Identification of residues and domains of Raf important for function in vivo and in vitro

Random mutagenesis and genetic screens for impaired Raf function in Caenorhabditis elegans were used to identify six loss-of-function alleles of lin-45 raf that result in a substitution of a single amino acid. The mutations were classified as weak, intermediate, and strong based on phenotypic severity. We engineered these mutations into the homologous residues of vertebrate Raf-1 and analyzed the mutant proteins for their underlying biochemical defects. Surprisingly, phenotype strength did not correlate with the catalytic activity of the mutant proteins. Amino acid substitutions Val-589 and Ser-619 severely compromised Raf kinase activity, yet these mutants displayed weak phenotypes in the genetic screen. Interestingly, this is because these mutant Raf proteins efficiently activate the MAPK (mitogen-activated protein kinase) cascade in living cells, a result that may inform the analysis of knockout mice. Equally intriguing was the observation that mutant proteins with non-functional Ras-binding domains, and thereby deficient in Ras-mediated membrane recruitment, displayed only intermediate strength phenotypes. This confirms that secondary mechanisms exist to couple Ras to Raf in vivo. The strongest phenotype in the genetic screens was displayed by a S508N mutation that again did not correlate with a significant loss of kinase activity or membrane recruitment by oncogenic Ras in biochemical assays. Ser-508 lies within the Raf-1 activation loop, and mutation of this residue in Raf-1 and the equivalent Ser-615 in B-Raf revealed that this residue regulates Raf binding to MEK. Further characterization revealed that in response to activation by epidermal growth factor, the Raf-S508N mutant protein displayed both reduced catalytic activity and aberrant activation kinetics: characteristics that may explain the C. elegans phenotype.

gl(2 vertical bar 2) current superalgebra and non-unitary conformal field theory

Motivated by application of current superalgebras in the study of disordered systems such as the random XY and Dirac models, we investigate gl(2\2) current superalgebra at general level k. We construct its free field representation and corresponding Sugawara energy-momentum tensor in the non-standard basis. Three screen currents of the first kind are also presented. (C) 2003 Elsevier B.V. All rights reserved.

An energy-based model for swing hammer mills

An energy-based swing hammer mill model has been developed for coke oven feed preparation. it comprises a mechanistic power model to determine the dynamic internal recirculation and a perfect mixing mill model with a dual-classification function to mimic the operations of crusher and screen. The model parameters were calibrated using a pilot-scale swing hammer mill at various operating conditions. The effects of the underscreen configurations and the feed sizes on hammer mill operations were demonstrated through the fitted model parameters. Relationships between the model parameters and the machine configurations were established. The model was validated using the independent experimental data of single lithotype coal tests with the same BJD pilot-scale hammer mill and full operation audit data of an industrial hammer mill. The outcome of the energy-based swing hammer mill model is the capability to simulate the impact of changing blends of coal or mill configurations and operating conditions on product size distribution. Alternatively, the model can be used to select the machine settings required to achieve a desired product. (C) 2003 Elsevier Science B.V. All rights reserved.

Media Convergence's Third Wave Content Streaming

Movies, pieces of music, books, or newspapers can all be expressed in the same binary code. Discrete forms of analogue media are just different dialects of the language of computerese. Content is becoming a very liquid asset. To take Marshall McLuhan's famed dictum a step further: The message is now independent of the medium

Vps20p and Vta1p interact with Vps4p and function in multivesicular body sorting and endosomal transport in Saccharomyces cerevisiae

