799 resultados para Réduction de dimensionnalité
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La raction du greffon contre lhte (GvHD) est une complication majeure de la transplantation de cellules souches hmatopotiques (HSCT). Les traitements de prophylaxie contre le dveloppement de la GvHD reposent essentiellement sur lutilisation dagents immunosuppresseurs, ce qui contribue ralentir la reconstitution immunitaire post-greffe et prolonger la dure de ltat immunosupprim des patients. Le dveloppement de prophylaxie pour la GvHD base dagents immunomodulateurs est ainsi privilgi. laide dun modle murin xnognique chez les souris NOD/scid-IL2r-/- (NSG), on a tudi le potentiel immunomodulateur des immunoglobulines intraveineuses (IVIG) dans la prvention de la GvHD, ainsi que leurs effets sur la qualit et la cintique de la reconstitution immunitaire. On a dtermin quun traitement hebdomadaire dIVIG peut effectivement rduire lincidence de la GvHD, ainsi que la mortalit qui y est relie, avec une efficacit similaire celle obtenue avec la cyclosporine A, un immunosuppresseur couramment utilis dans la prophylaxie de la GvHD. Par ailleurs, on a dtermin que le mcanisme daction des IVIG dans la réduction de la GvHD est distinct de celui des immunosuppresseurs. De plus, on a dmontr que les IVIG induisent lexpansion et lactivation des cellules NK prsentes au sein du greffon, lesquelles sont ncessaires pour lobtention de leffet protecteur des IVIG contre le dveloppement de la GvHD, et sont dpendantes de la prsence de lymphocytes T activs. Grce un modle murin humanis, on a galement dmontr que le traitement hebdomadaire dIVIG induit un dlai transitoire de la reconstitution humorale, ce qui naffecte toutefois pas la qualit globale de la reconstitution immunitaire. Ces rsultats mettent cependant en doute la pertinence de lutilisation des IVIG dans les protocoles cliniques de prophylaxie de la GvHD, puisque les immunosuppresseurs seront toujours utiliss, et quon a dmontr que les IVIG ont besoin de lymphocytes T activs afin de prvenir efficacement le dveloppement de la GvHD.
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Le sanctuaire Agoa est une aire marine protge dans la zone conomique exclusive (ZEE) des Antilles franaises qui fut cre en 2010 pour la conservation des mammifres marins et de leurs habitats. Il est connu que le rorqual bosse frquente les eaux des Antilles de dcembre mai pour la reproduction et la mise bas. Par contre, peu dinformation existe sur labondance, le comportement, la distribution et les pressions anthropiques sur cette espce aux Antilles et encore moins dans le sanctuaire. Cette matrise sintresse principalement connatre cette espce dans un secteur prcis de cette aire marine et les liens quelle entretient avec certains utilisateurs humains de son habitat. Le tout vise informer les intervenants en place, autant institutionnels quutilisateurs, vers une mise en place de mesures de conservation adaptes. Un suivi terrestre hivernal de plus de 300 heures, en 2012 et 2013, a permis de dterminer lutilisation de lhabitat et les pressions anthropiques sur une population de rorquals bosse frquentant le sud de la pninsule de la Pointe-des-Chteaux en Guadeloupe. Il sagit du premier suivi terrestre de cette espce aux Antilles franaises et un des premiers dans l'arc cariben. La zone dtude couvre environ 264 km2 et serait une des zones les plus frquentes de larchipel guadeloupen par lespce. laide dun thodolite, la trajectoire de 107 groupes diffrents (137,8 heures, 699 remontes) a t dcrite. Les rsultats montrent que la zone dtude est principalement frquente en mars et avril, avec une abondance maximale au dbut du mois davril. La forte prsence de baleineaux, particulirement au mois de mars, pousse croire que cette zone est utilise comme pouponnire. Le comportement nest pas alatoire dans la zone dtude et les trajectoires convergent vers certaines zones ayant possiblement un lien avec la bathymtrie. De plus, la zone marine proximit de la Pointe-des-Chteaux pourrait potentiellement tre un lieu de convergence des groupes. Ceux-ci se dplacent vitesse rduite en direction ENE en gnral, lexception des femelles accompagnes de baleineaux qui prennent une orientation tout autre, cest--dire vers le ONO, et ce plus grande vitesse. Bien que la pression dobservation soit considre comme modre, une forte proportion des remontes se trouve dans les corridors de navigation prsents dans la zone dtude. De plus, le corridor de navigation des navettes entre Saint-Franois et La Dsirade comporte le plus grand risque relatif de collision mortelle. Une réduction de vitesse des embarcations frquentant le corridor des navettes diminuerait significativement le risque de collision mortelle. Ces pistes de rflexion mneront sans doute dautres tudes plus pousses afin de continuer en apprendre sur lcologie de cette espce fascinante.
