ADA-deficient SCID is associated with a specific microenvironment and bone phenotype characterized by RANKL/OPG imbalance and osteoblast insufficiency

Adenosine deaminase (ADA) deficiency is a disorder of the purine metabolism leading to combined immunodeficiency and systemic alterations, including skeletal abnormalities. We report that ADA deficiency in mice causes a specific bone phenotype characterized by alterations of structural properties and impaired mechanical competence. These alterations are the combined result of an imbalanced receptor activator of nuclear factor-kappa B ligand (RANKL)/osteoprotegerin axis, causing decreased osteoclastogenesis and an intrinsic defect of osteoblast function with subsequent low bone formation. In vitro, osteoblasts lacking ADA displayed an altered transcriptional profile and growth reduction. Furthermore, the bone marrow microenvironment of ADA-deficient mice showed a reduced capacity to support in vitro and in vivo hematopoiesis. Treatment of ADA-deficient neonatal mice with enzyme replacement therapy, bone marrow transplantation, or gene therapy resulted in full recovery of the altered bone parameters. Remarkably, untreated ADA-severe combined immunodeficiency patients showed a similar imbalance in RANKL/osteoprotegerin levels alongside severe growth retardation. Gene therapy with ADA-transduced hematopoietic stem cells increased serum RANKL levels and children`s growth. Our results indicate that the ADA metabolism represents a crucial modulatory factor of bone cell activities and remodeling. The trials were registered at www.clinicaltrials.gov as #NCT00598481 and #NCT00599781. (Blood. 2009; 114: 3216-3226)

Genotyping of Cryptosporidium spp. from free-living wild birds from Brazil

In wild and domestic birds, cryptosporidiosis is often associated with infections by Cryptosporidium galli, Cryptosporidium baileyi and Cryptosporidium meleagridis. In addition to these species, a number of avian Cryptosporidium species yet to be fully characterized are commonly found among exotic and wild avian isolates. The present study aimed to detect and identify samples of Cryptosporidium spp. from free-living wild birds, in order to contribute to the knowledge of the variability of this parasite in the free-living population of Brazil. Stool samples were collected from 242 birds, with the following proportions of individuals: 50 Emberizidae (20.7%), 112 Psittacidae (46.3%), 44 Cardinalidae (18.2%), 12 Turdidae (5.0%), eight Ramphastidae (3.3%), seven Icteridae (2.9%), three Estrilididae (1.2%), two Contigidae (0.8%), two Thraupidae (0.8%) and two Fringilidae (0.8%). Among the 242 fecal samples from wild birds, 16(6.6%) were positive for the presence of oocysts of Cryptosporidium. Molecular characterization of the 16 samples of Cryptosporidium, were performed with phylogenetic reconstructions employing 292 positions of 18S rDNA. None of the samples of birds was characterized as C meleagridis. C gall was identified in one rufous-bellied thrush (Turdus rufiventris), five green-winged saltators (Saltator similis), one slate-coloured seedeater (Sporophila schistacea), one goldfinch (Carduelis carduelis) and three saffron finches (Sicalis flaveola). One goldfinch isolate, one buff-fronted seedeater (Sporophila frontalis), one red-cowled cardinal (Paroaria dominicana) and one other saffron finch (S. flaveola) were identified as C. baileyi. Avian genotype II was found in an isolate from a white-eyed parakeet (Aratinga leucophthalma). Clinical symptoms of cryptosporidiosis in birds have already been described and the number of wild birds which were shedding parasites was high. Therefore, further epidemiological research and disease surveillance of birds in the wild is warranted. (C) 2010 Elsevier B.V. All rights reserved.

Parasites of ornamental fish imported into Australia

Five commonly imported freshwater ornamental fish: Poecilia reticulata (guppy); Xiphophorus maculatus (platy); Paracheirodon innesi (neon tetra); Paracheirodon axelrodi (cardinal tetra); and Gyrinocheilus aymonieri (sucking catfish), 361 individuals in total, were examined for parasites immediately after being released from quarantine in Australia. Ten parasites species were found: Camallanus cotti; Centrocestus formosanus; Bothriocephalus acheilognathi; Urocleidoides reticulatus; Tetrahymena corlissi; Chilodonella piscicola; Hexamita sp.; Cryptobia sp.; Chloromyxum sp.; and an unidentified larval nematode. Though shipments had come from up to five different exporting companies, parasite prevalence was uniformly high. We suggest that prior to release, fish transported internationally should be checked for high risk pathogens such as Camallanus cotti, B. acheilognathi and Centrocestus formosanus, and treated for common infections such as Hexamita sp., Cryptobia sp. T. corlissi and Chilodonella piscicola to inhibit the spread of disease and enhance the survival of the fish.

