Efficacy of the dietary histone deacetylase inhibitor butyrate alone or in combination with vitamin A against proliferation of MCF-7 human breast cancer cells

The combined treatment with histone deacetylase inhibitors (HDACi) and retinoids has been suggested as a potential epigenetic strategy for the control of cancer. In the present study, we investigated the effects of treatment with butyrate, a dietary HDACi, combined with vitamin A on MCF-7 human breast cancer cells. Cell proliferation was evaluated by the crystal violet staining method. MCF-7 cells were plated at 5 x 10(4) cells/mL and treated with butyrate (1 mM) alone or combined with vitamin A (10 µM) for 24 to 120 h. Cell proliferation inhibition was 34, 10 and 46% following treatment with butyrate, vitamin A and their combination, respectively, suggesting that vitamin A potentiated the inhibitory activities of butyrate. Furthermore, exposure to this short-chain fatty acid increased the level of histone H3K9 acetylation by 9.5-fold (Western blot), but not of H4K16, and increased the expression levels of p21WAF1 by 2.7-fold (Western blot) and of RARβ by 2.0-fold (quantitative real-time PCR). Our data show that RARβ may represent a molecular target for butyrate in breast cancer cells. Due to its effectiveness as a dietary HDACi, butyrate should be considered for use in combinatorial strategies with more active retinoids, especially in breast cancers in which RARβ is epigenetically altered.

RNAi-mediated knockdown of pituitary tumor- transforming gene-1 (PTTG1) suppresses the proliferation and invasive potential of PC3 human prostate cancer cells

Pituitary tumor-transforming gene-1 (PTTG1) is a proto-oncogene that promotes tumorigenesis and metastasis in numerous cell types and is overexpressed in a variety of human tumors. We have demonstrated that PTTG1 expression was up-regulated in both human prostate cancer specimens and prostate cancer cell lines. For a more direct assessment of the function of PTTG1 in prostate tumorigenesis, RNAi-mediated knockdown was used to selectively decrease PTTG1 expression in PC3 human prostate tumor cells. After three weeks of selection, colonies stably transfected with PTTG1-targeted RNAi (the knockdown PC3 cell line) or empty vector (the control PC3 cell line) were selected and expanded to investigate the role of PTTG1 expression in PC3 cell growth and invasion. Cell proliferation rate was significantly slower (28%) in the PTTG1 knockdown line after 6 days of growth as indicated by an MTT cell viability assay (P < 0.05). Similarly, a soft agar colony formation assay revealed significantly fewer (66.7%) PTTG1 knockdown PC3 cell colonies than control colonies after three weeks of growth. In addition, PTTG1 knockdown resulted in cell cycle arrest at G1 as indicated by fluorescence-activated cell sorting. The PTTG1 knockdown PC3 cell line also exhibited significantly reduced migration through Matrigel in a transwell assay of invasive potential, and down-regulation of PTTG1 could lead to increased sensitivity of these prostate cancer cells to a commonly used anticancer drug, taxol. Thus, PTTG1 expression is crucial for PC3 cell proliferation and invasion, and could be a promising new target for prostate cancer therapy.

Gene transfer of Chlorella vulgaris n-3 fatty acid desaturase optimizes the fatty acid composition of human breast cancer cells

Chlorella vulgaris has the gene of n-3 fatty acid desaturase (CvFad3), which can synthesize the precursor of n-3 polyunsaturated fatty acids (PUFAs) or convert n-6 to n-3 PUFAs. The objective of the present study was to examine whether the CvFad3 gene from C. vulgaris can be functionally and efficiently expressed in human breast cancer cells and whether its expression can exert a significant effect on cell fatty acid composition. We inserted the CvFad3 gene into the plasmid pEGFP-C3 to construct the eukaryotic expression vector pEGFP-C3-n-3 and to express the n-3 Fad gene in human breast cancer cells (MCF-7 cells). Transfection of MCF-7 cells with the recombinant vector resulted in a high expression of n-3 fatty acid desaturase. Lipid analysis indicated that the ratio of n-6/n-3 PUFAs was decreased from 6:1 in the control cells to about 1:1 in the cells expressing the n-3 fatty acid desaturase. Accordingly, the CvFad3 gene significantly decreased the ratio of n-6/n-3 PUFAs of the MCF-7 cell membrane. The expression of the CvFad3 gene can decrease cell proliferation and promote cell apoptosis. This study demonstrates that the CvFad3 gene can dramatically balance the ratio of n-6/n-3 PUFAs and may provide an effective approach to the modification of the fatty acid composition of mammalian cells, also providing a basis for potential applications of its transfer in experimental and clinical settings.