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Les neurones cholinergiques et adrnergiques effrents du systme nerveux cardiaque intrinsque (SNCI) sont impliqus dans la rgulation de la fonction cardiaque chronotrope. La galanine, peptide prsent et libr dans les terminaisons nerveuses cardiaques, est capable de diminuer la libration de lactylcholine. Notre hypothse est dtudier la possibilit que la galanine puisse agir comme un peptide neuromodulateur inhibiteur dans les neurones du SNCI chez le rat. Les oreillettes et les tissus associs du SNCI sont isols partir de rats Sprague-Dawley et perfuss en vitro. Les valeurs de la frquence auriculaire mesures dun battement lautre sont tires partir dun enregistrement bipolaire auriculaire. La perfusion de la nicotine en forme de bolus (avec des concentrations dans le bain de 20-250 m) a induit des rponses biphasiques composes dune rponse chronotrope ngative au dbut suivie dune rponse chronotrope positive. Au cours de la superfusion de la galanine (170 nM), les rponses chronotropes positives la nicotine sont rduites chez 12/14 prparations (contrle : 21,35 17,4 galanine : 5,46 8,0 bpm, n = 14, p = 0,02), tandis que les rponses chronotropes ngatives sont rduites chez 8 /14 prparations et affichent une tendance gnrale vers la réduction (contrle : -16,09 14,7, galanine : -12,53 13,2 bpm). On peut conclure que la galanine agit comme un peptide neuromodulateur inhibiteur dans les SNCI chez le rat, en modifiant de prfrence la stimulation nicotinique de neurones adrnergiques.
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Malgr plusieurs chimiothrapies suivies dune transplantation et dune immunothrapie, 40% des patients avec un neuroblastome (NB) haut risque subissent une progression de la maladie ou une rechute. Lchec de ces traitements est attribu la prsence de cellules initiatrices de tumeur (TIC) qui expriment le marqueur CD133 et qui sont souvent rsistantes aux agents chimiothrapeutiques. Les cellules Natural Killer (NK), qui possdent un effet anti-tumoral, peuvent tre utilises dans le cadre du dveloppement de nouvelles approches immuno-thrapeutiques. Nous posons lhypothse que les cellules NK actives liminent efficacement les TIC et contribuent la réduction des risques de rechute. De plus, il est possible daugmenter leffet anti-tumoral des cellules NK contre le NB. Lactivit cytotoxique des cellules NK est augmente par des cellules dendritiques plasmacytodes (pDC) actives. A la suite de la stimulation de leurs rcepteurs Toll-like les pDC produisent de grandes quantits d'interfron-alpha (IFN-). Nous avons tudi les proprits lytiques des cellules NK contre des lignes cellulaires de NB la suite de leur activation par lIFN- ou des pDC actives. Nos rsultats rvlent une augmentation de lactivit cytolytique des cellules NK contre ces lignes en rponse une stimulation par les pDC actives. De plus, les cellules de NB CD133+ ou celles rsistantes limmunothrapie dirige contre le GD2 sont sensibles la lyse mdie par les cellules NK stimules par les pDC. Nous avons examin les mcanismes cellulaires impliqus dans la lyse des cellules de NB. Nous montrons que cette cytotoxicit est mdie en partie par TRAIL induisant l'apoptose et en partie par la libration des granules cytotoxiques. Ainsi, ces rsultats permettent de proposer une nouvelle approche immuno-thrapeutique complmentaire au traitement par lanticorps anti-GD2 pour les patients atteints de NB haut risque.
