LARVICIDAL ACTIVITY OF Bacillus sphaericus 2362 AGAINST Anopheles nuneztovari, Anopheles darlingi AND Anopheles braziliensis (DIPTERA, CULICIDAE)

In this present study, preliminary data was obtained regarding the mortality rate of the Amazonian anophelines, Anopheles nuneztovari, Anopheles darlingi and Anopheles braziliensis when subjected to treatment with Bacillus sphaericus strain 2362, the WHO standard strain. Initially, experiments were conducted to test the mortality rate of the three species of anopheline larvae. The third larval instar of An. nuneztovari and the second and third larval instars of An. darlingi proved to be the least susceptible. In other experiments, the same three mosquito species were tested with the standard strain 2362, An. nuneztovari was the least susceptible to this insect pathogen, while An. braziliensis was the most susceptible. This latter species showed a difference in the level of LC50 concentration, when compared to the former, of 2.4, 2.5 and 1.8 in readings taken 24, 48 and 72 hours after exposure to the bacillus.

Prevalence of Trypanosoma cruzi and Leishmania chagasi infection and risk factors in a Colombian indigenous population

This study was carried out in order to obtain base-line data concerning the epidemiology of American Visceral Leishmaniasis and Chagas’ Disease in an indigenous population with whom the government is starting a dwelling improvement programme. Information was collected from 242 dwellings (1,440 people), by means of house to house interviews about socio-economic and environmental factors associated with Leishmania chagasi and Trypanosoma cruzi transmission risk. A leishmanin skin test was applied to 385 people and 454 blood samples were collected on filter paper in order to detect L. chagasi antibodies by ELISA and IFAT and T. cruzi antibodies by ELISA. T. cruzi seroprevalence was 8.7% by ELISA, L. chagasi was 4.6% and 5.1% by IFAT and ELISA, respectively. ELISA sensitivity and specificity for L. chagasi antibodies were 57% and 97.5% respectively, as compared to the IFAT. Leishmanin skin test positivity was 19%. L. chagasi infection prevalence, being defined as a positive result in the three-immunodiagnostic tests, was 17.1%. Additionally, 2.7% of the population studied was positive to both L. chagasi and T. cruzi, showing a possible cross-reaction. L. chagasi and T. cruzi seropositivity increased with age, while no association with gender was observed. Age (p<0.007), number of inhabitants (p<0.05), floor material (p<0.03) and recognition of vector (p<0.01) were associated with T. cruzi infection, whilst age ( p<0.007) and dwelling improvement (p<0.02) were associated with L. chagasi infection. It is necessary to evaluate the long-term impact of the dwelling improvement programme on these parasitic infections in this community.

Protection of C57BL/10 mice by vaccination with association of purified proteins from Leishmania (Leishmania) amazonensis

In the past few years, induction of protective immunity to cutaneous leishmaniasis has been attempted by many researchers using a variety of antigenic preparations, such as living promastigotes or promastigote extracts, partially purified, or defined proteins. In this study, eleven proteins from Leishmania (Leishmania) amazonensis (LLa) with estimated molecular mass ranging from 97 to 13.5kDa were isolated by polyacrylamide gel electrophoresis and electro-elution. The proteins were associated as vaccine in different preparations with gp63 and BCG (Bacilli Calmette-Guérin). The antigenicity of these vaccines was measured by their ability to induce the production of IFN-g by lymphocyte from subjects vaccinated with Leishvacinâ . The immunogenicity was evaluated in vaccinated mice. C57BL/10 mice were vaccinated with three doses of each vaccine consisting of 30 mg of each protein at 15 days interval. One hundred mg of live BCG was only used in the first dose. Seven days after the last dose, they received a first challenge infection with 105 infective promastigotes and four months later, a second challenge was done. Two months after the second challenge, 42.86% of protection was obtained in the group of mice vaccinated with association of proteins of gp63+46+22kDa, gp63+13.5+25+42kDa, gp63+46+42kDa, gp63+66kDa, and gp63+97kDa; 57.14% of protection was demonstrated with gp63+46+97+13.5kDa, gp63+46+97kDa, gp63+46+33kDa, and 71.43% protection for gp63 plus all proteins. The vaccine of gp63+46+40kDa that did not protect the mice, despite the good specific stimulation of lymphocytes (LSI = 7.60) and 10.77UI/ml of IFN-g production. When crude extract of L. (L.) amazonensis was used with BCG a 57.14% of protection was found after the first challenge and 28.57% after the second, the same result was observed for gp63. The data obtained with the vaccines can suggest that the future vaccine probably have to contain, except the 40kDa, a cocktail of proteins that would protect mice against cutaneous leishmaniasis.

