983 resultados para Adenomatous Polyposis Coli
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Substrate inhibition by ATP is a regulatory feature of the phosphofructokinases isoenzymes from Escherichia coli (Pfk-1 and Pfk-2). Under gluconeogenic conditions, the loss of this regulation in Pfk-2 causes substrate cycling of fructose-6-phosphate (fructose-6-P) and futile consumption of ATP delaying growth. In the present work, we have broached the mechanism of ATP-induced inhibition of Pfk-2 from both structural and kinetic perspectives. The crystal structure of Pfk-2 in complex with fructose-6-P is reported to a resolution of 2 angstrom. The comparison of this structure with the previously reported inhibited form of the enzyme suggests a negative interplay between fructose-6-P binding and allosteric binding of MgATP. Initial velocity experiments show a linear increase of the apparent K(0.5) for fructose-6-P and a decrease in the apparent k(cat) as a function of MgATP concentration. These effects occur simultaneously with the induction of a sigmoidal kinetic behavior (n(H) of approximately 2). Differences and resemblances in the patterns of fructose-6-P binding and the mechanism of inhibition are discussed for Pfk-1 and Pfk-2, as an example of evolutionary convergence, because these enzymes do not share a common ancestor.
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Background. The aim of this study was to evaluate Ki-67 and Bcl-2 antigen expression in colorectal polyps from women with breast cancer. Methods. A randomized, controlled study was carried out in 35 women, either with or without breast cancer, who had adenomatous colorectal polyps. The patients were divided into two groups: group A (without breast cancer; control group; n = 17) and group B (with breast cancer; study group; n = 18). Immunohistochemistry was performed on the colorectal polyps to evaluate Ki-67 and Bcl-2 antigen expression. Student`s t-test and the chi(2) test were used for the statistical analysis of Ki-67 and Bcl-2 expression, respectively. Statistical significance was established as P < 0.05. Results. The mean percentage of Ki-67-stained nuclei in groups A and B was 36.25 +/- 2.31 and 59.44 +/- 3.34 ( SEM), respectively (P < 0.0001), while the percentage of cases with cells expressing Bcl-2 in groups A and B was 23.5 and 77.8%, respectively (P < 0.001). Conclusions. In the present study, there was greater proliferative activity and greater expression of the antiapoptotic protein Bcl-2 in the colorectal polyps of women with breast cancer.
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Neutral trehalase from Neurospora crassa was expressed in Escherichia coli as a polypeptide of similar to 84 kDa in agreement with the theoretical size calculated from the corresponding cDNA. The recombinant neutral trehalase, purified by affinity chromatography exhibited a specific activity of 80-150 mU/mg protein. Optima of pH and temperature were 7.0 and 30 degrees C, respectively. The enzyme was absolutely specific for trehalose, and was quite sensitive to incubation at 40 degrees C. The recombinant enzyme was totally dependent on calcium, and was inhibited by ATP, copper, silver, aluminium and cobalt. K(M) was 42 mM, and V(max) was 30.6 nmol of glucose/min. The recombinant protein was phosphorylated by cAMP-dependent protein kinase, but not significantly activated. Immunoblotting with polyclonal antiserum prepared against the recombinant protein showed that neutral trehalase protein levels increased during exponential phase of N. crassa growth and dropped at the stationary phase. This is the first report of a neutral trehalase produced in E. coli with similar biochemical properties described for fungi native neutral trehalases, including calcium-dependence. (C) 2008 Elsevier Inc. All rights reserved.
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The 4.5S RNA molecule of Escherichia coli is essential to cell viability. It has been shown that depletion of this molecule inhibits protein synthesis, induces the heat shock response, and generally slows cell growth. The molecule has also been implicated in protein secretion, as in cells depleted of 4.5S RNA, an unsecreted precursor to ?-lactamase accumulates (pre-?-lactamase). A role in protein secretion is further supported by structural similarities with the 7S RNA molecule of eukaryotic SRP, specific binding to SRP54, and its homolog in E. coli, P48, and the ability of 7S RNA from certain archaebacteria to suppress 4.5S RNA depletion. In this study I have utilized strains with mutant forms of the 4.5S RNA genes in order to study the effect of altered 4.5S RNA on cell physiology. These strains have their mutant 4.55 RNA under the control of the tryptophan synthetic operon. Decreased growth rates, inhibited cell division, and altered protein synthesis all result from these mutations.