Increased susceptibility to streptozotocin-induced beta-cell apoptosis and delayed autoimmune diabetes in alkylpurine-DNA-N-glycosylase-deficient mice

Type I diabetes is thought to occur as a result of the loss of insulin-producing pancreatic beta cells by an environmentally triggered autoimmune reaction. In rodent models of diabetes, streptozotocin (STZ), a genotoxic methylating agent that is targeted to the beta cells, is used to trigger the initial cell death. High single doses of STZ cause extensive beta -cell necrosis, while multiple low doses induce limited apoptosis, which elicits an autoimmune reaction that eliminates the remaining cells. We now show that in mice lacking the DNA repair enzyme alkylpurine-DNA-N-glycosylase (APNG), beta -cell necrosis was markedly attenuated after a single dose of STZ. This is most probably due to the reduction in the frequency of base excision repair-induced strand breaks and the consequent activation of poly(ADP-ribose) polymerase (PARP), which results in catastrophic ATP depletion and cell necrosis. Indeed, PARP activity was not induced in A-PNG(-/-) islet cells following treatment with STZ in vitro. However, 48 h after STZ treatment, there was a peak of apoptosis in the beta cells of APNG(-/-) mice. Apoptosis was not observed in PARP-inhibited APNG(+/+) mice, suggesting that apoptotic pathways are activated in the absence of significant numbers of DNA strand breaks. Interestingly, STZ-treated APNG(-/-) mice succumbed to diabetes 8 months after treatment, in contrast to previous work with PARP inhibitors, where a high incidence of beta -cell tumors was observed. In the multiple-low-dose model, STZ induced diabetes in both APNG(-/-) and APNG(-/-) mice; however, the initial peak of apoptosis was 2.5-fold greater in the APNG(-/-) mice. We conclude that APNG substrates are diabetogenic but by different mechanisms according to the status of APNG activity.

EMG activity normalization for trunk muscles in subjects with and without back pain

Purpose: The aims of the present study were to examine electromyographic (EMG) activity of six bilateral trunk muscles during maximal contraction in three cardinal planes, and to determine the direction of contraction that gives maximal activation for each muscle. both for healthy subjects and back-pain patients. Methods: Twenty-eight healthy subjects and 15 back-pain patients performed maximum voluntary contractions in three cardinal planes, Surface EMG signals were recorded from rectus abdominis, external oblique, internal oblique, latissimus dorsi, iliocostalis lumborum, and multifidus bilaterally. Root mean square values of the EMG data were calculated to quantify I the amplitude of EMG signals. Results: For both healthy subjects and back-pain patients. one single direction of contraction was found to give the maximum EMG signals for most muscles. Rectus abdominis demonstrated maximal activity in trunk flexion, external oblique in lateral flexion. internal oblique in axial rotation, and multifidus in extension. For the latissimus dorsi and iliocostalis lumborum. maximal activity was demonstrated in more than one cardinal plane. Conclusion: This study has implications for future research involving normalization of muscle activity to maximal levels required in many trunk EMG studies. As the latissimus dorsi and iliocostalis lumborum demonstrate individual differences in the plane that gives maximal activity, these muscles may require testing in more than one plane.

Autosomal dominant hypocalcemia: A novel activating mutation (E604K) in the cysteine-rich domain of the calcium-sensing receptor

We report a novel activating mutation (E604K) of the calcium-sensing receptor in a family with autosomal dominant hypocalcemia. Whereas all affected individuals exhibited marked hypocalcemia, some cases with untreated hypocalcemia exhibited seizures in infancy, whereas others were largely asymptomatic from birth into adulthood. The missense mutation E604K (G2182A, GenBank accession no. U20759), which affects an amino acid residue in the C terminus of the cysteine-rich domain of the extracellular head, co-segregated with hypocalcemia in all seven individuals for whom DNA was available. Two unaffected, normocalcemic members of the family did not exhibit the mutation. The molecular impact of the mutation on two key components of the signaling response was assessed in HEK-293 cells transiently transfected with cDNA corresponding to either the wild-type calcium-sensing receptor or the E604K mutation derived by site-directed mutagenesis. There was a significant leftward shift in the concentration response curves for the effects of extracellular Ca2+ on both intracellular Ca2+ mobilization (determined by aequorin luminescence) and MAPK activity (determined by luciferase expression). The C terminus of the cysteine-rich domain of the extracellular head may normally act to suppress receptor activity in the presence of low extracellular Ca2+ concentrations.