Alteração do paradigma da gestão dos cuidados à pessoa com infecção VIH : um modelo centrado nos cuidados de saúde primários

RESUMO - A infecção por VIH é reconhecida mundialmente como um problema de saúde pública, apesar de todos os esforços e recursos despendidos e dos avanços científicos conseguidos nos últimos anos. Portugal, apesar do registo da diminuição de novos casos de infecção VIH, encontra-se no 4.º lugar (dos países da União Europeia) em termos de incidência de infecção por VIH (dados de 2008). Esta situação, juntamente com a crescente constatação dos custos elevados para o tratamento desta infecção, da variabilidade de práticas e a fragmentação dos cuidados, motivou a reflexão sobre modelos alternativos de organização de cuidados, inspirados em modelos de gestão da doença e idealmente centrados nos cuidados de saúde primários. O presente trabalho teve como objectivos analisar os modelos de organização de cuidados prestados à pessoa com VIH, nos países desenvolvidos, a nível dos cuidados de saúde primários e compreender o nível de adequação dos resultados encontrados, para a realidade portuguesa. Para os alcançar foi realizada uma revisão da literatura e a realização de entrevistas a profissionais de saúde. Nos artigos analisados na revisão da literatura, verificou-se consenso em torno de um modelo baseado em cuidados partilhados, entre os prestadores primários e os diferenciados. Foram ainda referenciados múltiplos factores e condições que terão de ser assegurados para uma possível implementação do modelo. Quanto aos entrevistados verificou-se uma opinião favorável em relação ao modelo de cuidados partilhados, mostrando-se expectantes e despertos para a necessidade de mudança, perspectivando uma maior integração do actual estado de organização dos cuidados para a pessoa com VIH. Estes indícios reflectem a relevância de maior investigação sobre o modelo de cuidados partilhados.

Investigation of trypanothione synthetase of Leishmania infantum as a potential target for new anti-parasitic drugs

Dissertação para obtenção do Grau de Mestre em Biotecnologia

Chronic interstitial pneumonitis in dogs naturally infected with Leishmania (Leishmania) chagasi: a histopathological and morphometric study

Eighteen mongrel dogs of unknown age and naturally infected with Leishmania (Leishmania) chagasi, were obtained from the City Hall of Belo Horizonte, Brazil. Four dogs were used as control. Lung samples were obtained and immediately fixed in formalin. The histopathological picture of all lung tissue sections was a chronic and diffuse interstitial pneumonitis. The thickened inter-alveolar septa were characterized by the cellular exudate (mostly macrophages, lymphocytes and plasmocytes) associated with collagen deposition. Morphometric analysis showed greater septal thickness in the infected animals than in controls. In fact, the morphometric study of collagen stained with ammoniac silver confirmed a larger deposition of collagen in the infected animals. The parasitologic method was carried out during the study of the lesions on the slides. However, we did not observe any correlation between the histopathologic and morphometric data and the clinical status of the animals. We conclude that the pulmonary lesions observed in all naturally infected dogs were correlated with the disease and that the morphometric method used was satisfactory for the analysis of septal thickness and of increased collagen deposition, confirming the presence of fibrosis.

