Efecto del ejercicio de tiro y arrastre sobre el eje renina-angiotensina-aldosterona y cociente testosterona/cortisol en caballos euhidratados y deshidratados

Introducción. El estado hídrico previo al inicio de un ejercicio (hiperhidratación-deshidratación o hipohidratación y euhidratación) modifica la respuesta neurohumoral. En personas, la deshidratación origina una liberación incrementada de las hormonas implicadas en el mantenimiento de la volemia y del estado hidroelectrolítico, tales como la renina (REN), angiotensina (ANG) y aldosterona (ALD). La testosterona (T) es una hormona anabólica, mientras que el cortisol (C) es una hormona de estrés, con funciones catabólicas. El cociente T/C es un reflejo de la intensidad anabólica/catabólica de un ejercicio y en atletas humanos, se ve afectada por el estado hídrico. Objetivos. 1) Describir las variaciones en las concentraciones de REN, ANG, ALD, T, C y ratio T/C en caballos durante un ejercicio de tiro y arrastre, en relación con otros marcadores de equilibrio hidroelectrolítico y en función de la carga arrastrada; 2) Analizar si la respuesta de estas hormonas al ejercicio difiere entre animales con deshidratación hipertónica y euhidratados; Hipótesis: 1) Que las concentraciones de REN, ANG, ALD, T, C serán más elevadas en los caballos deshidratados que en los euhidratados; 2) Que el ejercicio de tiro y arrastre, particularmente en los animales de mayor peso corporal, inducirá una mayor activación del eje REN, ANG, ALD y una liberación superior de T; 3) Que los animales deshidratados experimentarán un incremento más intenso de estas hormonas en respuesta al ejercicio. Material y métodos. Se han llevado a cabo dos estudios simultáneos. En el estudio I, se han analizado los siguientes parámetros: valor hematócrito (HTO), albúmina (ALB), sodio (Na), potasio (K), cloro (Cl), lactato (LA) y concentraciones séricas de REN, ANG y ALD y en el estudio II, se han determinado las concentraciones de ALB, T, C y ratio T/C. En el estudio I, se han incluido 64 caballos machos, enteros y castrados, divididos en dos grupos según su estado hídrico: grupo control o euhidratado (CTR, n=11) y grupo deshidratado (DH; n=53), con deshidratación hipertónica inducida por restricción de agua y comida. Además, según su peso corporal, los animales se han dividido en 3 categorías de peso: I (<350 kg; n=3 para grupo CTR; n=23 para DH), II (351-450 kg; n=3 para CTR; n=18 para DH) y III (>451 kg; n=5 para CTR; n=12 para DH). En el estudio II, se han incluido los mismos animales, con excepción de la categoría de peso III para el grupo CTR, que solo está constituida por 3 animales, en lugar de 5, al descartar a los machos castrados, debido a la medición de T. Todos los animales, realizaron un ejercicio consistente en recorrer una pista de arena de playa de 60 m de longitud, tirando de un carruaje, con 2, 2,25 y 2,5 veces su peso corporal para las tres categorías de peso. La pista de arena se dividió en cuatro áreas de 15 m, en cada una de las cuales, el animal hizo una parada obligatoria, de duración decidida por el acompañante, y que se incluyó como tiempo de carrera. Los animales eran eliminados si se superan los 5 min de duración. En los dos estudios, se tomaron muestras de sangre en los siguientes tiempos: en reposo, antes del ejercicio (R), dentro del primer minuto tras finalizar el ejercicio (E) y a los 5, 10, 15 y 30 minutos de una recuperación pasiva (5REC, 10REC, 15REC y 30REC). Resultados. Estudio I. La diferencia de peso de los caballos tuvo una influencia mínima en los valores basales y en la respuesta al ejercicio. En reposo, los caballos DH tuvieron valores superiores de HTO, ALB, LA, Na, K y ANG en comparación con los CTR. El ejercicio condicionó una elevación de HTO, ALB, LA y Na, tanto en los caballos CTR como en los DH. Se encontró un incremento de ANG en los caballos DH y de ALD en los caballos CTR. La elevación con el ejercicio experimentada por los parámetros analizados fue de magnitud similar en los grupos CTR y DH, con excepción del LA (incrementó más en DH) y ALD (aumentó más en CTR). Estudio II. El ejercicio dio lugar a un aumento de T en las categorías I y III de los grupos CTR y DH, así como un descenso en la categoría II del grupo CTR. El C mostró un aumento progresivo en las tres categorías y en los dos grupos de estado hídrico, con los valores máximos en el tiempo 30REC. El ratio T/C aumentó en la categoría III del grupo DH, descendió en la categoría II del grupo CTR y no varió en los otros casos. Los animales DH, independientemente de la categoría de peso, tuvieron valores superiores de T y C, en la mayoría de los tiempos de extracción de muestras. Sin embargo, si se consideran los cambios experimentados por estas hormonas durante el ejercicio o en la recuperación, en relación a los valores basales, el aumento del C fue más marcado en el grupo CTR que en el DH, para las tres categorías de peso. Las variaciones de la concentración de T fueron superiores en las categorías de peso I y III del grupo CTR que en el grupo DH. El ratio T/C fue estadísticamente igual entre caballos CTR y DH en las categorías I y III, mientras que en la categoría II, los caballos DH presentaron cocientes T/C mayores. Conclusiones. La deshidratación hipertónica altera la concentración de las hormonas implicadas en la regulación del equilibrio hidro-electrolítico, de la presión sanguínea y del metabolismo. Sin embargo, el estado hídrico previo al ejercicio tiene una acción mínima sobre la magnitud de estos cambios en respuesta a un ejercicio de tiro y arrastre de corta duración (inferior a 5 min). Relevancia. Se ha demostrado que la respuesta neurohumoral, determinada en base a las concentraciones circulantes de las hormonas REN, ANG, ALD, T y C, se ve afectada por el ejercicio cuando el animal empieza el mismo en estado de euhidratación o de deshidratación.