Vps4p (End13p) is an AAA-family ATPase that functions in membrane transport through endosomes, sorting of soluble vacuolar proteins to the vacuole, and multivesicular body (MVB) sorting of membrane proteins to the vacuole lumen. In a yeast two-hybrid screen with Vps4p as bait we isolated VPS20 (YMR077c) and the novel open reading frame YLA181c, for which the name VTA1 has recently been assigned (Saccharomyces Genome Database). Vps4p directly binds Vps20p and Vta1p in vitro and binding is not dependent on ATP-conversely, Vps4p binding to Vps20p is partially sensitive to ATP hydrolysis. Both ATP binding [Vps4p-(K179A)] and ATP hydrolysis [Vps4p-(E233Q)] mutant proteins exhibit enhanced binding to Vps20p and Vta1p in vitro. The Vps4p-Vps20p interaction involves the coiled-coil domain of each protein, whereas the Vps4p-Vta1p interaction involves the (non-coiled-coil) C-terminus of each protein. Deletion of either VPS20 (vps20Delta) or VTA1 (vta1Delta) leads to similar class E Vps(-) phenotypes resembling those of vps4Delta, including carboxypeptidase Y (CPY) secretion, a block in ubiquitin-dependent MVB sorting, and a delay in both post-internalisation endocytic transport and biosynthetic transport to the vacuole. The vacuole resident membrane protein Sna3p (whose MVB sorting is ubiquitin-independent) does not appear to exit the class E compartment or reach the vacuole in cells lacking Vps20p, Vta1p or Vps4p, in contrast to other proteins whose delivery to the vacuole is only delayed. We propose that Vps20p and Vta1p regulate Vps4p function in vivo.

Actively shielded multi-layer gradient coil designs with improved cooling properties

In standard cylindrical gradient coils consisting of a single layer of wires, a limiting factor in achieving very large magnetic field gradients is the rapid increase in coil resistance with efficiency. This is a particular problem in small-bore scanners, such as those used for MR microscopy. By adopting a multi-layer design in which the coil wires are allowed to spread out into multiple layers wound at increasing radii, a more favourable scaling of resistance with efficiency is achieved, thus allowing the design of more powerful gradient coils with acceptable resistance values. Previously this approach has been applied to the design of unshielded, longitudinal, and transverse gradient coils. Here, the multi-layer approach has been extended to allow the design of actively shielded multi-layer gradient coils, and also to produce coils exhibiting enhanced cooling characteristics. An iterative approach to modelling the steady-state temperature distribution within the coil has also been developed. Results indicate that a good level of screening can be achieved in multi-layer coils, that small versions of such coils can yield higher efficiencies at fixed resistance than conventional two-layer (primary and screen) coils, and that performance improves as the number of layers of increases. Simulations show that by optimising multi-layer coils for cooling it is possible to achieve significantly higher gradient strengths at a fixed maximum operating temperature. A four-layer coil of 8 mm inner diameter has been constructed and used to test the steady-state temperature model. (C) 2003 Elsevier Inc. All rights reserved.

Normal values for pelvic organ descent in health nulligravid young caucasian women

Translabial ultrasound is increasingly being used for the assessment of women presenting with pelvic floor dysfunction and incontinence (1,2). However, there is little information on normal values for bladder neck descent, with the two available studies disagreeing widely (3,4). No data has so far been published on mobility of the central and posterior compartment which can now also be assessed by ultrasound (5). This study presents normal values for urethral, bladder, cervical and rectal mobility in a cohort of young, stress continent, nulliparous nonpregnant women. Methods 118 nonpregnant nulliparous Caucasian women between 18 and 23 years of age were recruited for an ongoing twin study of pelvic floor function. Translabial ultrasound assessment of pelvic organ mobility was undertaken supine and after bladder emptying (6,7). The best of at least three effective Valsalva manoeuvres was used for evaluation, with no attempts at standardization of Valsalva pressure. Parameters of anterior compartment mobility were obtained by the use of on-screen calipers; cervical and rectal descent were evaluated on printouts. All examinations were carried out under direct supervision of the first author or by personnel trained by him for at least 100 consecutive assessments. Results The median age of participants in this study was 20 (range 18- 23). Mean body mass index was 23 (range 16.9- 36.7). Of 118 women, 2 were completely unable to perform a Valsalva manoeuvre despite repeated efforts at teaching and were excluded from analysis, as were ten women who complained of urinary stress incontinence, leaving 106 datasets. Average measurements for the parameters ‘retrovesical angle at rest’ (RVA-R) and on Valsalva (RVA-S), urethral rotation, bladder neck mobility, cysto-cele descent, cervical descent and descent of the rectal ampulla are given in Table 1.

