Production and characterization of a milk-clotting protease in the crude enzymatic extract from the newly isolated Thermomucor indicae-seudaticae N31 (Milk-clotting protease from the newly isolated Thermomucor indicae-seudaticae N31)

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Estrutura dos grânulos de amido de milho normal e ceroso

Visando obter informações a respeito da estrutura dos grânulos, amidos de milho normal e ceroso foram isolados e submetidos à ação da a-amilase e amiloglucosidase. Para elucidar a estrutura dos grânulos, os resíduos desta hidrólise foram submetidos à cromatografia de permeção em gel Sephadex G-50, diretamente e após sucessivas digestões enzimáticas com pululanase e b-amilase. Os resultados mostraram que existem diferenças nos resíduos dos amidos de milho ceroso e normal, tratados com a-amilase e amiloglucosidase. No resíduo do amido de milho ceroso, os perfis de eluição mostraram duas frações a 290 e 350 ml (picos I e II) respectivamente, que não eram suscetíveis ao ataque da a-amilase e amiloglucosidase, indicando que estas frações faziam parte das zonas cristalinas do amido. Estas frações também faziam parte das áreas cristalinas no amido normal. A presença do pico V à 390 ml na a-glucana do amido de milho normal sugeriu que além das duas frações não suscetíveis à hidrólise existia outra que também participava das zonas cristalinas deste amido como regiões não suscetíveis às enzimas formando, consequentemente, rede cristalina fortemente associada. A presença deste pico a 390 ml sugeriu arranjo cristalino distinto entre o amido de milho ceroso e o normal.

Enzymatic toxins from snake venom: structural characterization and mechanism of catalysis

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Ribonuclease production by Aspergillus species

Ribonuclease production by Aspergillus flavipes. A sulphureus and A. fischeri in semisynthetic medium, after 24-144 hours at 30 degrees C under shaking, was studied. After cultivation, the medium was separated from micelia by filtration and the resultant solution was used as enzymatic extract. The highest amount of biomass and RNase was obtained after 96 hours of cultivation. The enzymes produced by three species presented similar characteristics, with optimum temperature at 55 degrees C and two peaks of activity at pH 4.5 and 7.0. A. flavipes RNases were more sensitive to temperature: 50% of the initial activity was lost after 1 hour at 70 degrees C. After this heat treatment, RNase of A. sulphureus lost 30% of this activity and that of A. fischeri only 16%. The nucleotides released by enzimatic hydrolysis of RNA were separated by ion exchange chromatography in a AG-1X8-formiate column and identified by paper chromatography. This procedure indicated that the raw enzymatic extract of Aspergillus flavipes is able to hydrolyze RNA, releasing 3'-nucleotides monophosphate at pH 4.5 and 3' and 5'-nucleotides monophosphate at pH 7.0 and 8.5. This result suggests that this strain produces two different types of RNase, one acidic and other alcaline, with different specificities.

Enzymatic Activity, Sensitivity to Antifungal Drugs and Baccharis dracunculifolia Essential Oil by Candida Strains Isolated from the Oral Cavities of Breastfeeding Infants and in Their Mothers' Mouths and Nipples

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Small-angle X-ray scattering from wet gels prepared from co-hydrolysis of tetraethoxysilane and vinyltriethoxysilane

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Colorimetric enzymatic assay of L-malic acid using dehydrogenase from baker's yeast

A colorimetric method has been developed and optimized to measure L-malic acid in samples of fruit juices and wine. This method is based on oxidation of the analyte, catalyzed by malate dehydrogenase (MDH) from dry baker's yeast, and in combination with the reduction of a tetrazolium salt (MTT: 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide). In the present study, the method exhibited sensitivity in the range of 500-4000 mu M of L-malic acid in the reaction cuvette, with the lower detection limit of 6.7-10(-2) g/L, the upper limit of 53.6.10(-2) g/L and a maximum standard deviation of only 2.5 % for the analyzed samples. The MDH activity from baker's yeast was also optimized, the enzyme showed a high stability at pH=8.0-9.0 and the activity was maintained completely at temperatures up to 40 degrees C for 1 hour. The results show that the colorimetric method using enzymatic preparations from dry baker's yeast is a simple and low-cost method with possibility of wide application.

