Atividade funcional neutrofílica em cabras com mastite induzida experimentalmente por Staphylococcus aureus e suplementadas com vitamina E (acetato DL-α-tocoferol)

Avaliou-se a função neutrofílica em cabras com mastite por Staphylococcus aureus, induzida experimentalmente, suplementadas com vitamina E (acetato DL-α-tocoferol). Foram utilizadas 14 cabras gestantes da raça Saanen, com idades entre 8 e 12 meses e com cultura bacteriológica do leite negativa. Sete cabras receberam 2000UI de vitamina E, via intramuscular, no dia do parto e no sétimo dia pós-parto. As outras sete não foram medicadas. No 10º dia pós-parto, os dois grupos foram inoculados com 300 unidades formadoras de colônias de Staphylococcus aureus, cepa ATCC 25923, diluídas em 10ml de solução fisiológica, na glândula mamária esquerda. A função de neutrófilos sangüíneos foi medida pelo teste nitroazul tetrazólio (NBT), antes da inoculação, no momento da infecção e 12, 24, 48 e 72 horas pós-infecção, quando foi instituído o tratamento intramamário com antimicrobiano, por três dias consecutivos. A colheita final de sangue foi realizada 48 horas após a última aplicação do medicamento. Amostras de sangue para determinação da vitamina E foram colhidas no dia do parto, no momento da infecção, 48 horas pós-infecção e 48 horas pós-tratamento e analisadas por cromatografia líquida de alta performance. Na prova não estimulada do NBT não foram verificadas diferenças entre grupos e entre momentos. Na prova estimulada do NBT (NBT-E) houve diferença entre tratamentos às 12 e 72 horas pós-infecção, com valores mais elevados de NBT-E nos animais sem suplementação. Conclui-se que a suplementação com vitamina E reduz o percentual de neutrófilos NBT-E positivos.

Variabilidades fenotípica e genotípica de estirpes de Staphylococcus aureus isoladas em casos de mastite subclínica bovina

Foram submetidas a PCR-Ribotipagem e aos testes de sensibilidade in vitro frente a 12 antimicrobianos 77 estirpes de Staphylococcus aureus isoladas em amostras de leite procedentes de 40 vacas da raça holandesa que apresentaram mastite subclínica, em uma propriedade rural localizada no Estado de São Paulo, Brasil. Os resultados obtidos revelaram quatro diferentes padrões de resistência a antimicrobianos, sendo observada a predominância de resistência à lincomicina entre 19 (24,7%) estirpes de S.aureus. As 58 (75,3%) estirpes restantes foram sensíveis aos 12 antimicrobianos testados. A PCR-ribotipagem revelou a ocorrência de nove padrões genotípicos distintos, além de apresentar uma capacidade discriminatória maior (D = 0,82) que a obtida nos antibiogramas (D = 0,42). Entre as 19 estirpes resistentes aos antimicrobianos, 14 (73,7%) foram agrupadas em três padrões de ribotipagem e, destas, 13 (92,9%) apresentaram resistência à eritromicina e à lincomicina, isoladamente ou em associação. O grande número de ribotipos e de padrões de resistência a antimicrobianos observados nesta propriedade demonstrou que há grande heterogeneidade genética em populações naturais de S. aureus, fato este que deve ser levado em consideração em programas de controle da mastite bovina.

Pheno and genotyping of Staphylococcus aureus, isolated from bovine milk samples from São Paulo State, Brazil

In the present study, 87 Staphylococcus aureus isolates obtained from milk samples of 87 cows with mastitis in 6 different municipal districts of 2 regions of São Paulo State, Brazil, were compared pheno and genotypically. Pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) analysis of the strains was performed, and PCR was carried out to detect genes for a number of staphylococcal cell surface proteins, exoproteins, and 3 classes of agr genes. Nine distinct S. aureus lineages (LA-LI) were identified by PFGE. The lineages LA and LE, which accounted together for 63 strains (72.2%), were prevalent and had been collected from all of the 6 municipal districts, indicating a broad geographic distribution of these lineages; LB, LC, LD, LF, LG, LH, and LI, however, were isolated sporadically and accounted for 24 strains (27.8%). Some characteristics, like penicillin resistance and the presence of cap8 and agr class II genes, were associated with the prevalent lineages (LA and LE), and penicillin susceptibility and the presence of cna and cap5 genes were associated with sporadic lineages. According to the present results, some S. aureus lineages possess a combination of genes that confer the propensity to cause and disseminate infection, and only a limited number of clones are responsible for the cases of bovine mastitis on the various farms. © 2004 NRC Canada.

