雄性生殖道局部免疫

：雄性生殖道局部免疫在性传播疾病的防治、免疫不育的防治和免疫避孕方面都具有十分重要的作用。本文 结合作者的研究工作，介绍了雄性泌尿生殖道的结构特征、天然和获得性的抗感染因子、抗精子免疫反应、性激素 对雄性生殖道免疫力的调控作用以及雄性生殖道的获得性免疫应答的激活等方面的研究动态，提出了今后的研究 方向，认为除了深入研究获得性免疫之外，雄性生殖道内天然免疫力的研究，应是十分值得关注的新方向。 39600016) ,云南省应用基础基金(96C097Q ,97C092M) 等资助。

Effects of testosterone undecanoate as a male contraceptive candidate on rat immunological features

Testosterone undecanoate (TU) is under phase III clinical trial as a hormonal male contraceptive in China. Sex hormones can modulate the immune system. Female hormonal contraceptives may affect SIV/HIV-1 transmission. To evaluate the safety of TU and to understand whether long-term use of TU for a male contraceptive affects users' immunological features, adult male rats were treated for a 32-week TU-treated phase at the dose of 20 mg TU/kg body weight and a 24-week recovery phase. The reproductive and immunological parameters of 4-6 rats in each subgroup were examined at the stated time point. The mean sperm count and viability in the treated rats were significantly suppressed (p < 0.01). In the TU-treated group: the mean blood leukocyte and lymphocyte counts; the proliferation indexes of T cells from peripheral blood mononuclear cells (PBMC) and spleen; and, of B cells from spleen, as well as the mean counts of blood T, NK, and B cells decreased in comparison with those of control group. These decreases were not significant (p > 0.01). Similarly, the mean serum IgM, IgG, and IgA levels and complement activity in TU-treated rats were lower than those in control group (p > 0.01), and the changes in the antibody levels of the examined genital secretions were not significant (p > 0.01). The changes in the thickness of urethra epithelium, and in secretory component (SC) expression in genitals were not observed in the treated group. These results demonstrated that long-term supraphysiological TU injection did not obviously affect the examined rat immunological parameters.

In vitro anti-HIV and -HSV activity and safety of sodium rutin sulfate as a microbicide candidate

Sodium rutin sulfate (SRS) is a sulfated rutin modified from the natural flavonol glycoside rutin. Here, we investigated its in vitro anti-HIV and -HSV activities and its cytotoxic profile. Fifty percent inhibitory concentration (IC50) values of SRS against HIV-1 X4 virus IIIB, HIV-1 R5 isolates Ada-M and Ba-L were 2.3 +/- 0.2, 4.5 +/- 2.0 and 8.5 +/- 3.8 mu M with a selectivity index (SI) of 563, 575 and 329, respectively. Its IC50 against primary R5 HIV-1 isolate from Yunnan province in China was 13.1 +/- 5.5 mu M, with a Sl of 197. In contrast, unsulfated rutin had no activity against any of the HIV-1 isolates tested. Further study indicated that SRS blocked viral entry and virus-cell fusion likely through interacting with the HIV- I envelope glycoprotein. SRS also demonstrated some activity against human herpes simplex virus (HSV) with an IC50 of 88.3 +/- 0.1 mu M and a Sl of 30. The 50% cytotoxicity concentration (CC50) of SRS was >3.0 mM, as determined in human genital ME 180, HeLa and primary human foreskin fibroblast cells. Minimum inhibitory concentration of SRS for vaginal lactobacilli was >3.0 mM. These results collectively indicate that SRS represents a novel candidate for anti-HIV-1/HSV microbicide development. (C) 2007 Elsevier B.V. All rights reserved.

KHAWIA SAUROGOBII N. SP (CESTODA: CARYOPHYLLIDEA) FROM FRESHWATER FISH SAUROGOBIO SPP. (CYPRINIDAE) IN CHINA

Khawia saurogobii n. sp. is described from the intestine of the cyprinid fishes Saurogobio dabryi and Saurogobio dumerili in China. The new species belongs to the Lytocestidae and is placed in Khawia because of its afossate scolex, vitelline follicles in the cortical parenchyma, uterus not looping anterior to the cirrus sac, gonopores separate but close together in distinct genital atrium, external seminal vesicle absent, and postovarian follicles present. The new species differs from other congeneric species by the shape of the body markedly tapering posteriorly from the end of the anterior third, the shape of the scolex that is very short and markedly wider than the neck, spatulate without incisions, but shallow superficial grooves, vitelline follicles and testes starting immediately posterior to the scolex, and an ovary with long, posterior arms bent medially, thus giving the shape of an inverted A.

