Cis interactions of immunoreceptors with MHC and non-MHC ligands

The conventional wisdom is that cell-surface receptors interact with ligands expressed on other cells to mediate cell-to-cell communication (trans interactions). Unexpectedly, it has recently been found that two classes of receptors specific for MHC class I molecules not only interact with MHC class I molecules expressed on opposing cells, but also with those on the same cell. These cis interactions are a feature of immunoreceptors that inhibit, rather than activate, cellular functions. Here, we review situations in which cis interactions have been observed, the characteristics of receptors that bind in trans and cis, and the biological roles of cis recognition.

CD3 delta establishes a functional link between the T cell receptor and CD8.

T cells expressing T cell receptor (TCR) complexes that lack CD3 delta, either due to deletion of the CD3 delta gene, or by replacement of the connecting peptide of the TCR alpha chain, exhibit severely impaired positive selection and TCR-mediated activation of CD8 single-positive T cells. Because the same defects have been observed in mice expressing no CD8 beta or tailless CD8 beta, we examined whether CD3 delta serves to couple TCR.CD3 with CD8. To this end we used T cell hybridomas and transgenic mice expressing the T1 TCR, which recognizes a photoreactive derivative of the PbCS 252-260 peptide in the context of H-2K(d). We report that, in thymocytes and hybridomas expressing the T1 TCR.CD3 complex, CD8 alpha beta associates with the TCR. This association was not observed on T1 hybridomas expressing only CD8 alpha alpha or a CD3 delta(-) variant of the T1 TCR. CD3 delta was selectively co-immunoprecipitated with anti-CD8 antibodies, indicating an avid association of CD8 with CD3 delta. Because CD8 alpha beta is a raft constituent, due to this association a fraction of TCR.CD3 is raft-associated. Cross-linking of these TCR-CD8 adducts results in extensive TCR aggregate formation and intracellular calcium mobilization. Thus, CD3 delta couples TCR.CD3 with raft-associated CD8, which is required for effective activation and positive selection of CD8(+) T cells.

79-OR: Measurement of β-tryptase in postmortem serum in cardiac death

Mast cells are well known for their role in hypersensitivity reactions. However, there is increasing evidence that they might also participate in both developing and weakening atherosclerotic plaques, potentially causing plaque instability. Some clinical studies have therefore postulated the existence of relationships between blood β-tryptase levels and acute coronary syndromes. In this study, we investigated postmortem serum β-tryptase levels in a series of 90 autopsy cases with various degrees of coronary atherosclerosisthat had undergone medico-legal investigations. β-tryptase concentrations in these cases were compared to levels observed in 6 fatal anaphylaxis cases following contrast material administration. Postmortem serum β-tryptase concentrations in the anaphylactic deaths ranged from 146 to 979 ng/ml. In 9 out of 90 cases of cardiac deaths, β-tryptase levels were higher than clinical reference values of 11.4 ng/ml and ranged from 21 to 65 ng/ml. These results indicate that increased postmortem serum β-tryptase levels can be observed, though not systematically, in cardiac deaths with varying degrees of coronary atherosclerosis disease, thereby suggesting that mast cell activation in this disease cannot be ascertained by postmortem serum β-tryptase measurements.

Atopic dermatitis-like disease and associated lethal myeloproliferative disorder arise from loss of Notch signaling in the murine skin.

