Novel characteristics of the biological properties of the yeast Saccharomyces cerevisiae eukaryotic initiation factor 2A

Eukaryotic initiation factor 2A (eIF2A) has been shown to direct binding of the initiator methionyl-tRNA (Met-tRNA(i)) to 40 S ribosomal subunits in a codon-dependent manner, in contrast to eIF2, which requires GTP but not the AUG codon to bind initiator tRNA to 40 S subunits. We show here that yeast eIF2A genetically interacts with initiation factor eIF4E, suggesting that both proteins function in the same pathway. The double eIF2A/eIF4E-ts mutant strain displays a severe slow growth phenotype, which correlated with the accumulation of 85% of the double mutant cells arrested at the G(2)/M border. These cells also exhibited a disorganized actin cytoskeleton and elevated actin levels, suggesting that eIF2A might be involved in controlling the expression of genes involved in morphogenic processes. Further insights into eIF2A function were gained from the studies of eIF2A distribution in ribosomal fractions obtained from either an eIF5BDelta (fun12Delta) strain or a eIF3b-ts (prt1-1) strain. It was found that the binding of eIF2A to 40 and 80 S ribosomes was not impaired in either strain. We also found that eIF2A functions as a suppressor of Ure2p internal ribosome entry site-mediated translation in yeast cells. The regulation of expression from the URE2 internal ribosome entry site appears to be through the levels of eIF2A protein, which has been found to be inherently unstable with a half-life of approximately 17 min. It was hypothesized that this instability allows for translational control through the level of eIF2A protein in yeast cells.

Studies on the mechanism of action on antitumour imidazotetrazinones

The imidazotetrazinones are clinically active antitumour agents, temozolomide currently proving successful in the treatment of melanomas and gliomas. The exact nature of the biological processes underlying response are as yet unclear.This thesis attempts to identify the cellular targets important to the cytotoxicity of imidazotetrazinones, to elucidate the pathways by which this damage leads to cell death, and to identify mechanisms by which tumour cells may circumvent this action. The levels of the DNA repair enzymes O6-alkylguanine-DNA-alkyltransferase (O6-AGAT) and 3-methyladenine-DNA-glycosylase (3MAG) have been examined in a range of murine and human cell lines with differential sensitivity to temozolomide. All the cell lines were proficient in 3MAG despite there being 40-fold difference in sensitivity to temozolomide. This suggests that while 3-methyladenine is a major product of temozolomide alkylation of DNA it is unlikely to be a cytotoxic lesion. In contrast, there was a 20-fold variation in O6-AGAT levels and the concentration of this repair enzyme correlated with variations in cytotoxicity. Furthermore, depletion of this enzyme in a resistant, O6-AGAT proficient cell line (Raji), by pre-treatment with the free base O6-methylguanine resulted in 54% sensitisation to the effects of temozolomide. These observations have been extended to 3 glioma cell lines; results that support the view that the cytotoxicity of temozolomide is related to alkylation at the O6-position of guanine and that resistance to this drug is determined by efficient repair of this lesion. It is clear, however, the other factors may influence tumour response since temozolomide showed little differential activity towards 3 established solid murine tumours in vivo, despite different tumour O6-AGAT levels. Unlike mitozolomide, temozolomide is incapable of cross-linking DNA and a mechanism by which O6-methylguanine may exert lethality is unclear. The cytotoxicity of the methyl group may be due to its disruption of DNA-protein interactions, or alternatively cell death may not be a direct result of the alkyl group itself, but manifested by DNA single-strand breaks. Enhanced alkaline elution rates were found for the DNA of Raji cells treated with temozolomide following alkyltransferase depletion, suggesting a relationship between O6-methylguanine and the induction single-strand breaks. Such breaks can activate poly(ADP-ribose) synthetase (ADPRT) an enzyme capable of rapid and lethal depletion of cellular NAD levels. However, at concentrations of temozolomlde relevant in vivo little change in adenine nucleotides was detected in cell lines, although this enzyme would appear important in modulating DNA repair since inhibition of ADPRT potentiated temozolomide cytotoxicity in Raji cells but not O6-AGAT deficient GM892A cells. Cell lines have been reported that are O6-AGAT deficient yet resistant to methylating agents. Thus, resistance to temozolomide may arise not only by removal of the methyl group from the O6-position of guanine, but also from another mechanism involving caffeine-sensitive post-replication repair or mismatch repair activity. A modification of the standard Maxam Gilbert sequencing technique was used to determine the sequence specificity of guanine-N7 alkylation. Temozolomide preferentially alkylated runs of guanines with the intensity of reaction increasing with the number of adjacent guanines in the DNA sequence. Comparable results were obtained with a polymerase-stop assay, although neither technique elucidates the sequence specificity of O6-guanine alkylation. The importance of such specificity to cytotoxicity is uncertain, although guanine-rich sequences are common to the promoter regions of oncogenes. Expression of a plasmid reporter gene under the control of the Ha-ras proto~oncogene promoter was inhibited by alkylation with temozolomide when transfected into cancer cell lines, However, this inhibition did not appear to be related to O6~guanine alkylation and therefore would seem unimportant to the chemotherapeutic activity of temozolomide.

