Visualization of the vesicular acetylcholine transporter in cholinergic nerve terminals and its targeting to a specific population of small synaptic vesicles.

Immunohistochemical visualization of the rat vesicular acetylcholine transporter (VAChT) in cholinergic neurons and nerve terminals has been compared to that for choline acetyltransferase (ChAT), heretofore the most specific marker for cholinergic neurons. VAChT-positive cell bodies were visualized in cerebral cortex, basal forebrain, medial habenula, striatum, brain stem, and spinal cord by using a polyclonal anti-VAChT antiserum. VAChT-immuno-reactive fibers and terminals were also visualized in these regions and in hippocampus, at neuromuscular junctions within skeletal muscle, and in sympathetic and parasympathetic autonomic ganglia and target tissues. Cholinergic nerve terminals contain more VAChT than ChAT immunoreactivity after routine fixation, consistent with a concentration of VAChT within terminal neuronal arborizations in which secretory vesicles are clustered. These include VAChT-positive terminals of the median eminence or the hypothalamus, not observed with ChAT antiserum after routine fixation. Subcellular localization of VAChT in specific organelles in neuronal cells was examined by immunoelectron microscopy in a rat neuronal cell line (PC 12-c4) expressing VAChT as well as the endocrine and neuronal forms of the vesicular monoamine transporters (VMAT1 and VMAT2). VAChT is targeted to small synaptic vesicles, while VMAT1 is found mainly but not exclusively on large dense-core vesicles. VMAT2 is found on large dense-core vesicles but not on the small synaptic vesicles that contain VAChT in PC12-c4 cells, despite the presence of VMAT2 immunoreactivity in central and peripheral nerve terminals known to contain monoamines in small synaptic vesicles. Thus, VAChT and VMAT2 may be specific markers for "cholinergic" and "adrenergic" small synaptic vesicles, with the latter not expressed in nonstimulated neuronally differentiated PC12-c4 cells.

Apolipoprotein E4 allele as a predictor of cholinergic deficits and treatment outcome in Alzheimer disease.

Apolipoprotein E (apoE) is critical in the modulation of cholesterol and phospholipid transport between cells of different types. Human apoE is a polymorphic protein with three common alleles, APO epsilon 2, APO epsilon 3, and APO epsilon 4. ApoE4 is associated with sporadic and late-onset familial Alzheimer disease (AD). Gene dose was shown to have an effect on risk of developing AD, age of onset, accumulation of senile plaques in the brain, and reduction of choline acetyltransferase (ChAT) activity in the hippocampus of AD subjects. To characterize the possible impact of the apoE4 allele on cholinergic markers in AD, we examined the effect of apoE4 allele copy number on pre- and postsynaptic markers of cholinergic activity. ApoE4 allele copy number showed an inverse relationship with residual brain ChAT activity and nicotinic receptor binding sites in both the hippocampal formation and the temporal cortex of AD subjects. AD cases lacking the apoE4 allele showed ChAT activities close or within age-matched normal control values. The effect of the apoE4 allele on cholinomimetic drug responsiveness was assessed next in a group (n = 40) of AD patients who completed a double-blind, 30-week clinical trial of the cholinesterase inhibitor tacrine. Results showed that > 80% of apoE4-negative AD patients showed marked improvement after 30 weeks as measured by the AD assessment scale (ADAS), whereas 60% of apoE4 carriers had ADAS scores that were worse compared to baseline. These results strongly support the concept that apoE4 plays a crucial role in the cholinergic dysfunction associated with AD and may be a prognostic indicator of poor response to therapy with acetylcholinesterase inhibitors in AD patients.

Localization of choline acetyltransferase in rat peripheral sympathetic neurons and its coexistence with nitric oxide synthase and neuropeptides.

