Rôle de la conformation des glycoprotéines de l’enveloppe du VIH-1 dans la réponse cytotoxique cellulaire dépendante des anticorps et impact des protéines virales Nef et Vpu

Alors que d’énormes efforts sont mis de l’avant pour mettre en place des stratégies thérapeutiques contre l’infection au VIH-1, il est nécessaire de mieux cerner les déterminants viraux qui aideront à l’efficacité de celles-ci. En ce sens, une volumineuse littérature scientifique suggère que les anticorps contre le VIH-1 possédant une capacité à induire une réponse effectrice dépendante de leur portion Fc puissent jouer un rôle important dans la prévention de l’infection et dans la progression de la maladie. Cependant, peu d’information est disponible concernant les déterminants reconnus par ces anticorps et comment le virus s’en protège. Le but des travaux présentés dans cette thèse est donc d’élucider les mécanismes viraux contrôlant la reconnaissance des cellules infectées par ces anticorps capables d’induire une réponse effectrice. De par les corrélats de protection identifiés au cours de l’essai vaccinal RV144, les travaux présentés ici se concentrent sur la réponse cytotoxique dépendante des anticorps (ADCC), puisqu’il s’agit d’une réponse effectrice suggérée pour avoir joué un rôle dans la protection observée dans le RV144, seul essai vaccinal anti-VIH à avoir démontré un certain degré de protection. De plus, plusieurs anticorps capables d’induire cette réponse contre le VIH sont connus pour reconnaître les glycoprotéines de surface du virus (Env) dans une conformation dite ouverte, c’est-à-dire la conformation adoptée lors de la liaison d’Env avec son récepteur CD4 (épitopes CD4i). Nous avons mis au point deux techniques in vitro permettant d’étudier ces changements de conformation ainsi que leur impact sur la réponse ADCC. Les techniques mises au point, un ÉLISA sur base cellulaire pour mesurer les changements de conformation d’Env ainsi que la mesure de la réponse ADCC par cytométrie en flux, nous ont permis de démontrer comment le virus empêche l’exposition des épitopes d’Env CD4i. L’activité simultanée des protéines accessoires virales Nef et Vpu sur le retrait du récepteur CD4 de la surface des cellules infectées et l’inhibition du facteur de restriction Tétherine / BST-2 par Vpu contrôlent à la fois les niveaux d’Env et de CD4 à la surface cellulaire et donc modulent l’interaction Env-CD4 et ultimement la susceptibilité à la réponse ADCC contre les épitopes CD4i reconnus par des anticorps hautement prévalents lors de l’infection au VIH. Également, nous démontrons comment de petits composés mimant la liaison de CD4 sur Env sont capables de forcer l’exposition des épitopes CD4i, même en présence des protéines Nef et Vpu, et donc d’augmenter la susceptibilité des cellules infectées à la réponse ADCC. Une autre découverte présentée ici est la démonstration que la portion soluble d’Env produite par les cellules infectées peut interagir avec le récepteur CD4 des cellules non-infectées avoisinantes et induire leur reconnaissance et élimination par la réponse ADCC contre Env. Somme toute, la modulation de la réponse ADCC par l’interaction Env–CD4 représente un important pilier de la relation hôte – pathogène du VIH-1 de la perspective des réponses Fc-dépendantes. Les travaux présentés dans cette thèse ont le potentiel d’être utilisés dans l’élaboration de nouvelles stratégies antivirales tout en élargissant les connaissances fondamentales de cette interaction hôte – pathogène.