CHRNA5 polymorphism and susceptibility to lung cancer in a Chinese population

Polymorphisms in the nicotinic acetylcholine receptor subunit CHRNA5 gene have been associated with lung cancer positive susceptibility in European and American populations. In the present hospital-based, case-control study, we determined whether polymorphism in rs503464 of CHRNA5 is associated with lung cancer risk in Chinese individuals. A single nucleotide polymorphism in CHRNA5 rs503464, c.-166T>A (hereafter T>A), was identified using TaqMan-MGB probes with sequencing via PCR in 600 lung cancer cases and 600 healthy individuals. Genotype frequencies for rs503464 (T>A) were in Hardy-Weinberg equilibrium for the control population. However, genotype frequencies were significantly different between cases and controls (P < 0.05), while allele frequencies were not significantly different between groups. Compared to homozygous genotypes (TT or AA), the risk of lung cancer in those with the heterozygous genotype (TA) was significantly lower (OR = 0.611, 95%CI = 0.486-0.768, P = 0.001). Using genotype AA as a reference, the risk of lung cancer for those with genotype TA was increased 1.5 times (OR = 1.496, 95%CI = 1.120-1.997, P = 0.006). However, no difference in risk was observed between T allele carriers and A allele carriers (OR = 0.914, 95%CI = 0.779-1.073, P = 0.270). Stratification analysis showed that the protective effect of TA was more pronounced in those younger than 60 years, nonsmokers, or those without a family history of cancer, as well as in patients with adenocarcinoma or squamous cell carcinoma in clinical stages III or IV (P < 0.05). Therefore, the heterozygous genotype c.-166T>A at rs503464 of CHRNA5 may be associated with reduced risk of lung cancer, thus representing a susceptibility allele in Chinese individuals.

AKT inhibitor suppresses hyperthermia-induced Ndrg2 phosphorylation in gastric cancer cells

Hyperthermia is one of the most effective adjuvant treatments for various cancers with few side effects. However, the underlying molecular mechanisms still are not known. N-myc downstream-regulated gene 2 (NDRG2), a tumor suppressor, has been shown to be involved in diverse cellular stresses including hypoxia, lipotoxicity, etc. In addition, Ndrg2 has been reported to be related to progression of gastric cancer. In the current study, our data showed that the apoptosis rate of MKN28 cells increased relatively rapidly to 13.4% by 24 h after treatment with hyperthermia (42°C for 1 h) compared to 5.1% in control cells (P < 0.05). Nevertheless, there was no obvious change in the expression level of total Ndrg2 during this process. Further investigation demonstrated that the relative phosphorylation levels of Ndrg2 at Ser332, Thr348 increased up to 3.2- and 1.9-fold (hyperthermia groupvs control group) at 3 h in MKN28 cells, respectively (P < 0.05). We also found that heat treatment significantly increased AKT phosphorylation. AKT inhibitor VIII (10 µM) decreased the phosphorylation level of Ndrg2 induced by hyperthermia. Accordingly, the apoptosis rate rose significantly in MKN28 cells (16.4%) treated with a combination of AKT inhibitor VIII and hyperthermia compared to that (6.8%) of cells treated with hyperthermia alone (P < 0.05). Taken together, these data demonstrated that Ndrg2 phosphorylation could be induced by hyperthermia in an AKT-dependent manner in gastric cancer cells. Furthermore, AKT inhibitor VIII suppressed Ndrg2 phosphorylation and rendered gastric cancer cells susceptible to apoptosis induced by hyperthermia.

