Diferenciación molecular de Lemna aequinoctialis y L. Valdiviana (lemnaceae) por patrones proteicos

El estudio se llevó a cabo en el Laboratorio de Genética Molecular de la Universidad Nacional, Heredia, Costa Rica. Se utilizaron plantas acuáticas macrófitas de Lemna valdiviana y L. aequinoctialis previamente identificadas. Estas especies habitan en aguas ricas en sales disueltas y aguas servidas. Recientemente se les consideró como un indicador de la contaminación ocasionada por pesticidas y herbicidas en el agua. La composición proteica llega a niveles entre 38 y 43% de materia seca, importante para diversos usos. La extracción de proteínas totales, por medio de electroforesis discontinua en gel de poliacrilamida, se realizó en condiciones reductoras con SDS (SDS-PAGE). Los geles separadores empleados fueron al 8 y 10%, gel espaciador al 4% y la tinción se efectuó con azul commassie. Los diversos patrones proteicos reflejaron diferencias genéticas entre ambas especies que se pueden deber a las diferencias de hábitat y de reproducción.

Caracterización molecular por patrones electroforéticos de isoenzimas esterasas en Lemna aequinoctialis y Lemna valdiviana (lemnaceae) de Costa Rica (ING)

The Lemnaceae family lacks morphologic and anatomical characteristics with comparative aims and for that reason the molecular studies has been necessary a differentiation. In Costa Rica there are two species of Lemna: Lemna aequinoctialis and Lemna valdiviana. With the objective of a molecular characterization and differentiation of both species were extracted isoenzymes esterases. The study was carried out in the Molecular Genetics Laboratory of the School of Biological Sciences at Universidad Nacional, Heredia, Costa Rica. The technical electrophoresis in gel of polyacrylamida SDS-PAGE was used. It was difference in the pattern of isoenzymes between both species. According to previous molecular studies based on morphology and anatomy, flavonoides, isoenzymes, and DNA sequences of certain genes both species are very different; in addition they belong to different monophyletics groups. On the other hand, the importance of this molecular characterization is its possible use in water treatment, because the esterases have had important in the bioremediation. Also, species of the Lemnaceae family are used in the water treatment like bioremediation.

First report of Eratyrus mucronatus, Stal, 1859, (Hemiptera, Reduviidae, Triatominae), in the State of Rondônia, Brazil

INTRODUCTION: This paper reports, for the first time, the presence of the Eratyrus mucronatus species in the State of Rondonia, Brazil. METHODS: These specimens were caught by chance in the forest and later they were collected using luminous traps. RESULTS: After finding these specimens, the number of the Triatominae genera in Rondonia rose to four, while its species rose to seven. CONCLUSIONS: Complimentary studies will be conducted in order to allow for clearer understanding the ecology of this arthropod, its possible role in transmitting Chagas' disease and its current geographical distribution.

A new bianthron glycoside as inhibitor of Trypanosoma cruzi glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase activity

A phytochemical investigation of the ethanolic extract of stalks of Senna martiana Benth. (Leguminoseae), native specie of northeast Brazil, resulted in the isolation and spectroscopic characterization of a new bianthrone glycoside, martianine 1 (10,10'-il-chrysophanol-10-oxi10,10'-bi-glucosyl). Its identification was established by HRMS, IR and 2D NMR experiments. The evaluation of martianine trypanocidal activity was carried out against gliceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase enzyme from Trypanosoma cruzi. Its inhibitory constant (Ki) is in the low micromolar concentration and it was determined by isothermal titration calorimetry to be 27.3 ± 2.47 µmol L-1. The non-competitive mechanism is asserted to be putative of the mode of action martianine displays against T. cruzi GAPDH. Results show that martianine has a great potential to become new lead molecule by inhibiting this key enzyme and for the development of new drugs against Chagas disease.

Screening of Trypanosoma cruzi glycosomal glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase enzyme inhibitors

The inhibitory activity of crude extracts of Meliaceae and Rutaceae plants on glycosomal glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (gGAPDH) enzyme from Trypanosoma cruzi was evaluated at 100 μg/mL. Forty-six extracts were tested and fifteen of them showed significant inhibitory activity (IA % > 50). The majority of the assayed extracts of Meliaceae plants (Cedrela fissilis, Cipadessa fruticosa and Trichilia ramalhoi) showed high ability to inhibit the enzymatic activity. The fractionation of the hexane extract from branches of C. fruticosa led to the isolation of three flavonoids: flavone, 7-methoxyflavone and 3',4',5',5,7-pentamethoxyflavone. The two last compounds showed high ability to inhibit the gGAPDH activity. Therefore, the assayed Meliaceae species could be considered as a promising source of lead compounds against Chagas' disease.