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A FarmaUSCS um projeto de extenso do curso de Farmcia da Universidade Municipal de So Caetano do Sul, que tem por finalidade manipular e dispensar medicamentos para a comunidade, alm de servir de campo de estgio e de desenvolvimento de projetos de pesquisa. O presente trabalho teve por objetivo avaliar a estabilidade fsico-qumica da soluo aquosa de hipoclorito de sdio a 0,5%, utilizada para a desinfeco de ambientes produtivos na FarmaUSCS, bem como sua eficcia como agente bactericida sobre Staphylococcus aureus e Escherichia coli. Para a estabilidade fsico-qumica, amostras da soluo foram submetidas a diferentes condies ambientais e determinado o teor de hipoclorito por iodometria. A eficcia do desinfetante foi realizada pela tcnica da diluio em tubos. Em nenhuma das condies ambientais testadas, houve degradao do teor de hipoclorito de sdio. A soluo aquosa de hipoclorito de sdio a 0,5% foi eficaz diante de S. aureus e E. coli, j a partir do tempo mnimo testado de 2,5 minutos de exposio.
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Foram estudados os efeitos da suplementao de vitamina E (VE) e selnio (Se) sobre a imunidade de galinhas vacinadas contra Escherichia coli (EC) patognica para sunos e com o vrus da encefalomielite aviria (VEA). Foram avaliados peso corporal (PC), peso de ovos (PO) e produo de anticorpos (AcP) em noventa poedeiras (H&N nick chick) com 49 semanas de idade alimentadas vontade com dietas suplementadas com 0, 50, 150, 250 e 250 UI VE/kg + 0,3 ppm de Se. s 51 semanas de idade, metade das galinhas foram vacinadas contra EC e todas as aves foram vacinadas contra VEA. Duas semanas aps, receberam uma segunda dose da vacina contra EC. Amostras de sangue foram coletadas semanalmente e a quantidade de IgY foi determinada por ELISA, como densidade tica (DO). As aves vacinadas apresentaram maior DO do que as aves no vacinadas (P0,05). As DO foram significativamente aumentadas (P0,05) quando as aves vacinadas foram alimentadas com 50 e 150 UI de VE/kg e comparadas com as DO das aves que receberam a dieta de 250 UI de VE + Se. Se no afetou AcP, PC e PO. A vacinao e a VE suplementada no afetaram PC. O PO no foi afetado pela vacinao, mas foi maior (P0,05) nas semanas 3, 5 e 7, quando as poedeiras receberam 250 UI VE/kg e comparados com aquelas que receberam 50, 150 e 0. A AcP contra VEA foi influenciada pela VE (P0,13). Cento e cinqenta UI VE e 0 UI VE aumentaram IgY produzida, quando comparados a 250 UI. Tambm o Se aumentou AcP. Os resultados deste estudo sugerem que nveis mdios de VE aumentam a produo de IgY por poedeiras vacinadas e Se adicionado ao mais alto nvel de VE tambm possui efeito imunomodulador.
