Polimorfismo do éxon 1 do gene da lectina ligadora de manose (MBL) em indivíduos expostos à malária causada por Plasmodium vivax

Neste estudo analisamos a freqüência de polimorfismos no éxon 1 do gene 2 da lectina Ligadora de manose (MBL) em indivíduos expostos à malária causada por Plasmodium vivax. Foram analisadas amostras de 81 indivíduos primoinfectados e 250 não infectados. Os indivíduos não infectados constituíram dois grupos, um que relatou nunca ter tido malária e o outro que teve de 1 a 4 ou mais episódios da doença. No grupo infectado, foi investigada a associação entre os polimorfismos e a suscetibilidade à infecção, a intensidade dos sinais e sintomas clínicos e a parasitemia. As mutações foram identificadas por reação em cadeia da polimerase e análise de restrição. O grupo infectado apresentou distribuição de freqüências alélicas e genotípicas diferente do grupo não infectado. As freqüências dos alelos MBL*A, MBL*B, MBL*C e MBL*D nos indivíduos infectados foram 64,20%, 19,75%, 0,00% e 15,43%, nos não infectados que nunca tiveram malária as freqüências foram 72,96%, 14,80%, 3,06% e 9,18%, e nos não infectados que relataram episódio prévio de malária as freqüências foram 74,67%, 14,81%, 2,30% e 8,22%, respectivamente. O alelo MBL*B foi associado à sintomatologia intensa e ao aumento na parasitemia, enquanto o alelo MBL*D foi associado às parasitemias mais baixas. No grupo não infectado, a distribuição das freqüências alélicas e genotípicas variou com o número de episódios e o tempo decorrido após o último episódio de malária. As variantes MBL*B e MBL*D contribuíram para essa variação. Esse foi o primeiro estudo para avaliar o impacto desses polimorfismos do gene da lectina ligadora de manose na resposta imune inata em indivíduos expostos naturalmente à malária causada por Plasmodium vivax.

Polimorfismo da região promotora do gene MBL (Mannose-Binding Lectin) e o seu impacto na infecção pelo Vírus da imunodeficiência humana 1 (HIV-1) e na progressão da SIDA/AIDS

Um emergente interesse à MBL tem surgido, devido a sua importância no sistema imune inato. Recentes estudos relatam uma influência do polimorfismo na região promotora nas regiões -550 (H/L) e -221 (X/Y) do gene MBL, com a deficiência do sistema imune à determinados patógenos. O objetivo do presente estudo é investigar a associação entre o polimorfismo na região promotora do gene MBL e a infecção pelo HIV-1e a progressão à SIDA/AIDS. No estudo foi feita identificação destes alelos em uma população de 127 pacientes soropositivos para HIV-1 e em 97 indivíduos soronegativos, a partir da técnica de SSP-PCR, utilizando-se seqüências de iniciadores específicos para cada variante. A evolução da infecção nos pacientes soropositivos foi avaliada por meio da contagem de linfócito T CD4⁺ e da carga viral plasmática. As distribuições nas freqüências alélicas e haplotípicas entre os grupos de portadores do HIV-1 e nos controles soronegativos não apresentaram diferenças estatisticamente significantes (p>0,05). Entretanto, pacientes soropostivos portadores do haplótipo HY apresentaram uma maior contagem e uma evolução significativa no número de linfócitos T CD4⁺; e uma menor contagem e maior redução da carga viral plasmática, em relação aos pacientes portadores dos haplótipos LY, LX e HX. Os resultados do presente estudo mostram que a presença de haplótipos relacionados a médios e baixos níveis séricos de MBL podem ter um papel direto na forma como o paciente soropositivo evolui laboratorialmente. Desse modo, conclui-se que a caracterização dos haplótipos da região promotora do gene MBL em portadores da infecção pelo HIV-1 pode ser importante na avaliação do prognóstico de evolução da SIDA/AIDS.

Coexistencia de variantes HIV-1 com insercao dipeptidica no gene da transcriptase reversa

O objetivo desta comunicação foi descrever a detecção de coexistência de variantes HIV-1 com inserções de dois aminoácidos entre os códons 69 e 70 da transcriptase reversa. Tais variantes foram isoladas de paciente do sexo masculino, 16 anos de idade, em tratamento no interior do estado de São Paulo. Após confirmação de falha terapêutica, foi realizado teste de resistência a antirretrovirais, a partir do qual foram detectadas duas variantes contendo inserções dos aminoácidos Ser-Gly/Ser-Ala no códon 69 da transcriptase reversa, além da mutação T69S. Tais inserções possuem baixa prevalência, não foram relatadas em caráter de coexistência no Brasil e estão relacionadas com a resistência a múltiplas drogas, tornando o achado relevante do ponto de vista epidemiológico.