Levantamento da fauna de Triatominae (Hemiptera: Reduviidae) em ambiente domiciliar e infecção natural por Trypanosomatidae no Estado de Mato Grosso do Sul

Entre 2000 a 2004, foi realizado levantamento da fauna de Triatominae (Hemiptera: Reduviidae) e exame de infecção natural por Trypanosomatidae, no Estado de Mato Grosso do Sul. Um total de 13.671 espécimes foram capturados. Na análise faunística das espécies capturadas, Triatoma sordida foi caracterizada como muito abundante, muito freqüente, constante e dominante. Os índices de infecção natural para Trypanosoma cruzi apresentaram os valores de 3,2% para Panstrongylus geniculatus, 0,6% para Rhodnius neglectus e 0,1% para Triatoma sordida, apesar do Estado de Mato Grosso do Sul apresentar-se livre da transmissão vetorial endêmica.

Ocorrência de Panstrongylus guentheri Berg (Hemiptera: Reduviidae) no Mato Grosso do Sul

Relata-se a primeira ocorrência de Panstrongylus guentheri Berg no Brasil. Essa espécie, até então, havia sido observada somente na Argentina, Paraguai, Bolívia e Uruguai. Desta feita, amplia-se a distribuição geográfica desse Triatominae por meio de dois exemplares capturados nos municípios de Bodoquena e Itaporã, ambos no Mato Grosso do Sul. Esses exemplares estavam em ambiente intradomiciliar

Protective effects of mate tea (Ilex paraguariensis) on H2O2-induced DNA damage and DNA repair in mice

Yerba mate (Ilex paraguariensis) is rich in several bioactive compounds that can act as free radical scavengers. Since oxidative DNA damage is involved in various pathological states such as cancer, the aim of this study was to evaluate the antioxidant activity of mate tea as well as the ability to influence DNA repair in male Swiss mice. Forty animals were randomly assigned to four groups. The animals received three different doses of mate tea aqueous extract, 0.5, 1.0 or 2.0 g/kg, for 60 days. After intervention, the liver, kidney and bladder cells were isolated and the DNA damage induced by H2O2 was investigated by the comet assay. The DNA repair process was also investigated for its potential to protect the cells from damage by the same methodology. The data presented here show that mate tea is not genotoxic in liver, kidney and bladder cells. The regular ingestion of mate tea increased the resistance of DNA to H2O2-induced DNA strand breaks and improved the DNA repair after H2O2 challenge in liver cells, irrespective of the dose ingested. These results suggest that mate tea could protect against DNA damage and enhance the DNA repair activity. Protection may be afforded by the antioxidant activity of the mate tea's bioactive compounds

Genome Size, Karyotype Polymorphism and Chromosomal Evolution in Trypanosoma cruzi

Background: The Trypanosoma cruzi genome was sequenced from a hybrid strain (CL Brener). However, high allelic variation and the repetitive nature of the genome have prevented the complete linear sequence of chromosomes being determined. Determining the full complement of chromosomes and establishing syntenic groups will be important in defining the structure of T. cruzi chromosomes. A large amount of information is now available for T. cruzi and Trypanosoma brucei, providing the opportunity to compare and describe the overall patterns of chromosomal evolution in these parasites. Methodology/Principal Findings: The genome sizes, repetitive DNA contents, and the numbers and sizes of chromosomes of nine strains of T. cruzi from four lineages (TcI, TcII, TcV and TcVI) were determined. The genome of the TcI group was statistically smaller than other lineages, with the exception of the TcI isolate Tc1161 (Jose-IMT). Satellite DNA content was correlated with genome size for all isolates, but this was not accompanied by simultaneous amplification of retrotransposons. Regardless of chromosomal polymorphism, large syntenic groups are conserved among T. cruzi lineages. Duplicated chromosome-sized regions were identified and could be retained as paralogous loci, increasing the dosage of several genes. By comparing T. cruzi and T. brucei chromosomes, homologous chromosomal regions in T. brucei were identified. Chromosomes Tb9 and Tb11 of T. brucei share regions of syntenic homology with three and six T. cruzi chromosomal bands, respectively. Conclusions: Despite genome size variation and karyotype polymorphism, T. cruzi lineages exhibit conservation of chromosome structure. Several syntenic groups are conserved among all isolates analyzed in this study. The syntenic regions are larger than expected if rearrangements occur randomly, suggesting that they are conserved owing to positive selection. Mapping of the syntenic regions on T. cruzi chromosomal bands provides evidence for the occurrence of fusion and split events involving T. brucei and T. cruzi chromosomes.

Haplotype distribution of five nuclear genes based on network genealogies and Bayesian inference indicates that Trypanosoma cruzi hybrid strains are polyphyletic

Chagas disease is still a major public health problem in Latin America. Its causative agent, Trypanosoma cruzi, can be typed into three major groups, T. cruzi I, T. cruzi II and hybrids. These groups each have specific genetic characteristics and epidemiological distributions. Several highly virulent strains are found in the hybrid group; their origin is still a matter of debate. The null hypothesis is that the hybrids are of polyphyletic origin, evolving independently from various hybridization events. The alternative hypothesis is that all extant hybrid strains originated from a single hybridization event. We sequenced both alleles of genes encoding EF-1 alpha, actin and SSU rDNA of 26 T. cruzi strains and DHFR-TS and TR of 12 strains. This information was used for network genealogy analysis and Bayesian phylogenies. We found T. cruzi I and T. cruzi II to be monophyletic and that all hybrids had different combinations of T. cruzi I and T. cruzi II haplotypes plus hybrid-specific haplotypes. Bootstrap values (networks) and posterior probabilities (Bayesian phylogenies) of clades supporting the monophyly of hybrids were far below the 95% confidence interval, indicating that the hybrid group is polyphyletic. We hypothesize that T. cruzi I and T. cruzi II are two different species and that the hybrids are extant representatives of independent events of genome hybridization, which sporadically have sufficient fitness to impact on the epidemiology of Chagas disease.