The carrier’s exemption from liability in the Hague, Hamburg and Rotterdam Rules : an examination from the perspectives of fairness and clarity

Le commerce international est souvent relié au transport maritime. La poursuite des règles uniformes se rapportant à ce dernier avait débuté à la fin du XIXe siècle et a abouti à l’émergence des Règles de La Haye, des Règles de Hambourg et des Règles de Rotterdam. L’exonération du transporteur maritime, qui suscitait des controverses favorisant le développement des règles maritimes internationales, a été réglementée de trois façons différentes dans les trois Règles précitées. La question principale abordée dans la thèse présente est si elles sont suffisamment satisfaisantes. Une autre question, qui se pose s’il est prouvé qu’aucune d’entre elles ne l’est, est quelle serait une meilleure façon. Pour y répondre, deux critères, soit la justice et la clarté, ont été choisis. Les recherches effectuées dans le cadre de la thèse présente visent à donner une évaluation profonde des régimes existants en matière de réglementation de l’exonération du transporteur maritime ainsi que des suggestions d’amélioration à cet égard.

Review: Head and neck squamous cell carcinoma in sub-Saharan Africa

Aim Review the literature from 1990 to 2013 to determine known anatomic sites, risk factors, treatments, and outcomes of head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) in sub-Saharan Africa. Methods Using a systematic search strategy, literature pertaining to HNSCC in sub-Saharan Africa was reviewed and patient demographics, anatomic sites, histology, stage, treatment, and outcomes were abstracted. The contributions of human immunodeficiency virus (HIV), human papillomavirus (HPV) and behavioural risk factors to HNSCC in the region were assessed. Results Of the 342 papers identified, 46 were utilized for review, including 8611 patients. In sub-Saharan Africa, the oropharyngeal/oral cavity was found to be the most common site, with 7750 cases (90% of all cases). Few papers distinguished oropharyngeal from oral cavity, making identification of possible HPV-associated oropharyngeal squamous cell carcinoma (SCC) difficult. SCC of the nasopharynx, nasal cavity, or paranasal sinuses was identified in 410 patients (4.8% of all cases). Laryngeal SCC was found in 385 patients (4.5% of all cases), and only 66 patients (0.8% of all cases) with hypopharyngeal SCC were identified. In 862 patients with data available, 43% used tobacco and 42% used alcohol, and reported use varied widely and was more common in laryngeal SCC than that of the oropharyngeal/oral cavity. Toombak and kola nut use was reported to be higher in patients with HNSCC. Several papers reported HIV-positive patients with HNSCC, but it was not possible to determine HNSCC prevalence in HIV-positive compared to negative patients. Reports of treatment and outcomes were rare. Conclusions The oropharyngeal/oral cavity was by far the most commonly reported site of HNSCC reported in sub-Saharan Africa. The roles of risk factors in HNSCC incidence in sub-Saharan Africa were difficult to delineate from the available studies, but a majority of patients did not use tobacco and alcohol.

