Purificação, caracterização e análise da atividade bioinseticida, de um inibidor de tripsina em sementes de catanduva (Piptadenia moniliformis)

One Kunitz-type trypsin inhibitors (PmTI) was purified from Piptadenia moniliformis seeds, a tree of the sub-family Mimosoideae, by TCA precipitation, affinity chromatography on immobilized trypsin-Sepharose, DEAE cellulose (ion exchange) and Superose 12 (molecular exclusion) column FPLC/AKTA. The inhibitor has Mr of 25 kDa by SDS-PAGE and chromatography molecular exclusion. The N-terminal sequence of this inhibitor showed high homology with other family Kunitz inhibitors. This also stable variations in temperature and pH and showed a small decrease in its activity when incubated with DDT in the concentration of 100mM for 120 minutes. The inhibition of trypsin by PmTI was competitive, with Ki of 1.57 x10-11 M. The activity of trypsin was effectively inhibited by percentage of inhibition of 100%, among enzymes tested, was not detected inhibition for the bromelain, was weak inhibitor of pancreatic elastase (3.17% of inhibition) and inhibited by 76.42% elastase of neutrophils, and inhibited in a moderate, chymotrypsin and papain with percentage of inhibition of 42.96% and 23.10% respectively. In vitro assays against digestive proteinases from Lepidoptera, Diptera and Coleoptera pests were carried out. Several degrees of inhibition were found. For Anthonomus grandis and Ceratitis capitata the inhibition was 89.93% and 70.52%, respectively, and the enzymes of Zabrotes subfasciatus and Callosobruchus maculatus were inhibited by 5.96% and 9.41%, respectively, and the enzymes of Plodia. interpunctella and Castnia licus were inhibited by 59.94% and 23.67, respectively. In vivo assays, was observed reduction in the development of larvae in 4rd instar of C. capitata, when PmTI was added to the artificial diet, getting WD50 and LD50 of 0.30% and 0.33%, respectively. These results suggest that this inhibitor could be a strong candidate to plant management programs cross transgenic

Synthetic amides toxic to the leaf-cutting ant Atta sexdens rubropilosa L. and its symbiotic fungus

1 Nine synthetic amides similar to natural N-piperidine-3-(4,5-methylenedioxyphenyl)-2-(E)-propenainide and N-pyrrolidine-3-(4,5-methylenedyoxiphenyl)2-(E)-propenamide were synthesized and identified by their spectroscopic data.2 the toxicity of these synthetic amides to the Atta sexdens rubropilosa workers and the antifungal activity against Leticoagaricus gongylophorus, the symbiotic fungus of the leaf-cutting ants, were determined.3 Workers ants that were fed daily on an artificial diet to which these compounds were added had a higher mortality rate than the controls for N-pyrrolidine-3(3',4'-methylenedioxyphenyl)-2-(E)-propenamide and N-benzyl-3-(3',4'-methylenedioxyphenyl)-2-(E)-propenamide at a concentration of 100 mu g/mL.4 the completely inhibition (100%) of the fungal growth was observed with N-piperldine-3-(3',4'-methylenedioxyphenyl)-2-(E)-propenamide and N,N-diethyl-3-(3',4'-methylenedioxyphenyl)-2-(E)-propenamide at concentrations of 50 and 100 mu g/mL and N-pirrolidine-3-(3',4'-methylenedioxyphenyl)-2-(E)-propenamide at a concentration of 100 mu g/mL.5 the possibility of controlling these insects in the future using synthetic piperamides that can simultaneously target both organisms is discussed.

Movement of Spodoptera frugiperda Adults (Lepidoptera: Noctuidae) in Maize in Brazil

The fall armyworm, Spodoptera frugiperda (J. E. Smith), is one of the most important maize pests in the Americas and particularly in South America. With the adoption of genetically modified plants expressing Bacillus thuringiensis toxins for lepidopterous pest control, there is a need for establishing strategies to delay the development of insect resistance (e.g. refuge areas). Thus, information on target insects' dispersal is essential to improve pest management techniques. The objective of this work was to evaluate the dispersal capacity of S. frugiperda adults using mark-release-recapture techniques. Insects were marked using red oil-soluble dye in the larval artificial diet. Marked adults were released twice in each growing season (dry and wet) in southeastern Brazil in 2006 and 2007. Recapture of marked insects was performed using light and pheromone traps. Males are more attracted to light traps than females and the recapture rate was higher in the dry season than in the rainy season. The most adequate model to explain the relationship between flight distance and number of recaptured insects is y = a(2)/ (1+ (2a(1.8)+ bx))((2.6)), where y is the distance and x is the number captured. The maximum recapture distances were 806 m for males and 608 m for females. Therefore, strategies for establishment of refuges should take such distances into consideration.

