1000 resultados para Matriz extracelular Teses
Resumo:
El presente plan tiene como objetivo general la caracterizacin de factores celulares y moleculares que afecten la sobrevida, la diferenciacin neural y la regeneracin axonal en clulas del sistema nervioso central (SNC). Las neuronas maduras de vertebrados superiores son incapaces de regenerar sus axones daados, razn por la cual todo estudio experimental de regeneracin axonal "in vitro", si bien aporta conocimientos bsicos, tiene potenciales aplicaciones prcticas en relacin a la recuperacin de la funcin neuronal. Diversos estudios de regeneracin axonal, especialmente para las clulas gangionares (CGR) han sido realizados con cultivos de clulas retinales. Estos cultivos estn compuestos por diversos tipos de neuronas, lo que hace que cuando se quiere determinar los efectos de un agente trfico, no sea ste el mejor sistema dado que los efectos observados pueden estar afectados por otros tipos celulares del cultivo. Por ello, para optimizar un modelo para estos estudios, hemos desarrollado un mtodo de cultivo para las CGR purificadas por "panning" de retinas de embrin de pollo de diverso desarrollo ontognico. Las CGR son sembradas a baja densidad en un medio sinttico que especialmente hemos formulado (BP5). (...) En base a la experiencia adquirida, y utilizando las tcnicas puestas en marcha en nuestro laboratorio, nos proponemos caracterizar, mediante el anlisis de parmetros bioqumicos y de video-microscopa con analizador de la diferenciacin y el crecimiento axonal de las CGR purificadas. Las CGR sern cultivadas en condiciones basales con el medio PB5, o en presencia de diversos factores de crecimiento, sustancias de la matriz extracelular y ganglisidos exgenos, agregados individualmente o en combinacin. En estas condiciones se correlacionarn los efectos observados con los cambios en los "patterns" de sntesis y expresin de los ganglisidos y con el flujo intracelular de Ca2+.
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Los experimentos del presente proyecto de investigacin tienen como objetivo general explorar los mecanismos celulares y moleculares involucrados en la morfognesis neuronal sobre la base de la hiptesis de que existe una relacin fundamental (interaccin estructural y funcional) y bidireccional entre seales ambientales (molculas de la matriz extracelular y neuritrofinas) y elementos del citoesqueleto (microtubulos y microfilamentos), que es esencial para promover y regular el desarrollo diferencial de axones y dentritas. De acuerdo a esto nos proponemos: 1. Analizar el patrn de expresin, distribucin y funcin de protenas microtubulares no-motoras (MAP-la, MAP-1b) y molculas relacionadas a ezrinas en neuronas en desarrollo. 2. Identificar y caracterizar estructural y funcionalmente protenas microtubulares motoras relacionadas a kinesina en neuronas en desarrollo y maduras de sistema nervioso central. 3. Determinar la distribucin intracelular y funcin de receptores para neurotrofinas y molculas de la matriz extracelular capaces de promover el crecimiento neurtico y el desarrollo de polaridad neuronal.
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La inflamacin osteoarticular es un desequilibrio entre formacin y detruccin tisular. Es factor fundamental la accin condroltica de metalo proteasas, cuya liberacin es el final de una cascada en que los estmulos enzimo-secretorios de molculas de adhesin, radicales libres de O2, y citokinas compiten con TIMPs y otros inhibidores tisulares. Tales mediadores son generados en la matriz extracelular, en clulas fias como endoteliocitos, condorcitos y sinoviocitos, o migrantes como PMN, macrfagos y linfocitos. Todas poseen receptores especficos que captan seales estimulantes (ICAM) o inhibidoras (TIMPs) y liberan mediadores que conducen el estmulo hacia el siguiente escaln celular de la cascada. La proteoglicanasa es una metalo proteasa que degrada ciertos componentes de la matriz extracelular. Como las enzimas colagenazas, estromelisina y gelatinazas, es secretada como proenzima y su funcin es remover el tejido conectivo durante el "turnover" normal y patolgico. Los niveles de MMPs, ICAM y VCAM en cultivos de condorcitos, PMN y sinoviocitos provenientes de pacientes con artropatas con y sin estmulo fagoctico y/o la accin de AINEs, podra constituir un ndice de la participacin celular, reflejar la severidad de la afeccin y orientar sobre la eficiencia de los tratamientos antiinflamatorios. Objetivos Generales Determinar "in vitro" y "ex vivo" los roles de citokinas, matrixinas, inhibidores tisulares y adhesinas en atritis reumatoidea y osteoartritis como modelos inflamatorios humanos, identificando agentes que puedan inhibir teraputicamente a las MMPs y citokinas y modular la degradacin y reparacin del tejido conectivo en esas patologas. Objetivos Especficos Cultivo de condrocitos de tejido articular humano para determinar "in vitro" y "ex vivo" los niveles de molcula de adhesin, inhibidores tisulares de citokinas (TIMPs) y MMPs, comparando con sus concentraciones en plasma y lquido sinovial, con y sin empleo de AINEs.