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Thse effectue en cotutelle avec lUniversit de Montral et lUniversit Paris 1 Panthon-Sorbonne (IHPST)
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Cette recherche sinscrit dans le cadre du programme interdisciplinaire de recherche Ignis Mutat Res et vise clairer lunivers de larchitecture sur la capacit des toits amener des solutions efficaces aux problmatiques environnementales dans un contexte urbain dense et forte consommation d'nergie. La volont de rduire lempreinte cologique des villes est aujourdhui bien prsente dans le monde de la recherche architecturale et urbaine, ayant ainsi fait preuve de son importance. Pourtant, la réduction de lempreinte cologique des villes serait une approche globale difficile quantifier conomiquement. Le manque de mthodologie standardise fait en sorte que les travaux sur le sujet empruntent des dmarches qui ne dpassent pas ltape exploratoire. Dans ce contexte, le mmoire porte sur llaboration dun dispositif numrique dvaluation des potentialits des toits horizontaux comme un outil daide la dcision pour les interventions urbaines visant rduire lempreinte cologique des villes, en utilisant le cas de Montral. Ce type de toit est abord comme un territoire dinvestigation en contribution aux proccupations relies la gestion de leau et lattnuation des lots de chaleur. Plus prcisment, cette recherche porte sur trois secteurs de l'le de Montral. Ces chantillons correspondent deux types de formes urbaines (rsidentielle versus commerciale ou industrielle) et sont dcortiqus dans le but didentifier les dsquilibres entre les espaces naturels, faisant rfrence aux espaces verts (jardins, parcs et canopes) et les tendues minrales occasionnes par l'urbanisation. Ces rapports exprims en superficies dmontrent que ltendue des toits est assez considrable pour compenser le manque despaces naturels en ville. La vgtalisation des toits lchelle dun secteur pourrait donc attnuer considrablement les problmes environnementaux lis aux lots de chaleur et la gestion du ruissellement des eaux de pluie. La stratgie consistant explorer l'hypothse des 50 % de naturel versus 50 % de minral pourrait contribuer grandement lautonomisation des villes et la diminution de leurs dpendances vis--vis des ressources fossiles.
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1) personne contact parmi le groupe julie-emilie.huot-marchand@umontreal.ca 2) adresse URL : https://www.facebook.com/bruitsantee
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Les cellules souches ont attir lattention du public ces dernires annes, grce non-seulement leur utilisation comme thrapies visant sattaquer certains types de cancers, mais aussi en relation avec leur potentiel dans le domaine de la mdecine regnrative. Il est tabli que le destin cellulaire des cellules souches embryonnaires (ESC) est rgul de faon intensive par un groupe de facteur cls agissant sur leur pluripotence. Il est nanmoins envisageable que certains dterminants influenant lauto-renouvellement et la diffrenciation de ces cellules soient toujours inconnus. Afin de tester cette hypothse, nous avons gnr, en utilisant une mthode par infections virales, une collection de ESC contenant des dltions chromosomales chevauchantes que nous avons baptise DelES (Deletion in ES cells). Cette librairie contient plus de 1000 clones indpendants dont les rgions dltes couvrent environ 25% du gnome murin. laide de cette ressource, nous avons conduit un criblage de formation de corps embryodes (EB), dmontrant que plusieurs clones dlts avaient un phnotype de diffrenciation anormal. Nos tudes de complmentation sur un groupe de clones ont par la suite permis lidentification de Rps14 - un gne codant pour une protine ribosomale (RP) comme tant haploinsuffisant pour la formation de EB. Dans un deuxime temps, lanalyse approfondie des rsultats de notre crible a permis didentifier un groupe de gnes codants pour des RP qui semblent essentiels pour la diffrenciation des ESC, mais dispensables pour leur auto-renouvellement. De manire intressante, les phnotypes anormaux de formation en EB les plus marqus sont associs des dltions de RP qui se retrouvent au site de sortie des ARN messagers (ARNm) du ribosome, soit Rps5, Rps14 et Rps28. tonnament, alors quun dbalancement des RP conduit gnralement une rponse de type p53, lhaploinsuffisance de ces trois gnes ne peut tre renverse par une simple réduction des niveaux dexpression de ce gne suppresseur de tumeurs. Finalement, nos tudes de profilage polysomal et de squenage haut-dbit montrent une signature spcifique de gnes lis au msoderme chez un clone htrozygote pour Rps5, suggrant ainsi une explication au phnotype de diffrenciation p53-indpendant identifi chez ces ESC. Nos travaux rapportent donc la cration dune ressource intressante de gnomique fonctionnelle qui a permis de mettre jour le rle essentiel que jouent les RP dans le processus de formation de EB. Nos rsultats permettent aussi de documenter une rponse p53-indpendante suite un dbalancement de RP dans un contexte opposant lauto-renouvellement et la diffrenciation des ESC.
