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Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

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We studied the effects of Amphotericin B (AmB) on Cryptococcus neoformans using different viability methods (CFUs enumeration, XTT assay and propidium iodide permeability). After 1 h of incubation, there were no viable colonies when the cells were exposed to AmB concentrations >= 1 mg/L. In the same conditions, the cells did not become permeable to propidium iodide, a phenomenon that was not observed until 3 h of incubation. When viability was measured in parallel using XTT assay, a result consistent with the CFUs was obtained, although we also observed a paradoxical effect in which at high AmB concentrations, a higher XTT reduction was measured than at intermediate AmB concentrations. This paradoxical effect was not observed after 3 h of incubation with AmB, and lack of XTT reduction was observed at AmB concentrations higher than 1 mg/L. When stained with dihydrofluorescein, AmB induced a strong intracellular oxidative burst. Consistent with oxidative damage, AmB induced protein carbonylation. Our results indicate that in C. neoformans, Amphotericin B causes intracellular damage mediated through the production of free radicals before damage on the cell membrane, measured by propidium iodide uptake. (C) 2011 Institut Pasteur. Published by Elsevier Masson SAS. All rights reserved.

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Apocynin has been used as an efficient inhibitor of the NADPH oxidase complex and its mechanism of inhibition is linked to prior activation through the action of peroxidascs. Here we studied the oxidation of apocynin catalyzed by myeloperoxidase (MPO) and activated neutrophils. We found that apocynin is easily oxidized by MPO/H2O2 or activated neutrophils and has as products dimer and trimer derivatives. Since apocynin impedes the migration of the cytosolic component p47phox to the membrane and this effect could be related to its conjugation with essential thiol groups, we studied the reactivity of apocynin and its MPO-catalyzed oxidation products with glutathione (GSH). We found that apocynin and its oxidation products do not react with GSH. However, this thiol compound was efficiently oxidized by the apocynin radical during the MPO-catalyzed oxidation. We suggest that the reactivity of apocynin radical with thiol compounds could be involved in the inhibitory effect of this methoxy-catechol on NADPH oxidase complex. (c) 2006 Elsevier B.V. All rights reserved.

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Redox processes are involved in the mechanism of action of NADPH oxidase inhibitors such as diphenyleneiodonium and apocynin. Here, we studied the structure-activity relationship for apocynin and analogous ortho-methoxy-substituted catechols as inhibitors of the NADPH oxidase in neutrophils and their reactivity with peroxidase. Aiming to alter the reduction potential, the ortho-methoxy-catechol moiety was kept constant and the substituents at para position related to the hydroxyl group were varied. Two series of compounds were employed: methoxy-catechols bearing electron-withdrawing groups (MC-W) such as apocynin, vanillin, 4-nitroguaiacol, 4-cyanoguaiacol, and methoxy-catechol bearing electron-donating groups (MC-D) such as 4-methylguaiacol and 4-ethylguaiacol. We found that MC-D were weaker inhibitors compared to MD-W. Furthermore, the radicals generated by oxidation of MC-W via MPO/H(2)O(2), but not for MC-D, were able to oxidize glutathione (GSH) as verified by the formation of thiyl radicals, depletion of GSH, and recycling of the ortho-methoxy-catechols during their oxidations. The capacity of oxidizing sulfhydryl (SH) groups was also verified when ovalbumin was incubated with MC-W, but not for MC-D. Since the effect of apocynin has been correlated with inactivation of the cytosolic fractions of the NADPH oxidase complex and its oxidation during the inhibitory process develops a special role in this process, we suggest that the close relationship between the reactivity of the radicals of MC-W compounds with thiol groups and their efficacy as NADPH oxidase inhibitor could be the chemical pathway behind the mechanism of action of apocynin and should be taken into account in the design of new and specific NADPH oxidase inhibitors. (c) 2007 Elsevier B.V. All rights reserved.