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La fecundacin involucra una secuencia de interacciones complejas entre los gametos masculino y femenino quienes se unen para crear un nuevo individuo con caractersticas diferentes a la de los padres. Este modo de reproduccin surgi durante la evolucin y se ha mantenido en los mamferos. Los espermatozoides dejan el testculo y maduran en el epiddimo para poder fecundar el vulo. El espermatozoide se adhiere y penetra la matriz extracelular del vulo, la zona pelcida, para luego fusionarse con la membrana plasmtica del vulo (oolema). En contraste con los bien conocidos mecanismos moleculares de la interaccin entre el espermatozoide y la zona pelcida, poco se conoce acerca de las molculas implicadas en la fusin entre las membranas plasmticas del espermatozoide y el vulo. Este proyecto tiene como objetivo indagar los mecanismos involucrados en el proceso de fecundacin. El trabajo pondr particular nfasis en: 1) Estudiar la participacin de los carbohidratos en el mecanismo de fusin entre las membranas plasmticas del espermatozoide y el vulo en diferentes especies de animales (sub-proyecto "A"). 2) Determinar las causas de las barreras reproductivas entre dos grupos de roedores silvestres de especiacin muy reciente (sub-proyecto "B").
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El cncer se origina por mutaciones, competicin y seleccin natural en clulas somticas de tejidos de diferentes rganos,siendo un proceso complejo y multifactorial que ocurre en una secuencia de etapas: iniciacin, promocin y progresin (1). Factores hereditarios,genticos y epigenticos como los lpidos dietarios, estrs oxidativo, hormonas, pesticidas y otros, influyen tanto en el desarrollo como en la inhibicin de esta enfermedad (2). Datos epidemiolgicos y experimentales tanto nuestros como de otros laboratorios han demostrado que el consumo de dietas ricas en cidos grasos de la familia n-3, n-6 o n-9 cambian la fluidez, la actividad de enzimas, el nivel de protenas y favorecen la formacin de molculas bioactivas derivadas de los lpidos como los eicosanoides y endocanabinoides que modulan el proceso carcinognico (3-15). Estos derivados lpdicos activan vias de sealizacin produciendo cambios especificos en la expresin gnica, un proceso fundamental durante la transformacin neoplsica (1-2).Tambin ha sido demostrado que estos cambios en la expresin gnica inducidos por derivados lipdicos modulan funciones en clulas cancerosas como proliferacin y muerte celular, migracin y produccin de matriz extracelular (16-17). A pesar de estos conocimientos, la identidad de los derivados lipdicos implicados en la modulacin de la expresin gnica durante la transformacin neoplsica asi como los mecanismos utilizados por estas molculas permanecen aun poco conocidos. HIPOTESIS: En los modelos a utilizar en el presente proyecto, la variacin lipdica de las membranas que se induzca por manipulacin dietaria debern generar tambin variaciones en los eicosanoides . endocanabinoides y otros perxidos que afecten factores de transcripcin nucleares como el p53 y GLI incidiendo en los mecanismos responsables de la muerte y proliferacin de clulas cancerosas. OBJETIVOS: Nos proponemos establecer el impacto de dietas enriquecidas con cidos grasos de las familias n-3, n-6 o n-9 sobre modelos experimentales in-vivo e in-vitro. Se estudiarn los cidos grasos de membrana plasmtica, la generacin de eicosanoides y endocanabinoides derivados de las vias COX y LOX Adems se determinar el efecto de los perxidos en la expresin y actividad de los factores nucleares de transcripcin p53 y GLI como mecanismos responsables de la muerte y proliferacin celular. MATERIALES Y MTODO: Se utilizar un modelo in-vivo de cncer de mama empleando ratones C57BL6J inducidos con DMBA que se alimentarn con una dieta base semi-sinttica suplemetada con diferentes PUFAs (Chia: n-3, Maz: n-6 y Oleico: n-9 , empleada