Oxidative catabolism of tetrahydropterins

Mixed labelled folic acid was administerd to rats. Exposure to N2O was used to give an insight into the major route of scission within the monoglutamate pool, results suggest that THF formed during transport from the gut lumen to the plasma is the major route of scission within the gut. Peroxides in corn oil and arising as a result of lipid peroxidation and autoxidation increase catabolism of the monoglutamate pool and decrease incorporation of administered folates into the polyglutamate pool. It is suggested that peroxides may oxidise B12 resulting in inhibition of methionine synthetase, this results in diminished polyglutamation and increased urinary excretion of 5 CH3THF. Fats undergo peroxidation within tissues, the resulting peroxides increase catabolism of the polyglutamate pool. It is suggested that the NBT assay may reflect polyglutamate breakdown. Antioxidants such as vitamin E (and DES) decrease catabolism of the monoglutamate pool. Administration of DES resulted in changes similar to those observed during malignancy, it is suggested that these changes may precede the onset of tumour development. Vitamin E elevates brain DHPR activity. Since lowered DHPR levels and disturbed THB metabolism have been observed in aging and Down's syndrome it is proposed that vitamin E therapy may prove beneficial in situations where oxidative stress is increased. Brain DHPR activity was increased on administration of peroxides suggesting that in situations of oxidative stress (which may result in increased catabolism of THB) the salvage pathway may be stimulated and loss of THB minimised. N2O exposure had no effect on THB metabolism suggesting that the stimulatory role of 5 CH3THF is due to its role as a methyl donor.

The in vivo susceptibility of Leishmania donovani to sodium stibogluconate is drug specific and can be reversed by inhibiting glutathione biosynthesis

Resistance to pentavallent antimonial (Sb-v) agents such as sodium stibogluconate (SSG) is creating a major problem in the treatment of visceral leishmaniasis. In the present study the in vivo susceptibilities of Leishmania donovani strains, typed as SSG resistant (strain 200011) or SSG sensitive (strain 200016) on the basis of their responses to a single SSG dose of 300 mg of Sb-v/kg of body weight, to other antileishmanial drugs were determined. In addition, the role of glutathione in SSG resistance was investigated by determining the influence on SSG treatment of concomitant treatment with a nonionic surfactant vesicle formulation of buthionine sulfoximine (BSO), a specific inhibitor of the enzyme gamma-glutamylcysteine synthetase which is involved in glutathione biosynthesis, and SSG, on the efficacy of SSG treatment. L. donovani strains that were SSG resistant (strain 200011) and SSG sensitive (strain 200016) were equally susceptible to in vivo treatment with miltefosine, paromomycin and amphotericin B (Fungizone and AmBisome) formulations. Combined treatment with SSG and vesicular BSO significantly increased the in vivo efficacy of SSG against both the 200011 and the 200016 L. donovani strains. However, joint treatment that included high SSG doses was unexpectedly associated with toxicity. Measurement of glutathione levels in the spleens and livers of treated mice showed that the ability of the combined therapy to inhibit glutathione levels was also dependent on the SSG dose used and that the combined treatment exhibited organ-dependent effects. The SSG resistance exhibited by the L. donovani strains was not associated with cross-resistance to other classes of compounds and could be reversed by treatment with an inhibitor of glutathione biosynthesis, indicating that clinical resistance to antimonial drugs should not affect the antileishmanial efficacies of alternative drugs. In addition, it should be possible to identify a treatment regimen that could reverse antimony resistance.