Carga viral e genotipagem do vírus de Epstein-Barr (EBV) e análise da frequência das variantes do gene viral BNLF-1 em indivíduos portadores do vírus da imunodeficiência humana (HIV)

Indivíduos imunocomprometidos possuem maior risco de desenvolver linfomas associados ao EBV. A detecção desse vírus em sangue periférico e a determinação de sua carga viral podem ter importância na evolução clínica de indivíduos portadores do HIV. Foram avaliadas 156 amostras de pacientes HIVpositivos pela reação em cadeia da polimerase em tempo real (qPCR) para detecção e quantificação da carga viral do EBV. 123/156 (78,8%) casos apresentaram carga viral detectável para o EBV, sendo que a carga viral média foi de 6,9x10-3 cópias de EBV/célula. Foi detectada elevada carga viral do EBV em indivíduos com falha terapêutica ou sem HAART (p =0,0076), em coinfectados pelos EBVs 1 e 2 (p=0,0205), em pacientes com altas cargas de HIV (rho=0,27614, p=0,0005) e longos períodos de infecção pelo HIV (rho= 0,24164, p =0,0026) e os que apresentavam altos níveis de linfócitos T CD8 + (rho=0,19286, p =0,0159). A amplificação do gene EBNA-2 para realização da tipagem viral foi possível em 95/123 (77,2%) amostras, das quais 72 (75,8%) revelaram infecção pelo EBV-1, 9 (9,5%) pelo EBV-2 e 14 (14,7%) apresentavam coinfecção entre os EBVs 1 e 2. Esses dados estão de acordo com a literatura visto que o tipo 1 é predominante em países ocidentais e 70,0% da coorte era composta por indivíduos caucasianos e heterossexuais. A maioria dos pacientes que apresentaram coinfecção pelos EBVs 1 e 2 tiveram contagem de linfócitos T CD4 + entre 200 e 499 células/μL de sangue segundo classificação CDC (p =0,0272). Quanto a analise do gene BNLF-1, a amplificação foi possível em 99/123 (80,5%). Desses 50/99 (50,5%) apresentavam a deleção de 30pb no gene, enquanto 49/99 (49,5%) não a possuíam. Em conjunto, os resultados obtidos evidenciam deterioração do sistema imunitário, caracterizada...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)

Expressão do gene Glipican 3 (Gpc3) no urotélio da bexiga de ratos expostos ao diuron (3-(3,4-dichlorophenyl)-1,1-dimethylurea) por 7 dias e 20 semanas

Diuron (3-(3,4-dichlorophenyl)-1,1-dimethylurea) is a substituted urea herbicide widely used in crops of sugar cane, cotton and soybeans. In 1997, this agent has been classified by the United States Environmental Protection Agency as known/likely human carcinogen because it induced tumors in the urinary bladder and renal pelvis of rats, and breast and skin of mice exposed to 2500 ppm for feed for two years. A previous study from our group demonstrated dose-response relationship in the gene expression profile associated with severe necrosis on bladder urothelium and increased incidence of simple hyperplasia in male Wistar rats treated with different concentrations of diuron for 20 weeks. To check how early the molecular changes occurs, rats were fed for 7 days with diets containing diuron at 0, 125, 500 or 2500 ppm. The main observations recorded were urothelium ultrastructural alterations and disruptions of molecular pathways associated with cell-cell interaction and the tissue organization maintenance. Particularly, the gene Glypican 3 (Gpc3), a surface proteoglycan related to cellular adhesion and apoptosis induction, was down regulated on urothelium exposed to 2500ppm diuron for 7 days and 20 weeks. The aim of this study was validate by quantitative RT-PCR real time, the reduced Gpc3 gene expression in epithelial cells of the urinary bladder of male Wistar rats treated with different concentrations of diuron for 7 days and 20 weeks. The endogenous control of the quantitative PCR real time technique was the β-actin gene and the target was the gene Gpc3. The relative quantification (RQ) was obtained by the method of relative quantification 2-ΔΔCt . Animals exposed to diuron for 7 days or for 20 weeks presented reduction of Gpc3 gene expression compared to the control group. This reduction was statistically significant only for the 7 days study. Moreover, by comparing animals exposed for 7 days with the exposed for 20 weeks, it was ...

Análise de Alterações Cromossômicas, Mutações no Éxon 1 e do Padrão de Metilação da Região Promotora do Gene FOXO3 em Síndrome Mielodisplásica

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Humoral immune responses against the malaria vaccine candidate antigen Plasmodium vivax AMA-1 and IL-4 gene polymorphisms in individuals living in an endemic area of the Brazilian Amazon

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Influence of sex on basal and dickkopf-1 regulated gene expression in the bovine morula

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Exenatide and sitagliptin decrease interleukin 1β, matrix metalloproteinase 9, and nitric oxide synthase 2 gene expression but does not reduce alveolar bone loss in rats with periodontitis

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Associação entre os polimorfismos do gene BCMO1 (β-caroteno 15,15'-monooxigenase 1) e as concentrações séricas de β-caroteno e retinol em diferentes etnias brasileiras

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

CC chemokine ligand 3 and receptors 1 and 5 gene expression in recurrent aphthous stomatitis