en estudios previos (8).Modelos in vitro: se utilizarn lineas celulares cancergenas humanas de mama MCF-7 y MDA, las cuales se tratarn exgenamente con diferentes PUFAS (GLA:n-6,EPA:n-3, Oleico n-9)(9). Se determinarn cidos grasos de membranas por Cromatografa de gas (CG)(10-11). El anlisis de eicosanoides en clulas tumorales se realizar por HPLC (9-11). Los endocanabinoides por GC-Espectometra de Masa (18).La formacin de perxidos intracelulares se determinar por anlisis de Glutation reducido (GSH)(16).La apoptosis se medir por actividad caspasas y por Citometria de flujo usando Annexina V FICT (19).La expresin celular de Tp53 y GLI se realizar por Western Blot, PCR e inmunohistoqumica (20-21).RESULTADOS ESPERADOS: Se espera que los lpidos aadidos en las dietas de ratones inyectados con DMBA o al medio de cultivo de clulas tumorales de mama o pncreas modifiquen los cidos grasos de membrana y sus derivados lipdicos los eicosanoides y endocanabionoides que suponemos afectarn la activacin y expresin de factores de transcripcin regulando la carcinognesis. IMPORTANCIA: Disear nuevos modelos experimentales para implementar en terapias gnicas y aplicar los resultados sobre factores nutricionales que pudieran actuar como inhibidores o promotores del desarrollo del cncer en humanos.
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El carcinoma basocelular (CBC) representa el tumor maligno ms frecuente de la piel en personas de raza blanca. Incide en mayores de 50 aos de edad e infiltra los tejidos, pero rara vez ocasiona metstasis. En trabajos anteriores, observamos imgenes de cuerpos apoptticos con MOAR (microscopa ptica de alta resolucin), en pieles portadoras de CBC. Todas las clulas eucariotas poseen una maquinaria enzimtica que interviene en la apoptosis. Estas enzimas son las proteincinasas pertenecientes a la familia de las caspasas. Se sintetizan como procaspasas, las cuales una vez activadas, actan sobre otra caspasa en una reaccin secuencial en cadena. Se reconoce que la apoptosis juega un rol importante en el balance y mantenimiento de los tejidos. Hiptesis: -Investigar si la expresin de metaloproteasas y caspasas en las clulas del CBC promueven y contribuyen a la progresin y extensin tumoral. Objetivos:-Profundizar el conocimiento de la conducta biolgica del CBC, en referencia a la relacin de los patrones de crecimiento macro y microscpicos del tumor, enfatizando en la expresin de metaloproteasas (colagenasa-3 y streptomelisina), CD-31, Ki-67, oncoprotena bcl-2 y caspasas, mediante la implementacin de tcnicas de inmunohistoqumica. -Analizar a nivel morfolgico la presencia de cuerpos apoptticos por medio de MOAR y determinar si influyen en la conducta biolgica del tumor. Materiales y Mtodos: Se realizar un estudio retrospectivo y prospectivo de pacientes asistidos en el Servicio de Dermatologa del Hospital Nacional de Clnicas, desde el ao 2000. Se utilizarn tomas incisionales de piel, que se fijarn en formol neutro al 10 por ciento y luego sern procesadas e incluidas en parafina y coloreadas con H-E (hematoxilina-eosina). Especimenes seleccionados, se utilizarn para tcnicas de MOAR e inmunocitoqumica. El material para MOAR, se fijar en Karnovsky enfriado a pH 7,2 y se incluir en resinas epxicas, seccionados con un ultramicrtomo Porter BluMT1 (1micra) y coloreados con P.A.S. azul de toluidina, fuscina bsica y metenamina-plata. La aplicacin de las tcnicas inmunohistoqumicas, se utilizaran sobre cortes desparafinados con xilol, que permitirn investigar en forma retrospectiva y prospectiva la matriz extracelular (MEC) y los elementos neoplsicos. Los anticuerpos monoclonales a utilizar sern: Colageno tipo IV clone CIV 22 M0785 monoclonal antibody (DAKO), CD44 clone E29 M0613 monoclonal antibody (DAKO), Oncoproteina bcl-2 clone 124 M0887 monoclonal antibody (DAKO), CD31: clone 35 BH11 MO631 monoclonal antibody (DAKO) K-167 clone PC10 M0879 monoclonal antibody.