Mapping of a Leishmania major gene/locus that confers pentamidine resistance by deletion and insertion of transposable element

Pentamidine (PEN) is an alternative compound to treat antimony-resistant leishmaniasis patients, which cellular target remains unclear. One approach to the identification of prospective targets is to identify genes able to mediate PEN resistance following overexpression. Starting from a genomic library of transfected parasites bearing a multicopy episomal cosmid vector containing wild-type Leishmania major DNA, we isolated one locus capable to render PEN resistance to wild type cells after DNA transfection. In order to map this Leishmania locus, cosmid insert was deleted by two successive sets of partial digestion with restriction enzymes, followed by transfection into wild type cells, overexpression, induction and functional tests in the presence of PEN. To determine the Leishmania gene related to PEN resistance, nucleotide sequencing experiments were done through insertion of the transposon Mariner element of Drosophila melanogaster (mosK) into the deleted insert to work as primer island. Using general molecular techniques, we described here this method that permits a quickly identification of a functional gene facilitating nucleotide sequence experiments from large DNA fragments. Followed experiments revealed the presence of a P-Glycoprotein gene in this locus which role in Leishmania metabolism has now been analyzed.

Risco Cardiovascular em Doentes com Infecção por Vírus da Imunodeficiência Humana

O aumento do risco cardiovascular é considerada uma importante complicação da infecção Infecção por Vírus da Imunodeficiência Humana (VIH) e da terapêutica anti-retroviral (TARV). À disfunção endotelial característica do processo inflamatório crónico desencadeado pela infecção retroviral, associa-se a disfunção metabólica induzida pela terapêutica, predispondo, em conjunto, para a aterogénese precoce. O reconhecimento deste aumento de risco cardiovascular permite-nos elaborar estratégias de prevenção e optimização terapêutica que passam pelo uso criterioso de hipolipemiantes e modificação da TARV, consoante a avaliação do risco cardiovascular global de cada doente.

Leishmaniose Cutânea Causada por Leishmania Infantum Zimodeme Mon-1 em Portugal

Leishmania infantum zimodeme MON-1 foi isolado a partir de uma lesão cutânea da face de uma criança, residente em Lisboa e que nunca saíu do país. Após biópsia excisional não houve recorrência da lesão. Este é o primeiro caso em que este agente é identificado como responsável pela leishmaniose cutãnea em Portugal.

Morbilidade Cardiovascular em Crianças com Infecção pelo Vírus da Imunodeficiência Humana

Na infecção pelo vírus da imunodeficiência humana (VIH) estão descritas alterações cardiovasculares, tanto estruturais como funcionais. Com o objectivo de fazer o rastreio das referidas alterações no propósito de uma intervenção terapêutica precoce, foi efectuada uma avaliação clínica e laboratorial prospectiva em 32 crianças com infecção pelo VIH, com idades compreendidas entre três meses e 13 anos (média = 3.11 +/- 3.51 anos). Em 90% dos doentes identificou-se transmissão perinatal. Vinte e duas crianças (69%) estavam sintomáticas, sendo a sintomatologia moderada em nove e grave em oito. Catorze doentes tinham alterações imunológicas e oito delas apresentavam imunosupressão grave. Vinte e oito crianças (88%)tinham infecção pelo VIH 1 e seis tinham infecção recente pelo Vírus de Ebstein-Barr. Dezanove doentes receberam tratamento com zidovudina e 14 com imunoglobulinas por via endovenosa. Foram detectadas 19 alterações cardiovasculares em 15 doentes (47%), nomeadamente: 11 casos de hipertensão pulmonar por critérios ecocardiográficos, (oito delas tinham infiltrados intersticiais na radiografia do tórax) e quatro casos de disfunção ventricular esquerda que, por isso, iniciaram terapêutica anticongestiva. As restantes anomalias estruturais ou funcionais foram: persistência de canal arterial; hipertrofia do septo interventricular; prolapso da válvula mitral e derrame pericárdico cada uma delas em um caso. No electrocardiograma de superfície quatro crianças apresentaram critérios de hipertrofia ventricular direita, uma tinha hipertrofia ventricular esquerda e duas tinham alterações inespecíficas de repolarização ventricular. Em 14 doentes (44%) verificou-se no ECG de 24 horas taquicardia sinusal com uma frequência cardíaca média superior ao percentil 95. As anomalias cardiovasculares foram mais frequentes nas crianças com estadios mais avançados de doença. Conclusões: As anomalias cardiovasculares são frequentes em crianças com infecção pelo VIH em estadios avançados; a hipertensão pulmonar é a anomalia cardiovascular mais frequentemente detectada e está associada a patologia respiratória crónica ou recorrente; o acompanhamento cardiológico está indicado nas crianças com infecção pelo vírus da imunodeficiência humana.