Objective. The aim of this study was to investigate the local and systemic expression of CC-chemokine ligand 3 (CCL3) and its receptors (CCR1 and CCR5) in tissue samples and peripheral blood mononuclear cells of recurrent aphthous stomatitis (RAS) patients. Study Design. This case-control study enrolled 29 patients presenting severe RAS manifestations and 20 non-RAS patients proportionally matched by sex and age. Total RNA was extracted from biopsy specimens and peripheral blood mononuclear cells for quatitative reverse-transcription polymerase chain reaction. The data obtained by relative quantification were evaluated by the 2(-Delta Delta Ct) method, normalized by the expression of an endogenous control, and analyzed by Student t test. Results. The results demonstrated overexpression in RAS tissue samples of all of the chemokines evaluated compared with healthy oral mucosa, whereas the blood samples showed only CCR1 overexpression in RAS patients. Conclusions. These findings suggest that the increased expression of CCL3, CCR1, and CCR5 may influence the immune response in RAS by T(H)1 cytokine polarization. (Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol 2012;114:93-98)

Tax Gene Characterization of Human T-Lymphotropic Virus Type 1 Strains from Brazilian HIV-Coinfected Patients

The tax gene of human T-lymphotropic virus type 1 (HTLV-1) diverges among isolates according to geographic regions and has been classified into two genotypes: taxA and taxB. In Brazil, taxA is the most prevalent genotype in symptomatic and asymptomatic carriers. Few studies have been conducted in HIV-infected patients. The present study characterized the tax gene (1059 bp) in 13 Brazilian HIV-1/HTLV-1-coinfected patients from the south and southeast regions. The results confirmed the transcontinental HTLV-1 subgroup A of the Cosmopolitan subtype and showed high nucleotide similarity both among Brazilian sequences and in relation to the ATK prototype (99.5% and 99.2%, respectively). Six nucleotide substitutions were highly conserved among isolates, ranging from 76.9% to 100%: C7401T, T7914C, C7920T, C7982T, G8231A, and A8367C. The presence of the Brazilian molecular signature of genotype taxA was confirmed in all of the isolates, and they clustered into two Latin American clusters, which confirms the double introduction of HTLV-1 in Brazil.

Association between mannose-binding lectin and interleukin-1 receptor antagonist gene polymorphisms and recurrent vulvovaginal candidiasis

Objective The influence of functional polymorphisms in the genes coding for mannose-binding lectin (MBL) and interleukin-1 receptor antagonist (IL-1ra) on recurrent vulvovaginal candidiasis (RVVC) were examined in an urban Brazilian population. Methods DNA was isolated from buccal swabs of 100 women with RVVC and 100 control women and tested by gene amplification for a single nucleotide polymorphism in codon 54 of the MBL2 gene and for a length polymorphism in intron 2 of the IL1RN gene. Genotype and allele frequencies were compared between groups. Results The frequency of the variant MBL2 B allele, associated with reduced circulating and vaginal MBL concentrations, was 27.0% in RVVC and 8.5% in control women (p < .0001). The MBL2 B, B genotype was present in 12% of RVVC patients and 1% of controls (p = .0025). The IL1RN 2 allele frequency, associated with the highest level of unopposed IL-1 beta activity, was 24.0% in RVVC and 23.4% in controls. The IL1RN genotype distribution was also similar in both groups. Conclusion Carriage of the MBL2 codon 54 polymorphism, but not the IL1RN length polymorphism, predisposes to RVVC in Brazilian women.

Endostatin gene therapy stimulates upregulation of ICAM-1 and VCAM-1 in a metastatic renal cell carcinoma model

One of the greatest challenges in urological oncology is renal cell carcinoma (RCC), which is the third leading cause of death in genitourinary cancers. RCCs are highly vascularized and respond positively to antiangiogenic therapy. Endostatin (ES) is a fragment of collagen XVIII that possesses antiangiogenic activity. In this study, we examined the potential of ES-based antiangiogenic therapy to activate tumor-associated endothelial cells in metastatic RCC (mRCC). Balb/c-bearing Renca cells were treated with NIH/3T3-LendSN or, as a control, with NIH/3T3-LXSN cells. The T-cell subsets and lymphocyte populations of tumors, mediastinal lymph nodes and the spleen were assessed by flow cytometry. The expression of intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) and vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1) was assessed by real-time PCR, flow cytometry and immunohistochemistry analysis. ES gene therapy led to an increase in the percentage of infiltrating CD4-interferon (IFN)-gamma cells (P<0.05), CD8-IFN-gamma cells (P<0.01) and CD49b-tumor necrosis factor-alpha cells (P<0.01). In addition, ES therapy caused an increase at the mRNA level of ICAM-1 (1.4-fold; P<0.01) and VCAM-1 (1.5-fold) (control vs treated group; P<0.001). Through flow cytometry, we found a significant increase in the CD34/ICAM-1 cells (8.1-fold; P<0.001) and CD34/VCAM-1 cells (1.6-fold; P<0.05). ES gene therapy induced a significant increase in both T CD4 and CD8 cells in the lymph nodes and the spleen, suggesting that ES therapy may facilitate cell survival or clonal expansion. CD49b cells were also present in increased quantities in all of these organs. In this study, we demonstrate an antitumor inflammatory effect of ES in an mRCC model, and this effect is mediated by an increase in ICAM-1 and VCAM-1 expression in tumor-associated endothelial cells.