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Lostoarthrose (OA) se caractrise par une perte du cartilage articulaire, une sclrose osseuse, et une inflammation de la membrane synoviale. Des tudes in vivo et in vitro indiquent que les modifications du tissu osseux sont responsables de la perte du cartilage articulaire. Les ostoblastes (Ob) OA prsentent une réduction de la rponse lhormone parathyrodienne (PTH), un signal anabolique important pour le tissu osseux, versus les Ob normaux. Le rcepteur la PTH (PTH-R) interagit avec le LRP6, le rcepteur des ligands Wnts, et les antagonistes Dickkopf (DKK) bloquent cette interaction. Puisque le niveau de DKK2 est lev en rponse au TGF-1 dans les OA Ob, nous proposons que DKK2 altre linteraction LRP6/PTH-R, le recyclage de PTH-R, et inhibe la rponse la PTH. Nous avons utilis des Ob OA et normaux humains en culture primaire. Lexpression de PTH-R, LPR6 et DKK2 est mesure par RT-PCR. Les niveaux protiques de LRP6, PTH-R et DKK2 ont t dtermins par immunobuvardage. Linhibition de DKK2 sest effectue par siRNA et lAMP cyclique (AMPc) a t mesure par ELISA. Leffet de TGF-1 sur lexpression de DKK2 et PTH-R a t test sur des cellules dostosarcome SaOS-2. Lexpression de PTH-R et LRP6 est similaire entre Ob normaux et OA, mais le niveau protique de PTH-R est rduit dans les Ob OA. Par contre, lexpression et la production de DKK2 sont plus leves dans les Ob OA. Linhibition de DKK2 ne modifia pas lexpression de LRP6 et PTH-R dans les Ob OA mais a augment le niveau protique de PTH-R dtect par immunobuvardage alors que celui de LRP-6 demeura inchang. Linhibition de DKK2 dans les Ob OA entrana une augmentation de PTH-R dans la fraction membranaire et une diminution de la fraction intracellulaire. Les rsultats de l'inhibition de la voie de clathrine par le triflupromazine ont montr une expression accrue du rcepteur PTH dans la fraction membranaire qui peut tre due l'inhibition de sa dgradation par la voie de clathrine. Linduction de DKK2 dans les cellules SaOS-2 par TGF-1 entrana linhibition de PTH-R mais non celle de LRP6. Linhibition de DKK2 dans les Ob OA a stimul la production dAMPc en rponse la PTH par les Ob OA. En outre, le traitement de TGF-1 dans les cellules SaOS-2 rduit la production d'AMPc en rponse la PTH.Ces rsultats dmontrent que les niveaux levs de DKK2, via linhibition de la signalisation Wnt/bcatnine, sont aussi responsables de laltration de la rponse la PTH observe dans les Ob OA. Le niveau lev de DKK2 diminue spcifiquement laffichage membranaire de PTH-R dans ces cellules et non son expression. Ces rsultats suggrent donc une altration du cross-talk entre LRP6 et PTH-R dans les Ob OA en lien avec leur niveau de DKK2.
