Evaluation of a new vaccine based on pDNA and recombinant protein against Helicobacter pylori

Dissertação para obtenção do Grau de Mestre em Genética Molecular e Biomedicina

Curcumin Inhibits Gastric Inflammation Induced by Helicobacter Pylori Infection in a Mouse Model

Helicobacter pylori (H. pylori) infection triggers a sequence of gastric alterations starting with an inflammation of the gastric mucosa that, in some cases, evolves to gastric cancer. Efficient vaccination has not been achieved, thus it is essential to find alternative therapies, particularly in the nutritional field. The current study evaluated whether curcumin could attenuate inflammation of the gastric mucosa due to H. pylori infection. Twenty-eight C57BL/6 mice, were inoculated with the H. pylori SS1 strain; ten non-infected mice were used as controls. H. pylori infection in live mice was followed-up using a modified 13C-Urea Breath Test (13C-UBT) and quantitative real-time polymerase chain reaction (PCR). Histologically confirmed, gastritis was observed in 42% of infected non-treated mice at both 6 and 18 weeks post-infection. These mice showed an up-regulation of the expression of inflammatory cytokines and chemokines, as well as of toll-like receptors (TLRs) and MyD88, at both time points. Treatment with curcumin decreased the expression of all these mediators. No inflammation was observed by histology in this group. Curcumin treatment exerted a significant anti-inflammatory effect in H. pylori-infected mucosa, pointing to the promising role of a nutritional approach in the prevention of H. pylori induced deleterious inflammation while the eradication or prevention of colonization by effective vaccine is not available.

Infecção gástrica por Helicobacter pylori em pacientes sintomáticos da Ilha de São Luís, MA: correlação endoscópica, anatomopatológica e microbiológica

Com critérios previamente definidos de inclusão e prévio consentimento, 26 pacientes consecutivos (19 a 64 anos), com queixas referentes ao aparelho digestivo superior, foram submetidos à endoscopia digestiva, com biópsia, constando de 8 fragmentos da região antropilórica (4 da parede anterior e 4 da posterior). Dois fragmentos destinados â cultura; dois a teste da urease livre; dois para esfregaço corado, todos colhidos em meio de transporte adequado sob refrigeração; dois fragmentos foram imersos em formalina a 10 % para exame histopatológico. Dos 26pacientes, 25 (96%) apresentaram infecção pelo Helicobacter pylori por um ou mais dos métodos empregados. Em 16 (61%), dos 26, foram observadas alterações pela endoscopia (gastrite em 11, úlcera péptica em dois e cicatriz de úlcera em três casos). Dos pacientes com gastrite endoscópica, 10/11 (91%) apresentaram-se positivos, bem como todos (100%>) os portadores de cicatriz ou úlcera péptica. Foi observada estreita relação entre a presença de H. pylori e gastrite crônica em 24/25 (96%). Corte histológico corado pela hematoxilina-eosina foi o teste de maior sensibilidade diagnostica: 24/25 (96%), seguido pelo teste da urease 23/25 (92%), esfregaço corado 19/25 (76%) e cultura 18/25 (72%). Conclui-se que a prevalência de infecção gástrica por H. pylori em portadores de sintomas é elevada, correlacionando-se com gastrite crônica e úlcera. Exame histológico corado pela hematoxilina-eosina e o teste da urease são os mais sensíveis no diagnóstico da infecção. Os estudos devem prosseguir para elucidação de mais questões relacionadas á infecção, incluindo-se grupo controle de sintomáticos, por sexo e idade.

Soroprevalência de anticorpos contra o antígeno CagA do Helicobacter pylori em pacientes com úlcera gástrica na região Norte do Brasil

O Helicobacter pylori é um agente patogênico largamente distribuído no mundo, estando envolvido no desenvolvimento de várias doenças gastrointestinais. Atualmente a infecção pela cepa virulenta (CagA+) do H. pylori é considerado um dos principais fatores etiológicos para o desenvolvimento de ulcerações gástricas. Baseado nessa informação, investigamos a soroprevalência das cepas virulentas entre os pacientes com úlcera gástrica da nossa região, utilizando testes sorológicos para detecção de anticorpos contra o H. pylori e a proteína CagA. Sendo observado que 82% (45/55) dos pacientes estavam infectados pela cepa virulenta, entre esses 89% (40/45) apresentaram grau de inflamação aumentado na mucosa gástrica, com denso infiltrado de leucócitos no tecido, o que provavelmente favoreceu a formação das ulcerações gástricas.

