Determinazione di composti bioattivi da campioni di oli di oliva aromatizzati

In questa tesi sperimentale verranno mostrati e discussi i risultati dell’analisi svolta in Spagna presso l’Università di Granada. L’obbiettivo è stato quello di determinare la presenza di composti bioattivi a partire da cinque campioni di oli di oliva aromatizzati prodotti presso le strutture del Campus di Scienze degli Alimenti di Cesena. Per la precisione, si sono valutati tre oli ottenuti mediante aromatizzazione per co-estrazione di olive con arance, sottoprodotti di arance e pepe nero e due campioni di controllo ottenuti per frangitura delle sole olive utilizzate anche per le co-frangiture. Sotto la supervisione di un gruppo di docenti dell’Università di Granada, i campioni sopra citati sono stati sottoposti ad una prima fase di estrazione in soluzione idro-alcolica e ad una successiva analisi esplorativa qualitativa mediante UPLC-DAD-ESI-TOF-MS. I risultati sono stati commentati in relazione alla presenza nell’olio aromatizzato di molecole a struttura fenolica e polifenolica, note per potere esplicare anche in vivo attività salutistiche, che si sono ripartite dalle materie prime vegetali impiegate in co-frangitura all’olio ottenuto. Nello specifico, è emersa la presenza di composti bioattivi peculiari dei frutti dell’olivo, in particolar modo secoiridoidi e derivati, in netta minoranza rispetto ai composti non identificati ipoteticamente derivanti dalle matrici vegetali impiegate in co-estrazione.

Valorizzazione della sansa d'oliva: estrazione ed analisi della frazione fenolica

Il presente elaborato di tesi espone uno studio scientifico che ha come obbiettivo quello di valutare un metodo sostenibile per il recupero della frazione fenolica presente nella sansa d’oliva vergine, il sottoprodotto solido dell’industria olearia. L’attività di ricerca ha riguardato prove sperimentali di estrazione di tali composti minori polari da sanse d’oliva vergini successivamente caratterizzate con metodi analitici (Folin-Ciocâlteu, UHPLC-DAD). Lo scopo finale di questo studio è l’ottenimento di un estratto idroalcolico caratterizzato per il contenuto in componenti polari ad attività riducente, quali le molecole fenoliche; si intende quindi ottenere un semilavorato ad alto valore aggiunto che possa essere conferito successivamente all’industria alimentare, cosmetica, farmaceutica, per la produzione di prodotti funzionali con proprietà bioattive. Questo studio è orientato verso un concetto di innovazione di metodi efficaci per la valorizzazione di questi scarti. Il lavoro compiuto ha confermato la possibilità di valorizzare la sansa d’oliva in maniera sostenibile in un’ottica di economia circolare, con ottenimento di estratti idro-alcolici interessanti in termini di contenuto in composti ad attività riducente riconducibili, con molta probabilità, soprattutto a molecole a struttura fenolica. Gli studi preliminari sulle sanse hanno permesso di individuare il campione ideale da sottoporre al processo di valorizzazione, ovvero la sansa trifasica ma, salvo un costo maggioritario in termini energetici durante la fase di evaporazione dell’estratto filtrato, grazie al metodo messo a punto, possono essere valorizzate sanse sia bifasiche che trifasiche denocciolate. Le tecnologie considerate, quali ad esempio presse, sistemi di centrifugazione ed evaporazione e solventi “green’’ quali l’etanolo, suggeriscono la possibilità di uno scale-up a livello industriale per la produzione di estratti caratterizzati per il contenuto in composti riducenti e fenolici.