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Introduction : Bien que la pratique de lusage de la warfarine se soit amliore au cours de la dernire dcennie, aucune recommandation claire base sur le dosage de lamiodarone na t jusqu maintenant standardise, ce qui reprsente un grand obstacle pour les cliniciens. La warfarine a un index thrapeutique troit ncessitant un suivi rgulier et un ajustement individuel de la posologie, ceci afin de dterminer la dose thrapeutique, tout en prvenant les effets secondaires qui pourraient tre fatals dans certains cas. La variabilit interindividuelle de la rponse la warfarine dpend de plusieurs facteurs, dont lge, le sexe, le poids, lalimentation et linteraction mdicamenteuse, mais ceux-ci nexpliquent que partiellement les diffrences de sensibilit la warfarine. Les polymorphismes des gnes CYP2C9 et VKORC1 jouent un rle important dans la rponse la warfarine et expliquent jusqu 50% de la variabilit des doses. Lutilisation dantiarythmiques telle lamiodarone peut accentuer considrablement leffet de la warfarine et ncessite gnralement une diminution de 30 50% de la dose de la warfarine. Aucune tude ce jour na tent de dterminer lutilit du gnotypage des polymorphismes des gnes CYP2C9 et VKORC1 chez les patients sous traitement combin de warfarine et amiodarone. Objectif : Notre tude a pour objectif tout dabord de dterminer si des facteurs gntiques influencent la premire dose de stabilisation de la warfarine chez les patients en FA aprs lintroduction de lamiodarone. Nous allons galement tenter de confirmer lassociation pralablement rapporte entre les facteurs gntiques et la premire dose de stabilisation de warfarine dans notre population ltude. Mthodes : Un devis de cohorte rtrospective de patients qui frquentaient la clinique d'anticoagulothrapie de lInstitut de cardiologie de Montral entre le 1er janvier 2007 et le 29 fvrier 2008 pour lajustement de leur dose selon les mesures d'INR. Au total, 1615 patients ont t recruts pour participer cette tude de recherche. Les critres de slection des patients taient les patients avec fibrillation auriculaire ou flutter, ayant un ECG document avec l'un de ces deux diagnostics et g de moins de 67 ans, en raison dune moindre comorbidit. Les patients souffrant dinsuffisance hpatique chronique ont t carts de ltude. Tous les patients devaient signer un consentement clair pour leur participation au projet et chantillon de sang a t pri pour les tests gntiques. La collecte des donnes a t effectue partir du dossier mdical du patient de lInstitut de cardiologie de Montral. Un formulaire de collecte de donnes a t conu cet effet et les donnes ont ensuite t saisies dans une base de donnes SQL programme par un informaticien expert dans ce domaine. La validation des donnes a t effectue en plusieurs tapes pour minimiser les erreurs. Les analyses statistiques utilisant des tests de rgression ont t effectues pour dterminer lassociation des variants gntiques avec la premire dose de warfarine. Rsultats : Nous avons identifi une association entre les polymorphismes des gnes CYP2C9 et VKORC1 et la dose de la warfarine. Les polymorphismes gntiques expliquent jusqu 42% de la variabilit de dose de la warfarine. Nous avons galement dmontr que certains polymorphismes gntiques expliquent la réduction de la dose de warfarine lorsque lamiodarone est ajoute la warfarine. Conclusion : Les travaux effectus dans le cadre de ce mmoire ont permis de dmontrer limplication des gnes CYP2C9 et VKORC1 dans la rponse au traitement avec la warfarine et lamiodarone. Les rsultats obtenus permettent dtablir un profil personnalis pour rduire les risques de toxicit, en permettant un dosage plus prcis de la warfarine pour assurer un meilleur suivi des patients. Dans le futur, dautres polymorphismes gntiques dans ces gnes pourraient tre valus pour optimiser davantage la personnalisation du traitement.