Indirect immunofluorescence methods using a mouse monoclonal antibody raised to rat choline acetyltransferase (ChAT) revealed dense networks of ChAT-immunoreactive fibers in the superior cervical ganglion, the stellate ganglion, and the celiac superior mesenteric ganglion of the rat. Numerous and single ChAT-immunoreactive cell bodies were observed in the stellate and superior cervical ganglia, respectively. The majority of ChAT-immunoreactive fibers in the stellate and superior cervical ganglia were nitric oxide synthase (NOS) positive. Some ChAT-immunoreactive fibers contained enkephalin-like immunoreactivity. Virtually all ChAT-positive cell bodies in the stellate ganglion were vasoactive intestinal polypeptide (VIP)-positive, and some were calcitonin gene-related peptide (CGRP)-positive. After transection of the cervical sympathetic trunk almost all ChAT- and NOS-positive fibers and most enkephalin- and CGRP-positive fibers disappeared in the superior cervical ganglion. The results suggest that most preganglionic fibers are cholinergic and that the majority of these in addition can release nitric oxide, some enkephalin, and a few CGRP. Acetylcholine, VIP, and CGRP are coexisting messenger molecules in some postganglionic sympathetic neurons.

Regulatory region in choline acetyltransferase gene directs developmental and tissue-specific expression in transgenic mice.

Acetylcholine, one of the main neurotransmitters in the nervous system, is synthesized by the enzyme choline acetyltransferase (ChAT; acetyl-CoA:choline O-acetyltransferase, EC 2.3.1.6). The molecular mechanisms controlling the establishment, maintenance, and plasticity of the cholinergic phenotype in vivo are largely unknown. A previous report showed that a 3800-bp, but not a 1450-bp, 5' flanking segment from the rat ChAT gene promoter directed cell type-specific expression of a reporter gene in cholinergic cells in vitro. Now we have characterized a distal regulatory region of the ChAT gene that confers cholinergic specificity on a heterologous downstream promoter in a cholinergic cell line and in transgenic mice. A 2342-bp segment from the 5' flanking region of the ChAT gene behaved as an enhancer in cholinergic cells but as a repressor in noncholinergic cells in an orientation-independent manner. Combined with a heterologous basal promoter, this fragment targeted transgene expression to several cholinergic regions of the central nervous system of transgenic mice, including basal forebrain, cortex, pons, and spinal cord. In eight independent transgenic lines, the pattern of transgene expression paralleled qualitatively and quantitatively that displayed by endogenous ChAT mRNA in various regions of the rat central nervous system. In the lumbar enlargement of the spinal cord, 85-90% of the transgene expression was targeted to the ventral part of the cord, where cholinergic alpha-motor neurons are located. Transgene expression in the spinal cord was developmentally regulated and responded to nerve injury in a similar way as the endogenous ChAT gene, indicating that the 2342-bp regulatory sequence contains elements controlling the plasticity of the cholinergic phenotype in developing and injured neurons.

Avaliação da inervação entérica e análise proteômica do intestino delgado de ratos expostos à dose aguda ou crônica de fluoreto

