Metástases intestinais de melanoma

OBJETIVO: O melanoma maligno é a causa mais comum de doença metastática envolvendo o trato gastrointestinal, e o intestino delgado o sítio mais freqüentemente envolvido. Este estudo foi realizado com a finalidade de avaliar o quadro clínico, tratamento, evolução e relatar a experiência com o tratamento cirúrgico do melanoma metastático para intestino delgado. MÉTODO: Foram revisados 11 casos operados no período setembro/1987 a setembro/2000, e estudados os dados referentes ao sexo, idade, localização e estadiamento do tumor primário, tempo e manifestação clínica da metástase intestinal. Também foram avaliados o tipo de cirurgia realizada, a ocorrência de complicações e necessidade de reoperações,a presença de outros sítios metastáticos e sobrevida. RESULTADOS: A média de idade dos pacientes foi de 43,3 anos, sendo 54,5% do sexo masculino. Os membros inferiores foram o sítio primário mais freqüente (54,5%), e em 18,2% dos casos a metástase intestinal foi a primeira manifestação da doença. Dor abdominal (72,7%), obstrução intestinal (36,3%) e massa abdominal (27,2%) foram os sintomas mais comuns. Enterectomia com enteroanastomose foi realizada em 72,7% dos pacientes, em caráter emergencial em mais de 50% dos casos. O tempo de sobrevida variou de 6 dias a 90 meses, e a mortalidade foi de 72,7%. CONCLUSÕES: As metástases intestinais devem ser consideradas em qualquer paciente que apresente sintomas gastrointestinais e uma história prévia de lesão melanocítica de pele, e o tratamento cirúrgico, apesar do caráter paliativo, pode ocasionalmente resultar em sobrevida longa.

Conduta para o melanoma cutâneo

A incidência do melanoma cutâneo vem aumentando significativamente de 1:1500 em 1935 para cerca de 1:75 no ano 2000. Contudo, atribuído a um diagnóstico cada vez mais precoce, têm-se observado uma melhora da sobrevida em cinco anos com diminuição da taxa de mortalidade geral entre 70 a 80% desde a década de 30. É o câncer mais prevalente na faixa etária entre 25 e 35 anos nos EUA. O Brasil ocupa a 15º posição com relação à incidência do tumor no mundo. O estadiamento inicial é baseado na pesquisa de sinais e sintomas que podem indicar doença metastática. Especial atenção deve ser dada à palpação de linfonodos regionais. A espessura e a ulceração são os principais fatores de risco independentes, em pacientes com melanoma primário com linfonodos livres. Já naqueles com metástases linfonodais, a presença de ulceração, de metástase detectada macroscopicamente e o número de linfonodos acometidos, são os principais índices de impacto na sobrevida. Pacientes com metástases para o pulmão possuem melhor prognóstico no primeiro ano de sobrevida em comparação àqueles com metástases para outros órgãos. A dosagem de DHL é fator prognóstico poderoso, sendo incluída no último estadiamento publicado, em pacientes com estádio IV da doença. A pesquisa do linfonodo sentinela já é técnica incorporada à conduta de pacientes com melanoma com reconhecido impacto no estadiamento, prognóstico e programação terapêutica. Devido à falta de padronização para o tratamento do melanoma, muitos pacientes ainda evoluem com um prognóstico reservado devido a uma conduta inicial inadequada. Os tratamentos vêm mudando significativamente e a proposta deste trabalho visa apresentar uma revisão com ênfase nas condutas preconizadas para o melanoma.

Recorrência em pacientes portadores de melanoma cutâneo submetidos a biópsia de linfonodo sentinela: seguimento mediano de 37 meses