BACKGROUND: The Notch pathway is essential for proper epidermal differentiation during embryonic skin development. Moreover, skin specific loss of Notch signaling in the embryo results in skin barrier defects accompanied by a B-lymphoproliferative disease. However, much less is known about the consequences of loss of Notch signaling after birth. METHODOLOGY AND PRINCIPAL FINDINGS: To study the function of Notch signaling in the skin of adult mice, we made use of a series of conditional gene targeted mice that allow inactivation of several components of the Notch signaling pathway specifically in the skin. We demonstrate that skin-specific inactivation of Notch1 and Notch2 simultaneously, or RBP-J, induces the development of a severe form of atopic dermatitis (AD), characterized by acanthosis, spongiosis and hyperkeratosis, as well as a massive dermal infiltration of eosinophils and mast cells. Likewise, patients suffering from AD, but not psoriasis or lichen planus, have a marked reduction of Notch receptor expression in the skin. Loss of Notch in keratinocytes induces the production of thymic stromal lymphopoietin (TSLP), a cytokine deeply implicated in the pathogenesis of AD. The AD-like associated inflammation is accompanied by a myeloproliferative disorder (MPD) characterized by an increase in immature myeloid populations in the bone marrow and spleen. Transplantation studies revealed that the MPD is cell non-autonomous and caused by dramatic microenvironmental alterations. Genetic studies demontrated that G-CSF mediates the MPD as well as changes in the bone marrow microenvironment leading to osteopenia. SIGNIFICANCE: Our data demonstrate a critical role for Notch in repressing TSLP production in keratinocytes, thereby maintaining integrity of the skin and the hematopoietic system.

Fatores que afetam a germinação do grão de pólen do maracujá: meios de cultura e tipos de agrotóxicos

Foram conduzidos estudos para seleção de temperatura, meio de cultura e tempo de incubação ideais para germinação de grãos de pólen do maracujá-amarelo (Passiflora edulis f. flavicarpa), com a finalidade de adequar o método de avaliação da interferência de agrotóxicos. A temperatura de 28 + 0,5ºC e o meio com 50 g/L de sacarose; 0,2 g/L de ácido bórico e 1,0 g/L de nitrato de cálcio forneceram as melhores condições para germinação dos grãos de pólen do maracujazeiro. Não detectou-se efeito significativo do tempo de incubação (17 e 48 horas) na germinação dos grãos de pólen. A percentagem de germinação dos grãos de pólen não foi prejudicada pelo acaricida Dicofol + Tetradifon e pelos inseticidas Cartap, Fenpropathrin e Abamectin. Os demais agrotóxicos afetaram a germinação dos grãos de pólen. Os inseticidas Malathion, Fenthion, Trichlorfon, Vamidothion, Deltamethrine, Parathion Methyl e o espalhante adesivo N-dodecil benzeno de sulfato de sódio reduziram moderadamente a germinação, enquanto o Ethion e o Lambdacyhalothrin interferiram severamente na germinação dos grãos de pólen.

Ionizing radiation enhances immunogenicity of cells expressing a tumor-specific T-cell epitope.

BACKGROUND: p53 point mutations represent potential tumor-specific cytolytic T lymphocyte (CTL) epitopes. Whether ionizing radiation (IR) alters the immunological properties of cells expressing mutant p53 in respect of the CTL epitope generated by a defined point mutation has not been evaluated. METHODS: Mutant p53-expressing syngeneic, nontumor forming BALB/c 3T3 fibroblasts, tumor forming ras-transfected BALB/c 3T3 sarcomas, and DBA/2-derived P815 mastocytoma cells, which differ at the level of minor histocompatibility antigens, were used as cellular vaccines. Cells were either injected with or without prior IR into naive BALB/c mice. Cellular cytotoxicity was assessed after secondary restimulation of effector spleen cells in vitro. RESULTS: Injection of P815 mastocytoma cells expressing the mutant p53 induced mutation-specific CTL in BALB/c mice irrespective of prior irradiation. However, syngeneic fibroblasts or fibrosarcomas endogenously expressing mutant p53 were able to induce significant mutation-specific CTL only when irradiated prior to injection into BALB/c mice. IR of fibroblasts did not detectably alter the expression of cell surface molecules involved in immune response induction, nor did it alter the short-term in vitro viability of the fibroblasts. Interestingly, radioactively-labeled fibroblasts injected into mice after irradiation showed altered organ distribution, suggesting that the in vivo fate of these cells may play a crucial role in their immunogenicity. CONCLUSIONS: These findings indicate that IR can alter the immunogenicity of syngeneic normal as well as tumor forming fibroblasts in vivo, and support the view that ionizing radiation enhances immunogenicity of cellular tumor vaccines.