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Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

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Foram utilizadas 30 vacas da raça Guzerá (10 por tratamento), suplementadas no pré-parto (PRE), pós-parto (POS) e sem suplementação (SS) com os objetivos de avaliar no pós-parto as variações do peso corporal (PC), do escore de condição corporal (ECC) (1 = muito magra a 9 = muito gorda) e dos níveis plasmáticos de colesterol total (NPCT), o índice de prenhez (IP) até 112 dias pós-parto e a viabilidade econômica dos tratamentos PRE e POS, que constou de 1 kg/dia/animal de concentrado (16% PB; 3000 kcal ED/kg). O PC e o ECC foram obtidos a cada 28 dias, e colheitas de sangue semanalmente para análise dos NPCT até 112 dias pós-parto. O PC e o ECC tiveram interação dias pós-parto x tratamento. O tratamento PRE aumentou o PC e o ECC das vacas ao parto: 477,80 kg e 6,20 respectivamente, em comparação com os tratamentos POS e SS de 453,37 kg e 5,5; 447,57 kg e 5,28, respectivamente. O PC e o ECC do tratamento PRE foi superior de 28 a 84 dias comparado ao SS, enquanto o tratamento POS foi superior apenas de 84 a 112 dias pós-parto. O tratamento POS não diferiu do PRE no PC de 56 a 112 dias pós-parto e no ECC de 28 a 112 dias pós-parto. O tratamento POS proporcionou aumento do PC e ECC das vacas, já os tratamentos PRE e SS perderam PC e ECC até 112 dias pós-parto. O PC e ECC dos tratamentos PRE, POS e SS aos 112 dias pós-parto foram de 457,79 kg e 5,38; 461,87 kg e 5,66; 436,57 kg e 4,78, respectivamente. Os NPCT tiveram efeito dos dias pós-parto, mas não de tratamento, aumentando com os dias pós-parto. Os IP não foram influenciados pelos tratamentos PRE, POS e SS com 50,00; 62,20 e 57,14%, respectivamente. Economicamente a suplementação não foi viável.

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The purpose of this study was to investigate indicators of urban bus drivers involvement in transit accidents. We analyzed their involvement in accidents in relation to several indicators suggested by the literature, including the temporal dimension of those bus drivers, as expressed in Zimbardo's Time Perspective Inventory (ZTPI), for previous studies have shown that people more present time oriented revealed greater tendency to engage in risk driving. A questionnaire was applied to 457 bus drivers of the city of Natal, RN, Brazil, with questions about participants socio-demographic information, their professional performance and items on time perspective, presented in a five points Likert type scale. Among the indicators analyzed, the best predictors of traffic accidents were: worried about not being on schedule, family problems, and falling asleep; to work overtime, passengers complaints, work while on vacations and medical leaves. In regard to drivers' time perspective, the sub-scale of "combined present" showed a positive relationship with involvement in transit accidents, while the future scale a negative one, in both cases in accordance with the expect direction, even though the effects have not been statistically significant. The selected predictive variable indicate that traffic accidents are mainly associated to situational factors, that could be prevented through the betterment of work conditions of the bus drivers and other organizational and public policies, since transit accidents should be part of initiatives in the areas of health and safety

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Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

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Objective: To investigate the degree of debris, roughness, and friction of stainless steel orthodontic archwires before and after clinical use.Materials and Methods: For eight individuals, two sets of three brackets (n = 16) each were bonded from the first molar to the first premolar. A passive segment of 0.019- x 0.025-inch stainless steel archwire was inserted into the brackets and tied by elastomeric ligature. Debris level (via scanning electron microscopy), roughness, and frictional force were evaluated as-received and after 8 weeks of intraoral exposure. Mann-Whitney, Wilcoxon signed-rank, and Spearman correlation tests were used for statistical analysis at the .05 level of significance.Results: There were significant increases in the level of debris (P = .0004), roughness of orthodontic wires (P = .002), and friction (P = .0001) after intraoral exposure. Significant positive correlations (P < .05) were observed between these three variables.Conclusion: Stainless steel rectangular wires, when exposed to the intraoral environment for 8 weeks, showed a significant increase in the degree of debris and surface roughness, causing an increase in friction between the wire and bracket during the mechanics of sliding. (Angle Orthod. 2010;80:521-527.)