Labeled EF-Tus for rapid kinetic studies of pretranslocation complex formation

The universally conserved translation elongation factor EF-Tu delivers aminoacyl(aa)-tRNA in the form of an aa-tRNA·EF-Tu·GTP ternary complex (TC) to the ribosome where it binds to the cognate mRNA codon within the ribosomal A-site, leading to formation of a pretranslocation (PRE) complex. Here we describe preparation of QSY9 and Cy5 derivatives of the variant E348C-EF-Tu that are functional in translation elongation. Together with fluorophore derivatives of aa-tRNA and of ribosomal protein L11, located within the GTPase associated center (GAC), these labeled EF-Tus allow development of two new FRET assays that permit the dynamics of distance changes between EF-Tu and both L11 (Tu-L11 assay) and aa-tRNA (Tu-tRNA assay) to be determined during the decoding process. We use these assays to examine: (i) the relative rates of EF-Tu movement away from the GAC and from aa-tRNA during decoding, (ii) the effects of the misreading-inducing antibiotics streptomycin and paromomycin on tRNA selection at the A-site, and (iii) how strengthening the binding of aa-tRNA to EF-Tu affects the rate of EF-Tu movement away from L11 on the ribosome. These FRET assays have the potential to be adapted for high throughput screening of ribosomal antibiotics.

Regulating the expression of eEF1A to decipher its non canonical functions in eukaryotic cells

The canonical function of eEF1A is delivery of the aminoacylated tRNA to the A site of the ribosome during protein translation, however, it is also known to be an actin binding protein. As well as this actin binding function, eEF1A has been shown to be involved in other cellular processes such as cell proliferation and apoptosis. It has long been thought that the actin cytoskeleton and protein synthesis are linked and eEF1A has been suggested to be a candidate protein to form this link, though very little is understood about the relationship between its two functions. Overexpression of eEF1A has also been shown to be implicated in many different types of cancers, especially cancers that are metastatic, therefore it is important to further understand how eEF1A can affect both translation and the organisation of the actin cytoskeleton. To this end, we aimed to determine the effects of reduced expression of eEF1A on both translation and its non canonical functions in CHO cells. We have shown that reduced expression of eEF1A in this cell system results in no change in protein synthesis, however results in an increased number of actin stress fibres and other proteins associated with these fibres such as myosin IIA, paxillin and vinculin. Cell motility and attachment are also affected by this reduction in eEF1A protein expression. The organisational and motility phenotypes were found to be specific to eEF1A by transforming the cells with plasmids containing either human eEF1A1 or eEF1A2. Though the mechanisms by which these effects are regulated have not yet been established, this data provides evidence to show that the translation and actin binding functions of eEF1A are independent of each other as well as being suggestive of a role for eEF1A in cell motility as supported by the observation that overexpression of eEF1A protein tends to be associated with the cancer cells that are metastatic.

Absolute configuration and biosynthesis of pahayokolide A from Lyngbya sp. Strain 15-2 of the Florida Everglades

Pahayokolides A-D are cytotoxic cyclic polypeptides produced by the freshwater cyanobacterium Lyngbya sp. strain 15-2 that possess an unusual β-amino acid, 3-amino-2,5,7,8-tetrahydroxy-10-methylundecanoic acid (Athmu). The absolute configuration of pahayokolides A-D was determined using advanced Marfey’s method. It was also confirmed that a pendant N-acetyl- N-methyl leucine moiety in pahayokolide A was absent in pahayokolides B and pahayokolides C-D were conformers of pahayokolide A. Feeding experiments indicated that the biosynthesis of the Athmu sidechain arises from leucine or α-ketoisovalerate, however could not be further extended by three rounds of condensation with malonate units. Putative four peptide and one unique polyketide synthetases in Lyngbya sp. strain 15-2 were identified by using a PCR method and degenerate primers derived from conserved core sequences of known NRPSs and PKSs. Identification of one unique KS domain conflicted with the logic rule that the long side chain of Athmu was assembled by three rounds of ketide extensions if PKSs were involved. A gene cluster (pah) encoding a peptide synthetase putatively producing pahayokolide was cloned, partially sequenced and characterized. Seven modules of the non-ribosomal peptide synthetase (NRPS) were identified. Ten additional opening reading frames (ORFs) were found, responsible for peptide resistance, transport and degradation. Although the predicted substrate specificities of NRPS agreed with the structure of pahayokolide A partially, the disagreement could be explained. However, no PKS gene was found in the pah gene cluster.

