Clonagem, expressão e purificação de três mutantes truncados da proteína LaRPA-1 de Leishmania amazonensis

A leishmaniose é uma doença que atinge milhões de pessoas no mundo e, de acordo com a FUNASA, está se espalhando por todas as regiões do Brasil. O tratamento desta zoonose é ineficaz, pois os fármacos utilizados apresentam muitos efeitos colaterais e colaboram com o aparecimento de parasitas e vetores resistentes. Portanto um maior conhecimento sobre a biologia molecular destes protozoários poderá facilitar o descobrimento de novas terapias e desenvolvimento de drogas antiparasitárias. O complexo telomérico é formado pela interação de DNA com proteínas, sendo que estas últimas podem também interagir entre si. A proteína RPA de eucariotos compreende um complexo trimérico subdividido em três subunidades. Este cumpre independentemente ou juntamente com outras proteínas diversas funções vitais para a célula, entre elas, auxiliar na manutenção dos telômeros e ajudar a recrutar a telomerase. Além disso, ela parece ser um dos principais componentes do complexo de proteínas que interagem com o terminal simples fita telomérico de protozoários tripanosomatídeos. Curiosamente, em Leishmania spp., as subunidades 2 e 3, ao contrário da subunidade 1 da RPA, não fazem parte do complexo telomérico. Portanto a LaRPA-1 pode apresentar comportamentos peculiares quando comparada a RPA dos outros eucariotos, e se tornar um importante alvo ao se estudar a biologia molecular do parasita. Este trabalho tem como objetivo clonar, expressar e purificar os três diferentes mutantes truncados da proteína LaRPA-1 para, futuramente, utilizar-se estas proteínas recombinantes como ligantes em ensaios de interação proteína:proteína, visando mapear possíveis sítios ou domínios na proteína LaRPA-1.O gene que codifica LaRPA-1 já encontrava-se clonado e sequenciado no laboratório de Telômeros da UNESP de Botucatu....(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)

Estudo do envolvimento da neurotransmissão noradrenérgica do córtex pré-frontal medial nas respostas autonômicas desencadeadas pelo estresse por restrição agudo em ratos

O córtex pré-frontal medial (CPFM) é uma região límbica envolvida no controle da atividade autonômica e cardiovascular. Foi demonstrado que a inibição da região infra-límbica (IL) do CPFM reduziu as repostas comportamentais, neuroendócrinas e autônomas induzidas por estímulos aversivos. Entretanto, apesar das evidências de um importante papel do córtex IL na integração das respostas ao estresse, informações sobre os mecanismos neuroquímicos locais envolvidos no controle destas respostas ainda são escassos. Diante disso, o presente estudo teve o objetivo de investigar um possível envolvimento de mecanismos noradrenérgicos do córtex IL nas respostas autonômicas ao estresse por restrição agudo em ratos. Para tanto, nós investigamos, em grupos independentes de animais, o efeito da microinjeção bilateral no córtex IL de veículo (salina, 100nL), WB4101 (antagonista seletivo de adrenoceptores α1), RX821002 (antagonista seletivo de adrenoceptores α2) e propranolol (antagonista não-seletivo de adrenoceptores β, 10nmol/100nL), sobre as respostas de aumento da pressão arterial (PA) e frequência cardíaca (FC) e redução da temperatura cutânea da cauda induzidas pelo estresse por restrição agudo em ratos. A microinjeção bilateral de WB4101, RX821002 e propranolol no córtex IL não afetou os parâmetros basais de PA, FC e temperatura cutânea da cauda, o que indica uma ausência de influência na manutenção tônica do sistema cardiovascular. Entretanto, o bloqueio de adrenoceptores α1 no córtex IL diminuiu a resposta taquicárdica induzida pelo estresse por restrição, sem afetar as respostas pressora e de redução da temperatura cutânea da cauda. O bloqueio de adrenoceptores α2 no córtex IL reduziu todos os parâmetros analisados e o bloqueio de adrenoceptores β no córtex IL atenuou a resposta de redução da temperatura cutânea induzida pelo estresse por restrição. As respostas de elevação da ...