Redescription of Camallanus hypophthalmichthys Dogel and Akhmerov, 1959 (Nematoda : Camallanidae) and its first record from fishes in China

The nematode Camallanus hypophthalmichthys Dogel and Akhmerov, 1959 is redescribed from specimens collected from the intestine of the bighead carp Aristichthys nobilis, from Liangzihu Lake (Yangtze River basin), Hubei Province, central China. The light and scanning electron microscopical examination made it possible to study in detail the morphology of this so far little-known species and to confirm its validity. The main specific features of C. hypophthalmichthys distinguishing it from the most similar Camallanus spp. is the presence of 3 small caudal processes on the male tail tip, 13-16 longitudinal ridges on the inner surface of the valve of the buccal capsule, and the arrangement of preanal and postanal genital papillae in the male. This finding represents a new host record, the first record of this parasite in the Yangtze River basin, and the first documented record of C. hypophthalmichthys from China. Camallanus hypophthalmichthys is considered a specific intestinal parasite of fishes of the cyprinid Hypophthalmichthyinae.

First record of the family Spengeliidae (Hemichordata : Enteropneusta) from Chinese waters, with description of a new species

Six species belonging to two families of Hemichordata have previously been recorded in Chinese waters. This paper records the discovery and description of a new species of the genus Glandiceps found in Jiaozhou Bay, Qingdao, Shandong Province, named Glandiceps qingdaoensis. The new species has a long proboscis with dorsal and ventral grooves, a stomochord with a long vermiform process, a proboscis cavity with a dorsal median, right and left glomeruli, right and left glomeruli very large and encircling the stomochord, a proboscis skeleton in the cavity extends into the median posterior of the collar, a well-developed dorsal ventral muscular septum in the proboscis cavity dividing the cavity completely into two separate parts. The collar cord is without giant nerve roots. The trunk with four distinct regions that can be recognized externally: branchial-genital region, genital region, hepatic region, and intestinal region. The dorsal pharynx is large and the gill pores are small. The tongue bars are encircled by vesicles, and the first gonad commences at the level of the second or third gill slit.

Epidemiologia, patogenia, diagnóstico, prevenção e controle da febre aftosa.

Com um rebanho de aproximadamente 200 milhões de cabeças e na primeira posição mundial em exportações de carnes, a pecuária bovina brasileira destaca-se pela importância estratégica na economia nacional. Considerando os valores expressivos oriundos da atividade do agronegócio, torna-se fundamental a adoção de medidas que contribuam para o melhoramento dos aspectos sanitários na cadeia produtiva. Nesse contexto, salientam-se medidas de vigilância e controle da febre aftosa, pois esta é a principal barreira sanitária imposta pelos países importadores, que podem decretar o embargo de produtos de origem animal. O conhecimento sobre o agente etiológico e o comportamento da doença são imprescindíveis para traçar estratégias de controle e tomada de decisões em casos de surtos, visto que a febre aftosa é uma enfermidade infecciosa viral que apresenta alta capacidade de disseminação e grande impacto, em razão das perdas na produção de carne e leite e das conseqüências políticas, sociais e econômicas associadas. Por meio desta série Documentos procura-se reforçar aos produtores, acadêmicos de ciências agrárias e demais envolvidos na cadeia produtiva agropecuária a importância do controle da febre aftosa nos rebanhos. São descritas a etiologia, epidemiologia e patogenia da doença, bem como as formas de diagnóstico e os aspectos de prevenção e controle.

Genômica e proteômica de Anaplasma marginale: contribuições para o controle da riquétsia.

A anaplasmose bovina é causada pela riquétsia intra-eritrocítica Anaplasma marginale, responsável por importantes prejuízos econômicos, por causa da alta morbidade e mortalidade em rebanhos bovinos suscetíveis. A vacinação tem sido uma forma econômica e eficiente de controlar a enfermidade. No entanto, os métodos de imunização tradicionais apresentam efeitos adversos em algumas categorias de animais. Nas últimas décadas, os estudos sobre imunização contra Anaplasma concentraram-se nas proteínas de superfície MSP1a, 1b, 2, 3, 4 e 5. No entanto, até o momento, os resultados foram pouco promissores, apontando a necessidade de ampliar o conhecimento sobre o rol das proteínas de membrana da riquétsia e das relações estruturais entre elas. Nesse contexto, os estudos do genoma e do proteoma da riquétsia têm contribuído com essa finalidade. Pela análise genômica, 14 genes para novas proteínas de membrana externa foram identificados (omp 1-14), dentre os quais, omp2, 3 e 6 não são transcritos. Esses genes ostraram-se altamente conservados entre isolados da riquétsia. As proteínas OMP4, 7, 10 e 14 foram reconhecidas por soros de bovinos imunizados com membrana de A. marginale, mostrando potencial para desenvolvimento de imunógenos. Além disso, mediante análise proteômica, foi possível detectar novas proteínas de membrana, negligenciadas pela anotação genômica. Dentre elas estão AM097 - conjugal transfer protein, AM956 - PepA citosol amino peptidase, AM254 - fator de elongação Tu e quatro proteínas de função desconhecida: AM127, 197, 387 e 854, as quais também foram reconhecidas por soros de bovinos imunizados com membrana de A. marginale.