Capecitabine maintenance therapy in patients with recurrent or metastatic breast cancer

Our objective was to investigate the efficacy and safety of capecitabine maintenance therapy (CMT) after capecitabine-based combination chemotherapy in patients with metastatic breast cancer. The clinical data of 139 metastatic breast cancer patients treated from March 2008 to May 2012 with capecitabine-based combination chemotherapy were retrospectively analyzed. When initial disease control was achieved by the combination chemotherapy, we used CMT for 50 patients, while 37 patients were treated with a different (non-CMT) maintenance therapy. We compared time to progression (TTP), objective response rate, disease control rate, clinical benefit rate, and safety of the two groups, and a sub-group analysis was performed according to pathological characteristics. Sixty-four percent of the patients received a median of six cycles of a docetaxel+capecitabine combination chemotherapy regimen (range 1-45); the median TTP (MTTP) for the complete treatment was 9.43 months (95%CI=8.38-10.48 months) for the CMT group and 4.5 months (95%CI=4.22-4.78 months; P=0.004) for the non-CMT group. The MTTPs for the maintenance therapies administered after the initial capecitabine combined chemotherapy were 4.11 months (95%CI=3.34-4.87 months) for the CMT group and 2.0 months (95%CI=1.63-2.38 months) for the non-CMT group. Gastrointestinal side effects, decreased white blood cells and palmar-plantar erythrodysesthesia were the main adverse reactions experienced with the combination chemotherapies, CMT and non-CMT treatments. No significant differences in the incidence of adverse reactions were detected in the CMT and non-CMT patients. After initial disease control was achieved with the capecitabine-based combination chemotherapy, CMT can significantly prolong TTP rates with a favorable safety profile.

Filopodia and stromal extracellular matrix as regulators of cancer cell invasion and growth

Bidirectional exchange of information between the cancer cells and their environment is essential for cancer to evolve. Cancer cells lose the ability to regulate their growth, gain the ability to detach from neighboring cells and finally some of the cells disseminate from the primary tumor and invade to the adjacent tissue. During cancer progression, cells acquire features that promote cancer motility and proliferation one of them being increased filopodia number. Filopodia are dynamic actin-rich structures extending from the leading edge of migrating cells and the main function of these structures is to serve as environmental sensors. It is nowadays widely appreciated, that not only the cancer cells, but also the surrounding of the tumor – the tumor microenvironment- contribute to cancer cell dissemination and tumor growth. Activated stromal fibroblasts, also known as cancer-associated fibroblasts (CAFs) actively participate on tumor progression. CAFs are the most abundant cell type surrounding the cancer cells and they are the main cell type producing the extracellular matrix (ECM) within tumor stroma. CAFs secrete growth factors to promote tumor growth, direct cancer cell invasion as well as modify the stromal ECM architecture. The aim of this thesis was to investigate the function of filopodia, particularly the role of filopodia-inducing protein Myosin-X (Myo10), in breast cancer cell invasion and metastasis. We found that Myo10 is an important regulator of basal type breast cancer spreading downstream of mutant p53. In addition, I investigated the role of CAFs and their secreted matrix on tumor growth. According to the results, CAF-derived matrix has altered organization and stiffness which induces the carcinoma cell proliferation via epigenetic mechanisms. I identified histone demethylase enzyme JMJD1a to be regulated by the stiffness and to participate in stiffness induced growth control.

Identifying the psychosexual implications of radical radiation treatment in prostate cancer