Novel Purification of Archaeal Rnase P Protein, Pfu Rpp38, for Nmr Studies

Dr. Kenneth Murray, Ph.D. Assistant Professor of Biology Ribonuclease P (RNase P) is an essential and ubiquitous ribonucleoprotein enzyme primarily responsible for cleaving 5' leader sequences during tRNA maturation. RNase P comprises one essential RNA, and one protein subunit in eubacteria, five proteins in archaea, and ten in humans. Due to its homology to human RNase P, its higher stability, and simpler structure; extensive studies have been conducted utilizing the enzyme from the archaeal hyperthermophile, Pyrococcus furious (Pfu). Previous studies identified only four protein subunits associated with the archaeal RNase P. This fourprotein reconstituted particle, however, had an optimal temperature of 55°C, compared to the optimal 70°C of the wild type RNase P. Additional probing of the organism's genome database revealed a fifth RNase P protein subunit, RPP38. To facilitate further investigations of Pfu RNase complexes, we sought to develop a protocol for the purification ofRPP38. Our results, presented herein, represent the first known expression.purification protocol developed for RPP38. Briefly, we synthesized an N-terminal6x-His RPP38 fusion construct, reengineered to contain a Tobacco Etch Virus (TEV) protease cleavage site. Purification was achieved via immobilized metal affinity chromatography and reversed phase high performance liquid chromatography. Following purification the 6X-His affinity tag was removed via TEV cleavage, thus regenerating the native RPP38 protein. Purity and identity of RPP38 were confirmed by sodium dodecylsulfate - polyacrylamide gel electrophoresis and mass spectrometry, respectively. Our work is expected to contribute to our understanding ofRNase P function and tRNA maturation by providing an efficient, facile technique to express and purify Pfu RNase protein RPP38 as a means to facilitate structural and functional analyses.

Absolute Configuration and Biosynthesis of Pahayokolide A from Lyngbya sp. Strain 15-2 of the Florida Everglades

Pahayokolides A-D are cytotoxic cyclic polypeptides produced by the freshwater cyanobacterium Lyngbya sp. strain 15-2 that possess an unusual β-amino acid, 3-amino-2,5,7,8-tetrahydroxy-10-methylundecanoic acid (Athmu). The absolute configuration of pahayokolides A-D was determined using advanced Marfey’s method. It was also confirmed that a pendant N-acetyl-N-methyl leucine moiety in pahayokolide A was absent in pahayokolides B and pahayokolides C-D were conformers of pahayokolide A. Feeding experiments indicated that the biosynthesis of the Athmu sidechain arises from leucine or α-ketoisovalerate, however could not be further extended by three rounds of condensation with malonate units. Putative four peptide and one unique polyketide synthetases in Lyngbya sp. strain 15-2 were identified by using a PCR method and degenerate primers derived from conserved core sequences of known NRPSs and PKSs. Identification of one unique KS domain conflicted with the logic rule that the long side chain of Athmu was assembled by three rounds of ketide extensions if PKSs were involved. A gene cluster (pah) encoding a peptide synthetase putatively producing pahayokolide was cloned, partially sequenced and characterized. Seven modules of the non-ribosomal peptide synthetase (NRPS) were identified. Ten additional opening reading frames (ORFs) were found, responsible for peptide resistance, transport and degradation. Although the predicted substrate specificities of NRPS agreed with the structure of pahayokolide A partially, the disagreement could be explained. However, no PKS gene was found in the pah gene cluster.