ANATOMICAL STUDIES OF IN VITRO ORGANOGENESIS INDUCED IN LEAF-DERIVED EXPLANTS OF PASSIONFRUIT

With the aim of studying the organogenesis in vitro in Passiflora edulis Sims f. flavicarpa Deg., the passionfruit, leaf-derived explants were cultured on media containing NAA or BAP and incubated either in continuous darkness or in light. The histological events leading to de novo organ formation were evaluated. Darkness induces rhizogenesis in the presence of NAA, whereas direct shoot regeneration is stimulated by light and BAP. This latter condition is recommended for passionfruit micropropagation as several adventitious shoot buds were formed from meristemoids of parenchymal origin.

Características físicas do maracujá-amarelo produzido em diferentes épocas

O trabalho objetivou avaliar as alterações físicas do maracujá-amarelo (Passiflora edulis f. flavicarpa Degener), produzido em diferentes épocas, no sul de Minas Gerais. O delineamento experimental usado foi o inteiramente casualizado, com três tratamentos (épocas): EP1 (maio a julho/1995), temperatura e precipitação baixas; EP2 (outubro a dezembro/1995), temperatura e precipitação moderadas, e EP3 (janeiro a março/1996), temperatura e precipitação elevadas, dez repetições e cinco frutos por parcela. Os frutos da EP2 foram significativamente melhores em massa, comprimento, diâmetro e número de sementes, e os da EP1 em espessura de casca e rendimento em suco.

Seletividade de inseticidas a três Vespidae predadores de Dione juno juno (Lepidoptera: Heliconidae)

Dentre os insetos que atacam o maracujazeiro, Dione juno juno (Lepidoptera: Heliconidae) é considerada a praga-chave. Estudou-se a seletividade dos inseticidas fentiom, cartape, malatiom e deltametrina a Dione juno juno, em relação às vespas predadoras Polybia fastidiosuscula, Polybia scutellaris e Protonectarina sylveirae (Hymenoptera: Vespidae). Estimaram-se as curvas concentração-mortalidade e mediante o uso da concentração letal do inseticida em 90% dos indivíduos (CL90) calcularam-se os índices de seletividade diferencial e índices de tolerância. A deltametrina foi seletiva à P. scutellaris e P. fastidiosuscula e medianamente seletiva à P. sylveirae e o cartape foi medianamente seletivo às três espécies de vespas predadoras. O malatiom foi seletivo a P. sylveirae e medianamente seletivo a P. fastidiosuscula. As vespas predadoras P. fastidiosuscula eP. scutellaris foram mais tolerantes a deltametrina e ao fentiom do que P. sylveirae, enquanto o P. fastidiosuscula e P. sylveirae toleraram mais o cartape do que P. scutellaris. O malatiom foi mais tolerado pela espécie P. sylveirae do que por P. fastidiosuscula e P. scutellaris.

Influência da época de produção e dos estádios de maturação nos maracujás doce e ácido nas condições de cerrado

Este trabalho objetivou avaliar a qualidade dos frutos do maracujazeiro doce e ácido nas condições de cerrado de Brasília, DF, por meio de características físico-químicas, de acordo com a época de produção e do estádio de maturação dos frutos. Adotou-se o delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial 2x2x2, com cinco repetições e três subamostras dentro de cada repetição. Foram feitas avaliações de acidez total titulável, sólidos solúveis totais açúcares totais, açúcares redutores e açúcares não-redutores. O maracujá-ácido apresentou atributos de qualidade para consumo in natura e para a indústria nas duas épocas e nos dois estádios de maturação, enquanto o maracujá-doce apresentou maior teor de açúcares no período mais frio. A antecipação da colheita de frutos em até quatro dias no maracujá-doce, e em até oito dias no maracujá-ácido não comprometem a qualidade, o que possibilita maior prazo para a comercialização e menores riscos de perdas dos frutos.