Hydrolysis of whey lactose by immobilized β-Galactosidase

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Quartz crystal microbalance as a tool for kinetic enzymatic assays by variation of pH

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Geranylation of benzoic acid derivatives by enzymatic extracts from Piper crassinervium (Piperaceae)

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Spectrophotometric Determination of Paracetamol in Pharmaceuticals Using Microwave-Assisted Hydrolysis and a Micellar Medium

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Improvement in RNA extraction from S. cerevisie by optimization in the autolysis and NH3 hydrolysis

The optimization of autolysis of Saccharomyces cerevisiae from brewery was studied aiming at the maximum ribonucleic acid extraction and yeast extract production. The best conditions for yeast autolysis was 55.2ºC, pH= 5.1 and 9.8% NaCl for 24h of processing, without the NH3 use. In these conditions, the RNA yield was 89.7%, resulting in 51.3% of dehydrated yeast extract with 57.9% protein. The use of 12.2% NH3 at 60ºC after autolysis (8h) and plasmolysis (8h) was not viable due to the reduction in the RNA yield from 89.7to78.4%. on the other hand, the thermal shock at 60ºC for 15 minutes prior to autolysis provided an increase in the yield from 89.7 to 91.4%. The autolysis, including NaCl plasmolysis in the optimized conditions was efficient, economic and with short time, thus usable for industrial purpose to obtain more valuable products such as yeast extract enriched in RNA and/or protein, for different applications.

Physiological quality and enzymatic activity of crambe seeds after the accelerated aging test

O crambe é uma cultura promissora para produção de biodiesel, principalmente pelo alto conteúdo de óleo de suas sementes. No entanto, não há metodologias estabelecidas para avaliar a qualidade fisiológica das sementes desta espécie e lotes não podem ser comparados, especialmente por testes de vigor, como o de envelhecimento acelerado. O objetivo da presente pesquisa foi avaliar o efeito da alta temperatura e do período de exposição durante o teste de envelhecimento acelerado na qualidade fisiológica e atividade enzimática de sementes de crambe. Dois lotes de sementes de crambe, cultivar Brilhante, foram analisados por meio dos testes de teor de água, massa de 1.000 sementes, germinação, primeira contagem, condutividade elétrica, atividade enzimática (peroxidase e superóxido dismutase) e comprimento de plântulas. As avaliações foram conduzidas antes e após o envelhecimento acelerado, que foram testadas diferentes temperaturas (38, 40 e 42ºC) e períodos de exposição (24, 48 e 72h). O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado com quatro repetições. Os dados foram submetidos à análise de variância e as médias foram comparadas pelo teste de Tukey (p < 0.05). O teste de Dunnet (p < 0.05) foi utilizado para comparar os valores da testemunha (antes do envelhecimento acelerado) com cada valor médio individualmente. O teste de correlação linear simples também foi aplicado. Conclui-se que a interação temperatura x período de exposição afeta a qualidade fisiológica das sementes e a atividade enzimática e que as melhores condições durante o teste de envelhecimento acelerado são dependentes do genótipo.

Hidrólise da uréia em latossolos: efeito da concentração de uréia, temperatura, pH, armazenamento e tempo de incubação

Este trabalho objetivou estudar a velocidade de hidrólise da uréia em dois diferentes solos brasileiros (Latossolo Vermelho Aluminoférrico típico e Latossolo Vermelho distrófico típico) onde foram realizados ensaios sobre o efeito do tempo e condições de armazenamento, concentração do substrato (uréia), temperatura, pH e tempo de incubação sobre a atividade da urease. As melhores condições de armazenamento foram em temperatura ambiente ou 5 ºC, após secagem ao ar, por um período de até 7 dias; para as condições estudadas, o melhor tempo de incubação foi de uma hora a 25-30 ºC, sem a utilização de tampão para acertar o pH, e a concentração de uréia suficiente foi de 3,30 g L-1, para o Latossolo Vermelho Aluminoférrico típico, e de 2,5 g L-1, para o Latossolo Vermelho distrófico típico para obter a velocidade máxima da enzima.