Identificação do Helicobacter pylori pela citologia do escovado gástrico: comparação com o método histológico

A proposta deste estudo foi a de verificar o valor da citologia do escovado gástrico no diagnóstico da infecção pelo Helicobacter pylori em pacientes submetidos à endoscopia digestiva, comparando-o a outro método endoscópico - a histologia. As endoscopias foram realizadas em 157 pacientes dispépticos, divididos em dois grupos: grupo A (n = 27) com úlcera duodenal, B (n = 130), sem úlcera. No grupo A, a porcentagem de pacientes positivos na citologia (77,8%) foi similar à histologia (74,1%; p = 0,3). No grupo B, a citologia (71,5%) foi superior à histologia (63,1%; p = 0,00002). A citologia do escovado gástrico é um método simples e prático. Foi eficiente para identificar a infecção pelo Helicobacter pylori em todos grupos de estudo.

Soroprevalência da infecção por Helicobacter pylori em crianças de diferentes níveis sócio-econômicos em Porto Velho, Estado de Rondônia

O estudo investigou a soroprevalência de infecção pelo Helicobacter pylori em 200 (subdivididas em 2 grupos) crianças da Cidade de Porto Velho, Rondônia. A prevalência da soropositividade variou consideravelmente de acordo com o nível sócio-econômico, onde 51% das crianças de baixo nível e 24% de classe média eram positivas. As características da população infantil relacionadas ao sexo, raça e dieta alimentar não representaram fatores de risco para a aquisição da infecção; porém, a maioria das infectadas pertencia à faixa etária de cinco ou mais anos, independente do nível sócio-econômico. A distribuição fenotípica dos grupos sanguíneos ABO, entre os indivíduos infectados e não infectados, mostrou4 que a sororeatividade ao Helicobacter pylori foi maior entre as crianças do grupo sanguíneo O, sugerindo que há uma maior susceptibilidade genética destas crianças para a infecção pelo Helicobacter pylori.

Helicobacter pylori em crianças e associação de cepas CagA na transmissão mãe-filho na Amazônia brasileira

Investigou-se a prevalência de infecção pela Helicobacter pylori em amostras de sangue de 100 crianças de 1 a 12 anos e de suas mães através dos métodos de hemaglutinação indireta e anti-CagA pelo ensaio ELISA. Destas 100 crianças, foram obtidas 79 amostras de fezes e realizada pesquisa de antígenos da bactéria nas fezes por ELISA de captura. Os antígenos foram detectados em 54,4% (43/79) das crianças, e os anticorpos no soro em 43% (34/79), métodos que apresentaram desempenhos semelhantes, com maiores discordâncias nas crianças de 1 a 4 anos. A soroprevalência nas crianças foi de 50% (50/100) e nas mães de 86% (86/100). Mães infectadas representaram fator de risco 19 vezes superior ao de mães soronegativas para determinar infecção em seus filhos (p < 0,05), sobretudo as mães com cepas CagA+ (p < 0,05). O contato direto pessoa-pessoa pode ser um modo de transmissão desta infecção.

Seroprevalence of Helicobacter pylori infection in chagasic and nonchagasic patients from the same geographical region of Brazil