Alterações microclimáticas causadas pelo uso de tela plástica

Com o objetivo de caracterizar as alterações microclimáticas provocadas pelo uso de tela plástica na agricultura, foi desenvolvido um experimento com alface, em área de cultivo agrícola, em Alegre - ES (latitude 20º45 S, longitude 41º28 W e altitude 150 m), no período de setembro a dezembro de 1996. Foram utilizados sombreamentos de 0; 30; 50, e 70%, segundo especificação comercial. Os resultados mostraram que a tela com especificação comercial de 50% de sombreamento provocou uma atenuação média de 41% na radiação solar global, ocorrendo, no entanto, uma flutuação significativa ao longo do dia em função do movimento aparente do sol. A cobertura com a tela plástica não provocou alterações significativas da temperatura e umidade relativa do ar. Em relação à temperatura do solo, foi possível verificar uma atenuação com o aumento do sombreamento.

Pensando o currículo com as crianças: ou sobre aprendizagens inventivas na educação infantil

Ninguém consegue sair ileso de um encontro com o currículo e com a escola, principalmente diante de relações tão assimétricas de poder que não valorizam o que as crianças têm a dizer. Quantas narrativas curriculares sobre as crianças? Quantas narrativas curriculares com as crianças? As narrativas e as fotografias se seguirão nesta pesquisa, porque com elas nos colocamos a pensar nos processos de criação curricular, explorando novas sensibilidades, novas maneiras de ver e falar, a partir das redes de sentidos, forjadas nos contextos vividos, imaginados ou pensados, dentrofora da escola. Também incluímos a forma como as crianças se relacionam com as práticas pedagógicas dos professores e do modo como se relacionam com a escola. Nessa perspectiva, interessa-nos pensar em como os usos (CERTEAU, 1994) da imagem fotográfica são capazes de afetar (e até transformar) as práticas curriculares, traçando algo da potência da/na imagem fotográfica em sua função fabuladora por meio das oficinas de fotografias realizadas com as crianças em virtude da pesquisa. A fotografia se torna potente como um recurso para provocar a invenção tessitura de outros sentidos em currículo não porque em sua materialidade ela está repleta de sentidos de currículo à priori, mas porque pode ou não, ao ser usada (CERTEAU, 1994), ao ser vista pelas crianças, agenciar outros possíveis para o currículo. Assim, o foco da discussão não é a fotografia em si nem a criança em si, ou seja, não há protagonismo nem da criança nem da fotografia. O foco está nas relações, naquilo que nos passa, isto é, na experiência estética (LARROSA, 2004b) que ocorre ao entrarmos em contato, ao vermos, ao compormos com as fotografias! Nesse sentido, pensamos as oficinas de fotografias como um dispositivo de criação e produção de acontecimentos em currículo, considerando-as máquinas de fazer “ver e falar”, o que as justifica como uma estratégia narrativa capaz de produzir acontecimentos na imagem e no mundo. Que sentidos de currículo são produzidos em multiplicidades? Pelas minoridades pretendemos movimentar nosso pensamento: que quer pensar um currículo como fabulação sem dizer o que ele é, mas no que ele vai se transformando com a chegada das crianças. No encontro das imagens com as palavras, em que o currículo vai se transformando? Sob a mesma superfície chamada currículo em extensão com as crianças, co-habitantes, encontrar os modos de olhar esse currículo e de dizê-lo por meio das fotografias, das narrativas, dos cartazes, dos desenhos, das poesias... As conversas com as crianças provocam o real, colocam em desequilíbrio algumas ideias feitas em educação, exigindo reordenações e invenções de outros pensamentos para a educação. É dessa criação de efeitos impensáveis que surge a invenção de currículos possíveis. Aprender a olhar mais (até cansar!) aquilo que não percebemos no dia a dia tem uma dimensão política muito importante; por meio desse gesto (que aprendemos com as crianças) podemos criar um novo pensamento político em educação. A partir daquilo que nos dá a ver, as crianças vão inaugurar sentidos impertinentes, desestabilizadores daquilo que chamamos de currículo e escola. O desafio consiste em falar da força contida na imagem fotográfica sem vontade de interpretá-la ou descrevê-la, mas escrever e pensar pelas fotografias num movimento de criação de sentidos e acontecer por elas.