The regulatory role of eNOS-derived nitric oxide on transcription in endothelial cells: Impact of S-nitrosylation on β-catenin signaling

Les cellules endothéliales forment une couche semi-perméable entre le sang et les organes. La prolifération, la migration et la polarisation des cellules endothéliales sont essentielles à la formation de nouveaux vaisseaux à partir de vaisseaux préexistants, soit l’angiogenèse. Le facteur de croissance de l’endothélium vasculaire (VEGF) peut activer la synthase endothéliale du monoxyde d’azote (eNOS) et induire la production de monoxyde d’azote (NO) nécessaire pour la régulation de la perméabilité vasculaire et l’angiogenèse. β- caténine est une composante essentielle du complexe des jonctions d’ancrage ainsi qu’un régulateur majeur de la voie de signalisation de Wnt/β-caténine dans laquelle elle se joint au facteur de transcription TCF/LEF et module l’expression de nombreux gènes, dont certains sont impliqués dans l’angiogenèse. La S-nitrosylation (SNO) est un mécanisme de régulation posttraductionnel des protéines par l’ajout d’un groupement nitroso au niveau de résidus cystéines. Le NO produit par eNOS peut induire la S-nitrosylation de la β−caténine au niveau des jonctions intercellulaires et moduler la perméabilité de l’endothélium. Il a d’ailleurs été montré que le NO peut contrôler l’expression génique par la transcription. Le but de cette thèse est d’établir le rôle du NO au sein de la transcription des cellules endothéliales, spécifiquement au niveau de l’activité de β-caténine. Le premier objectif était de déterminer si la SNO de la β-caténine affecte son activité transcriptionnelle. Nous avons montré que le NO inhibe l’activité transcriptionnelle de β- caténine ainsi que la prolifération des cellules endothéliales induites par l’activation de la voie Wnt/β-caténine. Il est intéressant de constater que le VEGF, qui induit la production de NO via eNOS, réprime l’expression de AXIN2 qui est un gène cible de Wnt s’exprimant suite à la i i stimulation par Wnt3a et ce, dépendamment de eNOS. Nous avons identifié que la cystéine 466 de la β-caténine est un résidu essentiel à la modulation répressive de son activité transcriptionnelle par le NO. Lorsqu’il est nitrosylé, ce résidu est responsable de la perturbation du complexe de transcription formé de β-caténine et TCF-4 ce qui inhibe la prolifération des cellules endothéliales induite par la stimulation par Wnt3a. Puisque le NO affecte la transcription, nous avons réalisé l’analyse du transcriptome afin d’obtenir une vue d’ensemble du rôle du NO dans l’activité transcriptionnelle des cellules endothéliales. L’analyse différentielle de l’expression des gènes de cellules endothéliales montre que la répression de eNOS par siRNA augmente l’expression de gènes impliqués au niveau de la polarisation tels que : PARD3A, PARD3B, PKCZ, CRB1 et TJ3. Cette analyse suggère que le NO peut réguler la polarisation des cellules et a permis d’identifier des gènes responsables de l’intégrité des cellules endothéliales et de la réponse immunitaire. De plus, l’analyse de voies de signalisation par KEGG montre que certains gènes modulés par l’ablation de eNOS sont enrichis dans de nombreuses voies de signalisation, notamment Ras et Notch qui sont importantes lors de la migration cellulaire et la différenciation des cellules de têtes et de tronc (tip/stalk). Le regroupement des gènes exprimés chez les cellules traitées au VEGF (déplétées de eNOS ou non) révèle que le NO peut affecter l’expression de gènes contribuant au processus angiogénique, dont l’attraction chimiotactique. Notre étude montre que le NO module la transcription des cellules endothéliales et régule l’expression des gènes impliqués dans l’angiogenèse et la fonction endothéliale.