The purpose of this study was to determine whether there was any evidence of psychosexual morbidity among men who experienced radical radiation treatment for prostate cancer. With relatively little known or available retrospective data on the psychosexual implications of radical radiation treatment in men with prostate cancer, this study posited eight research questions which provided the basis for the research. Fifty men from Southern Ontario, between the ages of 52 to 78 years, were included in the study. They had been previously randomized to a clinical trial comparing radical radiation therapy by external beam radiation, or radical radiation using a combination of a temporary iridium implant plus external beam radiation, for localized or locally advanced prostate cancer. Assessment of sexual functioning, drive, attitudes, body image, and sexual satisfaction was drawn from a multidimensional approach, since psychosexuality was viewed as having an impact on biological, psychological, and sociological domains of functioning. Medical chart reviews, semi-structured interviews, demographical profiles of each participant, and the Derogatis Sexual Functioning Inventory (DSFI) were the methods used to collect data over a four-month period. Both quantitative and qualitative research methods were incorporated in the design and evaluation of the study. Frequencies, contingency analysis, Pearson's coefficient of correlation, t-tests, and ANOVA comprised the quantitative analysis. Data obtained from audio-taped interviews were analyzed qualitatively, and used for offering further insight and for facilitating the quantitative aspect of the analysis. Overall, there was sufficient evidence to suggest psychosexual morbidity among men who were treated with radiation therapy for prostate cancer. As well,there were a number of significant findings available to answer all of the posited research questions. The most significant findings were noted in post-treatment erectile ability and sexual activity. A post-treatment change in erectile ability was reported by eighty percent of men. Sixty percent of men noted a decrease in their ability to achieve an erection by reporting some morning stiffness only, penile rigidity insufficient for penetration, decreased control of erection, and loss of spontaneous erection. Other contributing factors associated with change in erectile status were: pain or altering sensation of orgasm, blood in ejaculate, pain and decreased amount of ejaculate, and penile numbness or pain. Eighty-two percent of men experienced a post-treatment change in sexual function, primarily due to the impact of decreasing erectile status. Only seven men reported that they experienced a decrease in desire mentally, whereas the vast majority did not experience any change in desire. Changes in foreplay, stress with optimal sexual positioning, and reduced spontaneity of sex, were other factors reported with the changes in sexual activity. The findings in this study broaden our understanding of what middle- to later-aged men feel and experience as they venture onward following treatment. This was the first study that evaluated available prospective data on pre-treatment erectile status and sexual activity. As well, this study was the first (with participant compliance rates of 100 percent) to have included an interview format to capture the views of such a large number of men. This study concluded with recommendations and implications for future research and practice as we move in the direction of understanding what is necessary for preserving psychosexual well being and enhancing quality of life in men treated with radiation therapy for prostate cancer.

Prostate Cancer and the Search for Novel Biomarkers

The primary objective of this research project was to identify prostate cancer (PCa) -specific biomarkers from urine. This was done using a multi-faceted approach that targeted (1) the genome (DNA); (2) the transcriptome (mRNA and miRNA); and (3) the proteome. Toward this end, urine samples were collected from ten healthy individuals, eight men with PCa and twelve men with enlarged, non-cancerous prostates or with Benign Prostatic Hyperplasia (BPH). Urine samples were also collected from the same patients (PCa and BPH) as part of a two-year follow-up. Initially urinary nucleic acids and proteins were assessed both qualitatively and quantitatively for characteristics either unique or common among the groups. Subsequently macromolecules were pooled within each group and assessed for either protein composition via LC-MS/MS or microRNA (miRNA) expression by microarray. A number of potential candidates including miRNAs were identified as being deregulated in either pooled PCa or BPH with respect to the healthy control group. Candidate biomarkers were then assessed among individual samples to validate their utility in diagnosing PCa and/or differentiating PCa from BPH. A number of potential targets including deregulation of miRNAs 1825 and 484, and mRNAs for Fibronectin and Tumor Protein 53 Inducible Nuclear Protein 2 (TP53INP2) appeared to be indicative of PCa. Furthermore, deregulation of miR-498 appeared to be indicative of BPH. The sensitivities and specificities associated with using deregulation in many of these targets to subsequently predict PCa or BPH were also determined. This research project has identified a number of potential targets, detectable in urine, which merit further investigation towards the accurate identification of PCa and its discrimination from BPH. The significance of this work is amplified by the non-invasive nature of the sample source from which these candidates were derived, urine. Many cancer biomarker discovery studies have tended to focus primarily on blood (plasma or serum) and/or tissue samples. This is one of the first PCa biomarker studies to focus exclusively on urine as a sample source.

Consommation alimentaire d’antioxydants et risque de cancer du poumon : une étude cas-témoins montréalaise