O trato gastrointestinal (TGI) é a principal rota de exposição ao fluoreto (F) e o seu mais importante sítio de absorção. Acredita-se que a toxicidade do F comprometa a fisiologia do intestino, devido à relevante sintomatologia gastrointestinal relatada em consequência da exposição excessiva ao F. A função intestinal é controlada por uma complexa rede neuronal interligada e incorporada à parede deste órgão, denominada Sistema Nervoso Entérico (SNE). Embora os efeitos tóxicos do F sobre o Sistema Nervoso Central sejam descritos na literatura, não há estudos relacionados à sua toxicidade sobre o SNE. Neste estudo realizado em ratos, foi avaliado o efeito da exposição aguda ou crônica ao F, sobre a população geral de neurônios entéricos e sobre as subpopulações que expressam os principais neurotransmissores entéricos: Acetilcolina (ACh), Óxido Nítrico (NO), Peptídeo Vasoativo Intestinal (VIP), Peptídeo Relacionado ao Gene da Calcitonina (CGRP) e Substância P (SP). Os animais foram divididos em 5 grupos: 3 destinados à exposição crônica (0 ppm, 10 ppm ou 50 ppm de F na água de beber) e 2 à exposição aguda (0 ou 25 mgF/Kg por gavagem gástrica). Foram coletados os 3 segmentos do intestino delgado (duodeno, jejuno e íleo) e processados para a detecção da HuC/D, ChAT, nNOS, VIP, CGRP e SP, através de técnicas de imunofluorescência, no plexo mioentérico. Foram obtidas imagens para a realização da análise quantitativa dos neurônios da população geral (HuC/D) e nitrérgicos (imunorreativos à nNOS); e morfométrica dos neurônios imunorreativos à HuC/D ou nNOS; e das varicosidades imunorreativas à ChAT, VIP, CGRP ou SP. Amostras dos 3 segmentos intestinais foram preparadas e coradas em Hematoxilina e Eosina para análise histológica da morfologia básica. O segmento intestinal considerado mais afetado na análise morfométrica da população geral de neurônios, o duodeno, foi selecionado para a realização da análise proteômica, com o objetivo de oferecer o seu perfil proteico e determinar diferenças na expressão proteica em decorrência da exposição crônica ou aguda ao F. A análise da concentração de F no plasma sanguíneo foi realizada para a confirmação da exposição. Na análise quantitativa, o grupo de 50 ppm F, apresentou uma diminuição significativa na densidade da população geral de neurônios do jejuno e do íleo e na densidade dos neurônios imunorreativos à nNOS no duodeno e no jejuno. Quanto à análise morfométrica, a população geral e as subpopulações neuronais entéricas avaliadas apresentaram alterações morfológicas significativas, tanto após a exposição crônica quanto a aguda. Para a análise proteômica do duodeno, verificou-se que da associação de seus genes a um termo, e assim classificadas de acordo com diferentes processos biológicos. No caso do grupo da dose aguda, o processo biológico com a maior porcentagem de genes associados foi a geração de metabólitos precursores e energia (27% das proteínas); enquanto para os grupos de 10 e 50 ppm F foram o processo metabólico da piridina (41%) e a polimerização proteica (33%), respectivamente.

Incorporación de la Web 2.0 en la docencia de Proyectos e Infraestructuras de Telecomunicación II: Curso de adaptación al grado

Comunicación y póster presentados en las IX Jornadas de Redes de Investigación en Docencia Universitaria, Alicante, 16-17 junio 2011.

Búsqueda colaborativa para el apoyo a la recomendación de Objetos de Aprendizaje

Este trabajo propone un marco para la búsqueda, selección, valoración y recomendación tanto individual como en grupo de objetos de aprendizaje implementado dentro del sistema de recomendación hibrido DELPHOS. Para facilitar la búsqueda colaborativa se utilizan varias aproximaciones de creación de grupos. También se van a facilitar varias funciones colaborativas como la calificación, el etiquetado y la posibilidad de comentar los objetos. Finalmente se proporcionan varias actividades sociales para poder añadir o recomendar objetos a un grupo, visualizar y calificar objetos añadidos por otros usuarios del grupo, y comunicarse mediante chat o correo electrónico con otros miembros del mismo para llegar a tomar decisiones sobre los objetos más adecuados para los intereses del grupo.

Computational approaches to subjectivity and sentiment analysis: Present and envisaged methods and applications

Recent years have witnessed a surge of interest in computational methods for affect, ranging from opinion mining, to subjectivity detection, to sentiment and emotion analysis. This article presents a brief overview of the latest trends in the field and describes the manner in which the articles contained in the special issue contribute to the advancement of the area. Finally, we comment on the current challenges and envisaged developments of the subjectivity and sentiment analysis fields, as well as their application to other Natural Language Processing tasks and related domains.

