Determinação do perfil fenotípico e genotípico de amostras de Staphylococus aureus resistentes à meticilina (MRSA) e sensíveis a antibióticos não ß-lactâmicos em cinco hospitais no município do Rio de Janeiro

Staphylococcus aureus resistente à meticilina (MRSA) é um dos principais microrganismos envolvidos nas Infecções relacionadas à Assistência à Saúde (IrAS). Porém, um clone de MRSA, o CA-MRSA, emergiu na comunidade e atualmente vem sendo agente de IrAS. O objetivo desta dissertação é avaliar fenotípica e genotipicamente 111 amostras de Staphylococcus aureus resistentes à meticilina e sensíveis a antibióticos não ß-lactâmicos de pacientes atendidos em cinco hospitais no município do Rio de Janeiro. Utilizando os critérios padronizados pelo CLSI 2012, foram determinadas as susceptibilidades a 11 antimicrobianos pelo método de disco difusão em ágar e concentração inibitória mínima para vancomicina e oxacilina pelo método da microdiluição em caldo. A multirresistência (resistência a 3 ou mais antimicrobianos não ß-lactâmicos) foi observada em 31,5% das amostras, sendo que 53,2% apresentaram resistência ao antimicrobiano clindamicina, uma das opções para o tratamento empírico das infecções de pele/tecidos moles. 86,4% apresentaram concentração inibitória mínima (CIM) para vancomicina ≥ 1,0 g/mL ou seja, elevado percentual de amostras associadas ao fenômeno MIC creep, o qual está associado ao insucesso na terapia antimicrobiana anti-MRSA. Não foi observado até o momento nenhuma amostra com CIM ≥ 4cg/mL para vancomicina, entretanto, já há resistência à linezolida em quatro hospitais do estudo. A tipificação do SCCmec nos permitiu classificar 4,5% das amostras em HA-MRSA e 86,5% em CA-MRSA, nas quais a resistência heterogênea típica à oxacilina foi observada em 57,2%. A toxina de Panton-Valentine (PVL) foi identificada pela metodologia de PCR em 28% das amostras com genótipo CA-MRSA. Os fatores de riscos clássicos, da literatura, relacionados à infecção por HA-MRSA foram também observados nos pacientes com infecção por CA-MRSA portadoras de SCCmec IV e V. No intuito de verificar a existência de similaridades genéticas ou a presença de clone predominante entre as amostras dos cinco hospitais, foi realizada a técnica de eletroforese em gel sob campo pulsado (PFGE) e observou-se diversidade genética assim como a presença de amostras com padrões similares aos clones OSPC (18,5%) e USA400. Não foram encontradas amostras com padrões de eletroforese similares aos clones USA300, USA800 e CEB. É essencial a vigilância da resistência aos antimicrobianos não ß-lactâmicos no CA-MRSA, em especial à vancomicina. A mudança na epidemiologia deste microrganismo vem impactando os padrões característicos dos genótipos limitando os critérios de diferenciação entre eles. Neste contexto, as técnicas moleculares atuam como excelentes ferramentas de caracterização. O conhecimento do patógeno auxilia na elaboração e implementação de medidas preventivas, contribuindo para o controle da doença tanto no ambiente hospitalar quanto na comunidade.

A surveillance strategy for invasive species of concern in deepwater habitats of the Northwestern Hawaiian Islands

This report describes a surveillance strategy to detect deepwater invasive species in the Northwestern Hawaiian Islands. A need for this strategy was identified in the Papahānaumokuākea Marine National Monument Management Plan and the Monument’s Draft Natural Resources Science Plan. This strategy focuses on detecting two species of concern, the octocoral Carijoa riisei and the red alga Hypnea musciformis. Most research on invasive species in the Hawaiian archipelago has focused on shallow water habitats within the limits of conventional SCUBA (0-30 m). Deeper habitats such as mesophotic reefs are much more difficult to access and consequently little is known about the distribution of deepwater invasive species or their impacts. Recent deepwater (>30 m) sightings of H. musciformis and C. riisei, in and near NWHI, respectively, have prompted a call for further research and surveillance of invasive species in deepwater habitats. This report compiles the most up to date information about these two species of concern in deepwater habitats. A literature search and conversations with subject matter experts was used to identify their current distribution, preferred habitat types, optimal detection methods and ways to efficiently sample the vast extent of NWHI. The proposed sampling strategy prioritizes survey effort where C. riisei and H. musciformis are most likely to be found. At coarse spatial scales (tens to hundreds of kilometers), opportunistic observations and distance from the Main Hawaiian Islands, a principal propagule source, are used to identify high-risk islands and banks. At fine spatial scales (meters to tens of kilometers) a habitat suitability model was developed to identify high-risk habitats. The habitat suitability model focused on habitat preferences of C. riisei, since the species is well studied and adequate data exists to map habitats. There was insufficient information to identify suitable habitat for H. muscifomis. Habitat preferences for the algae are poorly understood and there is a lack of data at relevant spatial scales to map those preferences which are known. The principal habitats identified by the habitat suitability model were ledges and the edges of rugose coral reefs, where the shade loving octocoral would likely be found. Habitat suitability maps were developed for seven atolls and banks to aid in survey site selection. The protocol relied on technical divers to conduct visual surveys of benthic habitats. It was developed to increase the efficiency of surveys, maximize the probability of detection, identify important information relevant to future surveys and standardize results. The strategy, model and protocol were tested during a field mission in 2009 at several atolls and islands in NWHI. The field mission did not detect any invasive species among deepwater habitats and much was learned to improve future surveys. Data gaps and improvements are discussed.