1000 resultados para Modèle d’évaluation d’actifs


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Thèse numérisée par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.

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De nouveaux modèles cellulaires in vitro par transfert de milieu et par coculture ont été mis au point afin dâévaluer la capacité des HDL à éliminer lâexcès de cholestérol des tissus périphériques et de le transporter vers le foie afin dâêtre excrété par le foie, un processus nommé le transport inverse du cholestérol (TIC). Le système cellulaire par transfert in vitro où des macrophages J774 sont gorgés de LDL acétylées et marqués au 3H-cholestérol a été préalablement établi afin de mesurer par scintillation lâefflux de cholestérol marqué vers le milieu de culture contenant des accepteurs de cholestérol. Ce milieu conditionné est transféré sur des cellules HepG2 afin dâétudier lâinflux du cholestérol marqué. Ce dernier nous permet dâobserver un transport de cholestérol de 25 % hors des J774 et un transport de 39 000 cpm dans les HepG2 en utilisant un milieu contenant 2 % de sérums humains mis en commun. Une stimulation des cellules J774 par lâAMPc augmente lâefflux et lâinflux dâenviron 45 %. Des tests de preuve de concept ont été effectués sur le système cellulaire par co-culture qui utilise des chambres de Boyden où les J774 sont localisées au fond dâun puits et les HepG2 dans un insert, et où le milieu est partagé entre les deux types cellulaires. On a déterminé quâune confluence densité de 60 000 cellules/cm2 sur un insert constitué dâune membrane de polyester avec des pores de 3,0 μm, sans autre revêtement, permet dâobserver un influx spécifique au sérum dâenviron 6 000 cpm associés aux cellules HepG2, où 50 % des comptes radioactifs sont dans les cellules et lâautre moitié présente à la surface cellulaire.