Fonte proteica na criação de Diatraea saccharalis e seu reflexo na produção e no controle de qualidade de Cotesia flavipes

O objetivo do trabalho foi avaliar diferentes dietas para lagartas de Diatraea saccharalis, com o intuito de obter informações sobre as características biológicas da praga e consequentemente avaliar a qualidade do parasitoide Cotesia flavipes, visando melhorar tecnicamente sua produção massal. Lagartas de 24 horas de idade foram transferidas para tubos (25 lagartas/tubo) contendo dieta artificial com levedura de cerveja e germe de trigo e outra somente com germe de trigo como fonte de proteína. Depois de aproximadamente 15 dias, as lagartas foram retiradas dos tubos e acondicionadas em placas com dieta, sendo observadas lagartas de D. saccharalis não parasitadas e parasitadas para avaliação das características biológicas de D. saccharalis e C. flavipes.nas diferentes dietas. Além da observação das características biológicas de D. saccharalis, foram realizadas medições nas lagartas de 15 dias de idade. Também, massas de pupas de C. flavipes.produzidas em biofábrica foram classificadas em três diferentes tamanhos, sendo pequenas (1,3 a 2,5 cm de comprimento), médias (2,5 a 3,5 cm de comprimento) e grandes (3,5 a 4,0 cm de comprimento). Após a emergência dos adultos foi realizado o parasitismo em lagartas de D. saccharalis, sendo observados o número de machos e fêmeas, tamanho da massa, razão sexual e número de pupas inviáveis. A dieta artificial que contém somente germe de trigo é a mais indicada para criação massal do hospedeiro D. saccharalis para produção em larga escala de C. flavipes. Massas de pupas classificadas como grandes possuem melhor qualidade em criações massais de C. flavipes.

Efeito do corante Vermelho de sudan B na marcaçao e no desenvolvimento de Diatraea saccharalis ( Fabricius, 1794) (Lepidoptera: Crambidae) e de Cotesia flavipes (Cameron, 1891) ( Hymenoptera: Braconidae)

The objective of this work was to evaluate biological aspects of Diatraea saccharalis fed on artificial diet containing different concentrations of the Sudan B Red dye and the possibility to mark the parasitoid Cotesia flavipes, when submitted to the parasitism of dyed caterpillars. For that, were added to the artificial diet four concentrations of Sudan Red B dye (100, 200, 300 and 400 ppm) and control (no dye addition). It was evaluated larval and pupal period, larval and pupal viability, longevity, sex rate, pupal weigh, eggs per female, eggs per day, number of eggs per egg mass, egg viability and embrionary period; besides same were accomplished measurements in the caterpillars (bioassay I). Caterpillars of 17 days old (30) of each treatment were removed from the tubes and exposed to the parasitism of C. flavipes (bioassay 2). The egg-pupae period, sex rate, pupal period and viability, number of females, males, total of emerged adults and longevity were evaluated. The data were submitted to the multivariate analisys methods: cluster analysis, two-way and principal component analysis. Based on analysis, it was observed that the treatment of 100 ppm was the least harmful to the biology of the sugar cane borer larvae by groping to the control and did not influence negatively its biological aspects. The concentration of 400 ppm affected negatively the biology of C. flavipes. The Sudan Red B it is ended doses marked the caterpillars and the adults, however the concentration of 100 ppm is the most suitable to dye D. saccharalis. None of the tested concentration marked adults of C. flavipes, despite to affect negatively its biology. It is unviable to increase the concentration seeking futures tests, for that dye to be harmful to the biological aspects of D. saccharalis and C. flavipes.

