Seroprevalence of anti-Leptospira spp. antibodies in dogs in Bahia, Brazil

The aim of this study was to determine the prevalence of anti-Leptospira spp. antibodies in dogs living in the urban area of the city of Ilheus, Bahia, Brazil using the microscopic agglutination test (MAT) to investigate 24 serovars. A semi-structured questionnaire was administered to dog owners to collect data about demography, husbandry and environmental factors. The prevalence of anti-Leptospira spp. antibodies in the population of 282 dogs was 7.1% (95% confidence interval: 4.4-10.7%). Serovar Copenhageni was the most prevalent, followed by serovars Bratislava, Canicola and Gryppotyphosa. No risk factor was detected with regard to demography (age, gender and breed), husbandry (Leptospira vaccinations, food and water exposure through their environment, hunting habits, contact with other animals and contact with rats) and environmental factors (sewage network, garbage collection, history of flooding, river proximity and wastelands). Despite the low prevalence found in this study, the seroprevalence of Leptospira spp. in healthy dogs in Ilheus indicates the presence of this agent in the environment, which may be a source of human infection. Knowledge of the serovars present in this environment is important for understanding the epidemiology of leptospirosis and establishing public health policies aimed at its control. (C) 2012 Elsevier B.V. All rights reserved.

Epidemiological aspects in leptospirosis. Research of anti-Leptospira spp antibodies, isolation and biomolecular research in bovines, rodents and workers in rural properties from Botucatu, SP, Brazil.

Leptospirosis is a worldwide infection, transmitted between man and animals that causes a decrease in the production of bovine flocks, and offer risks for public health, as an important zoonosis. The rodents are the main reservoirs of leptospires. It was studied 27 dairy farm properties located in or near from Botucatu-SP, Brazil. In these farms were collected blood and kidney samples from rodents, blood and urine samples from bovines and blood samples from the workers. The serology was performed with microscopic agglutination test (MAT). Samples of bovine urine and rodent kidneys were cultivated searching for leptospires isolation. The polymerase chain reaction (PCR) of the kidneys of the rodents was performed. In MAT, 46/ 140 (32.85%) bovine and 8/34 (23.53%) human sera samples were positive, respectively. In human samples, the serovar Brastilava (37.51%) presented the highest occurrence, while in bovines, the serovars Hardjo and Castellonis were most frequent, with 26.08% each one. All of the rodents were negatives in serology. No leptospire was isolated, and kidney samples were negative in PCR. In bovines, the dam water and the bad hygiene quality of milking process were considered important risks of infection in the affected properties (p<0.05), where other reproductive problems, except abortion, can be related. In other side, to human beings the drainage system was the most important risk factor in the studied properties. Thus, it was verified the necessity of an improvement in zoosanitary handling of the properties, mainly of water supply.

The effects of Brazilian and Bulgarian propolis in vitro against Salmonella Typhi and their synergism with antibiotics acting on the ribosome

Salmonella enterica serovar Typhi is the causative agent of typhoid fever in humans, and the use of antibiotics is essential for controlling this infection; however, the excessive use of antibiotics may select resistant strains. Propolis is a honeybee product and its antimicrobial activity has been intensively investigated. Thus, the objective of this study was to investigate a possible synergism between propolis (collected in Brazil and Bulgaria) and antibiotics acting on the ribosome (chloramphenicol, tetracycline and neomycin) against Salmonella Typhi in vitro. The synergism was investigated by using 1/2 and 1/4 of the minimum inhibitory concentration for propolis and these antimicrobial agents, evaluating the number of viable cells according to the incubation time. Brazilian propolis showed a bacteriostatic action against S. Typhi, while Bulgarian propolis showed a bactericidal activity and a synergistic effect with the three antibiotics. Variations in the biological assays might be due to the differences in their chemical compositions. Based on the results, one may conclude that Bulgarian propolis showed an important antibacterial action, as well as a synergistic effect with antibiotics acting on the ribosome, which points out a possible therapeutic strategy evaluating the use of propolis preparations for the treatment of Salmonella Typhi infection.