SURVEILLANCE OF, AND THE IMPACT OF COMMUNITY POLICING ON ARREST-RELATED DEATHS (ARDS): Exploring the surveillance of ARDs and the opportunities to prevent them in the United States

Thesis (Master's)--University of Washington, 2016-08

Caractérisation de l'impact des conditions opératoires sur l'efficience d'un procédé de concentration du lait par ultrafiltration

Les concentrés de protéines de lait sont couramment utilisés comme ingrédients lors de la standardisation du lait de fromagerie. La concentration des protéines est généralement réalisée par ultrafiltration (UF) à l’aide de membranes polymériques ayant un seuil de coupure de 10 kDa, et ce, jusqu’à un facteur de concentration volumique de 3.5X. Dans l’optique d’améliorer l’efficience du procédé d’UF, l’étude avait pour but de caractériser l’impact du mode opératoire (pression transmembranaire constante (465 et 672 kPa) et flux constant) ainsi que la température (10°C et 50°C) sur la performance du système jusqu’à un facteur de concentration volumique de 3.6X. Le module de filtration à l’échelle pilote comprenait une membrane d’UF en polyéthersulfone de 10 kDa d’une surface de 2,04 m2. La performance du système a été caractérisée sur le flux de perméation, la sélectivité et la consommation énergétique totale. L’étude a montré que le flux de perméation était 1,9 fois plus élevé à une température de 50°C comparativement à 10°C lors de l’UF du lait. Le coefficient de rejet des protéines n’a pas été affecté significativement par la pression transmembranaire et la température (P< 0,05). L’effet de la température a été observé au niveau de la teneur en calcium, laquelle était plus élevée de 12% dans les rétentats générés à 50C. La consommation énergétique totale du système d’UF était plus élevée à 10C comparativement à 50C, représentant 0,32±0,02 et 0,26±0,04 kWh/kg rétentat respectivement. Les résultats montrent que le ratio d’efficience énergétique (rapport entre le flux de perméation et la consommation énergétique) optimal a été obtenu à faible pression transmembranaire constante et à 50C. L’approche développée dans le cadre de ce projet fournira des outils aux industriels laitiers pour améliorer l’éco-efficience de leurs procédés de séparation baromembranaire.

Impact of oral diseases and disorders on oral health-related quality of life of preschool children

BACKGROUND The presence of oral diseases and disorders can produce an impact on the quality of life of preschool children and their parents, affecting their oral health and well-being. However, socioeconomic factors could confound this association, but it has not been yet tested at this age. OBJECTIVE To assess the impact of early childhood caries (ECC), traumatic dental injuries (TDI) and malocclusions on the oral health-related quality of life (OHRQoL) of children between 2 and 5 years of age adjusted by socioeconomic factors. METHODS Parents of 260 children answered the Early Childhood Oral Health Impact Scale (ECOHIS) (six domains) on their perception of the children's OHRQoL and socioeconomic conditions. Two calibrated dentists (κ>0.8) examined the severity of ECC according to dmft index, and children were categorized into: 0=caries free; 1-5=low severity; ≥6=high severity. TDI and malocclusions were examined according to Andreasen & Andreasen (1994) classification and for the presence or absence of three anterior malocclusion traits (AMT), respectively. OHRQoL was measured through ECOHIS domain and total scores, and poisson regression was used to associate the different factors with the outcome. RESULTS In each domain and overall ECOHIS scores, the severity of ECC showed a negative impact on OHRQoL (P<0.001). TDI and AMT did not show a negative impact on OHRQoL nor in each domain (P>0.05). The increase in the child's age, higher household crowding, lower family income and mother working out of home were significantly associated with OHRQoL (P<0.05). The multivariate adjusted model showed that the high severity of ECC (RR=3.81; 95% CI=2.66, 5.46; P<0.001) was associated with greater negative impact on OHRQoL, while high family income was a protective factor for OHRQoL (RR=0.93; 95% CI=0.87, 0.99; P<0.001). CONCLUSIONS The severity of ECC and a lower family income had a negative impact on the OHRQoL of preschool children and their parents.