A Comunicação Interna Corporativa em Rede - Estudo de Caso: A Intranet como instrumento de Gestão Participativa no Grupo EDP

Quer seja a nível pessoal quer seja empresarial existem atualmente muitas formas de obter informações e conhecimentos. Numa empresa são produzidas milhares de informações que causam impacto na vida dos colaboradores, mas que nem sempre são bem comunicadas. O mais importante nos dias de hoje é a mobilidade e o acesso fácil à tecnologia de informação. Até ao final da década de 80, do século XX, a comunicação nas empresas era realizada através dos meios tradicionais, como por exemplo, as publicações impressas, a correspondência empresarial, entre outros. Em pleno século XXI, a comunicação organizacional utiliza também as novas tecnologias de comunicação como meio e instrumento para atingir os seus objetivos. A Intranet é neste momento, o meio de comunicação interna mais utilizado, possibilitando que as informações sejam encontradas e utilizadas de forma mais rápida, e disponibilizadas para todos os membros da organização. Representa um mecanismo que agiliza os processos internos e externos de uma empresa, possibilitando que várias pessoas planeiem estratégias, discutam projetos, realizem reuniões virtuais, de forma a obterem uma relação custo/benefício mais eficiente. A Intranet fornece serviços de correio, web, chat, o que agiliza os processos comunicacionais corporativos, e torna mais eficiente e eficaz a comunicação entre as pessoas e entre os departamentos/áreas de uma organização. Neste sentido a Comunicação Interna tem uma função muito importante, no sentido de fazer circular novas informações, promover o debate e a interação entre os vários colaboradores da organização da mesma área/departamento ou de áreas diferentes e, sobretudo, formar os colaboradores para os novos desafios. Por se tratar de um instrumento muito recente e existir poucos estudos sobre o mesmo e a sua implicação na comunicação interna, esta dissertação poderá ser útil em vários domínios. Ao longo da sua apresentação, e em concreto na revisão da literatura é abordado o conceito de comunicação interna a nível organizacional assim como as variáveis que está intimamente relacionada, e numa segunda fase é abordado a evolução das tecnologias ao serviço da gestão empresarial, e mais em concreto a ferramenta de comunicação- a Intranet. A dissertação tem como objetivo geral perceber que contributo a tecnologia e os novos sistemas de informação, neste caso a utilização da Intranet traz ao Grupo EDP, face às suas políticas de comunicação interna, e em que medida a sua utilização implica o conhecimento e a informação em todos os membros da organização e de que forma isso se expressa. Por um lado, pretende-se percecionar em que medida é que os conteúdos disponibilizados vão de encontro às necessidades e expectativas dos colaboradores e, por outro, percecionar se a informação disponibilizada na intranet da EDP (edpON), por conteúdos temáticos, vai ao encontro das expetativas das diferentes categorias profissionais em que se inserem os seus colaboradores. Este estudo de caso realizado no Grupo EDP, permite analisar sobretudo como a existência de uma Intranet apoia a comunicação interna de uma organização, mobilizando os colaboradores para o aumento do trabalho em equipa e a melhoria do seu desempenho profissional, bem como contribui para uma eficaz gestão comunicacional ao serviço da gestão do grupo empresarial, objeto de estudo. A Comunicação interna no caso do grupo EDP a nível mundial deve permitir compartilhar a missão, a visão, a estratégia e os valores organizacionais. Ela deve cumprir uma função estratégica dentro da empresa, e incorporar o desafio diário da gestão da mudança e ao mesmo tempo espelhar uma cultura organizacional comprometida com metas, objetivos, desempenho e resultados. A importância da concretização deste estudo de caso, no âmbito da análise da comunicação interna e essencialmente da sua Intranet, pretende acrescentar valor à prossecução do cumprimento de objetivos comunicacionais do grupo EDP, assim como propor outras soluções, para a sua gestão empresarial.

Oeuvres illustrées de Balzac.

Vol.1,4,7,8, pub. 1874; v.2, 1873; v.5-6, 1867, v.3, t.-p. wanting.

Économie rurale et civile, ou Moyens les plus économiques d'administrer et de faire valoir ses biens de campagne et de ville...

