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Resumo:
Nos testes de sanidade, realizados por meio dos mtodos de incubao em papel de filtro e em meio agarizado, a germinao rpida das sementes dificulta a identificao dos fungos e pode comprometer a validade desses mtodos. Para impedir ou reduzir a germinao de sementes de espcies dicotiledneas, o uso de 2,4-D (sal de sdio) tem sido a alternativa disponvel havendo, no entanto, questionamentos sobre este composto por inmeras razes, inclusive o aspecto toxicolgico. Neste trabalho, o objetivo foi estudar a viabilidade do uso da restrio hdrica como recurso para reduzir a germinao das sementes em substituio ao 2,4-D. Foram utilizados os restritores hdricos manitol e Cloreto de sdio, nos potenciais -0,6, -0,8, -1,0 e -1,2 MPa, sendo avaliados seus efeitos sobre a germinao das sementes, comprimento de plntulas e crescimento micelial in vitro dos principais fungos associados a sementes de algodoeiro e seu desenvolvimento sobre as sementes no teste de incubao em papel de filtro. A restrio hdrica proporcionada pelos solutos e potenciais osmticos testados foi capaz de reduzir a germinao e o comprimento das plntulas em nveis considerados satisfatrios para a anlise sanitria de sementes de algodoeiro, alm de no interferir na recuperao dos principais fungos sobre as sementes no teste de papel de filtro, revelando-se desta forma como uma alternativa eficaz em substituio ao uso do 2,4-D. O crescimento micelial dos fungos em meio agarizado foi reduzido nos potenciais osmticos a partir de -0,6 MPa. A recuperao dos fungos fitopatognicos atravs do teste de incubao em papel de filtro no foi afetada pelo mtodo da restrio hdrica.
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Three sensitive spectrophotometric methods are presented for the determination of finasteride in bulk and in tablets. The methods rely on the use of bromate-bromide reagent and three dyes namely, methyl orange, indigocarmine and thymol blue as reagents. They involve the addition of a measured excess of bromate-bromide reagent to finasteride in acid medium, and after the bromination reaction is judged to be complete, the unreacted bromine is determined by reacting with a fixed amount of either methylorange and measuring the absorbance at 520 nm (method A) or indigocarmine and measuring the absorbance at 610 nm (method B) or thymol blue and measuring the absorbance at 550 nm (method C). In all the methods, the amount of insitu generated bromine reacted corresponds to the amount of finasteride. The absorbance measured at the respective wavelength is found increase linearly with the concentration of finasteride. Beer's law is obeyed in the ranges 0.25- 2.0, 0.5-6.0 and 1-12 µg mL-1 for method A, method B and method C, respectively. The calculated molar absorptivity values are 5.7x10(4), 3.12x10(4) and 1.77x10(4) L mol-1 cm-1 respectively, for method A, method B and method C, and the corresponding Sandell sensitivity values are 0.0065, 0.012 and 0.021 µg cm-2. The limits of detection (LOD) and quantification (LOQ) are also reported for all the methods. Accuracy and, intra-day and inter-day precisions of the methods were established according to the current ICH guidelines. The methods were successfully applied to the determination of finasteride in commercially available tablets and the results were found to closely agree with the label claim. The results of the methods were statistically compared with those of a reference method by applying Student's t-test and F-test. The accuracy and reliability of the methods were further confirmed by performing recovery tests via standard addition procedure.
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Two sensitive spectrophotometric methods are described for the determination of lansoprazole (LPZ) in bulk drug and in capsule formulation. The methods are based on the oxidation of lansoprazole by insitu generated bromine followed by determination of unreacted bromine by two different reaction schemes. In one procedure (method A), the residual bromine is treated with excess of iron (II), and the resulting iron (III) is complexed with thiocyanate and measured at 470 nm. The second approach (method B) involves treating the unreacted bromine with a measured excess of iron (II) and remaining iron (II) is complexed with orthophenanthroline at a raised pH, and measured at 510 nm. In both methods, the amount of bromine reacted corresponds to the amount of LPZ. The experimental conditions were optimized. In method A, the absorbance is found to decrease linearly with the concentration of LPZ (r = -0.9986) where as in the method B a linear increase in absorbance occurs (r = 0.9986) The systems obey Beer's law for 0.5-4.0 and 0.5-6.0 µg mL-1 for method A and method B, respectively. The calculated molar absorptivity values are 3.97µ10(4) and 3.07µ10(4) L mol-1cm-1 for method A and method B, respectively, and the corresponding Sandell sensitivity values are 0.0039 and 0.0013 µg cm-2. The limit of detection (LOD) and quantification (LOQ) are also reported for both methods. Intra-day and inter-day precision, and accuracy of the methods were established as per the current ICH guidelines. The methods were successfully applied to the determination of LPZ in capsules and the results tallied well with the label claim and the results were statistically compared with those of a reference method by applying the Student's t-test and F-test. No interference was observed from the concomitant substances normally added to capsules. The accuracy and validity of the methods were further ascertained by performing recovery experiments via standard-addition method.
