foram testadas diversas concentrações de álcool etílico e hipoclorito de sódio em busca da desinfestação mais efetiva. O melhor processo para a desinfestação das sementes do ipê branco está nos tratamentos de germinação em apenas ágar com a retirada das alas da semente após a sua lavagem, com passagem por 30 segundos em álcool etílico e 5 minutos em hipoclorito de sódio, com posterior transferência da plântula para meio MS suplementado com 0,7% de ágar e 3% de sacarose. Sobre as plantas germinadas in vitro foram aplicados tratamentos com hormônios vegetais em busca das melhores concentrações para a obtenção de novas mudas. Os explantes caulinares tratados com BAP a 4,0 mg L-1 apresentaram 93,3% de brotações bem desenvolvidas, enquanto em meio WPM a melhor concentração para brotação com BAP é a de 4,0 mg L-1, não promovendo no entanto um tratamento tão efetivo como em meio MS. Para cinetina, todos os tratamentos exibiram formação de calo e/ou ausência de brotações em meio MS, e baixa porcentagem de brotação em meio WPM. Os tratamentos realizados com AIB e ANA não tiveram rizogênese efetiva em meio MS, apresentando formação de raízes pouco desenvolvidas em apenas poucos explantes no tratamento de 4,0 mg L-1 de ANA em meio WPM

Desenvolvimento e validação de método bioanalítico por difusão em ágar para determinação da potência do fenticonazol creme vaginal

O nitrato de fenticonazol é um derivado imidazólico de amplo espectro de ação contra patógenos dermatófitos, como Malassezia furfur e leveduras, a principal delas Candida albicans. É necessário que se possa garantir a qualidade dos medicamentos produzidos. O controle de qualidade é uma ferramenta que assegura a qualidade, eficácia e segurança desses produtos até o momento de sua utilização e faz-se necessário que métodos analíticos sejam desenvolvidos e validados para o doseamento desses fármacos. A grande importância dos métodos microbiológicos utilizados no controle de qualidade de fármacos com atividade antimicrobiana é demonstrar sua atividade biológica por meio de seu efeito inibitório no crescimento de micro-organismo. A diminuição da atividade antimicrobiana ou potência pode indicar alguma alteração sutil na molécula, que é pouco detectável em um método analítico físico-químico. O objetivo deste trabalho foi desenvolver e validar o método microbiológico difusão em ágar para o produto nitrato de fenticonazol creme vaginal. O método de difusão em ágar foi desenvolvido utilizando meio de cultura ágar Sabouraud e cepa de Candida albicans ATCC 64548 como micro-organismo teste. Para o ensaio foi utilizado o delineamento 3 x 3, conforme preconiza a Farmacopeia Brasileira (2010). A validação do método proposto demonstrou linearidade entre os diâmetros dos halos de inibição e o logaritmo da concentração na faixa de 50,0 a 200,0 μg/mL. O método obteve resultados precisos e lineares com r2=1. A exatidão foi comprovada pelo intervalo de tolerância de 98,83%, dentro dos limites permitidos. O método foi validado de maneira satisfatória, podendo ser utilizado em análises do Controle de Qualidade deste fármaco.