Automating and informating : roles to examine in technology's impact on performance

La calidad de la información y la calidad del sistema se consideran factores claves para determinar la utilidad de los sistemas. Sin embargo, estudios anteriores han arrojado resultados mixtos. En este artículo se sostiene que la asistencia del sistema (el grado de la asistencia proporcionada por un sistema a través de sus dos funciones: la automatización e “informating”) media en esta relación y puede ayudar a explicar estos resultados mixtos. Por otra parte, se sostiene que el nivel del sistema de intervención ( grado en que la tecnología participa en la realización de las tareas) es otro factor clave para determinar su utilidad, especialmente a través de la función de automatización. Se recogieron datos de 246 usuarios de diferentes jerarquías y funciones. Los resultados muestran que la calidad de la información y el nivel de intervención del sistema explican la utilidad de ambas funciones. La calidad del sistema explica la utilidad mediante el rol del “informating”, pero no mediante el papel de la automatización. Los efectos diferenciados de los factores a través de cada rol pueden ayudar a los gerentes para establecer criterios y prioridades más eficaces en las diferentes etapas del ciclo de vida de un sistema de información.

Evidencing the Impact of Coastal Contaminated Sediments on Mussels Through Pb Stable Isotopes Composition

Heavily contaminated sediments are a serious concern for ecosystem quality, especially in coastal areas, where vulnerability is high due to intense anthropogenic pressure. Surface sediments (54 stations), 50 cm interface cores (five specific stations), river particles, coal and bulk Pb plate from past French Navy activities, seawater and mussels were collected in Toulon Bay (NW Mediterranean Sea). Lead content and Pb stable isotope composition have evidenced the direct impact of sediment pollution stock on both the water column quality and the living organisms, through the specific Pb isotopic signature in these considered compartments. The history of pollution events including past and present contaminant dispersion in Toulon Bay were also demonstrated by historical records of Pb content and Pb isotope ratios in sediment profiles. The sediment resuspension events, as simulated by batch experiments, could be a major factor contributing to the high Pb mobility in the considered ecosystem. A survey of Pb concentrations in surface seawater at 40 stations has revealed poor seawater quality, affecting both the dissolved fraction and suspended particles and points to marina/harbors as additional diffuse sources of dissolved Pb.

On Growth Rate of Wind Waves: Impact of Short-Scale Breaking Modulations

The wave generation model based on the rapid distortion concept significantly underestimates empirical values of the wave growth rate. As suggested before, inclusion of the aerodynamic roughness modulations effect on the amplitude of the slope-correlated surface pressure could potentially reconcile this model approach with observations. This study explores the role of short-scale breaking modulations to amplify the growth rate of modulating longer waves. As developed, airflow separations from modulated breaking waves result in strong modulations of the turbulent stress in the inner region of the modulating waves. In turn, this leads to amplifying the slope-correlated surface pressure anomalies. As evaluated, such a mechanism can be very efficient for enhancing the wind-wave growth rate by a factor of 2-3.

The study of the sedimentation mechanism in channels under the impact of tidal currents