Mastite subclínica causada por Staphylococcus aureus: Custo-benefício da antibioticoterapia de vacas em lactação

Economic evaluation of the treatment bovine subclinical mastitis caused by S. aureus was evaluated. Two hundred and seventy udder quarters with or without subclinical mastitis were distributed into four groups, in conformity to lactational stage and treatments. Group 1 included animals treated between 10 and 60 days of lactation; group 2 included animals treated from 61 days of lactation to two months before drying; group 3 included animals no treated between 10 and 60 days of lactation; group 4 included animals no treated from 61 days of lactation to two months before drying. Treatment with gentamicin (150mg) was accomplished by intramammary doses, once a day, after performing sensitivity tests. The mammary quarters were re-evaluated after 30 days. The costs with the treatment were calculated considering a S. aureus prevalence of 5% as well as expenses with antibiotic, milk disposal, tests of drug sensitivity and workload. There was loss of income of 2% and 14% in the groups 1 and 2, respectively, when compared with the values before the treatment. In such case, the treatment of bovine subclinical mastitis caused by S. aureus in the lactation was economically unviable.

Atividade antimicrobiana in vitro de extrato de Punica granatum L. sobre staphylococcus aureus isolado em leite bovino

Bovine mastitis is considered important disease causing major economic losses in dairy herds. Antimicrobial drug can promote resistance, chemical residues in food and environmental contamination. The purpose of this study was to evaluate the antibacterial activity in vitro of pomegranate extract on Staphylococcus aureus isolated from bovine milk, evaluate its antioxidant activity, and quantify levels of total phenols and fravonoides of the different extracts used. Aqueous extracts were used in nature and dry, from the peel of the fruit (EAC) and leaves (EAF). Additionally, it was evaluated the antioxidant activity (AA%), total phenols and flavonoids. Milk samples were inoculated, incubated, and the colonies were characterized as Staphylococcus aureus were adjusted to 1.0x106 UFC/mL in the 6 standard of the MacFarland scale. The sensitivity of the microbial isolates were determined in quintuplicate, in disk diffusion test. The minimum inhibitory concentration was determined by visible inhibition zone greater than 15mm. The results were evaluated by ANOVA, Tukey 5%, using the program SISVAR 5.3 - DEX/UFLA. Results implied that the aqueous extract from the bark of dried fruit was capable of inhibiting bacterial growth at concentrations of 3%. The other treatments only showed this activity, from the concentrations of 15%, 20% and 30% for dry EAF, in nature EAC and in nature EAF, respectively. Regarding the action antioxidant of dry EAC, was not correlated with total phenols and flavonoids. Probably other alkaloids substances present in the extract studied, may have been responsible for this activity. It is concluded that extracts of Punica granatum L., especially those obtained by the shell of the fruit, showed inhibitory activity against S. aureus, indicating your use potential for the control of bovine mastitis.

Estudo fenotípico e genotípico da produção de biofilmes por estirpes de Staphylococcus aureus isolados dos casos de mastite subclínica bovina

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Potencial de atividade antimicrobiana in vitro de extratos vegetais do cerrado frente estirpes de Staphylococcus aureus

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Avaliação da citologia aspirativa e de expressão no diagnóstico da mastite bubalina e pesquisa de cepas de Staphylococcus aureus e Escherichia coli toxigênicas e produtoras de beta-lactamase

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Padronização da técnica de multiplex PCR para a detecção de Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae e Escherichia coli em amostras de leite bovino, obtidas de tanques de expansão

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Estudo epidemiológico, genotípico e fenotípico de estirpes de Staphylococcus aureus produtoras de biofilmes isoladas do ambiente de ordenha e de casos de mastite bovina

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Detecção molecular de Staphylococcus aureus e de suas toxinas no leite de tanque de rebanhos bovinos, em condições de refrigeração e sob temperatura ambiente

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Epidemiologia molecular dos Staphylococcus aureus isolados em diferentes pontos do fluxograma de produção do leite

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Epidemiologia molecular aplicada ao monitoramaento de estirpes de Staphylococcus aureus envolvidas em casos de mastite bovina

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Mastite subclínica bovina por Staphylococcus aureus: qualidade e quantidade de leite secretado por quartos tratados e não tratados e relação custo/benefício do tratamento durante a lactação

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Detecção microbiológica e molecular de Staphylococcus aureus em amostras de leite bovino obidas de tanques de expansão-correlação com a presença de resíduos de antibióticos

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)