(DAKO) bclx y Caspasa 8. Metodologa Estadstica Los resultados sern evaluados mediante: a) Varianza Anova; para datos con distribucin gausiana como media, SD. b) Krusal Walles; para rasgos de distribucin no gausiana. c) Chi2 para determinar la diferencia significativa para proporciones. Resultados esperados: Del anlisis histomorfolgico cualitativo y cuantitativo de biopsias de piel con CBC, aportar determinaciones que clarifiquen la conducta biolgica de este tumor.- Importancia del Proyecto: El CBC es una entidad que est aumentando su incidencia en forma exponencial, debido sobre todo a pautas sociales. No slo ocasiona trastornos en los pacientes, sino que tambin, representa gastos en el sistema de salud. Asimismo, significa un desafo para la investigacin. Esto permite explorar aspectos de la biologa molecular, a partir de una entidad que posee caractersticas nicas.
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En la terapia antimicrobiana, se pretende comprender y desarrollar sinergia con los mecanismos de defensa innatos del husped, en el rea oftalmolgica, los relacionados a procesos oculares infecciosos tanto especficos como no especficos. Conservando y estimulando la presencia de los pptidos antimicrobianos, se obtendra una prevencin e inhibicin de los microorganismos responsables de los principales procesos infecciosos e inflamatorios oculares, que permitir un tratamiento rpido y eficaz en el control del proceso patolgico.De esta forma se podr evitar secuelas devastadoras de dichas complicaciones que en un gran porcentaje llevan a la ceguera del paciente asociadas al diagnstico tardo, inespecfico o asociado a resistencia a los antibiticos actuales.Los pptidos antimicrobianos y anti-inflamatorios prometen ser un mtodo teraputico eficaz, natural, libre de efectos secundarios y adversos en la terapia antimicrobiana e inmuno moduladora futura.Basados en estudios publicados realizados en animales, estos pptidos con capacidad antibacteriana se expresaran en tejidos oculares normales actuando como agentes antimicrobianos de la inmunidad innata del ojo y as tambin como regulador de la actividad inflamatoria. Estos pptidos antimicrobianos anti inflamatorios podran utilizarse para la prevencin y tratamiento de procesos infecciosos oculares, en formulaciones simples o combinadas a otras sustancias antibiticas antimicrobianas en forma sinrgica.Secretory leukocyte protease inhibitor (SLPI), terminologa anglosajona que se utilizo para definir a una protena de 12 kDa de peso molecular cuya nica funcin conocida hasta hace unos aos era la de ser secretada por leucocitos para inhibir proteasas de la matriz extracelular. El objetivo es estudiar la presencia del pptido antimicrobiano SLPI en relacin con el remodelado cicatrizal de la matriz extracelular de la cornea y otras estructuras intra oculares, como as tambin su expresin en relacin a procesos inflamatorios e infecciosos del ojo como agente antimicrobiano de la inmunidad innata del husped
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La placenta es un rgano transitorio formado durante la gestacin, a travs del cual se relacionan fisiolgicamente membranas maternas y embrionarias. Constituye un tejido esencial ya que de la correcta comunicacin materna/fetal depende la aceptacin del conceptus, la viabilidad de los embriones, el xito de la preez y la sobrevida postnatal de los fetos. El cerdo presenta una placenta corialantoidea que se caracteriza por una aposicin entre los epitelios uterino y corinico, entre los cuales se interdigitan las microvellosidades maternas y fetales, involucrando un vasto incremento en el rea de contacto sin prdida de la continuidad de las membranas. stas persisten hasta el final de la gestacin, pero la distancia entre los vasos sanguneos uterinos y fetales se reduce a medida que avanza la preez a fin de hacer ms eficiente la difusin. En el cerdo, para que se produzca una