PCR Multiplex fluorescente para detecção de bactérias em sêmen bovino

Este estudo teve como objetivo avaliar o limiar de detecção da técnica de PCR multiplex fluorescente aliada a eletroforese capilar na detecção de agentes infecciosos em amostras de sêmen experimentalmente contaminadas com concentrações decrescentes das bactérias Brucella abortus, Leptospira interrogans sorovar pomona, Campylobacter fetus e Haemophilus somnus. Amostras de sêmen bovino foram experimentalmente contaminadas com concentrações decrescentes de bactérias obtidas através de diluições seriadas na base 10 de modo a obter-se amostras contendo desde 1 vez até 10-7 bactérias/mL a partir da concentração inicial de Leptospira pomona, Brucella abortus, Campylobacter fetus e Haemophilus somnus. As diluições foram efetuadas individualmente para cada bactéria, bem como nas diferentes concentrações necessárias para a padronização do teste de multiplex PCR. As extrações de DNA de todas as soluções contendo espermatozóides e bactérias analisadas no presente estudo foram realizadas segundo protocolo descrito por Heinemann et al. (2000). Os produtos de PCR multiplex foram avaliados por eletroforese em gel de poliacrilamida 8% e separação eletroforética por sistema capilar em equipamento automático de análise de fragmentos de DNA MegaBace. Observou-se a amplificação de fragmentos de 193pb, 330pb, 400pb e 415pb a partir do DNA de B. abortus, L. pomona, H. somnus, C. fetus, respectivamente. Na análise por eletroforese capilar de produtos da PCR multiplex do DNA para detecção simultânea dos quatro patógenos observou-se a sinal de positividade até a diluição de 10-3 bactérias/mL vezes da concentração inicial da solução estoque de cada bactéria. A técnica de PCR multiplex aliada à eletroforese capilar foi usada pela primeira vez para o diagnóstico direto de quatro bactérias patogênicas no sêmen, demonstrando ser um método rápido na detecção de bactérias causadoras de doenças reprodutivas.

Detection of Leptospira spp. from pure cultures and from experimentally contaminated bovine semen by polymerase chain reaction

Considerando a importância do sêmen na transmissão da leptospira bovina, foi realizado o presente estudo que teve como objetivo aplicar a reação em cadeia pela polimerase (PCR) para a detecção de leptospiras em sêmen bovino experimentalmente contaminado. A reação de PCR foi capaz de amplificar um fragmento de DNA específico de 330 pares de bases a partir de cultivos puros de 26 sorovares de Leptospira spp. A contaminação experimental de sêmen com Leptospira interrogans serovar hardjo revelou que a técnica de PCR conseguiu detectar 10 bactérias/ml, concentração sensivelmente mais baixa que as 1.000 bactérias/ml detectadas através do cultivo microbiológico. Os resultados observados revelam o grande potencial da reação de PCR para a detecção de Leptospira spp. em sêmen bovino, notadamente em centrais de inseminação artificial.

Configuration-Dependent Diffusion Dynamics of Downhill and Two-State Protein Folding

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Interference of vaccinal antibodies on serological diagnosis of leptospirosis in vaccinated buffalo using two types of commercial vaccines

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Resposta humoral, recuperação bacteriana e lesões histológicas em camundongos geneticamente selecionados para bons e maus produtores de anticorpos e Balb/c, frente à infecção por Leptospira interrogans sorovar icterohaemorrhagiae

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Respostas do híbrido de sorgo-sudão às adubações nitrogenada e potássica: características estruturais e produtivas