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The stoichiometry of the polyanions formed by the action of nitric acid on sodium tungstate (< 0.01M) has been studied by means of electrometric techniques involving pH-potentiometric and conductometric titrations. The well defined inflections and breaks in the titration curves provide evidence for the existence of the polyanions, para-W12O41(10-) and meta-W12O39(6-) corresponding to the ratio of H+:WO4(2-) as 7:6 and 9:6 in the pH ranges 5.7-6.0 and 3.6-4.1, respectively. The interaction of lanthanum nitrate with sodium tungstate solutions, at specific pH levels 8.0, 5.9 and 4.0 was also studied by pH and conductometric titrations, in aqueous and alcoholic media, with each of the reagents alternatively used as titrant. The electrometric experiments provide definite evidence of the formation of normal-La2O3.3WO3, para-5La2O3.36WO3 and meta-La2O3.12WO3 tungstates in the vicinity of pH 6.3, 5.0 and 4.2, respectively. Analytical investigations on the precipitates formed confirm the results of the electrometric study.
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Trinta e seis (36) cultivares de milho foram avaliadas em relao incidncia de gros ardidos, mofados e produo de fumonisina B1. Amostras de 1,2 kg de gros foram analisadas visualmente para a quantificao de gros ardidos (Fusarium subglutinans), mofados (Penicillium oxalicum) e para a anlise de fumonisina B1. Os gros ardidos foram submetidos anlise de sanidade (papel de filtro com congelamento) visando identificar os fungos a eles associados. A cultivar Hat 3052 apresentou 7,6% de gros ardidos, ultrapassando o limite de tolerncia que de 6,0%. As cultivares AG 5011, HT 7105-3, Dina 1000 e C 701 apresentaram 16,8% , 3,4%, 3,2% e 3,1% de gros mofados, respectivamente, acima do limite de tolerncia que de 3,0%. O fungo Fusarium subglutinans (Gibberella fujikuroi var. subglutinans) foi o causador de gros ardidos, cuja deteco variou de 50,0 a 99,0%. A anlise de varincia mostrou diferenas significativas entre as cultivares com relao s incidncias de gros ardidos e de gros mofados. Com relao produo de fumonisina B1, as cultivares Hat 3052, NB 6077 e 983 P produziram 7,0; 6,1 e 5,9 g.g-1 de gros, respectivamente, diferindo significativamente da cultivar P3071 (2,2 g.g-1 de gros). Conclui-se que h diferenas significativas entre as cultivares de milho em relao produo de gros ardidos e mofados, bem como acentuada interao entre as cultivares e o fungo toxignico Fusarium subglutinans (Gibberella fujikuroi var. subglutinans) quanto biossntese de fumonisina B1 em gros de milho.
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Rosellinia necatrix Prill induz a podrido branca da raiz da macieira, doena que causa severa perda em pomares localizados no sul do Brasil. O manejo da doena principalmente preventivo e inclui o uso de porta-enxertos resistentes e a fumigao do solo. A proteo das mudas de macieiras antes do plantio com um isolado antagonista de Pantoea agglomerans foi recentemente proposto para reduzir a incidncia da doena. Os objetivos desta pesquisa foram caracterizar o relacionamento entre o patgeno e a bactria antagonista; a produo de metablitos biolgicamente ativos pelo isolado bacteriano e a sua ao sobre o patgeno; o efeito do pH, da temperatura e de carboxi-metil-celulose (CMC) sobre o crescimento do antagonista e do patgeno, isolados ou no e no controle da doena. Os resultados demonstraram que o crescimento de P. agglomerans foi maior em pH 5,5 e 6,0 e nas temperaturas de 20 C e 30 C. O crescimento micelial de R. necatrix foi inibido em meio de cultura e previamente colonizado pelo antagonista e com CMC nas concentraes de 0,25 e 0,5 %. A proteo das macieiras da infeco por R. necatrix foi observada quando utilizadas as concentraes de 10(7); 10(8) e 10(9) cel/mL e nas diferentes concentraes de CMC. Maior desenvolvimento radicular das macieiras foi constatado em todas as concentraes de CMC quando usada a concentrao de 10(9) cel/mL. A formulao de P. agglomerans com CMC tornar possvel a incorporao desta estratgia de controle ao manejo integrado da podrido branca das razes da macieira no Sul do Brasil.