Cartografando movimentos curriculares produzidos nas redes de conversações nos encontrosformações do PROEJA/IFES/ES

Problematiza a constituição do currículo (e da “formação docente” no campo curricular), no cotidiano escolar, na dimensão das conversações. Objetiva acompanhar os movimentos curriculares concernentes ao Proeja entre formas e forças complexas no cotidiano do Ifes – campus Venda Nova do Imigrante (VNI). Compõe com as linhas de pensamentos principalmente de Alves (2008, 2010, 2012); Carvalho (2004, 2008a, 2008b, 2009, 2012); Deleuze (1988, 2002, 2010); Deleuze e Guattari (1995); Ferraço (2007, 2008a, 2008b); Garcia (2011); Guattari (1987, 2004, 2012); Kastrup (2009, 2013); Lopes e Macedo (2011); Lopes (2010, 2011); Oliveira (2005, 2009, 2012); Paiva (2004, 2009); Rolnik (1989); e Spinoza (2013), entremeando os conceitos de movimentos e afetos no campo do currículo em redes na relação híbrida com os encontros-formações docente do/no Proeja. Adota a (não) metodologia cartográfica ao acompanhar movimentos curriculares (des)(re)territorializantes nas redes de conversações, especialmente nos encontrosformações: “Rodas de conversas com professores e demais servidores do Proeja”. Utiliza como principais instrumentos metodológicos a observação participante, a gravação das vozes e o registro em diário de campo. Contribui para outros movimentos de pesquisa ao capturar produzir e analisar dados em que se percebe que: ainda que tenha ocorrido um planejamento coletivo, outras temáticas surgiram nos encontros formações (que não se pretendiam engessados e não objetivavam a paralisação dos fluxos que pedem passagem), e tais assuntos puderam ser usados como disparadores para criação de outros movimentos curriculares; as concepções dos professores sobre a “dificuldade/facilidade” em ministrar aulas para o Proeja e os lugares estabelecidos entre estudantes e docentes no processo ensino-aprendizagem não estão relacionados diretamente, em relação de causa e efeito, à disciplina/área de conhecimento específica que ministram, mas aos agenciamentos, aos ligamentos e às rupturas produzidas nas relações com essas redes de saberes fazeres poderes que envolvem múltiplos agentes: docentes, outros servidores, alunos, experiências e encontros múltiplos dentro fora no espaço tempo do Ifes; uma tríade-refrão coopera para a criação de uma fôrma triangular que enfatiza a noção de um padrão em um processo molar enraizado nas árvores do conhecimento: perfil, seleção e nivelamento, contudo, algumas linhas de fuga dissonantes são criadas por entre as fissuras dos pretensos tons harmônicos; as frases “os professores do IF não estão preparados para ministrar aulas para o Proeja” ou “não há formação/qualificação para os docentes se relacionarem com o Proeja” são utilizadas, em alguns discursos, como escudos-argumentos para a opção-política de não oferta de vagas para a modalidade EJA em composição com fios que afirmam tal especificidade da educação básica, dentro da rede federal, como um “favor social”; processos que envolvem a (des)organização da matriz curricular são considerados por alguns participantes como início, “produto” e objetivo das conversas curriculares e provocam tensões que (i)mobilizam, (não) movimentam entre os afetos dos corpos, podendo levar à (não) ação coletiva; a noção de “mercado de trabalho” ainda impera nos discursos, ciclicamente, enquanto início fim das problematizações do currículo do Ensino Médio e da EJA; a expressão “integração curricular” é constantemente usada nos discursos que circulam o campus, no entanto, os sentidos produzidos, as concepções e as teorias curriculares que embasam a noção de “integração” no currículo são bem diversos; não há totalidades nos discursos, não há homogeneização, não foi efetivada nenhuma coesão/única voz representante (e esse também não era o objetivo desta pesquisa); ainda que o tema da roda se propusesse às conversas curriculares do/no Proeja, nesses encontros, os participantes manifestaram a necessidade de intensificar os movimentos produzidos nas rodas visando à discussão dos currículos textos de todos os cursos e modalidades ofertados pelos campus VNI e na intensificação de espaços para trocas de experiências curriculares cotidianas; na potencialização das diferenças como possibilidades de inventividade nos encontros-formações docente e nas danças curriculares que envolvem diversas relações de aprendizagem no Ifes, algumas experimentações foram produzidas, entre afetos, criando composições(des)(re)territorializantes e ressonando com movimentos que não se restringiram às rodas de conversas, contudo, enredaram-se em fios de outros espaços tempos do campus em tentativas de propagações de currículos multidão.