Cellular and molecular phenotypes depending upon the RNA repair system RtcAB of Escherichia coli

RNA ligases function pervasively across the three kingdoms of life for RNA repair, splicing and can be stress induced. The RtcB protein (also HSPC117, C22orf28, FAAP and D10Wsu52e) is one such conserved ligase, involved in tRNA and mRNA splicing. However, its physiological role is poorly described, especially in bacteria. We now show in Escherichia coli bacteria that the RtcR activated rtcAB genes function for ribosome homeostasis involving rRNA stability. Expression of rtcAB is activated by agents and genetic lesions which impair the translation apparatus or may cause oxidative damage in the cell. Rtc helps the cell to survive challenges to the translation apparatus, including ribosome targeting antibiotics. Further, loss of Rtc causes profound changes in chemotaxis and motility. Together, our data suggest that the Rtc system is part of a previously unrecognised adaptive response linking ribosome homeostasis with basic cell physiology and behaviour.

The temperate Burkholderia phage AP3 of the Peduovirinae shows efficient antimicrobial activity against B. cenocepacia of the IIIA lineage

Burkholderia phage AP3 (vB_BceM_AP3) is a temperate virus of the Myoviridae and the Peduovirinae subfamily (P2likevirus genus). This phage specifically infects multidrug-resistant clinical Burkholderia cenocepacia lineage IIIA strains commonly isolated from cystic fibrosis patients. AP3 exhibits high pairwise nucleotide identity (61.7%) to Burkholderia phage KS5, specific to the same B. cenocepacia host, and has 46.7% - 49.5% identity to phages infecting other species of Burkholderia. The lysis cassette of these related phages has a similar organization (putative antiholin, putative holin, endolysin and spanins) and shows 29-98% homology between specific lysis genes, in contrast to Enterobacteria phage P2, the hallmark phage of this genus. The AP3 and KS5 lysis genes have conserved locations and high amino acid sequence similarity. The AP3 bacteriophage particles remain infective up to 5 h at pH 4-10 and are stable at 60°C for 30 min, but are sensitive to chloroform, with no remaining infective particles after 24 h of treatment. AP3 lysogeny can occur by stable genomic integration and by pseudo-lysogeny. The lysogenic bacterial mutants did not exhibit any significant changes in virulence compared to wild-type host strain when tested in the Galleria mellonella moth wax model. Moreover, AP3 treatment of larvae infected with B. cenocepacia revealed a significant increase (P < 0.0001) in larvae survival in comparison to AP3-untreated infected larvae. AP3 showed robust lytic activity, as evidenced by its broad host range, the absence of increased virulence in lysogenic isolates, the lack of bacterial gene disruption conditioned by bacterial tRNA downstream integration site, and the absence of detected toxin sequences. These data suggest the AP3 phage is a promising potent agent against bacteria belonging to most common B. cenocepacia IIIA lineage strains.

Lärplattor i matematikundervisningen : En intervjustudie med lärare inom f-3

I och med att det nu finns teknologi som kan ta oss bortom de gränser som våra biologiska förutsättningar sätter uppstod en nyfikenhet för mig kring digitala verktyg i matematikundervisningen. Denna studie riktar sig mot lärare och på användandet av lärplattor i matematikundervisningen. Metoden som användes i undersökningen var en kvalitativ forskningsinriktning med intervjuer av lärare arbetandes inom åldrarna f-3. Fem stycken lärare på fem olika skolor inom Sundsvalls kommun intervjuades. Studien kommer fram till att lärare ser positivt på användandet av lärplattor i matematikundervisningen. Resultatet visar att de intervjuade lärarna anser att det bland annat är viktigt att lärare använder sig av ett tydligt arbetssätt som innehar ett syfte så att elever förstår lärplattornas roll i klassrummet. Lärarna ser att det finns en rad olika för- och nackdelar med lärplattor i matematikundervisningen. Exempelvis menar lärarna att lärplattor bidrar till ett lustfyllt lärande där elever får färdighetsträning och begreppsförståelse. En annan positiv aspekt var att lärarna menade att eleverna får träna samarbetsförmågan när barnen kommunicerar med varandra kring aktiviteterna med lärplattan. Nackdelarna kunde enligt lärarna vara att nätet krånglar, att lärplattor används till fel saker av eleverna, samt att elever inte ser lärplattan som ett undervisningsverktyg utan som en spelkonsol. Vidare upptäcktes en skillnad huruvida i vilken omfattning lärplattor användes utav de intervjuade lärarna. Två av fem lärare använde lärplattan som ett kontinuerligt förekommande hjälpmedel i matematikundervisningen, medan de tre resterande lärarna använde lärplattan som ett komplement.