OBJETIVO: A biópsia de linfonodo sentinela (BLS) representa um avanço na cirurgia oncológica para o microestadiamento do melanoma. Apresentamos nossa experiência dando ênfase para a recorrência. MÉTODO: A BLS foi realizada em 133 pacientes portadores de melanoma cutâneo localizado envolvendo linfocintilografia, mapeamento linfático e detecção gama intra-operatórios em todos os pacientes. O exame histopatológico foi realizado por HE e imunohistoquímica (IHC). RESULTADOS: Encontrou-se LS em 128 pacientes (96,2%). Micrometástase foi diagnosticada em 20 pacientes (15,6%). Houve nove recorrências, sendo quatro no grupo com LS negativo (108 pacientes). Neste grupo, houve uma recorrência sistêmica e três (2,8%) na região linfática de drenagem (falso negativo). No grupo com LS positivo (20 pacientes) ocorreram cinco recorrências. Houve diferença significativa de recorrência entre os grupos, tendo sido menor no grupo LS negativo (p=0,0048). Através de análise de regressão logística univariada a ulceração (p=0,029) e a positividade do LS (p=0,003) apresentaram significância estatística como fatores de risco. Porém, apenas a positividade do LS manteve singificância na análise multivariada (p=0,024). O seguimento mediano foi de 37 meses. CONCLUSÕES: Pacientes com LS positivo apresentam recorrência significativamente maior que pacientes com LS negativo. O índice de falso negativo foi de 2,8% e os pacientes não apresentaram seqüelas o que permite considerar a BLS como procedimento seguro para o microestadiamento do melanoma cutâneo.

Perfusão isolada de membro com hipertermia na trataento das metástases em trânsito do melanoma cutâneo

OBJETIVO: Avaliar a casuística do Setor de Tumores Cutâneos da Disciplina de Cirurgia Plástica da Escola Paulista de Medicina/ Universidade Federal de São Paulo em relação à Perfusão Isolada de Membro (PIM) para o tratamento das metástases em trânsito do melanoma cutâneo, bem como os resultados conseqüentes, comparando-os com a literatura internacional. MÉTODO: De maio de 1993 a abril de 2007, 41 pacientes portadores de metástases em trânsito do melanoma cutâneo submeteram-se a 44 PIM. Por meio da observação de seus prontuários, foram avaliados quanto à toxicidade regional e sistêmica, e resposta tumoral após a PIM. Após a coleta dos resultados, procedeu-se a comparação com a literatura internacional e as posteriores conclusões. RESULTADOS: Houve 43,2% de respostas completas, 36,4% de respostas parciais e 20,4% sem resposta ao tratamento proposto. A toxicidade regional aguda descrita foi, de modo geral, restrita a edema e eritema discretos, não havendo nenhum caso de complicação sistêmica grave. CONCLUSÃO: Os dados obtidos nessa casuística corroboram os descritos pela literatura internacional, demonstrando a importância e a possibilidade da PIM para o controle locoregional das metástases em trânsito do melanoma cutâneo também na realidade brasileira.

A biópsia de linfonodo sentinela não deve ser recomendada para pacientes portadores de melanoma espesso

OBJETIVO: verificar se há alguma relação entre o estado histopatológico do linfonodo sentinela, a recorrência e a mortalidade decorrente do melanoma espesso em pacientes submetidos à BLS ao longo de um seguimento significante. MÉTODOS: Oitenta e seis pacientes portadores de melanoma espesso submetidos à BLS foram selecionados de um banco de dados prospectivo. A linfocintilografia, o mapeamento linfático e a detecção gama intraoperatória foram realizados em todos pacientes. O linfonodo sentinela (LS) foi analisado por HE e por imunoistoquímica. Linfadenectomia total foi indicada para os pacientes com LS positivo. O estado histopatológico do LS foi relacionado à taxa de recorrência e de mortalidade por melanoma. RESULTADOS: Cento e sessenta e seis LS foram retirados dos 86 pacientes. As idades variaram de 18 a 73 anos. Havia 47 mulheres e 39 homens. Micrometástases foram encontradas em 44 pacientes. Quarenta e dois pacientes foram submetidos à linfadenectomia total. Sete pacientes tiveram outro linfonodo positivo. Entre os 44 pacientes com LS positivo houve 20 recorrências e 15 mortes. Houve 18 recidivas e 12 mortes no grupo de LS negativo. A espessura de Breslow não apresentou correlação com o estado histopatológico do LS. O estado histopatológico do LS não interferiu nas taxas de recorrência e de mortalidade (teste de Fisher, p=1.00). A mediana de seguimento foi 69 meses. CONCLUSÃO: Considerando a falta de evidência de benefício, a BLS não deve ser indicada para pacientes com melanoma espesso fora de estudos clínicos.

Abdome agudo como manifestação inicial de melanoma metastático: relato de caso

The malignant melanoma is a relatively common neoplasia, with origin generally in the melanocytics cells in the skin, but with presentation of other possible primary lesions, being presented in this, a case witnessed of liver and mesentery metastases with unknown primary sites.