preez exitosa seguida de una gestacin normal debe ocurrir, a nivel de la placenta una correcta vascularizacin que permita un adecuado establecimiento y desarrollo de los embriones/fetos. La angiognesis placentaria es un factor primordial durante la gestacin, ya que es necesario un incremento en el flujo sanguneo a medida que avanza la preez, aumentando el transporte de nutrientes desde la madre para satisfacer las demandas metablicas del conceptus. Al inicio de la preez porcina se observa una vascularizacin endometrial involucrada en el establecimiento y crecimiento placentario. Fisiolgicamente, para que se produzca una prez exitosa debe ocurrir una correcta remodelacin celular placentaria y vascular, indispensable para el crecimiento fetal y el desarrollo placentario; para ello se expresan diferentes moleculas presentes en el microambiente materno/fetal, tales como VEGF y sus receptores, y las protenas de matriz extracelular: osteopontina, fibringeno, colgeno, desmina, vimentina y fibronectina. El propsito de este trabajo es estudiar la angiognesis, la vascularizacin y la caracterizacin de la matriz extracelular, en muestras de tejido placentario de cerdas de razas mestizas. Para ello se propone determinar el nmero de vasos sanguneos placentarios, su clasificacin de acuerdo al calibre y ubicacin y la localizacin de VEGF, sus receptores, osteopontina, fibringeno, colgeno, desmina, vimentina y fibronectina. Adems, se determinar la remodelacin celular vascular a travs de microscopa ptica de alta resolucin (MOAR) y microscopa electrnica de transmisin. Todas las determinaciones se realizarn durante la placentacin porcina: al inicio (30 das), la mitad (60 y 80 das) y al final de la gestacin (114 das). Poder reconocer algunos de los procesos fisiolgicos que desencadenan la remodelacin celular y la vascularizacin durante el establecimiento y crecimiento placentario porcino, permitir profundizar el conocimiento de los mecanismos que posibilitan un apropiado intercambio sanguneo materno-fetal durante la gestacin en porcinos. La identificacin y el estudio de las molculas que intervienen en la integridad y sostn tisular-vascular que sirven de contexto en los procesos de angiognesis y vascularizacin redundar en el futuro en beneficios aplicables a la produccin porcina.
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El carcinoma colorrectal es una de las neoplasias ms comunes y es la segunda causa de muerte por cncer luego del cncer de pulmn. La principal causa de muerte de los individuos que padecen esta enfermedad es la metstasis heptica. La angiognesis est asociada con la progresin y metstasis de dicho cncer, afectando la supervivencia del paciente, y ocasionando la mayora de las muertes. El crecimiento de nuevos vasos sanguneos en relacin al crecimiento tumoral, es un proceso complejo. En 1971, Judat Folkman postul la hiptesis: el crecimiento tumoral es angiognesis dependiente y que la inhibicin de la angiognesis podra ser teraputica. La Terapia fotodinmica es una modalidad teraputica que utiliza compuestos fotosensibilizadores (FSs) que se acumulan en tejidos tumorales y una vez excitados por la luz actan mediante 3 mecanismos principales: muerte directa de la clula tumoral; dao de la vasculatura tumoral; y respuesta inmunolgica. La inhibicin del proceso angiognico presenta claras ventajas debido a la casi inexistencia, en individuos adultos, de neovascularizacin en condiciones fisiolgicas normales. El desarrollo de ambientes celulares de arquitectura tridimensional es clave para simular las condiciones que gobiernan en el microambiente tumoral ya que las interacciones clula - clula juegan un papel clave en eventos fisiolgicos tal como la angiognesis. Por lo tanto, postulamos que el impacto de la TFD sobre los componentes del ambiente tumoral permitir modular el proceso angiognico como estrategia antitumoral. Los objetivos planteados son: I) Investigar la