Detecção dos genes de Biofilme, da leucocidina Panton-Valentine e da resistência a Meticilina em amostras de Staphylococcus aureus e Estafilococos Coagulase-Negativa

Uma coleção de 57 amostras de Staphylococcus aureus e 30 de estafilococos coagulasenegativa isoladas de recém-nascidos (RN) foram estudadas em relação à presença dos genes pvl, mecA e ica. Das 57 amostras de S. aureus, 31,6% apresentaram o gene mecA e 17,5% os genes pvl, sendo que dentre estas somente uma amostra foi mecA e pvl positiva. Os ECN apresentaram 36,7% de amostras mecA positivas, 93,3% ica positivas e nenhuma amostra pvl. Foi observada uma queda no número de amostras resistentes à meticilina no período de 1991-2005 para os S. aureus e também no período de 1990- 1996 para os ECN, porém a diferença não foi significativa. Também foram estudadas dez amostras de S. aureus isoladas de fossa nasal e nenhuma apresentou o gene mecA ou pvl. Já entre as dez amostras de ECN isoladas de fossa nasal, todas apresentaram o gene 11 ica, porém nenhuma foi resistente à meticilina. A análise dos dados clínicos dos RN revelou que o uso de cateter e outros corpos estranhos aumentam o risco de infecção por S. aureus e ECN. Assim, a produção de biofilme por ECN foi um importante fator de virulência presente em mais de 90% das amostras, confirmando a importância deste na ocorrência de infecções relacionadas com cateteres, e, apesar dos genes mecA e pvl estarem presentes concomitantemente em apenas uma amostra de S. aureus, esta revelou ter importância significativa

Production of human factor VIII-FL in 293T cells using the bicistronic MGMT(P140K)-retroviral vector

Hemophilia A is the most common X-linked bleeding disorder; it is caused by deficiency of coagulation factor VIII (FVIII). Replacement therapy with rFVIII produced from human cell line is a major goal for treating hemophilia patients. We prepared a full-length recombinant FVIII (FVIII-FL), using the pMFG-P140K retroviral vector. The IRES DNA fragment was cloned upstream to the P140K gene, providing a 9.34-kb bicistronic vector. FVIII-FL cDNA was then cloned upstream to IRES, resulting in a 16.6-kb construct. In parallel, an eGFP control vector was generated, resulting in a 10.1-kb construct. The 293T cells were transfected with these constructs, generating the 293T-FVIII-FL/P140K and 293T-eGFP/P140K cell lines. In 293T-FVIII-FL/P140K cells, FVIII and P140K mRNAs levels were 4,410 (+/- 931.7)- and 295,400 (+/- 75,769)-fold higher than in virgin cells. In 293T-eGFP/P140K cells, the eGFP and P140K mRNAs levels were 1,501,000 (+/- 493,700)- and 308,000 (+/- 139,300)-fold higher than in virgin cells. The amount of FVIII-FL was 0.2 IU/mL and 45 ng/mL FVIII cells or 4.4 IU/mu g protein. These data demonstrate the efficacy of the bicistronic retroviral vector expressing FVIII-FL and MGMT(P140K), showing that it could be used for producing the FVIII-FL protein in a human cell line.

Tagungsbericht «Gesundheitsrecht am Puls der Zeit»: Symposium der UFL zum Thema Herausforderung Alter am 23. November 2012 in Triesen FL

Bereits zum dritten Mal führte die Private Universität im Fürstentum Liechtenstein UFL im November 2012 ihr jährliches Symposium zum Gesundheitsrecht durch. Dieses Mal beschäftigten sich die Referate mit dem Thema Alter und Altern, und zwar nicht nur aus rechtlicher Perspektive, sondern mit Blick über die Disziplinengrenzen hinaus.