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Lencphalopathie hpatique (EH) est un syndrome neuropsychiatrique dcoulant des complications de l'insuffisance hpatique. Les patients souffrant d'une insuffisance hpatique chronique (IHC) prsentent frquemment une EH minimale (EHM) caractrise par des dysfonctions cognitives subtiles qui affectent leur qualit de vie. L'insuffisance hpatique entrane une hyperammonimie, le facteur central dans la pathogense de l'EH. Pourtant, les taux d'ammoniaque srique ne sont pas corrls avec la svrit de l'EH lors d'une IHC, suggrant que d'autres facteurs y contribuent. L'oedme crbral est une caractristique neuropathologique dcrite chez les patients souffrant d'une EHM et plusieurs facteurs dont le stress oxydatif, les altrations du mtabolisme nergtique et l'augmentation de la glutamine crbrale pourraient contribuer la pathogense de l'oedme crbral lors d'une EHM induite par une IHC. Les mcanismes sous-jacents exacts ainsi que les relations entre ces facteurs et l'ammoniaque ne sont pas connus. Prsentement, le seul traitement efficace de l'IHC est la transplantation hpatique, une option thrapeutique trs limite. Le but de cette thse est de contribuer l'avancement des connaissances sur les mcanismes sous-jacents lis au rle du stress oxydatif, de la glutamine et du lactate dans la pathogense de l'oedme crbral lors d'une EHM induite par une IHC afin d'envisager de nouvelles options thrapeutiques. Les objectifs prcis taient: 1. tablir le rle de lammoniaque et sa relation avec le stress oxydatif dans la pathogense de l'oedme crbral lors d'une EHM induite par une IHC. 2. tablir le rle du stress oxydatif dans la pathogense de l'oedme crbral, sa relation avec l'ammoniaque et l'effet du traitement avec des antioxydants. 3. Confirmer l'effet synergique entre l'ammoniaque et le stress oxydatif dans la pathogense de l'oedme crbral. 4. tablir le rle du lactate et de la glutamine dans la pathogense de l'oedme crbral et leur relation avec lammoniaque. Pour atteindre ces objectifs, 2 modles animaux d'EHM obtenus par microchirurgie chez le rat ont t utiliss: 1) la ligature de voie biliaire, un modle d'IHC et 2) l'anastomose porto-cave, un modle d'hyperammonimie induite par la drivation portosystmique. Nos rsultats dmontrent que l'ammoniaque et le stress oxydatif indpendamment n'induisent pas l'oedme crbral lors d'une EHM. Pourtant, lorsque les 2 facteurs agissent ensemble ils prsentent ii un effet synergique qui entrane le dveloppement de l'oedme crbral, le stress oxydatif tant une premire insulte, qui est suivie par l'hyperammonimie comme deuxime insulte. En plus, le stress oxydatif a t mis en vidence seulement au niveau systmique, et non au niveau central dans notre modle d'IHC en association avec l'oedme crbral, suggrant que le stress oxydatif systmique est une consquence de la dysfonction hpatique et que l'hyperammonimie ninduit pas le stress oxydatif ni systmique ni central. Nous avons dmontr quune augmentation du lactate crbral est une consquence directe de l'hyperammonimie et joue un rle important dans la pathogense de l'oedme crbral lors d'une EHM induite par une IHC, tandis quune augmentation de la glutamine au niveau crbral n'est pas un facteur cl. La comprhension de ces mcanismes a entran la proposition de 3 nouvelles stratgies thrapeutiques potentielles pour l'EHM. Elles ciblent la diminution de l'ammoniaque srique, la réduction du stress oxydatif et l'inhibition de la synthse du lactate.
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Les objectifs de cette tude taient (1) de dcrire la localisation et la svrit des lsions dostoarthrose (OA) chroniques acquises naturellement au niveau du grasset quin grce lchographie (US), la radiographie (XR), la tomodensitomtrie (CT) et lvaluation macroscopique (ME), (2) de comparer la performance diagnostique de chacune des modalities dimagerie avec ME et (3) dvaluer quantitativement la densit osseuse sous-chondrale lors dOA du grasset chez le cheval la tomodensitomtrie. Des valuations post mortem radiographique, tomodensitomtrique et chographique ont t ralises sur 23 grassets cadavriques et compares lvaluation macroscopique. Des associations significatives ont t notes entre le osteophytes global score de toutes les modalits (US, p=0.04; XR, p=0.005; CT, p0.0001) et ME. De plus, la tomodensitomtrie a dmontr la plus forte association. Les ostophytes taient principalement localiss au niveau de larticulation fmorotibiale mdiale et cette articulation prsentait galement les scores dostophytes les plus svres. Un patron spcifique dostophytes associ linsertion de la capsule articulaire sur le condyle fmoral mdial a t mis en vidence. La nouvelle projection radiographique (Ca10Pr5L-CrDiMO) a t utile dans la dtection des ostophytes de la rgion intercondylaire. Les grades dostophytes (0-3) ne diffraient pas significativement selon la modalit dans la majorit des sites. La faible sensibilit/spcificit a indiqu que la sclrose de los sous-chondral et lapplatissement des condyles fmoraux ne semblent pas tre des indicateurs fiables dOA du grasset quin. LOA du grasset quin est associe une réduction de la densit osseuse sous-chondrale et des sites spcifiques de rsorption/kystes sous-chondraux ont t nots chez certains spcimens.