Evaluation of outpatient discharge in patients with cutaneous melanoma

OBJECTIVE: to evaluate discharge in a group of patients with cutaneous melanoma according to recently established criteria. METHODS: we conducted an observational, cross-sectional study with 32 patients at the Hospital Universitário Clementino Fraga Filho (HUCFF) / Universidade Federal do Rio de Janeiro (UFRJ), between 1995 and 2013, in the following stages: IA (17 cases, 53.12%), IB (4 cases, 12.5%), IIA (3 cases, 9.37%), IIC (1 case, 3.12%), IIIB (1 case, 3.12%), IIIC (3 cases, 9.37%), melanomas in situ (2 cases, 6.25%), Tx (1 case, 3.12%). RESULTS: the follow-up time varied from one to 20 years (stage IA), five to 15 years (stage IB), six to 17 years (stage IIA), 20 years (stage IIC), 23 years (stage IIIB) and 14 to 18 years (stage IIIC). One melanoma in situ (subungueal) was discharged in the fourth year of follow-up and the other was promptly discharged. The Tx melanoma was followed for 12 years. We observed no relapses or recurrences in the period. CONCLUSION: although a controversial issue, it was possible to endorse the discharge of the patients since our follow-up time had already exceeded the one recommended by the other authors.

Melanoma amelanótico em cães: estudo retrospectivo de 35 casos (2004-2010) e caracterização imuno-histoquímica

Melanomas são tumores agressivos de melanócitos que ocorrem principalmente na cavidade oral, nas junções mucocutâneas e na pele de cães. Este tipo de neoplasma pode apresentar diversos graus de pigmentação melânica, incluindo total ausência (melanomas amelanóticos [MA]). Os arquivos de biópsia do SPV-UFRGS, que compreendem o período de 2004 a 2010, foram revisados e levantados os casos de neoplasias melanocíticas em cães. Realizou-se estudo retrospectivo de 35 casos de MA e caracterização pela imuno-histoquímica (IHQ). As principais raças acometidas foram o Poodle, Dachshund e Cocker Spaniel, mas o maior número de casos foi observado em cães sem raça definida (SRD). A idade média desses cães foi de 10,7 anos (variação de 5 a 18 anos) e não houve predileção por sexo. As principais localizações incluíram cavidade oral (57,1%) e dígitos (17,1%). Histologicamente, 40% dos MA foram classificados como epitelioides, 34,3% como mistos e 25,7% como fusiformes. Na avaliação IHQ, 86,6% dos casos foram positivos para a vimentina, 70% para a proteína S-100 e 56,6% para o melan-A. Os resultados obtidos neste trabalho possibilitam concluir que os cães com MA caracterizavam-se por serem velhos. A forma celular mais observada foi a epitelioide. Devido a pouca diferenciação desses tumores, ressalta-se a importância da realização do painel imuno-histoquímico, sobretudo da proteína S-100, que apresentou melhor marcação que o melan-A.

Kelvin Probe Force Microscopy (KPFM) characterization of lanthanum lutetium oxide high-k dielectric thin films

Lanthanum lutetium oxide (LaLuO3) thin films were investigated considering their perspective application for industrial microelectronics. Scanning probe microscopy (SPM) techniques permitted to visualize the surface topography and study the electric properties. This work compared both the material properties (charge behavior for samples of 6 nm and 25 nm width) and the applied SPM modes. Particularly, Kelvin probe force microscopy (KPFM) was applied to characterize local potential difference with high lateral resolution. Measurements showed the difference in morphology, chargeability and charge dissipation time for both samples. The polarity effect was detected for this material for the first time. Lateral spreading of the charged spots indicate the diffusive mechanism to be predominant in charge dissipation. This allowed to estimate the diffusion coefficient and mobility. Using simple electrostatic model it was found that charge is partly leaking into the interface oxide layer.

