Viability of OPS Vitrified Sheep Embryos After Direct Transfer

The aim of this study was to evaluate the viability in the effect of open pulled straw (OPS) vitrification procedure of sheep embryos after direct transference. Embryos were produced in vivo and cryopreserved in slow freezing or OPS vitrification. The survival rates of cryopreserved embryos were compared to non-frozen standard pattern. In a first set of experiments, embryos at morula and blastocyst stages were dived in ethylene glycol (1.5 M) and frozen in an automatic freezer. After being thawed, they were directly or indirectly transferred to ewes recipient. A second group of embryos were drawn into OPS and plunged into liquid nitrogen after being exposed at room temperature for 1 min and 45 s in 10% EG plus 10% dimethyl sulphoxide (DMSO), then again for 30 s in 20% EG + 20% DMSO + 0.5 M sucrose. After being warmed, embryos were also directly transferred using a French mini straw as the catheter for the transplantation process or after in vitro dilution of cryoprotectants (two-step-process). No significant difference was observed among fresh, frozen or vitrified embryos on pregnancy rate (50.0%, 38.6% and 55.8%). However, when we evaluated only the direct transference, the pregnancy rate of OPS vitrified embryos was higher than that of frozen embryos (57.1% vs 34.8%) (p = 0.07). In addition, vitrified morulae had a higher pregnancy rate than the one with frozen embryos (64.0% vs 38.9%) (p = 0.07). Finally, our results indicate that OPS vitrification technique in association with direct transference improves the viability of sheep embryos with potential applications to field conditions.

Embryo Transfer Efficiency of Quarter Horse Athletic Mares

This study was designed to compare embryo recovery rates and pregnancy rates of athletic and breeding Quarter Horse mares in a tropical warm climate. Thirty-nine barrel racing mares in training and 135 breeding mares as control donors were included. During the training period, the ambient temperature ranged from 31 degrees C to 36 degrees C and the average humidity from 70% to 90%. After the detection of a 35-mm follicle by ultrasound, ovulation was induced with 1 mg of deslorelin acetate (i.m), and insemination was performed 24 hours later with cooled and fresh semen from different fertile stallions. Embryos were collected on day 8 postovulation. The body temperature (rectal) was evaluated from eight athletic donor mares randomly selected from the same studied group. A total of 138 and 657 embryo collections were carried out on training and breeding mares, respectively, with a total of 105 (76%) and 466 (71%) embryos collected (P > .05). Similarly, no differences (P > .05) were observed for the pregnancy rates on day 15 (82/105, 78% vs. 370/466,79%), and day 40 (73/105, 69% vs. 328/466,70%) between the training and breeding donor mares. Just after training, the body temperature increased to an average of 39.4 degrees C and the respiratory rate from 14.5 to 35.3 breaths per minute. The results of the present study showed that embryo production from appropriately trained donor mares in good condition were similar to non-athletic broodmares. (C) 2011 Published by Elsevier B.V.

Diferenciação in vitro de células-tronco mesenquimais da medula óssea de cães em precursores osteogênicos

O objetivo principal da nossa pesquisa foi avaliar o potencial de diferenciação osteogênica de células-tronco mesenquimais (MSC) obtidas da medula óssea do cão. As MSC foram separadas pelo método Ficoll e cultivadas sob duas condições distintas: DMEM baixa glicose ou DMEM/F12, ambos contendo L-glutamina, 20% de SFB e antibióticos. Marcadores de MSC foram testados, confirmando células CD44+ e CD34- através da citometria de fluxo. Para a diferenciação osteogênica, as células foram submetidas a quatro diferentes condições: Grupo 1, as mesmas condições utilizadas para a cultura de células primárias com os meios DMEM baixa glicose suplementado; Grupo 2, as mesmas condições do Grupo 1, mais os indutores de diferenciação dexametasona, ácido ascórbico e b-glicerolfosfato; Grupo 3, células cultivadas com meios DMEM/F12 suplementado; e Grupo 4, nas mesmas condições que no Grupo 3, mais indutores de diferenciação de dexametasona, ácido ascórbico e b-glicerolfosfato. A diferenciação celular foi confirmada através da coloração com alizarin red e da imunomarcação com o anticorpo SP7/Osterix. Nós observamos através da coloração com alizarin red que o depósito de cálcio foi mais evidente nas células cultivadas em DMEM/F12. Além disso, usando a imunomarcação com o anticorpo SP/7Osterix obtivemos positividade em 1:6 células para o Meio DMEM/F12 comparada com 1:12 para o meio DMEM-baixa glicose. Com base nos nossos resultados concluímos que o meio DMEM/F12 é mais eficiente para a indução da diferenciação de células-tronco mesenquimais caninas em promotores osteogênicos. Este efeito provavelmente ocorre em decorrência da maior quantidade de glicose neste meio, bem como da presença de diversos aminoácidos.

Lipid content and apoptosis of in vitro-produced bovine embryos as determinants of susceptibility to vitrification

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Reuse of norgestomet implants in an eCG-based superovulation protocol administered to Nelore (Bos taurus indicus) cows

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Post-thaw viability of in vivo-produced canine blastocysts cryopreserved by slow freezing

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Análise de Bolton: uma proposta alternativa para a simplificação de seu uso

INTRODUÇÃO: as discrepâncias entre o tamanho mesiodistal dos dentes superiores e inferiores e seus efeitos sobre a oclusão têm sido relatados há muito tempo. O método proposto por Bolton para o diagnóstico de discrepância de tamanho dentário é, inegavelmente, um dos mais difundidos no meio ortodôntico, devido à sua relativa simplicidade. Entretanto, a aplicação desse método requer cálculos matemáticos e o uso de tabelas que, muitas vezes, inviabilizam a sua utilização durante a avaliação clínica. OBJETIVO: avaliar o método proposto por Wolford, que não requer o uso de tabelas, como alternativa ao método tradicional de Bolton. MÉTODOS: a amostra foi composta por 90 pares de modelos dentários iniciais de pacientes adultos, com diferentes más oclusões. A proporção entre os dentes inferiores e superiores foi calculada para cada paciente, resultando na obtenção de dois índices (a razão total e a razão anterior). Os índices foram obtidos por meio do método originalmente proposto por Bolton e por um método alternativo, composto por duas fórmulas (uma simplificada e a variação da mesma), que foram analisadas separadamente. RESULTADOS: comparadas ao método de Bolton, as fórmulas simplificadas mostraram uma tendência de superestimar as discrepâncias dentárias inferiores (total e anterior), embora em pequena proporção. CONCLUSÕES: ambas as fórmulas do método alternativo podem ser utilizadas em substituição ao método tradicional, uma vez que mostraram diferenças médias menores que 0,58mm quando comparadas ao método de Bolton, não apresentando, portanto, significância clínica.