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INTRODUÇÃO: Dados da literatura sugerem que as taxas de tromboembolismo e sangramento em pacientes com próteses valvares cardíacas mecânicas podem ser muito reduzidas se a terapia anticoagulante for otimizada. OBJETIVOS: Avaliar a ocorrência de complicações em portadores de próteses valvares cardíacas mecânicas submetidos à terapêutica anticoagulante, otimizada por meio de ambulatório especializado. MÉTODOS: Estudou-se a ocorrência de complicações ao longo de 10 anos em 261 pacientes com próteses valvares cardíacas mecânicas, anticoagulados e acompanhados em ambulatório especializado. Esses pacientes foram divididos em dois grupos conforme porcentual de consultas com tempo de protrombina (RNI) dentro do intervalo desejado: G1-0% a 50,00% e G2-50,01% a 100% das consultas. Foram avaliadas as ocorrências de complicações tromboembólicas e hemorrágicas na sua totalidade, ou subdivididas em maiores e menores, de acordo com a gravidade. Os resultados estão apresentados sob forma de estudo atuarial e de frequência linearizada de ocorrência de eventos. RESULTADOS: O estudo atuarial mostrou que, ao longo do tempo, no grupo G2 (com 50,01% a 100% das consultas com a RNI no intervalo desejado) maior número de pacientes esteve livre da ocorrência de qualquer tipo de evento, de eventos hemorrágicos menores ou da elevação exacerbada da RNI. As frequências linearizadas de ocorrência, em todos os tipos eventos, também foram menores nos pacientes do grupo G2. CONCLUSÕES: O tempo de permanência dentro do intervalo de anticoagulação desejado está diretamente relacionado com a ocorrência de complicações. Entretanto, mesmo com acompanhamento otimizado por meio de ambulatório especializado, apenas cerca de um terço dos pacientes apresentaram nível de anticoagulação adequado em mais da metade das consultas.

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As serpentes peçonhentas dos gêneros Bothrops e Crotalus têm sido mantidas em cativeiro visando à extração de venenos para a produção de imunobiológicos. O conhecimento da fisiologia desses animais e as alterações na concentração de proteínas e suas frações séricas são importantes para a identificação precoce de importantes enfermidades que cursam com estados de hipoproteinemia e hiperproteinemia. O objetivo do trabalho foi determinar a concentração de proteína total e o perfil eletroforético das proteínas séricas de serpentes Crotalus durissus terrificus (cascavel) criadas em cativeiro. Foram colhidas amostras de sangue da veia coccígea ventral de 21 serpentes adultas e sadias, divididas em dois grupos: Grupo 1 de 12 machos com peso médio de 588,89±193,55g, e Grupo 2 de nove fêmeas com peso médio de 708,33±194,04g. A proteína total sérica foi determinada pelo método de refratometria e a eletroforese em gel de agarose. Obtiveram-se valores da proteína total sérica (g/dL) de 4,51±0,50 para machos e de 4,82±0,72 para fêmeas, e para machos e fêmeas de 4,64±0,61. Foram identificadas pela eletroforese quatro frações protéicas (g/dL): albumina, a, b, g-globulinas e calculada a relação albumina:globulina. As serpentes fêmeas apresentaram maiores valores para as variáveis, albumina e para a relação albumina/globulina (AG) diferindo significativamente (P<0,05) do grupo de machos, porém sem significado clínico.

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Estudaram-se os efeitos do tratamento de frangos de corte com microbiota cecal anaeróbia liofilizada (MCL) e congelada (MCC) sobre a infecção do trato digestivo das aves por Salmonella enterica sorovar Enteritidis. Foi usada microbiota intestinal sem prévia identificação bacteriana. A infecção foi persistente, em ordem, no ceco, inglúvio e duodeno. A infecção também foi autolimitante nos grupos tratados e no controle. Não ocorreu diferença entre o grupo-controle positivo e os tratados com MCL ou MCC. Houve redução da colonização do ceco no período de 12 dias após o desafio nos grupos tratados com MCL e MCC, o que não ocorreu no grupo-controle positivo. Não houve variação entre os tratamentos com MCL e MCC quanto às características pesquisadas. A S. Enteritidis reduziu o ganho de peso médio nas aves inoculadas. Os tratamentos com MCL e MCC minimizaram a redução de peso nos grupos infectados.

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Este trabalho avaliou o efeito do farelo e da farinha de semente de algodão no ganho de peso e na atividade testicular de alevinos de tilápia-do-nilo (Oreochromis niloticus). Cento e cinqüenta alevinos com peso médio inicial de 1,26 g foram mantidos em aquários de 45 L, com renovação contínua d'água, e alimentados por 120 dias com dietas isoprotéicas (28% PB) e isocalóricas (4.030 kcal EB/kg de ração) contendo 0%, 2%, 4% e 6% de semente de algodão descorticada e moída, e 24% de farelo de algodão. Foi observado que os níveis avaliados interferem na atividade testicular, diminuindo a espermatogênese, embora não tenham comprometido de forma significativa o ganho de peso dos alevinos.