Objectif : Examiner l’association entre la consommation alimentaire de caroténoïdes (β-carotène, α-carotène, β-cryptoxanthine, lutéine/zéaxanthine, lycopène) et de vitamine C et le risque de cancer du poumon, selon le sexe, l’intensité de tabagisme et le sous-type histologique de la tumeur. Méthodes : Les données proviennent d’une étude cas-témoins menée à Montréal, Canada. Des entrevues ont été effectuées auprès de 1 105 cas incidents de cancer du poumon et 1 449 témoins issus de la population générale. Leur fréquence de consommation moyenne de 49 fruits et légumes deux ans auparavant a été convertie en apports en antioxydants. Les rapports de cotes (RC) et les intervalles de confiance (IC) à 95% caractérisant l’association entre les antioxydants et le risque de cancer du poumon ont été estimés à l’aide de modèles de régression logistique et polytomée, en tenant compte de facteurs de confusion potentiels. Résultats : Une consommation élevée en antioxydants était généralement associée à une diminution du risque de cancer du poumon de l’ordre de 30%. Un effet protecteur a été observé chez les hommes et les femmes, pour les non fumeurs, les fumeurs quelque soit l’intensité de tabagisme, ainsi que pour les carcinomes à petites cellules, épidermoïde et l’adénocarcinome. Conclusions : Plusieurs antioxydants alimentaires protégeraient du cancer du poumon. Les efforts de prévention bénéficieraient de cibler la promotion de la consommation de fruits et de légumes riches en caroténoïdes et en vitamine C.

New statistical methods to assess the effect of time-dependent exposures in case-control studies

Contexte. Les études cas-témoins sont très fréquemment utilisées par les épidémiologistes pour évaluer l’impact de certaines expositions sur une maladie particulière. Ces expositions peuvent être représentées par plusieurs variables dépendant du temps, et de nouvelles méthodes sont nécessaires pour estimer de manière précise leurs effets. En effet, la régression logistique qui est la méthode conventionnelle pour analyser les données cas-témoins ne tient pas directement compte des changements de valeurs des covariables au cours du temps. Par opposition, les méthodes d’analyse des données de survie telles que le modèle de Cox à risques instantanés proportionnels peuvent directement incorporer des covariables dépendant du temps représentant les histoires individuelles d’exposition. Cependant, cela nécessite de manipuler les ensembles de sujets à risque avec précaution à cause du sur-échantillonnage des cas, en comparaison avec les témoins, dans les études cas-témoins. Comme montré dans une étude de simulation précédente, la définition optimale des ensembles de sujets à risque pour l’analyse des données cas-témoins reste encore à être élucidée, et à être étudiée dans le cas des variables dépendant du temps. Objectif: L’objectif général est de proposer et d’étudier de nouvelles versions du modèle de Cox pour estimer l’impact d’expositions variant dans le temps dans les études cas-témoins, et de les appliquer à des données réelles cas-témoins sur le cancer du poumon et le tabac. Méthodes. J’ai identifié de nouvelles définitions d’ensemble de sujets à risque, potentiellement optimales (le Weighted Cox model and le Simple weighted Cox model), dans lesquelles différentes pondérations ont été affectées aux cas et aux témoins, afin de refléter les proportions de cas et de non cas dans la population source. Les propriétés des estimateurs des effets d’exposition ont été étudiées par simulation. Différents aspects d’exposition ont été générés (intensité, durée, valeur cumulée d’exposition). Les données cas-témoins générées ont été ensuite analysées avec différentes versions du modèle de Cox, incluant les définitions anciennes et nouvelles des ensembles de sujets à risque, ainsi qu’avec la régression logistique conventionnelle, à des fins de comparaison. Les différents modèles de régression ont ensuite été appliqués sur des données réelles cas-témoins sur le cancer du poumon. Les estimations des effets de différentes variables de tabac, obtenues avec les différentes méthodes, ont été comparées entre elles, et comparées aux résultats des simulations. Résultats. Les résultats des simulations montrent que les estimations des nouveaux modèles de Cox pondérés proposés, surtout celles du Weighted Cox model, sont bien moins biaisées que les estimations des modèles de Cox existants qui incluent ou excluent simplement les futurs cas de chaque ensemble de sujets à risque. De plus, les estimations du Weighted Cox model étaient légèrement, mais systématiquement, moins biaisées que celles de la régression logistique. L’application aux données réelles montre de plus grandes différences entre les estimations de la régression logistique et des modèles de Cox pondérés, pour quelques variables de tabac dépendant du temps. Conclusions. Les résultats suggèrent que le nouveau modèle de Cox pondéré propose pourrait être une alternative intéressante au modèle de régression logistique, pour estimer les effets d’expositions dépendant du temps dans les études cas-témoins