susceptibilidad individual de las de clulas endoteliales y tumorales a la TFD en la expresin y alteracin de molculas relevantes en angiognesis. II) Examinar la respuesta de clulas endoteliales fotosensibilizadas al estmulo tumoral para comprender la regulacin del proceso angiognico 2D y 3D. III) Examinar la respuesta a la TFD vascular y TFD tumoral, determinando la eficacia de la doble teraputica en revertir el proceso de angiognesis 2D y 3D. IV) Investigar la capacidad estimulante de las clulas tumorales fotosensibilizadas de inducir angiognesis en modelos in vivo. Para cumplir con los objetivos se propone evaluar: a) La expresin de factores proangiognicos, molculas de adhesin, invasividad y migracin de clulas microendoteliales humanas y de adenocarcinoma de colon, comparando modelos de monocultivos 2D y 3D. b) La capacidad de las clulas tumorales, con diferente malignidad, de promover en las clulas endoteliales tratadas con TFD estmulos de: proliferacin, migracin, formacin de tubos y quimiotxis. c) La capacidad de la TFD en modular la respuesta parcrina que participa en la progresin tumoral. d) La implicancia en la respuesta a la TFD de factores de crecimiento y receptores celulares por siRNA o anticuerpos bloqueantes. e) La respuesta angiognica in vivo mediante el uso de implantes de matrigel con clulas tumorales o sobrenadantes tratados con TFD. Este trabajo aportar conocimientos sobre el dialogo tumor-endotelio y la susceptibilidad de ese estmulo a la TFD. Adems, se determinarn blancos teraputicos que incrementen su efectividad en relacin al proceso angiognico. Las interacciones entre las clulas tumorales y endoteliales son relevantes en la angiognesis tumoral. Por ello, nuevas y ms eficientes teraputicas involucran estrategias combinadas que se dirigen hacia las clulas tumorales y su entorno, el cual est compuesto por clulas endoteliales, perivasculares, y matriz extracelular. El abordaje de esta problemtica de manera integrada hace suponer encontrar una solucin ms especfica al tratamiento del cncer. Se espera, segn los resultados obtenidos, poder optimizar y/o modular la intervencin teraputica de la accin fotodinmica sobre blancos moleculares del proceso angiognico.
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FUNDAMENTO: A insuficincia artica crnica importante sintomtica (IAo) leva a grande remodelamento ventricular esquerdo, custa de hipertrofia de miciotos e remodelamento da matriz extracelular. A relevncia da concentrao de fibrose intersticial nos pacientes acometidos desconhecida. Analisamos o grau de fibrose no ventrculo esquerdo (VE) em pacientes sintomticos com IAo submetidos a tratamento cirrgico e sua relao com caractersticas funcionais e anatmicas. OBJETIVO: Avaliar a fibrose miocrdica na insuficincia artica crnica importante. MTODOS: Selecionaram-se 28 pacientes com IAo (16 com funo VE normal e 12 com disfuno do VE), os quais foram analisados no pr e ps-operatrio por ecodopplercardiografia. A capacidade funcional foi medida pelo teste de esforo cardiopulmonar. Para comparao dos resultados histopatolgicos, um grupo-controle de 9 pacientes foi constitudo. RESULTADOS: A mdia etria foi de 39 12 anos, 75% do sexo masculino com 84% de etiologia reumtica. Vinte e cinco pacientes permaneceram em classes funcionais I e II ao fim do estudo e apresentaram reduo significativa dos dimetros do VE entre os momentos pr e ps-operatrios. Houve trs bitos no relacionados disfuno VE. Os parmetros do teste cardiopulmonar no se modificaram entre o pr e o ps-operatrio. O volume de fibrose intersticial em pacientes com IAo foi significativamente quando maior comparado ao grupo controle (3,47 1,9% vs 0,82 0,96%, respectivamente, p = 0,001). No houve correlao entre o grau de fibrose do VE, parmetros ecocardiogrficos e funcionais. CONCLUSO: Em pacientes com IAo, a presena de fibrose miocrdica no se associou s alteraes clnicas, ecocardiogrficas ou funcionais.