The purpose of this research is to study sedimentation mechanism by mathematical modeling in access channels which are affected by tidal currents. The most important factor for recognizing sedimentation process in every water environment is the flow pattern of that environment. It is noteworthy that the flow pattern is affected by the geometry and the shape of the environment as well as the type of existing affects in area. The area under the study in this thesis is located in Bushehr Gulf and the access channels (inner and outer). The study utilizes the hydrodynamic modeling with unstructured triangular and non-overlapping grids, using the finite volume, From method analysis in two scale sizes: large scale (200 m to 7.5km) and small scale (50m to 7.5km) in two different time durations of 15 days and 3.5 days to obtain the flow patterns. The 2D governing equations used in the model are the Depth-Averaged Shallow Water Equations. Turbulence Modeling is required to calculate the Eddy Viscosity Coefficient using the Smagorinsky Model with coefficient of 0.3. In addition to the flow modeling in two different scales and the use of the data of 3.5 day tidal current modeling have been considered to study the effects of the sediments equilibrium in the area and the channels. This model is capable of covering the area which is being settled and eroded and to identify the effects of tidal current of these processes. The required data of the above mentioned models such as current and sediments data have been obtained by the measurements in Bushehr Gulf and the access channels which was one of the PSO's (Port and Shipping Organization) project-titled, "The Sedimentation Modeling in Bushehr Port" in 1379. Hydrographic data have been obtained from Admiralty maps (2003) and Cartography Organization (1378, 1379). The results of the modeling includes: cross shore currents in northern and north western coasts of Bushehr Gulf during the neap tide and also the same current in northern and north eastern coasts of the Gulf during the spring tide. These currents wash and carry fine particles (silt, clay, and mud) from the coastal bed of which are generally made of mud and clay with some silts. In this regard, the role of sediments in the islands of this area and the islands made of depot of dredged sediments should not be ignored. The result of using 3.5 day modeling is that the cross channels currents leads to settlement places in inner and outer channels in tidal period. In neap tide the current enters the channel from upside bend of the two channels and outer channel. Then it crosses the channel oblique in some places of the outer channel. Also the oblique currents or even almost perpendicular current from up slope of inner channel between No. 15 and No. 18 buoys interact between the parallel currents in the channel and made secondary oblique currents which exit as a down-slope current in the channel and causes deposit of sediments as well as settling the suspended sediments carried by these currents. In addition in outer channel the speed of parallel currents in the bend of the channel which is naturally deeper increases. Therefore, it leads to erosion and suspension of sediments in this area. The speed of suspended sediments carried by this current which is parallel to the channel axis decreases when they pass through the shallower part of the channel where it is in the buoys No.7 and 8 to 5 and 6 are located. Therefore, the suspended sediment settles and because of this process these places will be even shallower. Furthermore, the passing of oblique upstream leads to settlement of the sediments in the up-slope and has an additional effect on the process of decreasing the depth of these locations. On the contrary, in the down-slope channel, as the results of sediments and current modeling indicates the speed of current increases and the currents make the particles of down-slope channel suspended and be carried away. Thus, in a vast area of downstream of both channels, the sediments have settled. At the end of the neap tide, the process along with circulations in this area produces eddies which causes sedimentation in the area. During spring some parts of this active location for sedimentation will enter both channels in a reverse process. The above mentioned processes and the places of sedimentation and erosion in inner and outer channels are validated by the sediments equilibrium modeling. This model will be able to estimate the suspended, bed load and the boundary layer thickness in each point of both channels and in the modeled area.

Impact of weight reduction program on serum alanine aminotransferase activity and immunologic response in obese hepatitis B patients.

Background: Globally, chronic B viral hepatitis (HBV) is a major health problem. Obesity is a common problem among patients with HBV. Several studies have reported that obesity is an important risk factor that alters immune system response in individuals with no underlying cause of liver disease. However, there is a strong association between BMI and the human immune system among HBV patients. Objective: This study was to examine the correlation between body mass index, serum alanine aminotransferase activity (ALT) and immunologic response in obese hepatitis B patients. Material and methods: One hundred fifty male patients with chronic hepatitis B virus, their age ranged from 30 to 45 (38.64 ± 7.12) years and their BMI ranged from 30-35 kg/m2. All Subjects were included in two groups: The first group received weight reduction program in the form of treadmill aerobic exercises in addition to diet control whereas the second group received no therapeutic intervention. Parameters of serum alanine aminotransferase (ALT), CD3, CD4 and CD8 were quantified; Leukocyte, differential counts and body mass index (BMI) were measured before and after 3 months at the end of the study. Results: There was a 24.7%, 36.8%, 30.8%, 40.7%, 28.6%, 25.9%, 33.3% and 14.3 % reduction in mean values of alanine aminotransferase (ALT), white blood cells, total neutrophil count, monocytes, CD3, CD4 ,CD8 and BMI respectively in group (A) at the end of the study. In addition, there were significant differences between mean levels of the investigated parameters in groups. Conclusion: Based on our findings, weight loss modulates serum alanine aminotransferase and immune system parameters of patients with hepatitis B virus infection.

