Impact of proximal cytoplasmic droplets on quality traits and in-vitro embryo production efficiency of cryopreserved bull spermatozoa

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

ORIGIN and EVOLUTION of DOMESTIC CATTLE

The origin and evolution of domestic cattle have recently moved to the forefront of the scientific literature in consideration of their links to human history and to decisions on Genetic Resources conservation strategies. DNA from modern and ancient Bos samples is being analysed to reconstruct, in cooperation with archaezoology, the main events and forces that shaped nowadays cattle genetic diversity. Still, a number of open questions remain, that hopefully will be answered with the help of new technologies and the combined analysis of worldwide data.

Timed artificial insemination in beef cattle using GnRH agonist, PGF2alpha and estradiol benzoate (EB)

The present work evaluated low-cost protocols for timed artificial insemination (TAI) in beef cattle. In Experiment 1, cycling nonlactating Nelore cows (Bos indicus, n=98) were assigned to the following groups: GnRH-PGF (GP) and GnRH-PGF-GnRH (GPG), whereas cycling (n=328, Experiment 2) or anestrus (n = 225, Experiment 3) lactating (L) cows were divided into 3 groups: GP-L, GPG-L and GnRH-PCF-Estradiol benzoate (GPE-L). In Experiment 4, lactating cows (n=201) were separated into 3 groups: GP-L, GPE-L and G 1/2PE-L. Animals from Experiment 1, 3 and 4 were treated (Day 0), at random stages of the estrous cycle, with 8 mug of buserelin acetate (GnRH agonist) intramuscularly (im), whereas in Experiment 2 half of the cows received 8 and the other half 12 mug of GnRH (im). Seven days later (D 7) all animals were treated with 25 mg of dinoprost trometamine (PGF2 alpha, im) except those cows from the G 1/2PE-L group which received only 1/2 dose of PGF2 alpha (12.5 mg) via intravulvo-submucosa (ivsm). Alter PGF2 alpha injection the animals from the control groups (GP and GP-L) were observed twice daily to detect estrus and Al was performed 12 h afterwards. The cows from the other groups received a second GnRH injection (D 8 in GPG-L and d9 in GPG groups) or one injection of estradiol benzoate (EB, 1.0 mg, D 8 in GPE-L group). All cows from GPG and GPG-L or GPE-L groups were AI 20 to 24 or 30 to 34 h, respectively, after the last hormonal injection. Pregnancy was determined by ultrasonography or rectal palpation 30 to 50 days after AI. In the control groups (GP and GP-L) percentage of animals detected in heat (44.5 to 70.3%) and pregnancy rate (20 to 42%) varied according to the number of animals with corpus luteum (CL) at the beginning of treatment. The administration of a second dose of GnRH either 24 (Experiment 2) or 48 h (Experiment 1) after PGF2 alpha resulted in 47.7 and 44.9% pregnancy rates, respectively, after TAI in cycling animals. However, in anestrus cows the GPG treatment induced a much lower pregnancy rate (14.9%) after TAI. The replacement of the second dose of GnRH by EB (GPE-L) resulted in a pregnancy rate (43.3%) comparable to that obtained after GnRH treatment (GPG-L, 47.7%, Experiment 2). Furthermore, the use of 1/2 dose of PGF2 alpha (12.5 mg ivms, Experiment 4) resulted in pregnancy rate (43.5%) similar to that observed with the full dose (im). Both protocols GPG and GPE were effective in synchronizing ovulation in cycling Nelore cows and allowed approximately a 45% pregnancy rate after TAI. Additionally, the GPE treatment is a promising alternative to the use of GPG in timed Al of beef cattle, due to the low cost of EB when compared to GnRH agonists. (C) 2001 by Elsevier B.V.