Melhoria da Atenção no Pré-Natal e Puerpério na UBS Vila Oliva, Caxias do Sul/RS

A ação programática do pré-natal e puerpério têm muita importância para a saúde materna e do recém-nascido, pois é um período de cuidado neomaterno onde ocorrer o compartilhamento de conhecimentos sobre a importância do aleitamento materno, dos cuidados do recém-nascido, manutenção das vacinas em dia e conhecimento sobre anticoncepção e planejamento familiar. O objetivo geral deste trabalho foi melhorar a atenção do pré-natal e puerperio na UBS Vila Oliva, Caxias do sul/RS, mediante o monitoramento do pré-natal e puerpério periodicamente. A intervenção foi realizada durante quatro meses. A população estimada é de 2000 habitantes. As ações foram realizadas baseadas em quatro eixos pedagógicos: monitoramento e avaliação, organização e gestão do serviço, engajamento público e qualificação da prática clínica. Foram cadastradas 14 gestantes, totalizando uma cobertura de 70%, 11 gestantes foram cadastradas no primeiro trimestre da gestação, perfazendo 78,6%. Realizamos exame ginecológico em 12 gestantes (85,7%) e exame de mamas em 13 gestantes (92,9%). Em 100% das gestantes cadastradas conseguimos solicitar os exames laboratoriais de acordo com o protocolo, prescrever sulfato ferroso e ácido fólico, manter a vacina antitetânica e contra hepatite B em dia e realizar atendimento odontológico. Cumpriu-se busca ativa em 100% das gestantes faltosas. Orientamos a 100% das gestantes sobre nutrição saudável durante a gestação, aleitamento materno exclusivo, cuidados com o recém-nascido e anticoncepção após o parto, sobre os riscos do tabagismo, uso de álcool e drogas na gestação e sobre higiene bucal. Em relação as metas planejadas para o puerperio atingimos uma cobertura de 7 puérperas cadastradas, totalizando 77,8%. Conseguimos realizar o exame de mamas, abdômen, ginecológico, avaliar o estado psíquico e prescrever um dos métodos de anticoncepção a 100% delas. Conseguimos manter registro na ficha de acompanhamento do programa, orientar sobre os cuidado do recém-nascido, aleitamento materno exclusivo e planejamento familiar em 100% das puérperas. A Importância da intervenção pra equipe esteve representada pelo trabalho integrado do médico, da enfermeira, das técnicas de enfermagem e dos ACS. O médico fez o controle das gestantes e puérperas, as enfermeiras e a gerente apoiaram ao médico no processo de monitoramento. Os ACS fizeram as buscas ativa das gestantes faltosas e monitoramento delas em suas casas, tendo impacto também sobre outras atividades no serviço da UBS, melhorou o registro e monitoramento das gestantes e puérperas, também ajudou à prevenção de doenças nos recém-nascidos. A intervenção reviu as atribuições da equipe viabilizando a atenção a mais pessoas, a melhoria dos registros e o agendamento das gestantes e puérperas, viabilizou a agenda para a atenção à demanda espontânea e de outras ações programáticas.

Biochemical, Anthropometric And Body Composition Indicators As Predictors Of Hepatic Steatosis In Obese Adolescents.

To describe the prevalence of hepatic steatosis and to assess the performance of biochemical, anthropometric and body composition indicators for hepatic steatosis in obese teenagers. Cross-sectional study including 79 adolecents aged from ten to 18 years old. Hepatic steatosis was diagnosed by abdominal ultrasound in case of moderate or intense hepatorenal contrast and/or a difference in the histogram ≥7 on the right kidney cortex. The insulin resistance was determined by the Homeostasis Model Assessment-Insulin Resistance (HOMA-IR) index for values >3.16. Anthropometric and body composition indicators consisted of body mass index, body fat percentage, abdominal circumference and subcutaneous fat. Fasting glycemia and insulin, lipid profile and hepatic enzymes, such as aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase, gamma-glutamyltransferase and alkaline phosphatase, were also evaluated. In order to assess the performance of these indicators in the diagnosis of hepatic steatosis in teenagers, a ROC curve analysis was applied. Hepatic steatosis was found in 20% of the patients and insulin resistance, in 29%. Gamma-glutamyltransferase and HOMA-IR were good indicators for predicting hepatic steatosis, with a cutoff of 1.06 times above the reference value for gamma-glutamyltransferase and 3.28 times for the HOMA-IR. The anthropometric indicators, the body fat percentage, the lipid profile, the glycemia and the aspartate aminotransferase did not present significant associations. Patients with high gamma-glutamyltransferase level and/or HOMA-IR should be submitted to abdominal ultrasound examination due to the increased chance of having hepatic steatosis.

Immobilization Of Papain On Chitin And Chitosan And Recycling Of Soluble Enzyme For Deflocculation Of Saccharomyces Cerevisiae From Bioethanol Distilleries.