Mode de vie, habitudes alimentaires et cancer du sein: Étude cas-témoins chez les Canadiennes-françaises non porteuses de mutations des gènes BRCA

Le cancer du sein (CS) est la deuxième cause de décès liés au cancer parmi les femmes dans la plupart des pays industrialisés. Les personnes qui ont le CS peuvent ne pas hériter des mutations causant le cancer de leurs parents. Ainsi, certaines cellules subissent des mutations qui mènent au cancer. Dans le cas de cancer héréditaire, les cellules tumorales contiennent généralement des mutations qui ne sont pas trouvées ailleurs dans l'organisme, mais peuvent maintenir des mutations qui vont répartir dans toutes les cellules. La genèse du CS est le résultat des mutations de gènes qui assurent la régulation de la prolifération cellulaire et la réparation de l’ADN. Deux gènes semblent particulièrement concernés par les mutations. Les gènes ‘Breast Cancer 1’ (BRCA1) et ‘Breast Cancer 2’ (BRCA2), sont impliqués dans la prédisposition génétique de CS. On estime que 5-10% des cas de cancer du sein sont attribuables à une prédisposition génétique. La plupart de ces cancers sont liés à une anomalie du gène BRCA1 ou BRCA2. Plusieurs études ont été menées chez les femmes atteintes de CS sporadique et quelques études se sont concentrées sur celles qui sont porteuses de mutations de BRCA. Alors, notre recherche a été entreprise afin de vérifier l’hypothèse d’une association entre le CS, le mode vie et les habitudes alimentaires chez les Canadiennes-françaises non porteuses des 6 mutations de BRCA les plus fréquentes parmi cette population. Nous avons mené une étude cas-témoins dans cette population. Quelque 280 femmes atteintes du cancer du sein et non-porteuses de mutations de BRCA, ont été recrutées en tant que cas. Les témoins étaient recrutés parmi les membres de la famille des cas (n=15) ou à partir d'autres familles atteintes de CS (n=265). Les participantes étaient de tous âges, recrutées à partir d’une étude de cohorte qui est actuellement en cours, menée par une équipe de chercheurs au Centre Hospitalier Universitaire de Montréal (CHUM) Hôtel-Dieu à Montréal. Les apports alimentaires ont été recueillis par un questionnaire de fréquence semi-quantitatif validé et administré par une nutritionniste, qui portait sur la période avant les deux ans précédant le premier diagnostic de CS pour les cas et la période avant les deux ans précédant l’entrevue téléphonique pour les témoins. Un questionnaire de base était administré par l’infirmière de recherche aux participantes afin de colliger des renseignements sociodémographiques et sur les facteurs de risque du CS. Une association positive et significative a été détectée entre l’âge (plus de 50 ans) auquel les sujets avaient atteint leur Indice de Masse Corporel (IMC) le plus élevé et le CS rapport de cotes (OR) =2,83; intervalle de confiance à 95% (IC95%) (2,34-2,91). De plus, une association positive a été détectée entre un gain de poids de >34 lbs comparativement à un gain de poids de ≤15 lbs, dès l’âge de 20 ans OR=1,68; IC95% (1,10-2,58). Un gain de poids de >24 lbs comparativement à un gain de poids de ≤9 lbs, dès l’âge de 30 ans a aussi montré une augmentation de risque de CS OR=1,96; IC95% (1,46-3,06). Une association positive a aussi été détecté entre, un gain de poids de >12 lbs comparativement à un gain de poids de ≤1 lb, dès l’âge de 40 ans OR=1,91; IC95% (1,53-2,66). Concernant le tabagisme, nous avons observé une association positive et significative reliée à la consommation de plus de 9 paquets-années OR = 1,59; IC95% (1,57-2,87). Il fut suggéré que l’activité physique modéré confère une protection contre le CS: une pratique de > 24,8 (‘metabolic equivalent’) MET-hrs par semaine par rapport à ≤10,7 MET-hrs par semaine, diminue le risque du CS de 52% OR = 0,48 ; IC95% (0,31-0,74). L’activité physique totale (entre 16,2 et 33,2 MET-hrs par semaine), a aussi montré une réduction de risque de CS de 43% OR = 0,57 ; IC95% (0,37-0,87). Toutefois, il n'y avait aucune association entre une activité physique vigoureuse et le risque de CS. L’analyse portant sur les macro- et micro-nutriments et les groupes alimentaires a montré qu’un apport en énergie totale de plus de 2057 Kcal par jour augmentait le risque de CS de 2,5 fois OR = 2,54; IC95% (1,67-3,84). En ce qui concerne la consommation de café, les participantes qui buvaient plus de 8 tasses de café par jour avaient un risque de CS augmenté de 40% OR = 1,40; IC95% (1,09-2,24). Les sujets ayant une consommation dépassant 9 g d’alcool (éthanol) par jour avaient également un risque élevé de 55% OR = 1,55; IC95% (1,02-2,37). De plus, une association positive et significative a été détectée entre le CS et la consommation de plus de deux bouteilles de bière par semaine OR = 1,34; IC95% (1,28-2,11), 10 onces de vin par semaine OR = 1,16; IC95% (1,08-2,58) ou 6 onces de spiritueux par semaine OR = 1,09; IC95% (1,02-2,08), respectivement. En résumé, les résultats de cette recherche supportent l’hypothèse selon laquelle le mode de vie et les habitudes alimentaires jouent un rôle important dans l’étiologie de CS chez les Canadiennes-françaises non porteuses de mutations de BRCA. Les résultats nous permettent de constater que le gain de poids et le tabagisme sont liés à des risques élevés de CS, tandis que l'activité physique modérée aide à réduire ce risque. De plus, nos résultats suggèrent qu’un apport énergétique total relativement élevé et une consommation élevée de café et d'alcool peuvent accroître le risque de ce cancer. Ce travail a permis de mettre l’accent sur une nouvelle direction de recherche, jusqu'à présent non investiguée. Les résultats de ce travail de recherche pourraient contribuer à recueillir de nouvelles informations et des conseils pouvant influencer et aider la population à modifier son mode de vie et ses habitudes alimentaires afin de diminuer le risque de cancer du sein.