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La investigacin oftalmolgica actual se focaliza en el estudio de los procesos cicatrizales normales y patolgicos del globo ocular. Nuestro proyecto se focaliza en el estudio de los mecanismos fisiopatolgicos oftalmolgicos relacionados a la inmunidad innata y procesos inflamatorios e infecciosos oculares. Actualmente la terapia antimicrobiana y de cicatrizacin tisular pretende comprender y desarrollar sinergia entre los mecanismos involucrados en la inmunidad innata y cicatrizacion del husped. En el rea oftalmolgica, son de crtica importancia el conocimiento y modulacin de mencionados procesos oculares. Modulando y estimulando la presencia de los pptidos antimicrobianos y anti inflamatorios, se obtendra una prevencin, modulacin de los principales procesos fisiopatologicos oculares, permitiendo estudiar y aplicar una nueva rea de tratamiento en las enfermedades oculares.De esta forma se podr evitar secuelas devastadoras de dichas complicaciones que en un gran porcentaje llevan a la ceguera del paciente, asociado a la destruccin de tejidos especficos como la transparencia corneal o la perdida de neuronas retinales. Los pptidos antimicrobianos y anti-inflamatorios prometen ser un mtodo teraputico eficaz, natural, libre de efectos secundarios y adversos. Basados en estudios publicados (propios y de otros autores) realizados en animales, demuestran pptidos con capacidad antibacteriana e inmuno moduladora que se expresaran en tejidos oculares normales, actuando como agentes antimicrobianos de la inmunidad innata del ojo y as tambin como regulador de la actividad inflamatoria. Estos pptidos antimicrobianos anti inflamatorios podran utilizarse a futuro para el desarrollo en la prevencin y tratamiento de procesos infecciosos oculares, en formulaciones simples o combinadas a otras sustancias antibiticas antimicrobianas en forma sinrgica. Secretory leukocyte protease inhibitor (SLPI), protena de 12 kDa de peso molecular cuya funcin es inhibir proteasas de la matriz extracelular y modular la inmunidad del tejido involucrado. El objetivo es estudiar la presencia del pptido antimicrobiano SLPI en relacin con el remodelado cicatrizal de la matriz extracelular de la cornea y otras estructuras intra oculares, como as tambin su expresin en relacin a procesos Inflamatorios e infecciosos del ojo como agente antimicrobiano de la inmunidad innata del husped.
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O processo de angiognese envolve uma sequncia complexa de estmulos e respostas integradas, como estimulao das clulas endoteliais (CE) para sua proliferao e migrao, estimulao da matriz extracelular, para atrao de pericitos e macrfagos, estimulao das clulas musculares lisas, para sua proliferao e migrao, e formao de novas estruturas vasculares. Angiognese principalmente uma resposta adaptativa hipxia tecidual e depende do acmulo do fator de crescimento induzido pela hipxia (FIH-1 α) na zona do miocrdio isqumico, que serve para aumentar a transcrio do fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) e seus receptores VEGF-R, pelas CE em sofrimento isqumico. Esses passos envolvem mecanismos enzimticos e proteases ativadoras do plasminognio, metaloproteinases (MMP) da matriz extracelular (MEC) e cinases que provocam a degradao molecular proteoltica da MEC, bem como pela ativao e a liberao de fatores de crescimento, tais como: fator bsico de crescimento dos fibroblastos (FCFb), VEGF e fator de crescimento insulnico-1 (FCI-1). Posteriormente, vem a fase intermediria de estabilizao do novo broto neovascular imaturo e a fase final de maturao vascular da angiognese fisiolgica. Como concluses generalizveis, possvel afirmar que a angiognese coronria em adultos , fundamentalmente, uma resposta parcrina da rede capilar preexistente em condies fisiopatolgicas de isquemia e inflamao.