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Les dendrites sont essentielles pour la rception et lintgration des stimuli affrents dans les neurones. De plus en plus dvidences dune dtrioration dendritique sont associes une axonopathie dans les maladies neurodgnratives. Le glaucome dont la physiopathologie est caractrise par une dtrioration progressive et irrversible des cellules ganglionnaires de la rtine (CGRs) est la premire cause de ccit irrversible dans le monde. Son volution est associe un amincissement graduel des axones et latrophie des somas des CGRs. La majorit des tudes de neuroprotection des neuropathies rtiniennes visent la survie et la protection des somas et des axones. Des tudes rcentes ont dmontr des changements dendritiques associs cette pathologie, toutefois les mcanismes molculaires les rgulant sont mconnus. Lhypothse principale de ma thse stipule quune lsion axonale entrane des altrations prcoces des structures dendritiques. Lidentification de voies de signalisation rgulant ces changements permettrait dlaborer des stratgies de neuroprotection et de rtablir la fonction de ces neurones. Dans la premire tude, nous avons examin leffet prcoce dune lsion axonale aige sur la morphologie dendritique des CGRs in vivo. En utilisant des souris transgniques exprimant la protine fluorescente jaune (YFP) soumises une axotomie, nous avons dmontr un rtrcissement de larbre dendritique des CGRs et une diminution slective de lactivit de mTOR avant le dbut de la mort des CGRs lses. Aussi nous avons dmontr une augmentation de lexpression de la protine Regulated in development and DNA damage response 2 (REDD2), un rgulateur ngatif en amont de la protine mTOR en rponse la lsion du nerf optique in vivo. Nous avons dmontr que la ractivation de mTOR par linhibition de lexpression de REDD2 prserve les arbres dendritiques des CGRs adultes. En effet, linjection de petits ARN dinterfrence contre la REDD2 (siREDD2) stimule lactivit de mTOR dans les CGRs lses et augmente significativement la longueur et la surface dendritique totale. De plus, la rapamycine, un inhibiteur de mTOR, inhibe compltement leffet du siREDD2 sur la croissance et llaboration des dendrites. Lanalyse lectrophysiologique des CGRs dmontre une augmentation de lexcitabilit des CGRs lses qui est restaure en prsence du siREDD2. Par ailleurs, des donnes rcentes ont mis en vidence limplication de la neuro-inflammation dans le glaucome, caractrise par une augmentation de cytokines pro-inflammatoires dont principalement le facteur de ncrose tumorale (TNF). Ainsi dans la deuxime tude nous avons examin leffet du TNF exogne sur la morphologie de larbre dendritique des CGRs et commenc ltude des mcanismes molculaires sous-jacents ces changements. Nos rsultats dmontrent que linjection de TNF recombinante dans le vitre induit une rtraction dendritique prcoce qui corrle une réduction de phospho-S6 suggrant limplication de mTOR dans ces CGRs lses. Ainsi, les tudes prsentes dans cette thse mettent en vidence un nouveau rle de mTOR dans la stabilit et le maintien des dendrites de neurones rtiniennes adultes. Ces tudes ont aussi dmontr leffet prcoce de stress direct ou indirect, cest--dire laxotomie et le TNF respectivement sur la pathologie dendritique et sur leur effet sur la fonction neuronale.