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As condies de crescimento e os requerimentos nutricionais de Arthrobotrys oligospora, um fungo nematfago, foram investigados em meio lquido. O organismo foi incubado em meio sinttico, a 30 C e em cultura estacionria. O perfil da curva de crescimento do fungo ajustou-se a uma equao de 3 grau, mesmo aps 15 dias de incubao. A temperatura e o pH timos para produo de miclio foram observados a 25 C e pH 5,0, respectivamente. Contudo, no foram observadas diferenas significativas entre a produo de biomassa nas temperaturas de 25 C e 30 C ou pH 5.0 e 6.0. Vrias fontes de carbono foram utilizadas pelo fungo, porm a maior produo de biomassa foi verificada com maltose e sacarose. Das fontes de nitrognio testadas, vrias protenas (triptona, extrato de levedura, casena, peptona e casaminocidos) e fontes inorgnicas (nitrato de sdio e cloreto de amnio) estimularam a maior produo de biomassa. Das vrias vitaminas experimentadas, o crescimento do fungo aumentou 2,2 vezes com riboflavina e 2,3 vezes com a mistura biotina e tiamina em relao ao controle, sem vitamina. De modo geral, constatou-se, aps o perodo de incubao, que o pH inicial do meio de cultura pode aumentar at 8,4. Estes resultados sugerem que as variveis estudadas podem ter papel importante no crescimento do organismo no solo.
Efeito de leos essenciais como alternativa no controle de Colletotrichum gloeosporioides, em pimenta
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Fungos do gnero Colletotrichum causam doenas conhecidas como antracnose. Mtodos alternativos que sejam eficientes e menos agressivos vm sendo amplamente testados. Dentre estes, surge o interesse pela utilizao de leos essenciais extrados de vegetais. O presente trabalho teve como objetivo avaliar o efeito de leos essenciais de eucalipto, copaba, andiroba, babau, coco, neem, semente de uva, amndoa, hortel e pau rosa, em diferentes concentraes sobre o fungo Colletotrichum gloeosporioides, in vitro e em frutos de pimenta em ps colheita. O experimento in vitro foi realizado utilizando-se cinco concentraes (0,2; 0,4; 0,6; 0,8 e 1,0%) dos dez leos misturados ao meio de cultura BDA. As variveis analisadas foram a taxa de crescimento micelial e o ndice de velocidade de crescimento micelial (IVCM). O ensaio em ps-colheita foi feito com imerso dos frutos de pimenta por 5 minutos, nos mesmos leos utilizados no experimento anterior, usando-se a maior concentrao. O fungo C. gloeosporioides foi inoculado, atravs de ferimento, logo aps a imerso dos frutos. As avaliaes foram realizadas diariamente atravs de medio do dimetro das colnias e das leses, tomando-se duas medies em sentidos diametralmente opostos. Pode-se observar que no experimento in vitro todos os leos, com exceo dos leos de babau, semente de uva e amndoa, tiveram excelentes resultados inibindo o crescimento do fungo. No resultado obtido em ps-colheita foi observado que apenas o leo de babau no foi eficiente em reduzir o desenvolvimento da leso de antracnose. Dados relevantes foram observados para os leos de semente de uva e amndoa, que no apresentaram efeito direto sobre o fungo in vitro, porm no tratamento ps-colheita apresentaram bons resultados, reduzindo a leso causada por C. gloeosporioides, sugerindo assim que estes leos possam ser utilizados como indutores de resistncia em frutos de pimenta com antracnose.