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Foi estudado o efeito das gemas de ovos de aves hiperimunizadas contra Escherichia coli patognica para sunos sobre a imunidade passiva (IP) de leites recm-nascidos em uma unidade produtora de leites (UPL). Foram avaliados densidade tica do ELISA (DO), peso corporal (PC) e ocorrncia de diarria diria (OcD) em 137 leites recm-nascidos oriundos de 25 fmeas primparas no vacinadas contra E. coli. De cada fmea, foram separados 6 leites recmnascidos de ambos os sexos, excluindo-se os mais leves e os mais pesados, divididos em 3 tratamentos e 2 repeties. A anlise estatstica para DO e PC foi realizada atravs de ANOVA, a comparao de mdias entre tratamentos pelo Lsmeans e o teste do qui-quadradro para a OcD. As gemas estavam armazenadas -5C, in natura e, minutos antes do fornecimento, foram descongeladas e diludas em 15 mL de uma soluo tampo (PBS). Os tratamentos foram fornecidos via oral, tendo sido os seguintes: T1: 2mL de PBS (controle) em 2 doses, a primeira ao nascer e a segunda 2 horas aps o nascimento; T2: 2mL de gemas de ovos com ttulo de 100.000 de anticorpos (IgY) contra E. coli em 2 doses, ao nascer e 2 horas aps o nascimento; T3: idem ao T2, alm de 2mL de gema de 3 em 3 dias at os leites completarem 12 dias de idade. Foram realizadas duas coletas de sangue em 1 leito/tratamento/porca: a primeira s 24 horas e a segunda aos 14 dias de idade. O ttulo de IgY contra E. coli dos soros foi determinado por ELISA. A DO do ELISA dos leites de T2 e T3 foi significativamente maior s 24 horas e aos 14 dias em relao ao controle (P0,0001). T3, T2 e T1 permaneceram 87, 79 e 72,5% do tempo estudado sem diarria (PX20,0001). Os animais de T3 foram significativamente mais pesados do que os do T1 (P0,08), mas no diferiram de T2. Os resultados deste estudo sugerem que o uso de gemas de aves hiperimunizadas contra E. coli age efetivamente na preveno da diarria dos leites e o seu uso contnuo mais vantajoso do que o fornecimento somente ao nascer.
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Com o objetivo de avaliar a sobrevivncia ao congelamento de microrganismos potencialmente patognicos, hambrgueres de frango foram contaminados com Escherichia coli (ECHC), Staphylococcus aureus (SAFH) e Salmonella Enteritidis (SE86) e armazenados a -18C. Os mesmos microrganismos e ainda E. coli ATCC 25972, S. aureus ATCC 25923, and S. Enteritidis ATCC 13076 tambm foram inoculados em gua peptonada 0,1% e congelados a -18C, a fim de avaliar um possvel efeito protetor dos componentes do hambrguer sobre os microrganismos. A quantificao dos microrganismos foi realizada nos intervalos de 0, 1, 2, 3, 4, 7, 14, 21 e 28 dias de congelamento. Com o propsito de estudar as alteraes nos cidos graxos das clulas microbianas expostas ao congelamento, foram extrados os cidos graxos de cada bactria, congelada e no congelada, e estes foram analisados por cromatografia gasosa. Os resultados demonstraram que, de modo geral, houve uma reduo mdia de menos de 1 unidade logartmica (log10) no nmero de clulas artificialmente inoculadas em hambrgueres de frango. As redues obtidas para cada microrganismo em gua peptonada 0,1% foram significativamente (P0,05) maiores do que as redues observadas em hambrguer de frango, sugerindo a existncia de um efeito crioprotetor dos componentes do hambrguer. Em todos os experimentos, as redues mais expressivas foram observadas nas primeiras semanas de congelamento. Ocorreram alteraes expressivas na composio de cidos graxos de S. aureus (SAFH) e S. aureus ATCC 25923, o que pode indicar que estes microrganismos alteraram a composio dos seus cidos graxos como resposta ao estresse causado pelo congelamento.