Dimensionamento ótimo de pilares de concreto armado

A área da engenharia responsável pelo dimensionamento de estruturas vive em busca da solução que melhor atenderá a vários parâmetros simultâneos como estética, custo, qualidade, peso entre outros. Na prática, não se pode afirmar que o melhor projeto foi de fato executado, pois os projetos são feitos principalmente baseados na experiência do executor, sem se esgotar todas as hipóteses possíveis. É neste sentido que os processos de otimização se fazem necessários na área de dimensionamento de estruturas. É possível obter a partir de um objetivo dado, como o custo, o dimensionamento que melhor atenderá a este parâmetro. Existem alguns estudos nesta área, porém ainda é necessário mais pesquisas. Uma área que vem avançando no estudo de otimização estrutural é o dimensionamento de pilares de acordo com a ABNT NBR 6118:2014 que atenda a uma gama maior de geometrias possíveis. Deve-se também estudar o melhor método de otimização para este tipo de problema dentro dos vários existentes na atualidade. Assim o presente trabalho contempla o embasamento conceitual nos temas de dimensionamento de pilares e métodos de otimização na revisão bibliográfica indicando as referências e métodos utilizados no software de dimensionamento otimizado de pilares, programado com auxílio do software MathLab e seus pacotes, utilizando métodos determinísticos de otimização. Esta pesquisa foi realizada para obtenção do Título de Mestre em Engenharia Civil na Universidade Federal do Espírito Santo.

Complicações pós-operatórias em tonsilectomias

Adenoidectomia e amigdalectomia são as cirurgias mais freqüentemente realizadas na prática otorrinolaringológica diária. Em geral, são procedimentos seguros, que não requerem internação prolongada. Em nosso serviço, o paciente recebe alta hospitalar cerca de seis horas após a intervenção, e são utilizadas diferentes técnicas cirúrgicas. OBJETIVO:Avaliar a segurança da liberação do paciente no mesmo dia e as complicações pós-operatórias, e compará-las às técnicas cirúrgicas utilizadas. FORMA DE ESTUDO: Clínico prospectivo. MATERIAL E MÉTODO:Avaliamos prospectivamente 147 pacientes submetidos a adenoidectomia e/ou amigdalectomia por três técnicas diferentes no Hospital das Clínicas da FMUSP. Um protocolo foi aplicado pelo médico que realizou a cirurgia no pós-operatório imediato, após uma semana e um mês, pesquisando a presença de episódios de sangramento, febre, náuseas, vômitos, dor, disfagia a líquidos e a sólidos. RESULTADOS: A incidência de hemorragia pós-operatória foi de 7,48% no primeiro pós-operatório. Houve sangramento discreto em 3,4% dos pacientes durante a primeira semana. Não houve diferença estatística entre os grupos em relação à técnica cirúrgica utilizada, quanto às complicações estudadas. CONCLUSÃO: A liberação do paciente após 6 horas de cirurgia é uma conduta segura. Como não há diferença estatística quanto às complicações de acordo com a técnica cirúrgica utilizada, acreditamos que o cirurgião deva utilizar a técnica com a qual é mais familiarizado.

Respiração oral na criança: repercussões diferentes de acordo com o diagnóstico

A respiração oral é um sintoma freqüente na infância. A síndrome do respirador oral caracteriza-se por cansaço freqüente, sonolência diurna, adinamia, baixo apetite, enurese noturna e até déficit de aprendizado e atenção. Entretanto este sintoma apresenta diversas causas. Faz-se necessário, portanto, esclarecer detalhes sobre estes aspectos clínicos de acordo com suas causas. OBJETIVO: Comparar os achados de sonolência diurna, cefaléia, agitação noturna, enurese, problemas escolares e bruxismo em indivíduos com respiração oral; de acordo com os seguintes diagnósticos: rinite alérgica, hiperplasia adenoideana, hiperplasia adenoamigdaliana. FORMA DE ESTUDO: Estudo de coorte transversal. MATERIAL E MÉTODO: Estudo prospectivo com 142 pacientes de 2 a 16 anos, classificados em três grupos: rinite alérgica, hiperplasia adenoideana isolada e hiperplasia adenoamigdaliana. Os responsáveis dos pacientes responderam a questionário padronizado sobre os sintomas noturnos para caracterização da presença de apnéia do sono e sobre os aspectos estudados: cefaléia matinal, desempenho escolar e atenção, sonolência diurna, agitação noturna, enurese, bruxismo. RESULTADOS: A respiração oral é mais freqüente em meninos. Crianças com hiperplasia adenoamigdaliana são mais jovens. Este grupo apresenta maior freqüência de roncos e apnéia do sono, assim como mau desempenho escolar, bruxismo, enurese e agitação noturna, sendo estes sintomas relacionados com a apnéia, diferenciando-se do grupo com rinite alérgica. Não se observou sonolência diurna e cefaléia matinal significante nos grupos estudados. CONCLUSÃO: Bruxismo, enurese, agitação noturna e cefaléia estão relacionados com a apnéia do sono, sendo mais freqüente na hiperplasia adenoamigdaliana. Assim, a investigação de apnéia do sono na criança com respiração oral é fundamental e assim como a determinação da causa da respiração oral.