Sôbre o modêlo catalítico reversível aplicado ao estudo da cinética epidemiológica da infecção chagásica

O "modêlo catalítico reversível" foi aplicado à análise de dados de prevalência da infecção chagásica em população de duas comunidades de Salvador, Bahia, Brasil e, para efeito de comparação, a dados recentemente publicados e referentes à população de uma localidade venezuelana. Apesar dos numerosos pressupostos básicos ao modêlo, o mesmo descreve bem a cinética da infecção chagásica nas populações. A fôrça da infecção de 35 contatos anuais efetivos por mil habitantes na localidade rural venezuelana revelou-se de magnitude aproximadamente três vezes maior que a fôrça atuante nos grupos populacionais de Salvador, os quais são constituídos, na sua maioria, de migrantes internos oriundos de áreas endêmicas do Estado da Bahia. Foram apontadas algumas das possíveis aplicações práticas do modêlo catalítico reversível ao estudo da história natural da doença de Chagas.

Infestação domiciliar por Triatoma infestans e alguns aspectos epidemiológicos da tripanossomose americana em área do Estado de São Paulo, Brasil

São relatados os resultados das investigações sôbre epidemiologia da tripanossomose americana, levadas a efeito no Bairro da Ilha, município de Salto de Pirapora, Estado de São Paulo, Brasil. Em conjunto de 28 edifícios submetidos ao expurgo seletivo pela aplicação de BHC, procurou-se pesquisar a infestação por Triatoma infestans, através o método das caixas de Gómez-Núñez. O resultado revelou a persistência de edifícios infestados, em proporção semelhante àquela observada antes do expurgo. Contudo, houve redução da intensidade, revelada pela queda do índice geral de infestação. A pesquisa de focos naturais do parasito mostrou a possível existência da infecção em roedores Akodon arviculoides e Oryzomys nigripes. Levando-se a efeito xenodiagnósticos em cães e gatos, nascidos ou introduzidos logo depois do rociado seletivo, pôde-se evidenciar a persistência da transmissão, pelo menos por via congênita. Ao lado disso, observou-se a introdução precoce de animais infectados, procedentes de outras áreas. Conclui-se pela necessidade de revisão na profilaxia da doença de Chagas, baseada no simples combate aos triatomíneos pelo uso de inseticidas.

Suspensão do rociado no combate ao Triatoma infestans em áreas do Estado de São Paulo, Brasil

Foi relatada a evolução do combate ao T. infestans, acentuando-se que inicialmente ocorreu uma queda na densidade de exemplares nos municípios periodicamente trabalhados. Esta foi acompanhada da queda dos índices de infecção pelo T. cruzi e das reações de Machado Guerreiro positivas. Quando as condições se tornaram adequadas, introduziu-se o método seletivo de Pedreira de Freitas, o qual possibilitou a melhoria das técnicas de borrifação e captura e ainda a ampliação da área protegida. Considerou-se que uma campanha de contrôle dos vetores domiciliários da doença de Chagas, apresenta distintas etapas. Procurou-se esclarecer quando e como, em São Paulo, conseguiu-se, em alguns municípios, chegar à fase de Vigilância, preconizada por Emmanuel Dias. Estabeleceu-se uma área pilôto, onde estão sendo estudados métodos de trabalho e adestrado o pessoal lotado nas áreas em Vigilância. Procurou-se mostrar que o T. sordida e o P. megistus não vêm respondendo satisfatòriamente aos atuais métodos de contrôle.

Aspectos ecológicos da tripanossomose americana: II - distribuição e dispersão local de triatomíneos em ecótopos naturais e artificiais

São apresentados os resultados de investigação destinada a estabelecer o quadro de distribuição de Triatoma sordida e Rhodnius neglectus em áreas com ecótopos naturais e artificiais. Essa distribuição revelou-se do tipo agrupado ou contagiante, dirigida uniformemente para casas e anexos por parte do primeiro, e para palmeiras por parte do segundo. Em áreas de vegetação mais densa, do tipo cerrado, a densidade é praticamente nula ou muito baixa, admitindo-se que isso deva correr por conta da competição. As modificações introduzidas pelo homem tendem a anular êsse fator, além de, as suas habitações, se transformarem em ecótopos que atraem a população de T. sordida. Êsse fato, aliado à eliminação local do T. infestans, parece explicar a tendência invasiva daquele triatomíneo. Evidenciou-se também a persistência da infecção pelo Trypanosoma cruzi em triatomíneos e vertebrados domiciliados, o que representa potencial para o incremento da transmissão.