Entre imagens cinema e imagens escola, movimentando o pensamento com a formação de professores

A presente pesquisa aborda o estudo dos movimentos do pensamento nas redes formação com professores no Ensino Fundamental. Procura problematizar a constituição de processos formativos não dogmáticos nos cotidianos escolares, pela articulação de imagens cinema e imagens escola, exibidas, compartilhadas e criadas nas redes de conversações em uma escola municipal de Vitória/ES, entre os anos de 2013 a 2014. Apresenta um campo problemático que se dedica a compreender que movimentos do pensamento são produzidos a partir do uso de imagens cinema nas redes de conversações com professores em formação continuada, a partir de uma cartografia de pesquisa que articula o mapeamento de virtualidades presentes no banco de teses da CAPES e as cinecartografias do cotidiano escolar em duas dobras do tempo. Tece um debate teórico que se compõe pelas linhas de pensamento, principalmente, de Bergson (2006a; 2006b), Carvalho (2008; 2009; 2010; 2012) Deleuze (1988; 1991; 1992; 1995; 1996; 2003; 2006; 2007; 2010; 2011), Foucault (1979; 1999. 2006a; 2006b; 2008), Guéron (2010; 2011), Pelbart (2011), Sauvagnargues (2009), dentre outros. As opções teórico-metodológicas estabelecem uma pesquisa de campo na intercessão entre os estudos com o cotidiano escolar e os da pesquisa cartográfica, tomando o plano de imanência como mundo material para a ocorrência de acontecimentos. Utiliza, para a produção de dados a observação participante, os registros em diário de campo, considerados como uma descrição cristalina, assim como, as narrativas cristalinas que emergiam nas redes de conversações com as personagens-escolas (docentes), que se configuram como imagensnarrativas de pesquisa. Organiza o debate dos dados produzidos em sete capítulos. Apresenta como considerações três principais agrupamentos do movimento do pensamento nas redes de conversações com professores provocados pelas imagens cinema: cinescola-clichês, imagensformação docente e cristaisescolas. Destaca que não há uma realidade que comporte uma só verdade sobre a formação com professores, mas o que existe são cortes, percepções, afecções e produções de verdades que entrelaçam os diferentes modos de existir e reexistir na educação brasileira. As telasescolas, assim como as telas do cinema, apresentam e nos cercam com um mundo que articula um cinescola-clichê, imagensformação docente e cristaisescolas, que para além do pensamento reto e dogmático, exibem entre imagens cinema e imagens escolas, outros movimentos do pensamento com a formação de professores, sendo capazes de potencializar as pesquisas educacionais a não ir em ‘busca de um tempo perdido, mas de um tempo a ser redescoberto’, fazendo crer ainda mais nesse mundo e na educação.

Composite synthetic hydroxyapatite 30%, in two physical states, as dermal filler

The aim of this study was to evaluate the response to the implantation of synthetic hydroxyapatite 30% (HAP-91®) in different physical states as dermal filler. Eighteen New Zealand rabbits were used, distributed randomly into two equal groups and then divided into three groups according to the postoperative period at 8, 21 and 49 days. One mL of HAP-91®, fluid and viscous, was implanted in the subcutaneous tissue, 1 cm proximal to the cranial crest of the right scapula. The thickness of the skin was measured before and after implantation and for the following 15 days. Pain sensitivity assessment was conducted, assigning the following scores: 0 - when the animal allowed the touch of the implant area and expressed no signs of pain; 1 - when the animal allowed the touch, but pain reaction occurred, like increase of the respiratory rate or attempt to escape; 2 - when the animal did not allow the touch to the implanted area. At 8, 21 and 49 days, biopsy of the implanted area was performed. No difference was observed between the thickness of the skin (p>0.05) and all animals received a score 0 for soreness. Histological analysis did not reveal any obvious inflammatory process, showing a predominance of mononuclear cells in samples of eight days and tissue organization around the biomaterial with a tendency to encapsulation. The results indicate that HAP-91®, both viscous and fluid, is biocompatible and suitable for dermal filling.