Fonologisk medvetenhet och avkodning – betydelsefulla förmågor i tidig läsutveckling : Intervjustudie i en F-3-skola

Forskare har under lång tid rapporterat om att den tidiga läs- och skrivinlärningen påverkas på ett positivt sätt när språkliga förmågor samverkar med språkliga sammanhang. En språklig förmåga som det forskats mycket kring är den fonologiska medvetenheten. Syftet med detta examensarbete var att undersöka hur fem lärare och en speciallärare anger att de arbetar för att främja läsinlärningen hos elever i skolans tidiga årskurser. I arbetet står följande frågeställningar i fokus: Hur arbetar lärarna med den tidiga läsinlärningen? Vilka aspekter anser lärarna vara särskilt viktiga i läsundervisningen? En intervjustudie genomfördes i en F-3-skola. Det framgick att lärarna arbetade på ett systematiskt sätt med läsinlärningen. Samtliga informanter började undervisningen med att stärka den fonologiska medvetenheten med hjälp av språklekar. Även om ingen av lärarna använde Bornholmsmodellens språklekar fullt ut i årskurs ett, använde de delar av materialets språklekar som lärarna ansåg att eleverna behövde träna mer på. Arbetet genomfördes i sociokulturell och pragmatisk teori som utgångspunkter.

”ANDT på Schemat” : Utvärdering av hur ett undervisningsmaterial om alkohol, narkotika, droger och tobak för elever i årskurs 7-9 fungerar i praktiken

Skolan har en lång tradition av att arbeta förebyggande gentemot olika former av droger. ANDT-undervisning kan i en del avseenden vara framgångsrik, samtidigt som det är viktigt att förväntningarna på de resultat som kan uppnås är realistiskt ställda. Lokalt bedrivs projekt för att få in undervisning om ANDT-frågor i skolan. Ett sådant exempel är ”ANDT på schemat” som den här rapporten handlar om. Projektet genomfördes under höstterminen 2015 med medverkan av elever i årskurs sju i två kommunala skolor. Syftet med utvärderingen är att ur ett pedagogiskt perspektiv beskriva och tolka på vilka sätt ett kursmaterial om alkohol, narkotika, droger och tobak (”ANDT-pärmen”) uppfattades fungera av de lärare och elever som medverkade i projektet. Med utgångspunkt i vad utvärderingsresultatet visar är ett ytterligare syfte att beskriva och diskutera pedagogiskt problematiska aspekter och därmed i förlängningen förhoppningsvis även bidra till uppslag för att utveckla skolans ANDT-undervisning i allmänhet. Utvärderingen bygger på en deskriptiv fallstudie. Insamlingen av data har skett genom att flera datainsamlingsmetoder användes.   Projektet ”ANDT på schemat” har initierats av en arbetsgrupp med representanter från Länsstyrelsen Dalarna och Borlänge kommun. Det undervisningsmaterial som arbetsgruppen arbetade fram byggs upp med samma struktur oavsett om temat är alkohol, narkotika, doping och tobak utifrån sju grundläggande frågeställningar. Arbetet är i första hand tänkt att ske ämnesövergripande och att lärarna kan välja att arbeta med ett eller flera av dessa teman samtidigt, liksom välja om de vill arbeta med alla sju frågeställningar eller välja ut några av dessa. Det är således ett flexibelt undervisningsmaterial som kan användas på en rad olika sätt. Förutom de sju frågeställningarna som är i fokus ska undervisningen också utveckla elevernas förmåga att söka information på internet och att träna en källkritisk hållning, liksom att förbättra förmågan att reflektera över egna värderingar och attityder till droger av olika slag.   Enligt de ursprungliga planerna skulle projektet innehålla medverkan av fem skolor. En skola föll bort redan innan projektet startade, senare föll ytterligare en andra skola bort och i ett tredje fall skulle ”ANDT-pärmen” används på ett sätt som skulle göra det svårt att utvärdera resultatet. Med tanke på att det bara var en av de fem ursprungliga skolorna i projektet som kom att genomföra projektet ”ANDT-på schemat” pekar det på att det finns organistoriska svårigheter att hantera. Det visade sig att det även fanns olika förutsättningar på de två skolorna som provade att använda ”ANDT-pärmen”. En slutsats av detta är att det krävs lång framförhållning i planeringen och att det är rektor som är ansvarig för att skapa nödvändiga förutsättningar, men även att det kan finnas behov av ”eldsjälar” som driver denna fråga bland kollegorna och på så sätt skapar ett intresse. En annan slutsats är att det måste finnas tid avsatt för lärare att planera hur undervisningen ska genomföras. Å andra sidan är det kanske inte alltid realistiskt att kunde göra det på det sätt som skulle vara önskvärt genom alla aktiviteter som konkurrerar med varandra om utrymme i skolans vardag. Detta kan ses som ett generellt problem som skolor i gemen har att hantera.   I de två skolor som provade ”ANDT-pärmen” verkar det som att lärarna uppfattade innehållet som användbart, vare sig att undervisningen skedde i projektform eller genomfördes som en temadag. Bland de fördelar som nämndes av de lärare som genomförde temadagen var att det fanns fakta, referenser och litteraturtips samlat på ett sådant sätt som att det underlättade planeringen. Det gör att det samtidigt finns ett stort utrymme för de involverade lärarna att skapa sin egen undervisning utifrån de lokala förutsättningar som råder. I skola B där undervisningen genomfördes i projektform utifrån ”ANDT-pärmen” beskrev lärarna detta som ett funderande sätt att arbeta. De nämnde samtidigt brist på tid för att hinna samplanera, men att det samtidigt trots detta gav en möjlighet till pedagogiska samtal. Här finns också ett annat problem i form av att det visade sig svårt att få arbetet i grupp att fungera. Lärarna framhöll å andra sidan den fördel som det innebar att använda filmproduktion som en del av undervisningsprocessen. När elever bearbetar det material de har samlat in och presenterar en film så kan detta ses som en viktig del av elevers lärande. I en digitaliserad värld där eleverna lätt kan hämta information behöver de inte bara lära sig att söka information, de behöver också på olika sätt värdera denna. ANDT-temat verkar väl lämpat för att öva elevernas källkritiska förmåga. En sammanfattande slutsats är att undervisning om alkohol, narkotika, droger och tobak med fördel kan genomföras i projektform. Ett sådant arbetssätt involverar både lärare och elever, vilket även kan ses som att det har potential för att skapa goda relationer mellan elever och lärare och på så sätt även skapa ett bättre arbetsklimat i skolan. Vad som samtidigt framstår som ett problem är att det kan vara svårt att implementera undervisning i projektform på bred front i en skolvardag som fortfarande i hög grad styrs av traditionella undervisningsformer och schemaläggningsstrukturer.