Microcracks and Vortices in Superconducting Thin Films

In this work, superconducting YBa₂ Cu₃O_6+x (YBCO) thin films have been studied with the experimental focus on the anisotropy of BaZrO₃ (BZO) doped YBCOthin films and the theoretical focus on modelling flux pinning by numerically solving Ginzburg- Landau equations. Also, the structural properties of undoped YBCO thin films grown on NdGaO₃ (NGO) and MgO substrates were investigated. The thin film samples were made by pulsed laser ablation on single crystal substrates. The structural properties of the thin films were characterized by X-ray diffraction and atomic force microscope measurements. The superconducting properties were investigated with a magnetometer and also with transport measurements in pulsed magnetic field up to 30 T. Flux pinning was modelled by restricting the value of the order parameter inside the columnar pinning sites and then solving the Ginzburg-Landau equations numerically with the restrictions in place. The computations were done with a parallel code on a supercomputer. The YBCO thin films were seen to develop microcracks when grown on NGO or MgO substrates. The microcrack formation was connected to the structure of the YBCO thin films in both cases. Additionally, the microcracks can be avoided by careful optimization of the deposition parameters and the film thickness. The BZO doping of the YBCO thin films was seen to decrease the effective electron mass anisotropy, which was seen by fitting the Blatter scaling to the angle dependence of the upper critical field. The Ginzburg-Landau simulations were able to reproduce the measured magnetic field dependence of the critical current density for BZO doped and undoped YBCO. The simulations showed that in addition to the large density also the large size of the BZO nanorods is a key factor behind the change in the power law behaviour between BZO doped and undoped YBCO. Additionally, the Ginzburg-Landau equations were solved for type I thin films where giant vortices were seen to appear depending on the film thickness. The simulations predicted that singly quantized vortices are stable in type I films up to quite large thicknesses and that the size of the vortices increases with decreasing film thickness, in a way that is similar to the behaviour of the interaction length of Pearl vortices.

Application of cerium oxide thin films grown by atomic layer deposition for soot removal

The objective of the thesis is to study cerium oxide thin films grown by the atomic layer deposition (ALD) for soot removal. Cerium oxide is one of the most important heterogeneous catalysts and can be used in particulate filters and sensors in a diesel exhaust pipe. Its redox/oxidation properties are a key factor in soot oxidation. Thus, the cerium oxide coating can help to keep particulate filters and sensors clean permanently. The literature part of the thesis focuses on the soot removal, introducing the origin and structure of soot, reviewing emissions standards for diesel particulate matter, and presenting methods and catalysts for soot removal. In the experimental part the optimal ALD conditions for cerium oxide were found, the structural properties of cerium oxide thin films were analyzed, and the catalytic activity of the cerium oxide for soot oxidation was investigated. Studying ALD growth conditions of cerium oxide films and determining their critical thickness range are important to maximize the catalytic performance operating at comparatively low temperature. It was found that the cerium oxide film deposited at 300 °C with 2000 ALD cycles had the highest catalytic activity. Although the activity was still moderate and did not decrease the soot oxidation temperature enough for a real-life application. The cerium oxide thin film deposited at 300 °C has a different crystal structure, surface morphology and elemental composition with a higher Ce3+ concentration compared to the films deposited at lower temperatures. The different properties of the cerium oxide thin film deposited at 300 °C increase the catalytic activity most likely due to higher surface area and addition of the oxygen vacancies.

Hyperthermia increases the metastatic potential of murine melanoma

Hyperthermia, either alone or combined with radio-, immuno- or chemotherapy, can control tumor growth, but its effect on metastasis is still controversial. In the present study, we investigated the influence of hyperthermia on the metastatic potential of B16-F10 murine melanoma cells. Incubation of melanoma cells at 43ºC for 30 min led to a significant decrease in cell viability. About half of the cells survived the acute exposure to heat. These thermoresistant cells displayed a longer lag phase as compared to control unheated B16-F10 melanoma cells. Other parameters of cell growth such as doubling time and saturation density were equivalent in both control and thermoresistant cells. Both control and treated cells were adherent, but thermoresistant cells failed to spread during the first 48 h after heat exposure. B16-F10 cells colonize the lungs of C57BL/6J mice when injected intravenously; the number of lung colonies is a measure of the metastatic potential of injected cells. Median values of 22, 10.5 and 31 colonies per injected mouse were observed for control cells, cells heated to 43ºC for 30 min and thermoresistant cells, respectively, with statistically significant differences between groups (Mann-Whitney test, P<0.02). Thus, despite its cytotoxic action, heat exposure induced the acquisition of a more metastatic phenotype in a subpopulation of B16-F10 cells

The role of calcium, calcium-activated K+ channels, and tyrosine/kinase in psoralen-evoked responses in human melanoma cells