The histopathology of cutaneous leishmaniasis due to Leishmania (Leishmania) mexicana in the Yucatan peninsula, Mexico

Localized Cutaneous Leishmaniasis (LCL) known as "chiclero's ulcer" in southeast Mexico, was described by SEIDELIN in 1912. Since then the sylvatic region of the Yucatan peninsula has been documented as an endemic focus of LCL. This study of 73 biopsies from parasitological confirmed lesions of LCL cases of Leishmania (Leishmania) mexicana infection was undertaken: 1) to examine host response at tissue level; and 2) to relate manifestations of this response to some characteristics of clinical presentation. Based on Magalhães' classification we found that the most common pattern in our LCL cases caused by L. (L.) mexicana was predominantly characterized by the presence of unorganized granuloma without necrosis, (43.8%). Another important finding to be highlighted is the fact that in 50/73 (68.5%) parasite identification was positive. There was direct relation between the size of the lesion and time of evolution (r s = 0.3079, p = 0.03), and inverse correlation between size of the lesion and abundance of amastigotes (r s = -0.2467, p = 0.03). In view of the complexity of clinical and histopathological findings, cell-mediated immune response of the disease related to clinical and histopathological features, as so genetic background should be studied.

Perfil do doente com infecção do trato urinário num serviço de ortopedia

RESUMO - As infecções do trato urinário são um problema constante nas unidades prestadoras de cuidados de saúde. Sabe-se que a incidência das mesmas é das mais elevadas em termos de infecções associadas aos cuidados de saúde, bem como acarretam fortes custos hospitalares devido ao aumento da demora média de internamento, uso de antibioterapia aumentado, entre outros. De modo a tentar compreender toda esta problemática, com a realização deste trabalho de projecto, pretende-se encontrar o perfil do doente com infecção do trato urinário num serviço de Ortopedia. Através deste mesmo perfil, tornar-se-á mais fácil uma vigilância epidemiológica e intervenções mais direccionadas ao problema em questão. Para tal, pretende-se construir um instrumento de colheita de dados que caracterize o doente de uma forma geral, antes, e durante o próprio internamento. Caso este mesmo instrumento fosse aplicado, pretender-se-ia cruzar as váriáveis concluindo eventualmente o perfil, justificando melhor o facto da existência de infecções urinárias e adequando medidas de prevenção. ------------ -ABSTRACT - The urinary infections are a constant problem in the health care facilities. It is known that the incidence of these infections is one of the biggest in terms of infections associated to health care, as well as they bring higher hospital costs, due to the middle delay of internment, the increased use of antibioterapy, as long as others. In the way of trying to understand all problems, with the realization of this work project, one intends to find the profile of the orthopedic patient with urinary infection, in the Orthopedic Service. Trough this same profile, it will be easier to do an epidemiological surveillance and more directed interventions to the problem in matter. To achieve this goal, it is claimed to build an instrument of data collection that characterizes the patient in a general way, before and during the internment. If this instrument would be applied, it would be intended to cross the variables concluding eventually the profile, justifying better the fact of the existence of urinary infection

Sarcoma de Kaposi Pulmonar na Infecção por VIH

O aparecimento recente do sarcoma de Kaposi (SK)epidémico na prática clínica corrente da Medicina Interna veio permitir encontrar expressões clínicas raras, como a pulmonar (SKP). A radiologia tem um papel preponderante na avaliação da extensão do SKP. A grande agressividade que por vezes apresenta conduziu à investigação de novas terapêuticas em diferentes áreas (imunomodulação, hormonal e citostática). Os novos conceitos quanto à sua provável origem talvez permitam que, a curto prazo, seja mais uma profilaxia nos imunodeprimidos pelo VIH.