Historiebruk i skolan : Historielärares tankar och resonemang om historiebruk

Syftet med den här studien har varit att undersöka hur fem lärare uppfattar och ser på begreppet historiebruk samt hur de menar att de tillämpar historiebruk i en undervisning. Tidigare forskning visar att begreppet historiebruk definieras, tillämpas och uttrycks på en mängd olika sätt. Skolinspektionen anser att historieundervisningen inte ger elever möjligheten att få träna sig i förmågan att analysera och resonera om historiebruk. Lärare uttrycker också en osäkerhet i hur en undervisning om historiebruk ska se ut. Forskning visar också att elever har svårt att tänka ab-strakt, som att ta sig mellan olika tidsdimensioner, vilket krävs för att kunna genomföra en analys av historiebruk. Av ovan nämnda anledningar avsåg denna studie att undersöka vidare på lärarnas förståelse om be-greppet historiebruk och hur de ser på att tillämpa historiebruk i historieundervisningen. Denna stu-die har därför intervjuat fem aktiva historielärare och därefter analyserat deras svar utifrån aktuell litteratur och forskning. Det huvudsakliga resultatet är att det finns en osäkerhet i hur man skall förstå själva begreppet histo-riebruk. Av intervjuerna framkommer att lärarna ger olika slags förklaringar till vad det är. Man för-står det till exempel som en förlängning av källkritik, att det är att se spår av det förflutna samt att det är själva syftet med historieundervisningen. På frågan hur lärarna ser på hur man kan tillämpa historiebruk i en undervisning anser lärarna att analys av historiebruk är en svår kognitiv process för elever i årskurs 7-9. Dessutom menar de att det krävs mycket goda förkunskaper för att kunna genomföra en analys om historiebruk.