Yeast flocculation (Saccharomyces cerevisiae) is one of the most important problems in fuel ethanol production. Yeast flocculation causes operational difficulties and increase in the ethanol cost. Proteolytic enzymes can solve this problem since it does not depend on these changes. The recycling of soluble papain and the immobilization of this enzyme on chitin or chitosan were studied. Some cross-linking agents were evaluated in the action of proteolytic activity of papain. The glutaraldehyde (0.1-10% w·v(-1)), polyethyleneimine (0.5% v·v(-1)), and tripolyphosphate (1-10% w·v(-1)) inactivated the enzyme in this range, respectively. Glutaraldehyde inhibited all treatments of papain immobilization. The chitosan cross-linked with TPP in 5 h of reaction showed the yield of active immobilized enzyme of 15.7% and 6.07% in chitosan treated with 0.1% PEI. Although these immobilizations have been possible, these levels have not been enough to cause deflocculation of yeast cells. Free enzyme was efficient for yeast deflocculation in dosages of 3 to 4 g·L(-1). Recycling of soluble papain by centrifugation was effective for 14 cycles with yeast suspension in time perfectly compatible to industrial conditions. The reuse of proteases applied after yeast suspension by additional yeast centrifugation could be an alternative to cost reduction of these enzymes.

Combining Xanthan And Chitosan Membranes To Multipotent Mesenchymal Stromal Cells As Bioactive Dressings For Dermo-epidermal Wounds.

The association between tridimensional scaffolds to cells of interest has provided excellent perspectives for obtaining viable complex tissues in vitro, such as skin, resulting in impressive advances in the field of tissue engineering applied to regenerative therapies. The use of multipotent mesenchymal stromal cells in the treatment of dermo-epidermal wounds is particularly promising due to several relevant properties of these cells, such as high capacity of proliferation in culture, potential of differentiation in multiple skin cell types, important paracrine and immunomodulatory effects, among others. Membranes of chitosan complexed with xanthan may be potentially useful as scaffolds for multipotent mesenchymal stromal cells, given that they present suitable physico-chemical characteristics and have adequate tridimensional structure for the adhesion, growth, and maintenance of cell function. Therefore, the purpose of this work was to assess the applicability of bioactive dressings associating dense and porous chitosan-xanthan membranes to multipotent mesenchymal stromal cells for the treatment of skin wounds. The membranes showed to be non-mutagenic and allowed efficient adhesion and proliferation of the mesenchymal stromal cells in vitro. In vivo assays performed with mesenchymal stromal cells grown on the surface of the dense membranes showed acceleration of wound healing in Wistar rats, thus indicating that the use of this cell-scaffold association for tissue engineering purposes is feasible and attractive.

Efeitos do estresse fisico no processamento das informações visuais perifericas em motoristas do transporte coletivo urbano

Universidade Estadual de Campinas. Faculdade de Educação Física

Enzyme kinetics, structural analysis and molecular modeling studies on a series of Schistosoma mansoni PNP inhibitors

The enzyme purine nucleoside phosphorylase from Schistosoma mansoni (SmPNP) is an attractive molecular target for the development of novel drugs against schistosomiasis, a neglected tropical disease that affects about 200 million people worldwide. In the present work, enzyme kinetic studies were carried out in order to determine the potency and mechanism of inhibition of a series of SmPNP inhibitors. In addition to the biochemical investigations, crystallographic and molecular modeling studies revealed important molecular features for binding affinity towards the target enzyme, leading to the development of structure-activity relationships (SAR).

Screening of Trypanosoma cruzi glycosomal glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase enzyme inhibitors

The inhibitory activity of crude extracts of Meliaceae and Rutaceae plants on glycosomal glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (gGAPDH) enzyme from Trypanosoma cruzi was evaluated at 100 μg/mL. Forty-six extracts were tested and fifteen of them showed significant inhibitory activity (IA % > 50). The majority of the assayed extracts of Meliaceae plants (Cedrela fissilis, Cipadessa fruticosa and Trichilia ramalhoi) showed high ability to inhibit the enzymatic activity. The fractionation of the hexane extract from branches of C. fruticosa led to the isolation of three flavonoids: flavone, 7-methoxyflavone and 3',4',5',5,7-pentamethoxyflavone. The two last compounds showed high ability to inhibit the gGAPDH activity. Therefore, the assayed Meliaceae species could be considered as a promising source of lead compounds against Chagas' disease.

Quimioterapia da doença de Chagas: estado da arte e perspectivas no desenvolvimento de novos fármacos

Neglected diseases are a major global cause of illness, long-term disability and death. Chagas' disease is a parasitic infection widely distributed throughout Latin America, with devastating consequences in terms of human morbidity and mortality. The existing drug therapy suffers from a combination of drawbacks including poor efficacy, resistance and serious side effects. In 2009, we celebrate the 100th anniversary of the discovery of Chagas' disease, facing the challenges of developing new, safe and effective drugs for the treatment of this disease. This brief review attempts to highlight the state of the art, limitations and perspectives of Chagas' disease drug development.