Técnica de medição de área foliarconsumida por insetos através de digitalizador de imagens

Este trabalho teve por objetivo verificar a viabilidade do uso de digitalizador de imagens manual, acoplado a um microcomputador, para a avaliação do consumo de folhas de soja, por lagartas de 5o instar de Anticarsia gemmatalis Hübner (Lep.: Noctuidae), em comparação com o método de pesagem e do planímetro, baseando-se na eficiência dos métodos e no tempo gasto para a avaliação. Os testes foram realizados utilizando-se folhas de soja `IAC 8' e lagartas criadas em dieta artificial. Foram realizados 2 tipos de teste: 1o) oferecimento de folíolos inteiros de soja às lagartas e, 2o) oferecimento de disco de folhas de área conhecida. No 1o teste comparou-se o método de pesagem com o digitalizador de imagens (scanner); no 2o experimento foram comparados o método do planímetro com o digitalizador de imagens que emprega o programa PCXAREA. Os resultados obtidos demonstraram que não existem diferenças nas medições de folíolos e discos de soja consumidos por A. gemmatalis quando comparados os métodos tradicionais (planímetro e pesagem) e o de digitalização de imagens. A medição com o digitalizador reduziu o tempo de avaliação em 88,5% e 87%, em relação ao planímetro e método de pesagem, respectivamente, sendo plenamente viável a sua utilização.

Feeding substrates to black coconut bunch weevil, Homalinotus coriaceus (Gyllenhal) (Coleoptera: Curculionidae), rearing in laboratory

A broca do cacho do coqueiro, Homalinotus coriaceus (Gyllenhal), é uma praga limitante da produção de coco no Brasil, sendo que tanto as larvas como os adultos provocam a queda das flores femininas e dos frutos imaturos, pela interceptação do fluxo de seiva ou pela alimentação direta nas estruturas reprodutivas. em virtude da escassez de informações sobre sua biologia, realizou-se esse trabalho com o objetivo de desenvolver uma metodologia mais adequada para a criação da praga em laboratório. Foram utilizados os parâmetros biológicos para avaliação e comparação dos sistemas de criação estudados.Toletes de cana-de-açúcar foram utilizados como substrato para alimentação dos adultos coletados no campo e obtenção dos ovos. As larvas foram criadas em três substratos alimentares no Laboratório de Entomologia da Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (EMBRAPA)-CPATC (Centro de Pesquisa Agropecuária dos Tabuleiros Costeiros), em Aracaju, SE. Os substratos alimentares estudados foram: o mesocarpo do coco, dieta para criação da broca dos citros e dieta para criação da broca do olho do coqueiro, sendo esta a que proporcionou o melhor desenvolvimento larval num menor tempo, com boa viabilidade, maior facilidade no preparo e manutenção.

Pressurização da calda de pulverização na viabilidade de microrganismos entomopatogênicos

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Influence of the insecticide pyriproxyfen on the flight muscle differentiation of Apis mellifera (Hymenoptera, Apidae)

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Nutritional ecology of blowflies (Diptera, Calliphoridae): estimates of critical larval weight for pupation on two different diets

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

PRODUÇÃO DE LARVAS DE CURIMBATÁ (Prochilodus scrofa) SUBMETIDAS A DIFERENTES DENSIDADES DE ESTOCAGEM E NÍVEIS DE PROTEÍNA BRUTA NAS DIETAS

O gênero Prochilodus é amplamente distribuído pela América do Sul, incluindo várias espécies que apresenta certo grau de endemismo nas diferentes bacias. Essas espécies alimentam-se basicamente de detritos orgânicos, organismos do benton, e alimentações artificiais. O objetivo deste estudo foi testar três densidades de estocagem (0,5, 0,75, e 1 larva/litro) e dietas contendo dois níveis diferentes de proteína bruta (35 e 40% PB) nos parâmetros do crescimento e na taxa da sobrevivência do curimbatá, Prochilodus scrofa. As larvas foram estocadas em aquários experimentais de 100 litros, mantidos com volume de 60 litros, com o fluxo de água contínuo, proveniente de poço semi-artesiano. A maior média foi proporcionada pela ração com 40% de PB (1,66g ± 0,21). As diferenças foram significativas para os efeitos dos teores de PB sobre o ganho de peso e densidades de estocagem, na sobrevivência das larvas. Para o ganho de peso, as melhores médias foram obtidas com nível de 40% de PB (2,50g ± 0,40) e para a sobrevivência, as melhores taxas foram 94,45% ± 19,32 e 78,87% ± 19,32 nas densidades de 0,5 e 0,75 larvas/litro, respectivamente.

Sobrevivência de operárias de Atta sexdens rubropilosa Forel (Hymenoptera: Formicidae) isoladas do formigueiro e alimentadas com dietas artificiais

Avaliou-se dietas artificiais, para operárias médias de Atta sexdens rubropilosa Forel isoladas de formigueiros de laboratório e de campo. Os bioensaios foram realizados com 6 formigas/placa de Petri, sendo 10 placas/tratamento, em câmara ambiental a 24 ± 1 °C e UR > 70%. Não houve diferença na sobrevivência entre as operárias de laboratório e de campo, quando tratadas com dieta artificial líquida. Ao se comparar as dietas artificiais líquida e sólida, pode-se constatar que não houve diferença na sobreviência das operárias de laboratório tratadas com as diferentes dietas. A dieta artificial sólida com troca a cada 48 h, até 25 dias, representa uma alternativa para se trabalhar com operárias médias de A. sexdens rubropilosa, isoladas do formigueiro, em bioensaios de laboratório.