ELISA com MSP5 recombinante truncada para detecção de anticorpos contra Anaplasma marginale em bovinos.

Os objetivos buscados pelos autores neste estudo foram produzir e solubilizar a proteína MSP5 recombinante truncada de Anaplasma marginale e avaliar seu desempenho em um ensaio de imunoadsorção enzimática indireto para detecção de anticorpos contra a riquétsia. O gene msp5, exceto a região N-terminal hidrofóbica, foi amplificado por reação em cadeia da polimerase, clonado em plasmídeo pTrcHis-TOPO e expresso em Escherichia coli. A solubilização da proteína recombinante foi avaliada em diferentes pHs e concentrações de uréia. A sensibilidade e a especificidade do ensaio foram avaliados testando-se 66 soros de animais infectados experimentalmente com A. marginale e 96 soros negativos, com o estado de infecção desses animais confirmado por reação em cadeia da polimerase. Um total de 1.666 amostras de soros bovinos, provenientes do Brasil - Rio Grande do Sul (73), Mato Grosso do Sul (91), Pernambuco (86), Bahia (314) e Minas Gerais (267), assim como do Uruguai (32) e Costa Rica (803) foram testadas nos ELISAs com MSP5 truncada e com MSP1a recombinantes, e a concordância entre os dois testes foi avaliada. O ELISA indireto com MSP5 truncada foi capaz de detectar animais infectados com 96,97% de sensibilidade e 100% de especificidade. Nos animais infectados experimentalmente, o ELISA detectou anticorpos do 12o dia após a inoculação (DPI) até o último dia de observação (37o DPI). Os ELISAs para MSP5 e MSP1a apresentaram concordância de 95,67%, com índice kappa de 0,81. Os resultados discordantes apresentaram uma diferença significativa (P < 0,001). Anticorpos contra A. marginale foram detectados em animais de todas asregiões estudadas. O ELISA com MSP5 recombinante truncada apresentou bom desempenho na detecção de anticorpos contra A. marginale, com alta sensibilidade e especificidade, representando uma importante ferramenta para o diagnóstico da anaplasmose bovina em estudos epidemiológicos.

Imunização de bovinos com MSP1a e MSP2 recombinantes de Anaplasma marginale com CpG ODN 2006 como adjuvante, e desafio com isolado heterólogo.

A anaplasmose é uma importante enfermidade de bovinos de áreas tropicais e subtropicais do mundo, causada pela riquétsia intra-eritrocítica Anaplasma marginale. A vacinação tem sido a forma mais econômica e eficiente de controlar a anaplasmose bovina. Nos últimos anos, esses estudos têm se concentrado nas proteínas de membrana da riquétsia, sobretudo MSP1a e MSP2. Este trabalho teve como objetivos avaliar o grau de proteção induzido pelas proteínas de membrana MSP1a e MSP2 recombinantes de A. marginale, associadas com adjuvante CpG ODN 2006, perante desafio heterólogo e avaliar a resposta imune gerada. Novilhos da raça Aberdeen Angus foram imunizados três vezes com 200 ?g de MSP1a e/ou MSP2 recombinantes, associadas com CpG ODN 2006 e alúmen. Posteriormente, foram desafiados com 3 x 107 eritrócitos infectados com isolado heterólogo de A. marginale. Os animais experimentais apresentaram quadro clínico de anaplasmose (redução do volume globular, febre e riquetsemias detectáveis por distensões sangüíneas coradas). Não foram detectadas diferenças significativas entre os grupos imunizados e os controles quanto ao percentual de redução do volume globular, riquetsemias máximas e temperaturas retais máximas, indicando que as imunizações não foram protetoras. A despeito da significativa produção de IgG total contra MSP1a e MSP2, detectada no dia do desafio, os animais imunizados apresentaram produção significativa de IgG2 apenas contra MSP1a. As razões para as possíveis falhas de proteção são discutidas. Neste trabalho, é relatada a imunização de bovinos com MSP1a e MSP2 recombinantes de A. marginale, associadas com alúmen e CpG ODN 2006, e posterior desafio com isolado heterólogo, bem como a avaliação da resposta imune gerada.