Lower limb and associated injuries in frontal-impact road traffic collisions.

Objectives: To study the relationship between severity of injury of the lower limb and severity of injury of the head, thoracic, and abdominal regions in frontal-impact road traffic collisions. Methods: Consecutive hospitalised trauma patients who were involved in a frontal road traffic collision were prospectively studied over 18 months. Patients with at least one Abbreviated Injury Scale (AIS) ≥3 or AIS 2 injuries within two AIS body regions were included. Patients were divided into two groups depending on the severity of injury to the head, chest or abdomen. Low severity group had an AIS < 2 and high severity group had an AIS ≥ 2. Backward likelihood logistic regression models were used to define significant factors affecting the severity of head, chest or abdominal injuries. Results: Eighty-five patients were studied. The backward likelihood logistic regression model defining independent factors affecting severity of head injuries was highly significant (p=0.01, nagelkerke r square = 0.1) severity of lower limb injuries was the only significant factor (p=0.013) having a negative correlation with head injury (Odds ratio of 0.64 (95% CI: 0.45-0.91). Conclusion: Occupants who sustain a greater severity of injury to the lower limb in a frontal-impact collision are likely to be spared from a greater severity of head injury.

Rôle de la conformation des glycoprotéines de l’enveloppe du VIH-1 dans la réponse cytotoxique cellulaire dépendante des anticorps et impact des protéines virales Nef et Vpu

Alors que d’énormes efforts sont mis de l’avant pour mettre en place des stratégies thérapeutiques contre l’infection au VIH-1, il est nécessaire de mieux cerner les déterminants viraux qui aideront à l’efficacité de celles-ci. En ce sens, une volumineuse littérature scientifique suggère que les anticorps contre le VIH-1 possédant une capacité à induire une réponse effectrice dépendante de leur portion Fc puissent jouer un rôle important dans la prévention de l’infection et dans la progression de la maladie. Cependant, peu d’information est disponible concernant les déterminants reconnus par ces anticorps et comment le virus s’en protège. Le but des travaux présentés dans cette thèse est donc d’élucider les mécanismes viraux contrôlant la reconnaissance des cellules infectées par ces anticorps capables d’induire une réponse effectrice. De par les corrélats de protection identifiés au cours de l’essai vaccinal RV144, les travaux présentés ici se concentrent sur la réponse cytotoxique dépendante des anticorps (ADCC), puisqu’il s’agit d’une réponse effectrice suggérée pour avoir joué un rôle dans la protection observée dans le RV144, seul essai vaccinal anti-VIH à avoir démontré un certain degré de protection. De plus, plusieurs anticorps capables d’induire cette réponse contre le VIH sont connus pour reconnaître les glycoprotéines de surface du virus (Env) dans une conformation dite ouverte, c’est-à-dire la conformation adoptée lors de la liaison d’Env avec son récepteur CD4 (épitopes CD4i). Nous avons mis au point deux techniques in vitro permettant d’étudier ces changements de conformation ainsi que leur impact sur la réponse ADCC. Les techniques mises au point, un ÉLISA sur base cellulaire pour mesurer les changements de conformation d’Env ainsi que la mesure de la réponse ADCC par cytométrie en flux, nous ont permis de démontrer comment le virus empêche l’exposition des épitopes d’Env CD4i. L’activité simultanée des protéines accessoires virales Nef et Vpu sur le retrait du récepteur CD4 de la surface des cellules infectées et l’inhibition du facteur de restriction Tétherine / BST-2 par Vpu contrôlent à la fois les niveaux d’Env et de CD4 à la surface cellulaire et donc modulent l’interaction Env-CD4 et ultimement la susceptibilité à la réponse ADCC contre les épitopes CD4i reconnus par des anticorps hautement prévalents lors de l’infection au VIH. Également, nous démontrons comment de petits composés mimant la liaison de CD4 sur Env sont capables de forcer l’exposition des épitopes CD4i, même en présence des protéines Nef et Vpu, et donc d’augmenter la susceptibilité des cellules infectées à la réponse ADCC. Une autre découverte présentée ici est la démonstration que la portion soluble d’Env produite par les cellules infectées peut interagir avec le récepteur CD4 des cellules non-infectées avoisinantes et induire leur reconnaissance et élimination par la réponse ADCC contre Env. Somme toute, la modulation de la réponse ADCC par l’interaction Env–CD4 représente un important pilier de la relation hôte – pathogène du VIH-1 de la perspective des réponses Fc-dépendantes. Les travaux présentés dans cette thèse ont le potentiel d’être utilisés dans l’élaboration de nouvelles stratégies antivirales tout en élargissant les connaissances fondamentales de cette interaction hôte – pathogène.