Melhora da qualidade de vida em crianças após adenoamigdalectomia

O aumento de volume das tonsilas palatina e faríngea é um dos problemas mais freqüentes do consultório do otorrinolaringologista e é a principal causa de apnéia obstrutiva do sono em crianças. OBJETIVO: Avaliar o impacto da adenoamigdalectomia na qualidade de vida em crianças com hiperplasia adenoamigdaliana. FORMA DE ESTUDO: Clínico prospectivo. MATERIAL E MÉTODO: Trinta e seis pais ou responsáveis de crianças submetidas a adenoamigdalectomia foram entrevistados antes e após a cirurgia através do questionário sobre qualidade de vida específica desenvolvido por Serres et al., 2000, que inclui os domínios: sofrimento físico, distúrbios do sono, problemas de fala e deglutição, desconforto emocional, limitação das atividades e preocupação do responsável. RESULTADOS: A qualidade de vida de todas as crianças melhorou após a cirurgia. Foi observada correlação direta entre o grau de obstrução e distúrbios do sono, preocupação paterna, e na média dos domínios. Correlacionando-se os domínios entre si, observamos relação estatística entre sofrimento emocional e distúrbios do sono, preocupação paterna e distúrbios do sono, limitação das atividades físicas e desconforto emocional. CONCLUSÃO: O aumento das tonsilas e a apnéia obstrutiva do sono pioram a qualidade de vida das crianças, principalmente pelo sofrimento físico e distúrbios do sono. A adenoamigdalectomia realmente traz uma melhora importante na qualidade de vida destes pacientes.

Avaliação da pressão inspiratória em crianças com aumento do volume de tonsilas

Crianças com aumento do volume de tonsilas palatina e faríngea freqüentemente apresentam anormalidades respiratórias tais como ronco, respiração oral e apnéia do sono. Sabe-se que a obstrução de vias aéreas superiores e conseqüentemente a respiração oral podem resultar em problemas pulmonares. OBJETIVO: Avaliar a pressão inspiratória em crianças com obstrução de vias aéreas superiores devido ao aumento do volume de tonsilas. FORMA DE ESTUDO: clínico com coorte transversal. MATERIAL E MÉTODO: Nós avaliamos 37 crianças (4-13 anos, ambos os sexos) com aumento do volume de tonsilas que seriam submetidas à cirurgia de Adenoamigdalectomia na Divisão de Otorrinolaringologia da Universidade de São Paulo no mesmo período. O grupo controle foi composto de 28 crianças sem aumento de volume tonsilar que foram submetidas aos mesmos testes. A pressão Inspiratória foi obtida pelo uso do manovacuômetro. RESULTADOS: Observamos uma menor pressão inspiratória no grupo com aumento do volume de tonsilas. A média do grupo com aumento do volume das tonsilas foi 14,607 cm/H2O e do grupo normal foi de 27,580 cm/H2O (P< 0,001). CONCLUSÃO: O aumento de volume de tonsilas palatina e faríngea foi associado a uma menor pressão inspiratória, resultando em um aumento do esforço respiratório e do trabalho dos músculos envolvidos.

A faringometria acústica: correlações clínico-instrumentais nos distúrbios do sono

A faringometria acústica representa um método atual baseado no principio físico da reflexão acústica, útil à análise volumétrica do espaço orofaringolaringotraqueal. OBJETIVO: Este estudo se propõe a avaliar as variações dos parâmetros faringométricos em indivíduos portadores de distúrbios respiratórios do sono (DRS), para estabelecer uma relação entre as variações morfovolumétricas do espaço orofaringolaríngeo e a existência e gravidade da patologia. FORMA DE ESTUDO: Clínico e experimental. MATERIAL E MÉTODO: Foram examinados 110 pacientes, 70 com DRS e 40 normais, durante o período de Junho/04 a Junho/05. Todos os pacientes foram submetidos à faringometria acústica que permitiu uma avaliação da área oro e hipofaríngea através de um gráfico explicativo. RESULTADOS: Os parâmetros obtidos nos pacientes com DRS mostraram uma importante diferença com respeito ao grupo controle, principalmente na amplitude da I onda (significantemente menor nos pacientes com macroglossia), na extensão do segmento OF, na amplitude do segmento OF e na área hipofaríngea. COLCLUSÃO: A faringometria acústica, mesmo não sendo uma técnica padronizada, pode auxiliar no diagnóstico das síndromes obstrutivas do sono, na localização dos possíveis pontos de obstrução e da gravidade da patologia, e no monitoramento dos pacientes submetidos a cirurgias desobstrutivas das vias aéreas superiores.