Contiene: Première partie: Administration des biens / par M. L.D.B.[Le Bègue de Presle]. 1789, XXIV, 541 p. - Seconde partie: Economie domestique / par M. L. B. D. P. [Le Bègue de Presle]. 1789, XXXIIV, 502 p., 2 lám. - Troisième partie, tome 1: Exploitation / par M. l'abbé de Lalauze. 1789, XVI, 488 p., 4 lám. - Troisième partie, tome 2: Exploitation des terres / par M. l'abbé de Lalauze. 1790, 2 h., 528 p., 2 lám. - Troisième partie, tome 3: Economie des champs / par M. l'abbé de Lalauze. 1791, 2 h., 540 p. - Troisième partie, tome 4: Economie des champs / par M. l'abbé de Lalauze..., 1792. 2 h., 390 p., 2 lám.

Ouvrajes [sic] politiques /

Encabezamiento completado con CCPB.

Itineraire de Paris a Jerusalem /

Accompagne de fac-similes.

Journal d'agriculture pratique et de jardinage.

Title from vol. t.p.

Oeuvres complètes.

V. 1. Béatrix.--v. 2-3. Les célibataires.--v. 4. César Birotteau.--v. 5. Les Chouans. Une passion dans le desert.--v. 6. Le colonel Chabert. Gobseck. La bourse. La grenadière. L'interdiction.--v.7-8. Les contes drolatiques.--v. 9. Le contrat de mariage. Albert Savarus. Étude de femme.--v. 10. Le cousin Pons.--v. 11. La cousine Bette.--v. 12. Le curé de village.--v. 13. Un début dans la vie. Une double famille. Pierre Grassou.--v. 14. Le député d'Arcis.--v. 15. Les employés. Sarrasine. Gaudissart II. Facino Cane.--v. 16. L'enfant Maudit. Massimilla Doni. Un drame au bord de la mer. Le réquisitionnaire. Gambara.--v. 17. Eugénie Grandet.--v. 18. La femme de trente ans. La femme abandonnée. La messe de l'Athée. Le message.--v. 19. Histoire des treize.--v. 20. Honorine. La paix du ménage. Madame Firmiani. La vendetta. La grande Bretèche.--v. 21-23. Illusions perdues.--v. 24. Louis Lambert. Séraphita.--v. 25. Le lys dans la vallée.--v. 26. Madame de la Chanterie. L'initié. Z. Marcás.--v. 27. La maison du chat qui pelote. Le bal de sceaux. Une fille d'Eve.--v. 28. La maison Nucingen. Les secrets de la princesse de Cadignan. Un homme d'affaires. Les comédiens sans le savoir. Un prince de la Bohème.--v. 29. Les Marana. Adieu. El verdugo. L'auberge rouge. Maitre Cornélius. L'élixir de longue vie. les proscrits.--v. 30. Le médicin de campagne.--v. 31. Memoires de deux jeunes mariées. La fausse maitresse.--v. 32. Modeste Mignon.--v. 33. Monographie du rentier Physiologie de l'employé. Traité de la vie élégante. Monographie de la presse parisienne.--v. 34. Théorie de la démarche. Traité des excitants modernes. Portraits et critique littéraire. Physiologie de la toilette. Physiologie gastronomique. De la mode en littérature. Gavarni. La chine et les chinois. Contes et nouvelles.--v. 35. Les paysans.--v. 36. Le peau de chagrin.--v. 37. Le père Goriot.--v. 38. Petites misères de la vie conjugale. Une rue de Paris et son habitant.--v. 39-40. Les petits bourgeois.--v. 42. La recherche de l'absolu. Le chef d'oeuvre inconnu. Jésus-Christ en Flandre. Melmoth réconcilie.--v. 43-44. Splendeurs et misères des courtisanes.--v. 45. Sur Catherine de Médicis. Le martyr Calviniste. Les confidences de Ruggieri. Les deux rêves.--v. 46. Une ténébreuse affaire. Un épisode sous la terreur.--v. 47. Vautrin. Les ressources de Quinola. Paméla Giraud.--v. 48. La maratre. Le faiseur.--v. 49. Ursele Mirouet.--v. 50. La vieille fille. Le cabinet des antiques.