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A seqncia de nucleotdeos codificante do peptdeo derivado da hidrlise da canatoxina (jaburetox-2Ec), foi clonada e expressa nos sistema pET101/E. coli BL 21. Neste trabalho, estudamos a estabilidade dos plasmdeos da srie pET contendo a seqncia codificante do jaburetox-2Ec no sistema de expresso E. coli BL 21 (Mulinari, 2004), e as condies para aumentar produo do peptdeo recombinante, avaliando a velocidade de transferncia de oxignio, o controle do pH, e a utilizao da lactose como indutor em substituio ao IPTG. O cultivo da bactria recombinante em incubadora orbital contendo 10 g/l de lactose como indutor produziu 1,26 g de jaburetox-2Ec/mg de protena total aps oito horas de cultivo. A estabilidade do plasmdeo e a expresso do peptdeo recombinante foram estudadas em biorreatores. A expresso do jaburetox-2Ec foi fortemente afetada pelo pH da cultura, com a diminuio de mais de 50 % da concentrao desse peptdeo quando ocorre acidificao do meio de cultura. Da mesma forma, o aumento da aerao e agitao tem efeito negativo sobre a produo do peptdeo, diminuindo em sete vezes a produo do jaburetox-2Ec Apesar do aumento da biomassa devido ao cultivo da E. coli recombinante em meio mnimo, contendo como fonte de carbono a glicose, isto no representou aumento da concentrao do peptdeo recombinante. Contudo, sob a melhor condio de cultivo em biorreator estudada (pH controlado e menor transferncia de oxignio), obteve-se uma produo de 7,14 g de jaburetox-2Ec/mg de protena total, representando em torno de 2 % da protena total da clula. Em todas as bateladas, aps atingir a mxima expresso do peptdeo, essa concentrao diminui provavelmente devido atividade das proteases da clula causando a degradao do peptdeo recombinante. A carga metablica imposta clula devido expresso do jaburetox-2Ec, uma das possveis causas da instabilidade do plasmdeo observada em todas as bateladas.
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O queijo o produto de maior importncia entre os derivados do leite, pelo seu grande valor nutritivo e pelas suas caractersticas organolpticas. Na regio litornea do Rio Grande do Sul, Brasil, existe uma concentrao elevada de comrcio artesanal de queijo. Para a estimativa da qualidade microbiolgica destes produtos, foram coletadas 80 amostras referentes a 29 bancas de estabelecimentos comerciais localizados nas rodovias RS 30 (Osrio-Tramandai), RS 40 (Viamo-Pinhal) e RS 389 (Osrio-Torres). Em 26% das amostras, a contagem de coliformes fecais estava acima da estabelecida pela legislao e em 32% das amostras foi possvel o isolamento de E.coli., sugerindo considervel contaminao e a necessidade de orientar estes produtores para normas bsicas de higiene. Foi confirmada a presena de Listeria sp. em 16% das amostras, sendo 4% L. monocytogenes. No foram isoladas cepas de Brucella sp. As caractersticas do produto analisado como pH, atividade da gua, estocagem, presena de altas contagens de microrganismos competidores, provavelmente, contriburam significativamente para controle de Listeria sp. e Brucella sp. O presente estudo demonstra que este tipo de alimento pode tornar-se um problema de sade pblica, principalmente para os grupos de risco.
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Essa dissertao possui como objetivo traar, uma nova metodologia de classificao de patogenicidade da Escherichia.coli,.atravs de um ndice no qual, alm do nmero de animais mortos, tambm foi considerado o tempo de morte e a capacidade da cepa causar leso compatvel colibacilose em pintos de 1 dia. Para gerar esse critrio, foram utilizadas 300 amostras de E.coli oriundas de lotes com leso de celulite, cama desses mesmos avirios e amostras de quadros respiratrios. Atravs desse experimento foi possvel observar que as amostras de E.coli originadas das camas dos avirios, apresentavam ndice de patogenicidade significativamente menor do que aquelas isoladas das leses cutneas e de quadros respiratrios.Tambm foi associado s cepas de E.coli a capacidade de causar leses de: pericardite, perihepatite, aerossaculite, peritonite e celulite. Dentre as leses citadas somente a celulite foi considerada de apresentao significativamente mais freqente em comparao s outras.