Mutations du gène HFE dans le cancer épithélial de l'ovaire

Le cancer épithélial de l’ovaire est le cancer gynécologique le plus agressif avec le plus haut taux de mortalité. La croissance des cellules cancéreuses de l’ovaire est limitée par les nutriments de l’environnement, le fer étant un des éléments indispensables à leur prolifération. L’hémochromatose héréditaire est une maladie associée à une accumulation corporelle de fer. Cette maladie est liée à deux mutations majeures du gène HFE soit H63D et C282Y. Étant donnée l’influence de la protéine HFE sur l’entrée du fer dans la cellule, des mutations du gène HFE pourraient être associées à une croissance rapide des cellules cancéreuses. Des études de génotypage du gène HFE effectuées chez 526 patientes avec cancer épithélial de l’ovaire, ont révélées une fréquence allélique de la mutation C282Y significativement plus élevées chez les patientes avec tumeur ovarienne comparativement aux patientes du groupe contrôle (5.9% versus 1.3%, p = 0.02). De plus, le taux de survie des patientes avec mutations C282Y et tumeur ovarienne de G3, après 2 ans, est faible (20%) lorsque comparé à celui des patientes sans mutations (60%, p = 0.005). Une analyse de régression multivariée de Cox a démontrée un risque relatif de 3.1, suggérant que les patientes avec mutations C282Y ont 3 fois plus de chance d’avoir une faible survie (p=0.001). Également, des études de corrélation ont démontrées que les niveaux de ferritine du sérum étaient plus élevés chez les patientes avec grade avancé du cancer épithélial de l’ovaire (r = 0.445 et p= 0.00001), suggérant que ce paramètre pourrait servir comme marqueur tumoral. Afin de comprendre ces résultats, nous avons tout d’abord étudiés l’influence des mutations HFE sur les cellules cancéreuses. Pour ce faire, la lignée du cancer de l’ovaire TOV-112D, homozygote pour la mutation C282Y, a été transfectée avec les vecteurs HFEwt et HFEC282Y. Bien qu’aucune différence significative n’ait été trouvée en termes de TfR totaux, des analyses par FACS ont démontrées un phénotype de déficience de fer pour les clones stables HFEwt. In vitro, la restauration de la protéine HFE, dans la lignée TOV-112D du cancer de l’ovaire, n’influence pas la croissance cellulaire. Ensuite, nous avons étudiés l’influence des niveaux de fer sur la progression tumorale. Une expérience in vivo préliminaire a démontré une tendance à un volume tumoral supérieur dans un modèle de souris de surcharge de fer,HfeRag1-/-. De plus, les souris HfeRag1-/-, injectées avec la lignée du cancer de l’ovaire TOV-21G, ont montrées des niveaux significativement plus faibles de fer sérique comparativement à leur contrôle (fer sérique 40±7μM versus 27±6μM, p = 0.001). En conclusion, des études supplémentaires sont nécessaires afin de comprendre davantage le rôle des mutations HFE sur la progression tumorale. Notamment, les niveaux élevés de fer pourraient rendre les cellules tumorales résistantes aux traitements ou encore, augmenter la toxicité et ainsi, contribuer à un mauvais prognostique.