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Avaliou-se a patogenicidade do isolado IBCB 473 de Verticillium lecanii no pulgo-do-pinus Cinara atlantica (Hemiptera, Aphididae), inseto-praga em plantios de Pinus spp. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado, com cinco repeties por tratamento e cada repetio constituda de uma placa de Petri (9 cm de dimetro) contendo 10 ninfas. Foram testadas suspenses de inculo nas concentraes de 1,0 ' 10(6); 0,5 ' 10(7); 1,0 ' 10(7); 0,5 ' 10(8); e 1,0 ' 10(8) condios/mL, pulverizando-se 1 mL sobre as ninfas. Como tratamento-testemunha, utilizou-se gua esterilizada. As placas de Petri foram mantidas em cmara climatizada a 25 ± 1 °C, 70 ± 10% de UR e fotofase de 12 horas. As avaliaes foram realizadas diariamente, anotando-se a mortalidade dos indivduos de cada tratamento. A dose mais eficiente foi de 1,0 x 10(8) condios/mL, causando mortalidade de 86,0% aps cinco dias da pulverizao. Os valores de TL50 das concentraes utilizadas foram de 5,82; 5,24; 4,60; 4,34; e 3,83 dias, respectivamente.
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Sementes de Caesalpinia peltophoroides (Leguminosae Caesalpinioideae) - sibipiruna - foram colocadas para embebio por 144 h, sendo retiradas amostras para anlise de protena, quantificaes da atividade de alfagalactosidase e de acares presentes na micrpila. A germinao iniciou-se com 96 h de embebio, sem que fossem detectadas modificaes na parede celular da micrpila. Nesta, observou-se maior proporo de arabinose, que mostrou tendncia de aumento com o decorrer da embebio. A atividade especfica da alfagalactosidase foi detectada em sementes secas, tanto no eixo embrionrio quanto nos cotildones, aumentando no primeiro a partir de 24 h de embebio. O aumento da atividade nos cotildones foi mais lento, sendo mais acentuado a partir de 120 h de embebio. O teor de protena decresceu continuamente no eixo embrionrio a partir de 24 horas de embebio, enquanto se manteve estvel nos cotildones. A atividade da alfagalactosidase foi mxima nas temperaturas de 55 e 50 C para o eixo embrionrio e para os cotildones, respectivamente. O pH que mais estimulou a atividade da enzima foi na faixa de 5,5 a 6,0 para o eixo embrionrio e na de 4,5 a 5,0 para os cotildones. As alfagalactosidase do eixo embrionrio e dos cotildones foram inibidas por SDS, CuSO4, galactose e melibiose. No houve efeito estimulante sobre a atividade da alfagalactosidase do eixo embrionrio por nenhum dos efetores, enquanto o mercaptoetanol estimulou a atividade da enzima dos cotildones. Os K M para o substrato ro-NPGal para a alfagalactosidase do eixo embrionrio e dos cotildones foram de 1,74 e 2,64 mM, respectivamente.
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Azadirachta indica A. Juss, popularmente conhecido como nim, uma espcie arbrea que se destaca por possuir substncias de ao inseticida, fungicida, bactericida e nematicida. Sementes de nim foram inoculadas em meio de cultura WPM (Wood Plant Medium) contendo diferentes concentraes de cido giberlico (GA3) (0; 3,0; 6,0; 9,0; e 12,0 mg L-1). Aps 30 dias, cotildones obtidos a partir de plntulas germinadas in vitro foram inoculados em meio WPM suplementado com cido 2,4-diclorofenoxiactico (2,4-D) (0,0; 1,0; 2,0; e 3,0 mg L-1) e, ou, 6-benzilaminopurina (BAP) (0,0; 1,0; 2,0; e 3,0 mg L-1). As culturas foram incubadas no escuro, a 28 C. Os calos formados foram avaliados com base na sua colorao e textura, e trs subcultivos foram realizados mensalmente em meio WPM contendo 2,0 mg L-1 BAP, na presena de luz. A cada 30 dias, avaliou-se o nmero de brotos formados a partir dos calos subcultivados. Entre os meios testados, o mais apropriado para germinao in vitro de nim foi o WPM na ausncia de GA3. Explantes cotiledonares cultivados em WPM suplementado com 2,0 mg L-1 de BAP promoveram a maior formao de calos com potencial morfognico. Quando esses calos foram transferidos para meio de composio similar, obteve-se alta formao de brotaes at o terceiro subcultivo.