The regulatory role of eNOS-derived nitric oxide on transcription in endothelial cells: Impact of S-nitrosylation on β-catenin signaling

Les cellules endothéliales forment une couche semi-perméable entre le sang et les organes. La prolifération, la migration et la polarisation des cellules endothéliales sont essentielles à la formation de nouveaux vaisseaux à partir de vaisseaux préexistants, soit l’angiogenèse. Le facteur de croissance de l’endothélium vasculaire (VEGF) peut activer la synthase endothéliale du monoxyde d’azote (eNOS) et induire la production de monoxyde d’azote (NO) nécessaire pour la régulation de la perméabilité vasculaire et l’angiogenèse. β- caténine est une composante essentielle du complexe des jonctions d’ancrage ainsi qu’un régulateur majeur de la voie de signalisation de Wnt/β-caténine dans laquelle elle se joint au facteur de transcription TCF/LEF et module l’expression de nombreux gènes, dont certains sont impliqués dans l’angiogenèse. La S-nitrosylation (SNO) est un mécanisme de régulation posttraductionnel des protéines par l’ajout d’un groupement nitroso au niveau de résidus cystéines. Le NO produit par eNOS peut induire la S-nitrosylation de la β−caténine au niveau des jonctions intercellulaires et moduler la perméabilité de l’endothélium. Il a d’ailleurs été montré que le NO peut contrôler l’expression génique par la transcription. Le but de cette thèse est d’établir le rôle du NO au sein de la transcription des cellules endothéliales, spécifiquement au niveau de l’activité de β-caténine. Le premier objectif était de déterminer si la SNO de la β-caténine affecte son activité transcriptionnelle. Nous avons montré que le NO inhibe l’activité transcriptionnelle de β- caténine ainsi que la prolifération des cellules endothéliales induites par l’activation de la voie Wnt/β-caténine. Il est intéressant de constater que le VEGF, qui induit la production de NO via eNOS, réprime l’expression de AXIN2 qui est un gène cible de Wnt s’exprimant suite à la i i stimulation par Wnt3a et ce, dépendamment de eNOS. Nous avons identifié que la cystéine 466 de la β-caténine est un résidu essentiel à la modulation répressive de son activité transcriptionnelle par le NO. Lorsqu’il est nitrosylé, ce résidu est responsable de la perturbation du complexe de transcription formé de β-caténine et TCF-4 ce qui inhibe la prolifération des cellules endothéliales induite par la stimulation par Wnt3a. Puisque le NO affecte la transcription, nous avons réalisé l’analyse du transcriptome afin d’obtenir une vue d’ensemble du rôle du NO dans l’activité transcriptionnelle des cellules endothéliales. L’analyse différentielle de l’expression des gènes de cellules endothéliales montre que la répression de eNOS par siRNA augmente l’expression de gènes impliqués au niveau de la polarisation tels que : PARD3A, PARD3B, PKCZ, CRB1 et TJ3. Cette analyse suggère que le NO peut réguler la polarisation des cellules et a permis d’identifier des gènes responsables de l’intégrité des cellules endothéliales et de la réponse immunitaire. De plus, l’analyse de voies de signalisation par KEGG montre que certains gènes modulés par l’ablation de eNOS sont enrichis dans de nombreuses voies de signalisation, notamment Ras et Notch qui sont importantes lors de la migration cellulaire et la différenciation des cellules de têtes et de tronc (tip/stalk). Le regroupement des gènes exprimés chez les cellules traitées au VEGF (déplétées de eNOS ou non) révèle que le NO peut affecter l’expression de gènes contribuant au processus angiogénique, dont l’attraction chimiotactique. Notre étude montre que le NO module la transcription des cellules endothéliales et régule l’expression des gènes impliqués dans l’angiogenèse et la fonction endothéliale.