Ambiente de desenvolvimento e início da vida reprodutiva em mulheres Brasileiras

Modelos teóricos inspirados na teoria da história de vida têm avaliado padrões de reprodução humanos em países desenvolvidos, com resultados ainda não conclusivos. Em vista das condições de vida na população brasileira, foram investigadas relações entre marcos da carreira reprodutiva feminina, condições ambientais e variáveis psicossociais relacionadas às condições de criação. Foram entrevistadas 606 mulheres em seis estados. Os resultados apóiam a teoria da história de vida, mostrando associações entre condições de vida na infância e início da vida sexual e da reprodução, mas não com a idade da menarca. Sugerimos que diferentes marcadores da vida reprodutiva podem estar sob controle de diferentes fenômenos e que a diversidade de condições da população brasileira oferece contextos alternativos para testar hipóteses.

Nutrição e doenças cardiovasculares: uma revisão

Diversos fatores de risco cardiovascular são preveníveis e modificáveis pela dieta. Esta revisão foi baseada nos dados do PubMed e posicionamento da órgãos oficiais. A proteína da soja contendo ou não isoflavonas exerce pouco efeito (<6%) sobre as dislipidemias, sendo que as isoflavonas isoladas têm efeito nulo. Os ácidos graxos saturados e trans permanecem como nutrientes controlados, sendo a exclusão dos trans meta de diversas leis. Em contrapartida, o ômega 3 e 9 deve ser estimulado nos países onde o consumo é reduzido. Embora a literatura apresente ações contraditórias sobre ômega 6, as entidades oficiais reforçam seus benefícios sobre o risco cardiovascular. Os fitoesteróis trazem benefícios no controle lipídico em intervenções primárias e secundárias. Essas observações ganham dimensão populacional quando alimentos (frutos secos, peixes, azeite de oliva, vinho) e modelos dietéticos (Mediterrâneo e Asiática) apresentam relação negativa com as doenças cardiovasculares. Portanto, há fortes evidências que justificam o consumo de alimentos contendo esses nutrientes

The development of an immobilized enzyme reactor containing glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase from Trypanosoma cruzi: the effect of species' specific differences on the immobilization

Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) plays an important role in the life cycle of the Trypanosoma cruzi, and an immobilized enzyme reactor (IMER) has been developed for use in the on-line screening for GAPDH inhibitors. An IMER containing human GAPDH has been previously reported; however, these conditions produced a T. cruzi GAPDH-IMER with poor activity and stability. The factors affecting the stability of the human and T. cruzi GAPDHs in the immobilization process and the influence of pH and buffer type on the stability and activity of the IMERs have been investigated. The resulting T. cruzi GAPDH-IMER was coupled to an analytical octyl column, which was used to achieve chromatographic separation of NAD+ from NADH. The production of NADH stimulated by D-glyceraldehyde-3-phosphate was used to investigate the activity and kinetic parameters of the immobilized T. cruzi GAPDH. The Michaelis-Menten constant (K-m) values determined for D-glyceraldehyde-3-phosphate and NAD(+) were K-m = 0.5 +/- 0.05 mM and 0.648 +/- 0.08 mM, respectively, which were consistent with the values obtained using the non-immobilized enzyme.

Purine nucleoside phosphorylase from Schistosoma mansoni in complex with ribose-1-phosphate

Schistosomes are blood flukes which cause schistosomiasis, a disease affecting approximately 200 million people worldwide. Along with several other important human parasites including trypanosomes and Plasmodium, schistosomes lack the de novo pathway for purine synthesis and depend exclusively on the salvage pathway for their purine requirements, making the latter an attractive target for drug development. Part of the pathway involves the conversion of inosine (or guanosine) into hypoxanthine (or guanine) together with ribose-1-phosphate (R1P) or vice versa. This inter-conversion is undertaken by the enzyme purine nucleoside phosphorylase (PNP) which has been used as the basis for the development of novel anti-malarials, conceptually validating this approach. It has been suggested that, during the reverse reaction, R1P binding to the enzyme would occur only as a consequence of conformational changes induced by hypoxanthine, thus making a binary PNP-R1P complex unlikely. Contradictory to this statement, a crystal structure of just such a binary complex involving the Schistosoma mansoni enzyme has been successfully obtained. The ligand shows an intricate hydrogen-bonding network in the phosphate and ribose binding sites and adds a further chapter to our knowledge which could be of value in the future development of selective inhibitors.