Superovulation and embryo transfer in Bos indices cattle

Compared to Bos taurus breeds, Bos indices breeds of cattle present several differences in reproductive physiology. Follicular diameter at deviation and at the time of ovulatory capability are smaller in B. indicus breeds. Furthermore, B. indicus breeds have a greater sensitivity to gonadotropins, a shorter duration of estrus, and more often express estrus during the night. These differences must be considered when setting up embryo transfer programs for B. indicus cattle. In recent studies, we evaluated follicular dynamics and superovulatory responses in B. indicus donors with the objective of implementing fixed-time AI protocols in superstimulated donors. Protocols using estradiol and progesterone/progestrogen releasing devices to control follicular wave emergence were as efficacious as in B. taurus cattle, allowing the initiation of superstimulatory treatments (with lower dosages of FSH than in B. taurus donors) at a self-appointed time. Furthermore, results presented herein indicate that delaying the removal of progesterone/progestogen-releasing devices, combined with the administration of GnRH or pLH 12 h after the last FSH injection, results in synchronous ovulations, permitting the application of fixed-time AI of donors without the necessity of estrus detection and without compromising the results. (c) 2005 Elsevier B.V. All rights reserved.

Synchronization of ovulation in crossbred dairy heifers using gonadotrophin-releasing hormone agonist, prostaglandin F2a and human chorionic gonadotrophin or estradiol benzoate

Girolando (Gir x Holstein) is a very common dairy breed in Brazil because it combines the rusticity of Gir (Bos indicus) with the high milk yield of Holstein (Bos taurus). The ovarian follicular dynamics and hormonal treatments for synchronization of ovulation and timed artificial insemination were studied in Girolando heifers. The injection of a gonadotrophin-releasing hormone (GnRH) agonist was followed 6 or 7 days (d) later by prostaglandin F2a (PGF2a). Twenty-four hours after PGF2a injection either human chorionic gonadotropin (hCG, GPh-d6 and GPh-d7 groups) or estradiol benzoate (EB, GPE-d6 and GPE-d7 groups) was administered to synchronize ovulation and consequently allow timed artificial insemination (AI) 24 and 30 h after hCG and EB injection, respectively. Follicular dynamics in Girolando heifers was characterized by the predominance of three follicular waves (71.4%) with sizes of dominant follicles (10-13 mm) and corpus luteum (approximately 20 mm) similar to those for Bos indicus cattle. In the GnRH-PGF-hCG protocol, hCG administration induced earlier ovulation (67.4 h, P<0.01) compared to the control group (GnRH-PGF) and a better synchronization of ovulation, since most of it occurred within a period of 12 to 17 h. Pregnancy rate after timed AI was 42.8 (3/7, GPh-d6) to 50% (7/14, GPh-d7). In contrast, estradiol benzoate (GnRH-PGF-EB protocol) synchronized ovulation of only 5 of 11 heifers from the GPE-d7 group and of none (0/7) from the GPE-d6 group, which led to low pregnancy rates after timed AI (27.3 and 0%, respectively). However, since a small number of Girolando heifers was used to determine pregnancy rates in the present study, pregnancy rates should be confirmed with a larger number of animals.

Single nucleotide polymorphisms in the bovine genome are associated with the number of oocytes collected during ovum pick up

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Heparin-binding proteins of seminal plasma in Nellore bulls

O objetivo deste estudo foi identificar proteínas ligadoras à heparina no plasma seminal de touros Nelore (Bos taurus indicus). Para tanto, foram selecionados quatro touros entre 30 e 36 meses de idade e peso aproximado de 500-550kg. Após centrifugação, amostras do plasma seminal foram misturadas e as proteínas ligadoras à heparina foram isoladas por meio da cromatografia por afinidade. As frações após a eluição foram agrupadas para caracterização das bandas protéicas (SDSPAGE, 12,5%). Foram identificadas oito bandas protéicas variando entre 15 e 63kDa. Duas proteínas com 22 e 25kDa foram similares às descritas em touros Bos taurus taurus. Outras proteínas identificadas com 39, 53, 58 e 63kDa ainda não foram descritas e possivelmente sejam específicas para Bos taurus indicus.