Psychometric properties of the oral health impact profile and new methodological approach

Objective: Evaluate the validity, reliability, and factorial invariance of the complete Portuguese version of the Oral Health Impact Profile (OHIP) and its short version (OHIP-14). Methods: A total of 1,162 adults enrolled in the Faculty of Dentistry of Araraquara/UNESP participated in the study; 73.1% were women; and the mean age was 40.7 ± 16.3 yr. We conducted a confirmatory factor analysis, where χ2/df, comparative fit index, goodness of fit index, and root mean square error of approximation were used as indices of goodness of fit. The convergent validity was judged from the average variance extracted and the composite reliability, and the internal consistency was estimated by Cronbach standardized alpha. The stability of the models was evaluated by multigroup analysis in independent samples (test and validation) and between users and nonusers of dental prosthesis. Results: We found best-fitting models for the OHIP-14 and among dental prosthesis users. The convergent validity was below adequate values for the factors “functional limitation” and “physical pain” for the complete version and for the factors “functional limitation” and “psychological discomfort” for the OHIP-14. Values of composite reliability and internal consistency were below adequate in the OHIP-14 for the factors “functional limitation” and “psychological discomfort.” We detected strong invariance between test and validation samples of the full version and weak invariance for OHIP-14. The models for users and nonusers of dental prosthesis were not invariant for both versions. Conclusion: The reduced version of the OHIP was parsimonious, reliable, and valid to capture the construct “impact of oral health on quality of life,” which was more pronounced in prosthesis users.

Nutritional status and its impact on time and relocation in postoperative complications of abdominal patients undergoing surgery

Introduction: The nutritional state is the independent factor that most influences the post-operational results in elective surgeries. Objective: to evaluate the influence of the nutritional state on the hospitalization period and on the post-operative complications of patients submitted to abdominal surgery. Methods: prospective study with 99 surgical patients over 18 years of age, submitted to abdominal surgeries in the period from April to October of 2013, in the Instituto de Medicina Integral Professor Fernando Figueira (IMIP). All patients were submitted to anthropometric nutritional evaluations through the body mass Index (BMI), arm circumference (AC) and triceps skinfold thickness (TEST). The biochemical evaluation was carried out from the leukogram and serum albumin results. The identification of candidate patients to nutritional therapy (NT) was carried out through the nutritional risk (NR) evaluation by using the BMI, loss of weight and hypoalbuminemia. The information about post-operational complications, hospitalization period and clinical diagnosis was collected from the medical records. Program SPSS version 13.0 and significance level of 5% were used for the statistical analysis. Results: The malnutrition diagnosed by the AC showed significant positive association with the presence of post-operative complications (p=0.02) and with hospitalization period (p=0.02). The presence of NR was greater when evaluated by hypoalbuminemia (28.9%), however, only 4% of the sample carried out the NT in the pre-operational period. The hospitalization period was greater for patients with malignant neoplasia (p<0.01). Conclusion: The malnutrition diagnosis of patients submitted to abdominal surgeries is associated to greater risk of post-operational complications and longer hospitalization permanence.