A pesquisa foi instalada no Setor de Forragicultura da FCAV/UNESP-Jaboticabal, para avaliar o híbrido de sorgo-sudão AG 2501C no outono e inverno. O manejo da pastagem foi conduzido, simulando o sistema de lotação intermitente. O experimento foi desenvolvido de março a setembro de 2002. A forrageira foi submetida a nove tratamentos: três doses de N (100, 200 e 300 kg/ha) e três doses de K (0, 80 e 160 kg/ha de K2O), em delineamento experimental de blocos casualizados com três repetições em esquema de parcelas subdivididas. As características estudadas foram massas, secas, inicial de planta inteira, folha e colmo e massa seca residual; relação lâmina/colmo; índice de área foliar (IAF); interceptação da radiação fotossinteticamente ativa (RFA) e coeficiente de extinção luminosa. Os tratamentos não influenciaram a massa seca inicial (MSI) e residual (MSR) da planta inteira, folha e colmo e massa seca residual. Os resultados médios para MSI, MSR, folha e colmo foram 2801,2; 964,7; 1462,8 e 1085,2 kg/ha de MS, por ciclo de pastejo, respectivamente. Houve redução da relação lâmina/colmo e da porcentagem de folhas, enquanto a porcentagem de colmos aumentou. Houve interação entre N e K para IAF, interceptação de luz e coeficiente de extinção.

Pesquisa de suínos portadores renais de leptospiras pelo isolamento microbiano e reação em cadeia pela polimerase em amostras de rins de animais sorologicamente positivos e negativos para leptospirose

Com o intuito de se estudar a presença de suínos portadores renais de leptospiras foram colhidas 131 amostras sanguíneas e os respectivos rins de animais durante o abate em abatedouro da região de Botucatu-SP. Pela prova de Soroaglutinação Microscópica obteve-se 48 amostras sorológicas positivas para um ou mais sorovar de Leptospira spp., com uma taxa de ocorrência de anticorpos anti-leptospira de 36,64%, e maior importância para o sorovar icterohaemorrhagiae. Para a pesquisa do agente nos rins, das 88 amostras renais submetidas a cultura em meio de EMJH e analisadas pela prova de PCR, foi isolado e detectado o agente em uma única amostra renal, pertencente a um animal soropositivo. Embora não tenha sido possível a comparação estatística, em termos de sensibilidade e especificidade das duas provas de detecção do agente a partir de amostras renais, a PCR mostrou-se mais rápida e prática na pesquisa de portadores renais. Pelo isolamento obtido, ressalta-se a importância desses animais como possíveis transmissores da doença para trabalhadores de abatedouro e inspetores de carne.

Identificação da Leptospira interrogans sorovar pomona em camundongos geneticamente selecionados, para a alta e baixa produção de anticorpos, através da técnica de imunoperoxidase em tecido renal e isolamento bacteriano em meio de Fletcher

O presente trabalho teve por objetivo identificar a presença da Leptospira interrogans sorovar pomona em camundongos geneticamente selecionados para a alta e baixa resposta a anticorpos. Todos os animais foram submetidos ao isolamento bacteriano, imunohistoquímica (imunoperoxidase) em cortes de tecido renal e coloração através da hematoxilina-eosina. A técnica de imunoperoxidase apresentou-se pouco mais sensível em relação ao cultivo, entretanto, ambas foram bons parâmetros de identificação do agente. Presença de lesões renais mais intensas ocorreram em períodos em que houve maior número de bactérias isoladas em meio de cultivo. Camundongos da linhagem HIV-A conseguiram eliminar as leptospiras com maior eficiência e rapidez em relação as linhagem LIV-A, entretanto o estudo demonstrou que ambas linhagens da seleção IV-A foram eficientes em controlar o processo infeccioso.

Evaluation of isopathic treatment of Salmonella enteritidis in poultry

Background. Salmonellosis is a common problem worldwide in commercially reared poultry. It is associated with human Salmonellosis. No fully satisfactory method of control is available.Method: Nosodes to an antibiotic-resistant strain of Salmonella enterica serovar Enteritidis in D30 (30X) potency were prepared. One day old chicks (N = 180) were divided into four groups: two control and two different preparations of the nosode. Treatments were administered in drinking water for 10 days. The birds were challenged by a broth culture of the same Salmonella, by mouth, on day 17. Cloacal swabs were taken twice weekly for Salmonella enterica serovar Enteritidis.Results: Birds receiving active treatment were less likely to grow the strain of Salmonella from cloacal swabs compared to control.Conclusion: Isopathy is low cost and non-toxic. It may have a role to play in the widespread problem of Salmonella in poultry. Further research should be conducted.

Nanostructured films from phthalocyanine and carbon nanotubes: Surface morphology and electrical characterization

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)