INTRODUCTION: In this study, we evaluated the seroprevalence of Helicobacter pylori infection among chagasic and non-chagasic subjects as well as among the subgroups of chagasic patients with the indeterminate, cardiac, digestive, and cardiodigestive clinical forms. METHODS: The evaluated subjects were from the Triângulo Mineiro region, Minas Gerais, Brazil. Chagasic patients showed positive reactions to the conventional serological tests used and were classified according to the clinical form of their disease. Immunoglobulin G antibodies specific to H. pylori were measured using a commercial enzyme-linked immunosorbent assay kit. RESULTS: The overall H. pylori prevalence was 77.1% (239/310) in chagasic and 69.1% (168/243) in non-chagasic patients. This difference was statistically significant even after adjustment for age and sex (odds ratio = 1.57; 95% confidence interval, 1.02-2.42; p = 0.04) in multivariate analysis. The prevalence of infection increased with age in the non-chagasic group (p = 0.007, χ2 for trend), but not in the chagasic group (p = 0.15, χ2 for trend). H. pylori infection was not associated with digestive or other clinical forms of Chagas disease (p = 0.27). CONCLUSIONS: Our findings demonstrate that chagasic patients have a higher prevalence of H. pylori compared to non-chagasic subjects; a similar prevalence was found among the diverse clinical forms of the disease. The factors contributing to the frequent co-infection with H. pylori and Trypanosoma cruzi as well as its effects on the clinical outcome deserve further study.

Histological and endoscopic features of the stomachs of patients with Chagas disease in the era of Helicobacter pylori

Introduction Most studies that have evaluated the stomachs of patients with Chagas disease were performed before the discovery of Helicobacter pylori and used no control groups. This study compared the gastric features of chagasic and non-chagasic patients and assessed whether gastritis could be associated with Chagas disease. Methods Gastric biopsy samples were taken from patients who underwent endoscopy for histological analysis according to the Updated Sydney System. H. pylori infection was assessed by histology, 16S ribosomal ribonucleic acid (rRNA) polymerase chain reaction (PCR), serology and the 13C-urea breath test. Patients were considered H. pylori-negative when all of these diagnostic tests were negative. Clinical and socio-demographic data were obtained by reviewing medical records and using a questionnaire. Results The prevalence of H. pylori infection (70.3% versus 71.7%) and chronic gastritis (92.2% versus 85%) was similar in the chagasic and non-chagasic groups, respectively; such as peptic ulcer, atrophy and intestinal metaplasia. Gastritis was associated with H. pylori infection independent of Chagas disease in a log-binomial regression model. However, the chagasic H. pylori-negative patients showed a significantly higher grade of mononuclear (in the corpus) and polymorphonuclear (PMN) (in the antrum) cell infiltration. Additionally, the patients with the digestive form of Chagas disease showed a significantly lower prevalence of corpus atrophy than those with other clinical forms. Conclusions The prevalence of H. pylori infection and of gastric histological and endoscopic features was similar among the chagasic and non-chagasic patients. Additionally, this is the first controlled study to demonstrate that H. pylori is the major cause of gastritis in patients with Chagas disease.

Antimicrobial resistance of Helicobacter pylori strains to five antibiotics, including levofloxacin, in Northwestern Turkey

INTRODUCTION: Antibiotic resistance is the main factor that affects the efficacy of current therapeutic regimens against Helicobacter pylori. This study aimed to determine the rates of resistance to efficacy clarithromycin, amoxicillin, tetracycline, levofloxacin and metronidazole among H. pylori strains isolated from Turkish patients with dyspepsia. METHODS: H. pylori was cultured from corpus and antrum biopsies that were collected from patients with dyspeptic symptoms, and the antimicrobial susceptibility of H. pylori was determined using the E-test (clarithromycin, amoxicillin, tetracycline, metronidazole and levofloxacin) according to the EUCAST breakpoints. Point mutations in the 23S rRNA gene of clarithromycin-resistant strains were investigated using real-time PCR. RESULTS: A total of 98 H. pylori strains were isolated, all of which were susceptible to amoxicillin and tetracycline. Of these strains, 36.7% (36/98) were resistant to clarithromycin, 35.5% (34/98) were resistant to metronidazole, and 29.5% (29/98) were resistant to levofloxacin. Multiple resistance was detected in 19.3% of the isolates. The A2143G and A2144G point mutations in the 23S rRNA-encoding gene were found in all 36 (100%) of the clarithromycin-resistant strains. Additionally, the levofloxacin MIC values increased to 32 mg/L in our H. pylori strains. Finally, among the clarithromycin-resistant strains, 27.2% were resistant to levofloxacin, and 45.4% were resistant to metronidazole. CONCLUSIONS: We conclude that treatment failure after clarithromycin- or levofloxacin-based triple therapy is not surprising and that metronidazole is not a reliable agent for the eradication of H. pylori infection in Turkey.