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As infeces do tracto urinrio (ITU) so doenas infecciosas comuns e distinguem-se em dois grandes grupos: o das infeces do tracto urinrio superior e o das infeces do tracto urinrio inferior. O principal agente etiolgico envolvido nas ITU a bactria Escherichia coli (E. coli), representando 80-95% dos invasores do tracto urinrio na populao em geral. mais comum entre os adultos do sexo feminino, principalmente com actividade sexual, embora as crianas, mulheres grvidas e idosos tambm apresentam grande susceptibilidade. Paralelamente, a problemtica da resistncia aos antimicrobianos um tema actual e muito debatido internacionalmente. Como tal, o presente estudo teve como principal objectivo contribuir para a identificao fivel da bactria E. coli em infeces urinrias bem como a determinao do seu perfil de resistncia a antibiticos. Os dados apresentados referem-se a um estudo efectuado entre Outubro de 2008 e Junho de 2009 no Laboratrio de Anlises Clnicas Castro Fernandes MMC. Foram analisadas 6522 amostras de urina, das quais 390 corresponderam a uroculturas positivas. Verificou-se que o sexo feminino tem uma maior propenso para infeces urinrias, havendo uma tendncia para o aumento das ITU com a idade. Na interpretao da cultura revelou-se importante a informao dada pelo exame cultural acerca do nmero de leuccitos. Concluiu-se que nas uroculturas cujo nmero de colnias foi superior a 105 com menos de trs espcies de colnias diferentes na cultura, o nmero de leuccitos foi superior a 30 milhares de clulas por L, o que sugere a existncia de infeco urinria. No estudo do perfil de sensibilidade da bactria E. coli isolada, para a famlia dos betalactmicos (Ampicilina (AMP), Amoxicilina/cido Clavulnico (AMC), Piperacilina/Tazobactam (PIP/TZP)), famlia das cefalosporinas (Cefalotina (KF), Cefuroxima (CXM), Cefuroxima Acetil (CA), Cefotaxima (CTX), Ceftazidima (CAZ), Cefepima (FEP)), famlia dos aminoglicosdeos (Amicacina (AM), Gentamicina (GM), Tobramicina (TOB)) e para as nitrofurantonas (F), verificou-se uma grande sensibilidade e pouca resistncia em termos quantitativos, mas para a famlia das quinolonas (Ciprofloxacina (CIP), Levofloxacina (LEV), Norfloxacina (NOR)) e para os Trimetoprim/Sulfametoxazol (TMP/SMX) verificou-se resistncias quantitativamente superiores aos das famlias anteriormente referidas, sugerindo valores convergentes aos da tendncia europeia. Foram identificados famlias de fentipos tais como: os beta-lactmicos, os aminoglicosdeos, quinolonas, tetraciclinas, furanos e trimetoprim/sulfamidas.E. coli um microganismo cujo fentipo selvagem no tem resistncias intrnsecas. Todas as resistncias so adquiridas. Actualmente, a realizao dos antibiogramas para E. coli tornou-se fundamental tendo em vista os factores ecolgicos, genticos, ambientais e pelo facto de que mais isolados so resistentes maioria dos antibiticos. Como concluso, este estudo permitir alertar para um problema srio que uma grande ameaa Sade Pblica.
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Clinical evaluations have been made possible with radiobiocomplexes marked with tecnecium-99m (99mTc). Natural or synthetic drugs are able to interfere in the marking of blood structures with 99m Tc. Also, the toxicity of several natural products has been described. The aim of this study was evaluating the effect of an extract of Ganoderma lucidum (Reishi) in the marking of blood constituents with 98m Tc and in the survival of Escherichia coli. Blood samples from Wistar rats were treated with reishi extract. Radiomarking procedure was performed. Samples of plasma (P), blood cells (CS), and insoluble (FI) and soluble (FS) fractions of P and CS were separated and the radioactivity was counted to determine radioactivity percentages (%ATI). Escherichia coli AB1157 cultures were treated with stannous chloride in the presence and absence of the reishi extract. Blood samples and bacterial cultures treated with NaCl 0.9% were used as controls. Data indicated that the reishi extract has significantly altered (p<0,05) the %ATI of P, CS, FI-P, FS-P, FI-CS e FS-CS, as well as it has increased survival of bacterial cultures treated with stannous chloride. Our results suggest that the Reishi extract would be able to present a redox/ chelant action by altering blood constituent marking with 99mTc and by protecting bacterial cultures against stannous chloride-induced oxydating lesions. The study had a multidisciplinary character, with the participation of the following areas of knowledge: Biophysics, Radiobiology, Botanics, Phytotherapy, and Hematology
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Fundao de Amparo Pesquisa do Estado de So Paulo (FAPESP)