Desenvolvimento e caracterização de sistemas líquido cristalinos para incorporação de p-metoxicinamato de octila

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Controle postural e informação sensorial em idosos diabéticos praticantes e não praticantes de atividade física

O objetivo deste estudo foi avaliar o desempenho dos sistemas sensoriais e do controle postural de idosos diabéticos e investigar a relação entre as alterações destes sistemas e do controle postural desta população. Participaram deste estudo dez idosos diabéticos ativos (62±4,4 anos) (GDA), 10 diabéticos sedentários (65,5±7,4 anos) (GDS) e 10 idosos saudáveis ativos (63,2±4.5anos) (GCA) foram submetidos a avaliações sensoriais e de controle postural. As avaliações sensoriais foram compostas por avaliação somatossensorial (sensibilidade cutânea e sensibilidade ao movimento passivo). Para avaliar o controle postural foram analisadas medidas de oscilação corporal durante manutenção da postura ereta (em tandem stance e bipodal). Os resultados indicaram pior desempenho do GDS na avaliação do movimento passivo e de controle postural. Nas avaliações de controle postural, o GDS apresentou uma maior amplitude média de oscilação (AMO) (cm) nas condições de manutenção da postura ereta na posição tandem stance na direção médio-lateral. No teste de sensibilidade ao movimento passivo, o GDS precisou, em média, de um maior deslocamento angular para perceber o movimento das articulações do joelho e tornozelo. Estes resultados indicam, portanto, que as alterações estruturais e fisiológicas decorrentes do diabetes, resultam em piora do desempenho dos sistemas sensoriais e de controle postural. Além disso, a maior deterioração do sistema proprioceptivo em idosos diabéticos pode interferir negativamente no desempenho de controle postural dos mesmos. Desta forma, a atividade física minimiza a perda sensorial e ainda ajuda no controle postural dos diabéticos.

Estudo do envolvimento da neurotransmissão noradrenérgica do córtex pré-límbico nas respostas autônomas desencadeadas pelo estresse por restrição agudo em ratos

As respostas fisiológicas durante o estresse emocional são mediadas por estruturas límbicas no sistema nervoso central através da ação de vários mecanismos neuroquímicos. O córtex pré-frontal medial (CPFM) é uma região límbica envolvida na integração de respostas comportamentais e fisiológicas ao estresse. Estudos anteriores demonstraram que as sub-regiões do CPFM denominadas pré-límbica (PL) e infra-límbica (IL) parecem ter funções diferentes no controle das respostas ao estresse. Neste sentido, estudos tem sugerido uma função inibitória do córtex PL, ao passo que a ativação do córtex IL parece ter uma ação facilitatória sobre as respostas comportamentais, cardiovasculares e neuroendócrinas ao estresse. Apesar das evidências de um importante papel do CPFM na integração das respostas ao estresse, informações acerca dos mecanismos neuroquímicos locais, envolvidos no controle destas respostas, ainda são escassos. Diante disso, o presente estudo teve o objetivo de investigar, em grupos independentes de animais, o efeito da microinjeção bilateral no córtex PL de WB4101 (antagonista seletivo de adrenoceptores α1), RX821002 (antagonista seletivo de adrenoceptores α2) ou propranolol (antagonista não-seletivo de adrenoceptores β) nas respostas de aumento da pressão arterial (PA) e frequência cardíaca (FC) e redução da temperatura cutânea da cauda induzidas pelo estresse por restrição agudo em ratos. A microinjeção bilateral no córtex PL tanto de WB4101 quanto de RX821002 reduziram as respostas de elevação da PA e FC e a redução na temperatura cutânea da cauda induzidas pelo estresse por restrição. O tratamento local do córtex PL com propranolol reduziu a resposta de temperatura cutânea da cauda, sem afetar os demais parâmetros investigados. Assim, os ...

Incorporação do trans-resveratrol em sistemas nanoestruturados: avaliação das ações antioxidante e despigmentante in vitro

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Obtenção de uma nova proteína recombinante componente do complexo telemérico LAGT1 de Leishmania Amazonensis

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Genotipagem das mutações do gene humano que codifica a lectina ligante da manose de voluntários do Departamento de Parasitologia do Instituto de Biociências