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O objetivo desta pesquisa foi avaliar o efeito da aclimatao sobre a tolerncia ao frio de mudas de Eucalyptus dunnii Maiden (clone K-1007) e a relao entre a tolerncia ao frio e as concentraes foliares de carboidratos solveis totais e de prolina. O delineamento experimental utilizado foi de blocos ao acaso com quatro repeties. Os tratamentos consistiram de diferentes perodos de aclimatao (0, 7, 21 e 42 dias de exposio s plantas a temperaturas diurnas de 5 C e noturnas de 1 C). Aps cada perodo de aclimatao, as mudas foram submetidas a quatro gradientes de temperatura negativas (-2 C, -4 C, -6 C e -8 C), por 3 h cada gradiente. Aps cada perodo de aclimatao, foram avaliadas as concentraes foliares de carboidratos solveis totais e prolina. Aps cada gradiente de temperatura negativa, foram coletadas amostras foliares para a avaliao da temperatura letal de 50% (TL50). Os dados foram submetidos anlise de regresso linear e teste de correlao de Pearson. As mudas de E. dunnii apresentaram aumento nos teores de carboidratos solveis at 28 dias de aclimatao; aps esse perodo, as concentraes permaneceram estveis. Observou-se correlao negativa entre a temperatura letal de 50% (TL50) e a concentrao de carboidratos solveis totais no tecido foliar. Dessa forma, observou-se aumento na tolerncia ao frio com o aumento dos teores de carboidratos solveis no perodo de aclimatao de at 28 dias.
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The objectives of this work were to analyze seed behaviour under controlled deterioration and estimate viability equations for forest species Eucalyptus grandis and Pinus taeda. Desired moisture content levels were achieved from initial values after either rehydration over water or drying over silica gel, both at 25 C. Seed sub samples with 8 moisture contents each for E. grandis (1.2 to 18.1%, initial value of 11.3%) and P. taeda (1.5 to 19.5%, initial value of 12.9%) were sealed in laminate aluminium-foil packets and stored in incubators maintained at 40, 50 and 65 C. The seeds from these species exhibited true orthodox and sub-orthodox storage behaviour, respectively, however E. grandis showed higher seed storability, probably due to a different seed chemical composition. Lowest moisture content limits estimated for application of the viability equations at 65 C were 4.9 and 4.1 mc for E. grandis and P. taeda, on equilibrium with 20% RH. The viability equation estimated quantified the response of seed longevity to storage environment well with K E = 9.661 and 8.838; C W = 6.467 and 5.981; C H = 0.03498 and 0.10340; C Q = 0.0002330 and 0.0005476, for E. grandis and P. taeda, respectively.
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Objetivou-se avaliar os efeitos da classe diamtrica e das umidades geral e do alburno sobre a reteno de CCA-C (arseniato de cobre cromatado tipo C) na madeira de clone de Eucalyptus urophylla preservada em autoclave. Foram utilizados 36 moires pertencentes s classes diamtricas de 7, 9, 11 e 13 cm, que foram separados e expostos a trs tempos de secagem ao ar livre: 20, 40 e 70 dias. Determinaram-se os valores de umidade pr-tratamento, geral e apenas do alburno, por classe diamtrica e por tempo de secagem. Aps a preservao em autoclave, foi feito o controle de qualidade do tratamento preservativo, por meio da anlise de reteno do CCA-C. A reteno nos moires da classe de 7 cm foi superior das classes de 9, 11 e 13 cm, que no variaram estatisticamente entre si. O aumento do tempo de secagem de 20 para 40 dias proporcionou incremento significativo na reteno mdia de 5,70 para 6,67 kg I.A*m-3. As variaes mdias das umidades geral e do alburno se mostraram significativas com a variao da reteno, apresentando boa correlao entre os fatores. A correlao entre a umidade geral e a reteno de CCA-C (r = -0,86) foi mais forte que a correlao entre a umidade do alburno e a reteno (r = -0,70).
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Desenvolveu-se um programa computacional que permite a aplicao da metodologia para gerao de sries sintticas de precipitao desenvolvida por OLIVEIRA (2003). O desenvolvimento do aplicativo foi viabilizado pela elaborao de um algoritmo computacional em ambiente de programao "Borland Delphi 6.0". Os dados de entrada necessrios so provenientes de banco de dados no formato padronizado pela Agncia Nacional de guas (ANA) com registros pluviomtricos dirios provenientes de estaes meteorolgicas. A partir dessas informaes, o programa computacional capaz de gerar sries sintticas de precipitao diria contendo o total precipitado em milmetros, a durao do evento em horas, o tempo padronizado de ocorrncia da intensidade mxima instantnea e a intensidade mxima instantnea padronizada. A srie sinttica gerada armazenada em arquivos no formato "Texto" que podem ser acessados posteriormente por outros aplicativos e/ou planilhas eletrnicas. Alm dos arquivos, so apresentadas vrias informaes na forma de grficos e quadros, facilitando a avaliao do desempenho da metodologia desenvolvida.