Situação atual da resistência do carrapato-do-boi Rhipicephalus (Boophilus) microplus aos acaricidas no Brasil.

Rhipicephalus microplus é o principal ectoparasita hematófago dos bovinos, presente nas diversas regiões do país. É causador de enormes perdas econômicas pela espoliação que causa ao hospedeiro, além de ser transmissor da tristeza parasitária bovina. O principal método de controle utilizado atualmente é o controle químico, mas é crescente o número de relatos que apontam um aumento das populações resistentes de carrapatos a diversos princípios químicos presentes nos acaricidas. As bases moleculares da resistência em R. microplus ainda não são totalmente conhecidas, mas muitos estudos indicam alguns mecanismos associados. O estudo dos mecanismos de resistência no carrapato aos acaricidas é de fundamental importância para a eficiência do seu controle no rebanho bovino. O objetivo deste trabalho é apresentar uma visão geral da resistência dos carrapatos aos acaricidas e a situação atual deste problema no Brasil.

Cancro oral

Projeto de Pós-Graduação/Dissertação apresentado à Universidade Fernando Pessoa como parte dos requisitos para obtenção do grau de Mestre em Medicina Dentária

Inibidores do co-transportador renal de sódio-glicose 2

Projeto de Pós-Graduação/Dissertação apresentado à Universidade Fernando Pessoa como parte dos requisitos para obtenção do grau de Mestre em Ciências Farmacêuticas

Hardening of zona pellucida of mouse oocytes and embryos in vivo and in vitro

Objective - To evaluate the effect of in vitro culture on zona pellucida resistance in mouse oocytes and embryos. Method-Zona pellucida resistance was assessed by comparing duration of zona lysis in the presence of alpha- chymotrypsin. The effects of artificial or physiological conditions of development were evaluated by comparing embryos in vitro with those left to reach the same stage of development in vivo. Results - The time required for zona lysis of oocytes increased after 2, 9.4, and 48 hours in vitro (P < .001). The same observation holds true for oocytes left in vivo during 24 hours. Fertilization both in vivo and in vitro induced a major increase in zona resistance. At the two-cell stage, in vitro culture did not harden the zona pellucida. At the morula stage and beyond, enzymatic lysis was slightly longer in vitro as compared to that of similar stages recovered from the genital tract. Conclusions - Our data indicate that in vitro culture conditions do not modify zona hardening in oocytes and only slightly increased zona resistance from the morula stage on.

Decoding an olfactory mechanism of kin recognition and inbreeding avoidance in a primate.

BACKGROUND: Like other vertebrates, primates recognize their relatives, primarily to minimize inbreeding, but also to facilitate nepotism. Although associative, social learning is typically credited for discrimination of familiar kin, discrimination of unfamiliar kin remains unexplained. As sex-biased dispersal in long-lived species cannot consistently prevent encounters between unfamiliar kin, inbreeding remains a threat and mechanisms to avoid it beg explanation. Using a molecular approach that combined analyses of biochemical and microsatellite markers in 17 female and 19 male ring-tailed lemurs (Lemur catta), we describe odor-gene covariance to establish the feasibility of olfactory-mediated kin recognition. RESULTS: Despite derivation from different genital glands, labial and scrotal secretions shared about 170 of their respective 338 and 203 semiochemicals. In addition, these semiochemicals encoded information about genetic relatedness within and between the sexes. Although the sexes showed opposite seasonal patterns in signal complexity, the odor profiles of related individuals (whether same-sex or mixed-sex dyads) converged most strongly in the competitive breeding season. Thus, a strong, mutual olfactory signal of genetic relatedness appeared specifically when such information would be crucial for preventing inbreeding. That weaker signals of genetic relatedness might exist year round could provide a mechanism to explain nepotism between unfamiliar kin. CONCLUSION: We suggest that signal convergence between the sexes may reflect strong selective pressures on kin recognition, whereas signal convergence within the sexes may arise as its by-product or function independently to prevent competition between unfamiliar relatives. The link between an individual's genome and its olfactory signals could be mediated by biosynthetic pathways producing polymorphic semiochemicals or by carrier proteins modifying the individual bouquet of olfactory cues. In conclusion, we unveil a possible olfactory mechanism of kin recognition that has specific relevance to understanding inbreeding avoidance and nepotistic behavior observed in free-ranging primates, and broader relevance to understanding the mechanisms of vertebrate olfactory communication.