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La protine de filament intermdiaire Nestin, marqueur de cellules souches neurales, est exprime dans les cellules vasculaires. Il a t dmontr que les cellules de la crosse aortique drivent de la crte neurale pendant le dveloppement. Des cellules endothliales exprimant Nestin sont retrouves dans les capillaires durant lembryognse ainsi que durant la vascularisation de tumeurs cancreuses. Cette protine est implique dans les mcanismes de prolifration cellulaire. Rcemment des cellules Nestin+ ont t identifies au niveau des cellules du muscle lisse de laorte. La rgulation de Nestin dans ces cellules, pendant le dveloppement et en conditions pathologiques, est inconnue. Cette thse porte sur lanalyse de la protine Nestin dans le remodelage vasculaire en situation diabtique et dhypertension au niveau des artres carotide et aortique. Nos travaux examinent lhypothse que lexpression vasculaire de Nestine joue un rle dans lhomostasie durant le vieillissement physiologique et participe au remodelage suite des stimuli pathologiques. La protine Nestin est fortement exprime dans les aortes de rats nonataux et cette expression diminue rapidement avec le dveloppement. Au niveau de laorte lexpression de la protine Nestin est retrouve dans une sous-population de cellules du muscle lisse et au niveau des cellules endothliales. Lexpression de la protine Nestin est corrle avec sa proximit au cur, une plus grande expression est observe dans larche aortique et une faible expression est dtecte dans la partie thoracique. Nous avons dtermin quen prsence de diabte de type I, il y a une perte de lexpression de la protine Nestin dans la mdia de laorte et de la carotide. Cette perte dexpression reprsente un vnement prcoce dans la pathologie diabtique et prcde la dysfonction endothliale. La diminution de lexpression de la protine Nestin est galement concomitante avec la perte de la capacit prolifrative des cellules du muscle lisse. Dans les rats souffrant de diabte de type 1, une réduction significative de la densit des cellules du muscle lisse exprimant la protine phosphoryle phosphohistone 3, une protine implique dans un cycle cellulaire actif, est observe. De plus, cette réduction est corrle avec la perte de lexpression de la protine Nestin. Nous avons galement dmontr in vitro quun traitement hyperglycmique rduit lexpression de Nestin ainsi que la prolifration des cellules du muscle lisse. Enfin, lutilisation dun shARN dirig contre Nestin nous a permis de dterminer limplication de cette protine dans la prolifration des cellules du muscle lisse en condition basale caractrise par la diminution de lincorporation de [3H] thymidine. Dans le modle dhypertension induite par une constriction aortique abdominale surrnale, laugmentation de la pression sanguine est associe avec laugmentation de lexpression de la protine Nestin dans lartre carotidienne. Une corrlation positive a t observe entre lexpression de la protine Nestin dans la carotide et la pression artrielle moyenne laquelle la paroi de la carotide est soumise. De plus, les facteurs de croissance impliqus dans le remodelage vasculaire secondaire lhypertension augmentent lexpression de Nestin dans les cellules du muscle lisse isoles des carotides. Puis, la réduction de lexpression de la protine Nestin via un shARN attnue lincorporation de [3H] thymidine, associe la prolifration cellulaire, stimule par ces facteurs de croissance alors que lincorporation de [3H] leucine, associe la synthse protique, demeure inchange. Ces rsultats suggrent que laugmentation de lexpression de la protine Nestin, secondaire lhypertension, pourrait reprsenter une rponse adaptative o il y a une augmentation de la croissance des cellules du muscle lisse afin de permettre la paroi vasculaire de sajuster laugmentation de la pression sanguine.
Resumo:
OBJECTIF: LapoB plasmatique prdit le diabte de type 2 chez lhumain. Une clairance ralentie des triglycrides (TG) favorise la lipotoxicit et la rsistance linsuline (RI). Nous avons dmontr ex vivo que les LDL, forme majeure dapoB-lipoprotines, altrent le stockage des gras dans le tissu adipeux blanc (TAB) humain. Nous mettons lhypothse que le lien reliant lapoB plasmatique la RI et lhyperinsulinmie est mdi par un retard de clairance des gras dittiques. MTHODE/RSULTATS: Nous avons examin la scrtion dinsuline (SI), puis la RI lors dun test de tolrance au glucose intraveineux suivi dun clamp hyperinsulinmique-euglycmique chez des sujets obses normoglycmiques (N=29, 45%hommes, indice de masse corporelle (IMC)27kg/m2, 45-74ans, post-mnopauss). La clairance des TG dittiques a t mesure suivant lingestion dun repas gras marqu au 13C. La fonction dune biopsie de TAB ( jeun) a t mesure comme la capacit stocker un substrat de 3H-TG. LapoB tait de 1,030,05g/L et corrlait avec la RI, la 2ime phase de SI, un dlai de clairance des TG dittiques et une réduction de la fonction du TAB. Un retard de clairance des TG dittiques tait associ la RI et la 2ime phase de SI. Une correction pour la clairance des TG dittiques ou la fonction du TAB a limin lassociation entre lapoB et la RI et la 2ime phase de SI. CONCLUSION: Lassociation entre lapoB plasmatique et la RI et la SI chez les sujets obses est mdie par une clairance ralentie des gras dittiques et une dysfonction du TAB.