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Adhesion to host cells is an initial and important step in Acinetobacter baumannii pathogenesis. However, there is relatively little information on the mechanisms by which A. baumannii binds to and interacts with host cells. Adherence to extracellular matrix proteins, such as fibronectin, affords pathogens with a mechanism to invade epithelial cells. Here, we found that A. baumannii adheres more avidly to immobilized fibronectin than to control protein. Free fibronectin used as a competitor resulted in dose-dependent decreased binding of A. baumannii to fibronectin. Three outer membrane preparations (OMPs) were identified as fibronectin binding proteins (FBPs): OMPA, TonB-dependent copper receptor, and 34 kDa OMP. Moreover, we demonstrated that fibronectin inhibition and neutralization by specific antibody prevented significantly the adhesion of A. baumannii to human lung epithelial cells (A549 cells). Similarly, A. baumannii OMPA neutralization by specific antibody decreased significantly the adhesion of A. baumannii to A549 cells. These data indicate that FBPs are key adhesins that mediate binding of A. baumannii to human lung epithelial cells through interaction with fibronectin on the surface of these host cells.
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Durante o desenvolvimento embrionrio dos Vertebrados a mesoderme presomtica (MPS) progressivamente dividida em segmentos, denominados os smitos. No embrio de galinha, os smitos formam-se com uma periodicidade de 90 minutos e pensa-se que essa periodicidade seja regulada por genes de expresso cclica envolvidos nas vias Notch e Wnt e a sua resposta a gradientes de FGF/Wnt e cido retinico. Porm, a reorganizao celular durante a somitognese envolve tambm molculas de adeso e de matriz extracelular com particular destaque para a fibronectina (FN). Alm de estar associada a dinmicas celulares subjacentes a segmentao morfolgica, dados preliminares indicaram que possa tambm ter um envolvimento na segmentao molecular. Sendo assim, o objectivo deste trabalho de pesquisa foi de verificar o papel da FN na segmentao no embrio de galinha. Atravs de aplicao de inibidores de fibrilognese de FN e de sinalizao Notch em sistemas de culturas de explantes e de MPS isoladas seguido de uma marcao da expresso gnica, foram revelados que a matriz de FN necessria para a segmentao tanto a nvel morfolgico como a nvel de expresso gnica segmentar (de delta1 e de meso1). Adicionalmente foi observado que os efeitos da inibio da fibrilognese da FN produzem um fentipo semelhante a inibio da sinalizao Notch. Foi constatado que a sinalizao Notch activa a expresso de meso1 que regula a segmentao e que tanto a ausncia de sinalizao Notch como a ausncia de uma matriz de FN provocam, na expresso gnica segmentar, efeitos de perturbao muito parecidos. Finalmente foi observado que a segmentao molecular parece no apenas ser resultado de sinalizao intrnseca MPS, mas tambm influenciada pela ectoderme, comprovada pela existncia de regulao da FN exgena sobre a segmentao molecular na parte rostral da MPS e sobre a expresso de delta1 na sua regio caudal.
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La cicatrizacin de las heridas es un proceso complejo que implica diferentes fases que se solapan entre s, incluyendo la inflamacin, la epitelizacin, la angiognesis y la sntesis y deposicin de matriz extracelular. Los fibroblastos drmicos tienen una funcin esencial en la formacin del tejido de granulacin. Migran hasta la lesin en respuesta a citoquinas, proliferan y sintetizan las protenas de la matriz extracelular, las cuales son la base del proceso de reparacin futuro. Los oligoelementos tales como el zinc y el manganeso son necesarios para muchas funciones celulares y, por consiguiente, pueden potencialmente estimular los procesos de reparacin de las heridas. En el presente estudio hemos investigado el efecto de un aposito que contiene zinc, calcio y manganeso (Trionic) sobre la proliferacin, el crecimiento, la sntesis de colgeno I y III y la migracin de los fibroblastos. Los resultados obtenidos indican que los oligoelementos solubles presentes en Trionic actan estimulando la proliferacin, el crecimiento, la biosntesis de colgeno y la migracin de los fibroblastos. Dada la participacin crucial que estas funciones celulares tienen sobre el comportamiento de los fibroblastos durante el proceso de formacin del tejido de granulacin, concluimos que los iones Ca2+, Zn2+, y Mn2+ contenidos en Trionic pueden proporcionar potenciales beneficios en el tratamiento de las heridas crnicas y durante la fase reparativa del proceso de cicatrizacin.