Adubação nitrogenada e irrigação no maracujazeiro-amarelo. I. Produtividade e qualidade dos frutos

Conduziu-se um experimento em Campos dos Goytacazes, RJ, no período de dezembro de 1995 a junho de 1997, para avaliar o efeito da adubação nitrogenada, sob diferentes lâminas de irrigação, na produtividade e na qualidade dos frutos do maracujazeiro-amarelo. Testaram-se quatro doses de nitrogênio (50, 250, 450 e 650 g planta-1 ano-1 de N), utilizando a uréia como fonte de N, sob seis lâminas de irrigação (0, 25, 50, 75, 100 e 125% da ET0 - evapotranspiração de referência), num esquema fatorial 4 x 6, com três repetições. Utilizou-se um sistema de irrigação por gotejamento. Não houve variação na produtividade quando o N foi aplicado sob lâminas de irrigação de 0, 25, 100 e 125% da ET0. A produtividade máxima de frutos, 41,3 t ha-1, foi obtida quando se aplicaram 290 g planta-1 ano-1 de N, sob uma lâmina de irrigação de 75% da ET0, o que correspondeu a uma lâmina total de água (irrigação + precipitação efetiva) de 1.293 mm. A adubação nitrogenada influenciou o número de frutos e não apresentou influência sobre o peso médio e outras características qualitativas dos frutos. A irrigação influenciou a produtividade, o peso médio, o comprimento e o diâmetro dos frutos.

Deletion of mu- and kappa-opioid receptors in mice changes epidermal hypertrophy, density of peripheral nerve endings, and itch behavior.

The mu- (MOR) and kappa- (KOR) opioid receptors have been implicated in the regulation of homeostasis of non-neuronal cells, such as keratinocytes, and sensations like pain and chronic pruritus. Therefore, we have studied the phenotype of skin after deletion of MOR and KOR. In addition, we applied a dry skin model in these knockout mice and compared the different mice before and after induction of the dermatitis in terms of epidermal thickness, epidermal peripheral nerve ending distribution, dermal inflammatory infiltrate (mast cells, CD4 positive lymphocytes), and scratching behavior. MOR knockout mice reveal as phenotype a significantly thinner epidermis and a higher density of epidermal fiber staining by protein gene product 9.5 than the wild-type counterparts. Epidermal hypertrophy, induced by the dry skin dermatitis, was significantly less developed in MOR knockout than in wild-type mice. Neither mast cells nor CD4 T(h)-lymphocytes are involved in the changes of epidermal nerve endings and epidermal homeostasis. Finally, behavior experiments revealed that MOR and KOR knockout mice scratch less after induction of dry skin dermatitis than wild-type mice. These results indicate that MOR and KOR are important in skin homeostasis, epidermal nerve fiber regulation, and pathophysiology of itching.

Produtividade de seis cultivares de maracujazeiro-azedo durante três anos em Vargem Bonita, DF

Avaliou-se a produtividade de cultivares de maracujazeiro-azedo (Passiflora edulis), com vistas à seleção de um material mais produtivo nas condições do Distrito Federal para frutos destinados ao consumo in natura. As cultivares Maguari, CSB Marília, NJ3 Vermelho, CSB Marília x NJ3 Vermelho, Roxo Australiano e Seleção DF foram avaliadas durante três anos de produção, em Latossolo Vermelho-Amarelo, no sistema de espaldeira vertical. A cultivar Maguari apresentou porcentagem de germinação das sementes superior à das demais cultivares. A média da altura das plantas das cultivares Seleção DF e Roxo Australiano foi superior à das outras quatro cultivares. A cultivar Maguari apresentou o maior vigor vegetativo durante os três anos de experimento, e o menor número de plantas perdidas por declínio da cultura. A cultivar CSB Marília foi a mais precoce e a primeira a produzir frutos. Na primeira safra, as cultivares CSB Marília, CSB Marília x NJ3 Vermelho, Roxo Australiano e Seleção DF foram as mais produtivas. No segundo ano de colheita, as seis cultivares apresentaram alta produtividade, destacando-se a cultivar Seleção DF, que produziu 50 t/ha. No terceiro ano de produção, em que ocorreu um declínio considerável, a cultivar Maguari apresentou a maior produtividade. Na produção média dos três anos, as seis cultivares mostraram-se superiores em produtividade aos resultados já conhecidos da pesquisa no Brasil.