Polyphasic characterisation of Burkholderia cepacia complex species isolated from children with cystic fibrosis

Cystic fibrosis (CF) patients with Burkholderia cepacia complex (Bcc) pulmonary infections have high morbidity and mortality. The aim of this study was to compare different methods for identification of Bcc species isolated from paediatric CF patients. Oropharyngeal swabs from children with CF were used to obtain isolates of Bcc samples to evaluate six different tests for strain identification. Conventional (CPT) and automatised (APT) phenotypic tests, polymerase chain reaction (PCR)-recA, restriction fragment length polymorphism-recA, recA sequencing, and matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight (MALDI-TOF) were applied. Bacterial isolates were also tested for antimicrobial susceptibility. PCR-recA analysis showed that 36 out of the 54 isolates were Bcc. Kappa index data indicated almost perfect agreement between CPT and APT, CPT and PCR-recA, and APT and PCR-recA to identify Bcc, and MALDI-TOF and recA sequencing to identify Bcc species. The recA sequencing data and the MALDI-TOF data agreed in 97.2% of the isolates. Based on recA sequencing, the most common species identified were Burkholderia cenocepacia IIIA (33.4%), Burkholderia vietnamiensis (30.6%), B. cenocepacia IIIB (27.8%), Burkholderia multivorans (5.5%), and B. cepacia (2.7%). MALDI-TOF proved to be a useful tool for identification of Bcc species obtained from CF patients, although it was not able to identify B. cenocepacia subtypes.

Interrogation of human monoclonal antibodies induced by 4C-MenB to identify protective antigens contained in the OMV component

Neisseria meningitidis is a gram negative human obligated pathogen, mostly found as a commensal in the oropharyngeal mucosa of healthy individuals. It can invade this epithelium determining rare but devastating and fast progressing outcomes, such as meningococcal meningitidis and septicemia, leading to death (about 135000 per year worldwide). Conjugated vaccines for serogroups A, C, W135, X and Y were developed, while for N. meningitidis serogroup B (MenB) the vaccines were based on Outern Membrane Vesicles (OMV). One of them is the 4C-MenB (Bexsero). The antigens included in this vaccine’s formulation are, in addition to the OMV from New Zeland epidemic strain 98/254, three recombinant proteins: NadA, NHBA and fHbp. While the role of these recombinant components was deeply characterized, the vesicular contribution in 4C-MenB elicited protection is mediated mainly by porin A and other unidentified antigens. To unravel the relative contribution of these different antigens in eliciting protective antibody responses, we isolated human monoclonal antibodies (mAbs) from single-cell sorted plasmablasts of 3 adult vaccinees peripheral blood. mAbs have been screened for binding to 4C-MenB components by Luminex bead-based assay. OMV-specific mAbs were purified and tested for functionality by serum bactericidal assay (SBA) on 18 different MenB strains and characterized in a protein microarray containing a panel of prioritized meningococcal proteins. The bactericidal mAbs identified to recognize the outer membrane proteins PorA and PorB, stating the importance of PorB in cross-strain protection. In addition, RmpM, BamE, Hyp1065 and ComL were found as immunogenic components of the 4C-MenB vaccine.

Longitudinal Micro CT-driven biomarkers as a tool to evaluate lung fibrosis progression and antifibrotic efficacy in a refined Bleomycin mouse model

Idiopathic pulmonary fibrosis (IPF) is a chronic progressive disease with no curative pharmacological treatment. Animal models play an essential role in revealing molecular mechanisms involved in the pathogenesis of the disease. Bleomycin (BLM)-induced lung fibrosis is the most widely used and characterized model for anti-fibrotic drugs screening. However, several issues have been reported, such as the identification of an optimal BLM dose and administration scheme as well as gender-specificity. Moreover, the balance between disease resolution, an appropriate time window for therapeutic intervention and animal welfare remains critical aspects yet to be fully elucidated. In this thesis, Micro CT imaging has been used as a tool to identify the ideal BLM dose regimen to induce sustained lung fibrosis in mice as well as to assess the anti-fibrotic effect of Nintedanib (NINT) treatment upon this BLM administration regimen. In order to select the optimal BLM dose scheme, C57bl/6 male mice were treated with BLM via oropharyngeal aspiration (OA), following either double or triple BLM administration. The triple BLM administration resulted in the most promising scheme, able to balance disease resolution, appropriate time-window for therapeutic intervention and animal welfare. The fibrosis progression was longitudinally assessed by micro-CT every 7 days for 5 weeks after BLM administration and 5 animals were sacrificed at each timepoint for the BALF and histological evaluation. The antifibrotic effect of NINT was assessed following different treatment regimens in this model. Herein, we have developed an optimized mouse model of pulmonary fibrosis, enabling three weeks of the therapeutic window to screen putative anti-fibrotic drugs. micro-CT scanning, allowed us to monitor the progression of lung fibrosis and the therapeutical response longitudinally in the same subject, drastically reducing the number of animals involved in the experiment.