Quantification of bovine cytokine gene expression using real-time RT-PCR methodology

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

mRNA profile of Nellore calves after primary infection with Haemonchus placei

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Exigência mínina de fósforo em novilhos da raça Nelore

A determinação da absorção real de fósforo (P) em bovinos deve levar em consideração a fração endógena mínina do mineral, que se perde nas fezes. de modo geral esses cálculos são feitos utilizando-se tabelas cujos valores foram obtidos em outros países, com outras raças de animais e em condições bem diferentes das condições brasileiras. O trabalho teve como objetivo determinar a perda endógena de P nas fezes e estimar a exigência mínima de P em novilhos da raça Nelore (Bos indicus). Foram utilizados 18 novilhos castrados, com peso médio de 190,82±27,53 kg e idade aproximada de 12 meses, divididos em três grupos de seis animais, e mantidos em gaiolas metabólicas individuais. Os animais receberam dieta básica constituída de feno de Brachiaria decumbens e uma mistura de concentrados durante os 30 dias de período experimental. Os tratamentos consistiram de diferentes quantidades de fosfato bicálcico em níveis de 0,12, 0,24 e 0,36% de P, com base na dieta total. Foram aplicadas injeções de 32P nos animais para a determinação da perda endógena fecal de P. A perda endógena mínima fecal de P para uma ingestão zero do mineral, calculada por interpolação, foi de 5,72 mg/kg de peso vivo e para um balanço zero, o requerimento mínimo foi de 8,84 mg/kg de peso vivo por dia.

Cytogenetic and molecular analysis of the Pantaneiro cattle breed

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Mitochondrial DNA of Nellore and European x Nellore crossing cattle of high performance

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Caracterização das áreas hemófagas da placenta bovina

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

O cromossomo Y na raça Chianina no Brasil

Foram cariotipados 95 touros puros de origem, da raça Chianina, ditribuidos em 19 empresas pastoris, em 5 estados brasileiros. O objetivo foi investigar a incidência de indivíduos portadores de cromossomo Y acrocêntrico, típico das raças de Bos taurus indicus, face às especulações de que as raças indianas poderiam ter contribuido para a formação do Chianina. Todos os indivíduos avaliados mostraram o cromossomo Y de Bos taurrus taurus. O índice centromérico obtido foi de 43,91%, o que permitiu classificar o centrômero deste cromossomo como localizado na região mediana. Foram avaliados também 29 touros com o objetivo de verificar a presença do polimorfismo intraracial do cromossomo Y. O índice centromérico e o tamanho relativo do Y foi determinado. O tamanho do cromossomo X serviu como base para estimar o tamano relativo do Y. A análise de variância mostrou diferenças entre touros apenas no tamanho relativo do Y, sendo que o índice centromérico não difereiu entre os mesmos. Concluimos que este polimorfismo indica que a raça Chianina pode ter recebido contribuição de outras raças em passado remoto ou pode também indicar a possibilidade de cruzamentos mais recentes.

População protozoários ciliados e degradabilidade ruminal em búfalos e bovinos zebuínos sob dieta à base de cana-de-açúcar

Três búfalos e três bovinos zebuínos adultos com cânulas ruminais foram alimentados à vontade com dieta de cana-de-açúcar fresca e picada, suplementada com 3 kg de concentrado/animal, durante 13 semanas. Após duas semanas de adaptação, amostras do conteúdo ruminal foram coletadas semanalmente, em dois tempos de amostragem: antes da alimentação e 40 minutos após para determinação da concentração e composição da fauna ruminal. Na quinta semana do experimento, os conteúdos ruminais foram misturados e reinoculados entre animais de mesma espécie e, na última semana, estimadas as degradabilidades in situ da MS, PB e FDN da cana-de-açúcar e MS e PB do concentrado. A concentração média de protozoários foi maior em bovinos, de 4,85 x 10(5)/mL, que em búfalos, de 3,82 x 10(5)/mL. As composições genéricas para Entodinium e subfamília Diplodiniinae foram 79,2 e 6,2% em bovinos e 32,0 e 54,9% em búfalos, respectivamente. Não houve interação significativa entre espécies animais e tempo de amostragem. Houve aumento da concentração média dos holotricos após 40 minutos da alimentação. As degradabilidades efetivas dos nutrientes estudados foram semelhantes entre as duas espécies animais, observando-se diferenças na cinética da degradação. Concluiu-se que os búfalos apresentaram menor concentração de ciliados no rúmen, maior composição de Diplodiniinae e menor de Entodinium que os bovinos; os holotricos exibiram capacidade de migração e seqüestro no rúmen em ambas as espécies; e as diferenças na fauna ruminal não influenciaram a degradabilidade efetiva dos nutrientes da cana-de-açúcar e do concentrado.