A leishmaniose é uma doença causada pelo protozoário do gênero Leishmania, possuindo uma variedade de formas clínicas. A mais severa é a Leishmaniose visceral, que no Brasil é causada por L. chagasi e transmitida pelo flebotomíneo Lutzomia longipalpis. O cão, tanto o doméstico como o selvagem, é o principal reservatório no ciclo zoonótico da doença, que no Brasil ocorre principalmente na região nordeste. Através de estudos epidemiológicos realizados em áreas endêmicas, notou-se que apesar do elevado número de pessoas infectadas, poucas manifestavam a doença. Isso pode ser explicado pelo estado nutricional e imunológico do paciente, infecção por HIV e variabilidade das cepas, visto que a heterogeneidade genética e diversidade clonal estão relacionadas a variações nos fatores de virulência do parasita. A lectina que se liga à manose (Mannose-Binding Lectin), ou MBL, é uma proteína que pode estar relacionada ao desenvolvimento da doença, uma vez que pode se ligar a carboidratos na membrana externa de patógenos, agindo como uma opsonina e facilitando assim a ação de macrófagos. Altas concentrações desta proteína podem ser desvantajosas, uma vez que pode facilitar a infecção por LV. Genes mutados podem contribuir para a variação do nível sérico da proteína diminuindo as taxas de transcrição do gene. Concluindo, o projeto tem o intuito de identificar e genotipar mutações específicas no promotor e no exon 1 do gene que codifica a MBL em humanos. A realização do estudo permitirá também, a consolidação de uma base de dados para estudos posteriores envolvendo a genética populacional da Lectina Ligante de Manose

Detecção de marcadores de resistência a múltiplas drogas na pele de cães com infecção natural por Leishmania (Leishmania) infantum chagasi (Cunha e Chagas, 1937) Shaw, 2002, submetidos a diferentes protocolos de tratamento

Pós-graduação em Medicina Veterinária - FCAV

Síntese e avaliação biológica de bioisósteros de nitrofural ativos contra Leishmania amazonensis

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Ocorrência de infecção por Leishmania sp. em cães no município de Florianópolis, Santa Catarina

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Efeitos da adição de mananoproteínas derivadas da parede celular de leveduras sobre parâmetros imunológicos de cães adultos e idosos

Pós-graduação em Medicina Veterinária - FCAV

Indicadores Antropométricos do Estado Nutricional de Idosas Praticantes e Não Praticantes de Exercício Fisíco na Zona Norte de São José do Rio Preto-SP

Although the regular practice of physical exercise for the maintenance of the nutritional state and quality of life is important, it is not a common habit among the elderly, especially those of the lower income social bracket. The objective was to characterize and compare according to social-economic conditions and anthropometric indexes of the nutritional state of the elderly who regularly practice and those who do not practice exercises, offered at no cost, in the Northern zone of São José do Rio Preto-SP. In this study, 110 elderly women participated, of which 60 (group P) exercised regularly and 50 did not (group NP). Group P participated in a special gym program, free of charge, for at least 2 years, 2 to 3 times a week, one hour a day. Group NP was recruited from the same location as Group P. The comparison between the groups of elderly women was proportionately distributed according to marital status, level of education, means of locomotion, results of body mass index (IMC), waist to hip ratio (RCQ) and calf circumference, using the chi-square test. Comparisons were also made of average age, per capita family income, individual income, IMC, arm and triceps skin fold measured by t-Test. Differences were not found in all the comparisons made. The variables that stood out were the IMC (overweight) and RCQ (risk of chronic diseases) results, which were above what was expected, and the high frequency of walking and riding buses for both groups of elderly women (about 60%). We came to the conclusion that the low-intensity exercise program evaluated made no difference in the nutritional profile of the elderly who also used walking as a means of getting around.

Padronização de técnica histoquímica de mensuração de lipídios da epiderme de cães e mensuração de lipídios da epiderme de cães atópicos antes e após reposição tópica de lipídios e ceramidas

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Conhecimento de diferentes populações sobre as leishmanioses

As leishmanioses são enfermidades infecciosas que costumam afetar populações de países de clima tropical e subtropical, em sua maioria subdesenvolvidos, uma vez que seus principais vetores necessitam de condições ambientais e climáticas adequadas facilmente encontradas nessas regiões, para se proliferar. Há diferentes formas clínicas que se caracterizam por sua evolução crônica, sendo a forma visceral (LV) uma das mais graves. Neste caso, a disseminação é relativamente rápida uma vez que existe também a abundância de um dos seus principais reservatórios domésticos, o cão, que vive bem próximo ao homem, o qual é também acometido por esta zoonose. Dessa maneira é preciso que as populações, principalmente aquelas localizadas em áreas endêmicas, saibam identificar os pontos principais dessa doença como a transmissão, sinais clínicos e prevenção. Por esse motivo, essa revisão sistemática objetivou procurar saber qual o conhecimento de diferentes populações sobre as leishmanioses. Foram utilizados os seguintes descritores: (knowledge) AND (population) AND (leishmaniasis), através de um levantamento bibliográfico em três bases de dados, LILACS, SCIELO e PUBMED. Foi possível concluir, através da análise de sete artigos, que o conhecimento das leishmanioses ainda se encontra muito superficial dentro das populações e que a principal fonte de informação ainda é a informal, de pessoa a pessoa