Ingestão de ração e comportamento de larvas de pacu em resposta a estímulos químicos e visuais

Este estudo foi realizado com o objetivo de comparar a influência dos estímulos visual e/ou químico de náuplios de Artemia e de dieta microencapsulada sobre a taxa de ingestão da dieta microencapusulada por larvas de pacu Piaractus mesopotamicus. Utilizou-se um esquema fatorial 7 x 4 (estímulos e idades) com duas repetições. Verificou-se efeito da idade das larvas e dos estímulos, mas não houve efeito para a interação idade ´ estímulos. O estímulo químico da Artemia e ambos os estímulos da Artemia resultaram em maior taxa de ingestão de dieta inerte. Resultado intermediário foi obtido com o estímulo visual da dieta microencapsulada. O estímulo químico, em comparação ao estímulo visual da Artemia, resultou em maiores taxas de ingestão da dieta. Com o aumento da idade, houve incremento na taxa de ingestão. Os estímulos visual e químico dos náuplios e o estímulo visual da ração aumentaram a ingestão de dieta inerte por larvas de pacu. Náuplios de Artemia devem ser oferecidos antes do fornecimento da dieta inerte, pois podem auxiliar no processo de transição alimentar. Os resultados deste trabalho apontaram novas possibilidades de estudos com larvas de peixes neotropicais visando a substituição precoce do alimento vivo para o inerte.

Oil-soluble dyes for marking Spodoptera frugiperda (Lepidoptera : Noctuidae)

Although various biological aspects of Spodoptera frugiperda (J.E. Smith) (Lepidoptera: Noctuidae) have been examined, adult movement and dispersal of this insect pest is not well understood. Release-recapture techniques by using marked insects is a useful approach for dispersal studies; however, the marking technique should not significantly affect insect biology or behavior. Therefore, the effect of different concentrations of oil-soluble dyes (Solvent Blue 35 [C.I. 61554], Sudan Red 7B [C.I. 26050], Sudan Black B [26150], Sudan Orange G [C.I. 11920], and Sudan I 103624 [C.I. 12055]) on development, mortality, and fecundity of S. frugiperda was evaluated. Dyes were added to artificial diet used to feed larvae. Larval and pupal development and mortality, adult longevity, and female fecundity were evaluated. High concentrations (400 and 600 ppm) of all dyes led to longer larval and pupal stages. Adult life span and number of eggs were not affected by the dyes. Sudan Red 7B marked both adults and eggs very well. Solvent Blue 35 marked both adults and eggs, but the blue-marked eggs could not be distinguished from some bluish eggs laid by nonlabeled females. Adults and eggs were not adequately marked by the Sudan Black B, Sudan Orange G, and Sudan I 103624 (a yellow dye).

Toxicity of synthetic piperonyl compounds to leaf-cutting ants and their symbiotic fungus

The development of Leucoagaricus gongylophorus, the fungus cultured by the leaf-cutting ant Atta sexdens was inhibited in vitro by synthetic compounds containing the piperonyl group. In addition, worker ants that were fed daily on an artificial diet to which these compounds were added had a higher mortality rate than the controls. The inhibition of the fungal growth increased with the size of the carbon side chain ranging from C1 through C8 and decreasing thereafter. 1-(3,4-Methylenedioxybenzyloxy)octane (compound 5) was the most active compound and inhibited the fungal development by 80% at a concentration of 15 μg m1-1. With worker ants the toxic effects started with compound 5 and increased with the number of carbons in the side chain. Thus, for the same concentration (100 μg m1-1) the mortality rates observed after 8 days of diet ingestion were 82%, 66% and 42%, for 1-(3,4-methylenedioxybenzyloxy)decane, 1-(3,4-methylenedioxybenzyloxy)dodecane and compound 5, respectively, whereas with commercial piperonyl butoxide the mortality was 68%. The latter compound, which is known as a synergist insecticide, was as inhibitory to the symbiotic fungus as the synthetic compound 5. The possibility of controlling these insects in the future using compounds that can target simultaneously both organisms is discussed. © 2001 Society of Chemical Industry.