8-Methoxy psoralen (8-MOP) exerts a short-term (24 h) mitogenic action, and a long-term (48-72 h) anti-proliferative and melanogenic action on two human melanoma cell lines, SK-Mel 28 and C32TG. An increase of intracellular calcium concentration was observed by spectrofluorometry immediately after the addition of 0.1 mM 8-MOP to both cell lines, previously incubated with calcium probe fluo-3 AM (5 µM). The intracellular Ca2+ chelator BAPTA/AM (1 µM) blocked both early (mitogenic) and late (anti-proliferative and melanogenic) 8-MOP effects on both cell lines, thus revealing the importance of the calcium signal in both short- and long-term 8-MOP-evoked responses. Long-term biological assays with 5 and 10 mM tetraethylammonium chloride (TEA, an inhibitor of Ca2+-dependent K+ channels) did not affect the responses to psoralen; however, in 24-h assays 10 mM TEA blocked the proliferative peak, indicating a modulation of Ca2+-dependent K+ channels by 8-MOP. No alteration of cAMP basal levels or forskolin-stimulated cAMP levels was promoted by 8-MOP in SK-Mel 28 cells, as determined by radioimmunoassay. However, in C32TG cells forskolin-stimulated cAMP levels were further increased in the presence of 8-MOP. In addition, assays with 1 µM protein kinase C and calcium/calmodulin-dependent kinase inhibitors, Ro 31-8220 and KN-93, respectively, excluded the participation of these kinases in the responses evoked by 8-MOP. Western blot with antibodies anti-phosphotyrosine indicated a 92% increase of the phosphorylated state of a 43-kDa band, suggesting that the phosphorylation of this protein is a component of the cascade that leads to the increase of tyrosinase activity.

Biological activity and binding of estradiol to SK-Mel 23 human melanoma cells

Patients expressing estradiol receptors in melanoma cells have been reported to have a better prognosis. We therefore decided to investigate the in vitro effects of ß-estradiol and tamoxifen on the growth and tyrosinase activity of SK-Mel 23 human melanoma cells. Twenty-four-hour treatment with 0.4 nM ß-estradiol inhibited cell proliferation in 30% (0.70 ± 0.03 x 10(5) cells) and increased tyrosinase activity in 50% (7130.5 ± 376.5 cpm/10(5) cells), as compared to untreated cells (1.0 ± 0.05 x 10(5) cells and 4769 ± 25.5 cpm/10(5) cells, respectively). Both responses were completely (100%) blocked by 1 µM tamoxifen. Higher concentrations (up to 1.6 nM) or longer treatments (up to 72 h) did not result in a larger effect of the hormone on proliferation or tyrosinase activity. Competition binding assays demonstrated the presence of binding sites to [2,4,6,7-³H]-ß-estradiol, and that the tritiated analogue was displaced by the unlabeled hormone (1 nM to 100 µM, Kd = 0.14 µM, maximal displacement of 93%) or by 10 µM tamoxifen (displacement of 60%). ß-estradiol also increased the phosphorylated state of two proteins of 16 and 46 kDa, after 4-h treatment, as determined by Western blot. The absorbance of each band was 1.9- and 4-fold the controls, respectively, as determined with Image-Pro Plus software. Shorter incubation periods with ß-estradiol did not enhance phosporylation; after 6-h treatment with the hormone, the two proteins returned to the control phosphorylation levels. The growth inhibition promoted by estradiol may explain the better prognosis of melanoma-bearing women as compared to men, and open new perspectives for drug therapy.

The P48T germline mutation and polymorphism in the CDKN2A gene of patients with melanoma

CDKN2A has been implicated as a melanoma susceptibility gene in some kindreds with a family history of this disease. Mutations in CDKN2A may produce an imbalance between functional p16ink4a and cyclin D causing abnormal cell growth. We searched for germline mutations in this gene in 22 patients with clinical criteria of hereditary cancer (early onset, presence of multiple primary melanoma or 1 or more first- or second-degree relatives affected) by secondary structural content prediction, a mutation scanning method that relies on the propensity for single-strand DNA to take on a three-dimensional structure that is highly sequence dependent, and sequencing the samples with alterations in the electrophoretic mobility. The prevalence of CDKN2A mutation in our study was 4.5% (1/22) and there was a correlation between family history and probability of mutation detection. We found the P48T mutation in 1 patient with 2 melanoma-affected relatives. The patient descends from Italian families and this mutation has been reported previously only in Italian families in two independent studies. This leads us to suggest the presence of a mutational "hotspot" within this gene or a founder mutation. We also detected a high prevalence (59.1%) of polymorphisms, mainly alleles 500 C/G (7/31.8%) or 540 C/T (6/27.3%), in the 3' untranslated region of exon 3. This result reinforces the idea that these rare polymorphic alleles have been significantly associated with the risk of developing melanoma.