Performances de la puce exon et son application dans l’analyse de l’épissage alternatif associé à la métastase du cancer de sein

Nous montrons l’utilisation de la puce exon d’Affymetrix pour l’analyse simultanée de l’expression des gènes et de la variation d’isoformes. Nous avons utilisé les échantillons d’ARN du cerveau et des tissus de référence qui ont été antérieurement utilisés dans l’étude du consortium MicroArray Quality Control (MAQC). Nous démontrons une forte concordance de la quantification de l’expression des gènes entre trois plateformes d’expression populaires à savoir la puce exon d’Affymetrix, la puce Illumina et la puce U133A d’Affymetrix. Plus intéressant nous montrons que la majorité des discordances entre les trois plateformes résulterait des positions différentes des sondes à travers les plateformes et que les variations d’isoforme exactes ne peuvent être identifiées que par la puce exon. Nous avons détecté avec succès, entre les tissus de référence et ceux du cerveau, une centaine de cas d’évènements d’épissage alternatif. La puce exon est requise dans l’analyse de l’épissage alternatif associé aux pathologies telles que les cancers et les troubles neurologiques. Comme application de cette technologie, nous avons analysé les variations d’épissage dans la métastase du cancer de sein développé dans le model de la souris. Nous avons utilisé une gamme bien définie de trois lignées de tumeur mammaire ayant différents potentiels métastatiques. Par des analyses statistiques, nous avons répertorié 2623 transcripts présentant des variations d’expression et d’isoformes entre les types de tumeur. Une analyse du réseau de gènes montre qu’environ la moitié d’entre eux est impliquée dans plusieurs activités cellulaires, ainsi que dans nombreux cancers et désordres génétiques.

Étude de l’impact d’un programme d’activité physique (Amazone) auprès de femmes en traitement pour un cancer du sein

Le cancer du sein est la forme de cancer la plus souvent diagnostiquée chez les femmes. Elles doivent vivre avec des séquelles qui nuisent à leur qualité de vie. Plusieurs études ont montré les bienfaits de l’activité physique (AP) sur les composantes physiques et psychologiques des patientes. Toutefois, elles réduisent souvent leur pratique d'AP suite aux traitements en raison de la détérioration de leur condition physique. Or, le maintien à long terme de la pratique d’AP est essentiel pour en conserver les bénéfices. La première section du mémoire présente une recension des écrits sur les bienfaits de l’AP auprès des femmes atteintes d'un cancer du sein et la seconde rend compte d'une étude expérimentale ayant pour objectif d'évaluer l’impact d’un programme d’AP sur le sentiment d’efficacité personnel et sur le plaisir associé à la pratique d'AP. Une enquête de suivi a été menée trois mois après la fin du programme afin d’évaluer le maintien à long terme de la pratique d'AP. L'étude a été réalisée auprès de 18 patientes en cours de traitement. Le groupe expérimental a suivi un programme supervisé d’AP combiné à des séances de counseling sur une période de 16 semaines. Le groupe témoin avait la possibilité de suivre un programme de yoga. Nos résultats indiquent une amélioration statistiquement significative des trois composantes mesurées, soit le sentiment d'efficacité personnelle, le plaisir à faire de l'AP et le maintien de la pratique après la participation au programme.