Similarities and differences in signal transduction by interleukin 4 and interleukin 13: analysis of Janus kinase activation.

The cytokines interleukin (IL) 4 and IL-13 induce many of the same biological responses, including class switching to IgE and induction of major histocompatibility complex class II antigens and CD23 on human B cells. It has recently been shown that IL-4 induces the tyrosine phosphorylation of a 170-kDa protein, a substrate called 4PS, and of the Janus kinase (JAK) family members JAK1 and JAK3. Because IL-13 has many functional effects similar to those of IL-4, we compared the ability of IL-4 and IL-13 to activate these signaling molecules in the human multifactor-dependent cell line TF-1. In this report we demonstrate that both IL-4 and IL-13 induced the tyrosine phosphorylation of 4PS and JAK1. Interestingly, although IL-4 induced the tyrosine phosphorylation of JAK3, we did not detect JAK3 phosphorylation in response to IL-13. These data suggest that IL-4 and IL-13 signal in similar ways via the activation of JAK1 and 4PS. However, our data further indicate that there are significant differences because IL-13 does not activate JAK3.

Inhibition of selective signaling events in natural killer cells recognizing major histocompatibility complex class I.

Many studies have characterized the transmembrane signaling events initiated after T-cell antigen receptor recognition of major histocompatibility complex (MHC)-bound peptides. Yet, little is known about signal transduction from a set of MHC class I recognizing receptors on natural killer (NK) cells whose ligation dramatically inhibits NK cell-mediated killing. In this study we evaluated the influence of MHC recognition on the proximal signaling events in NK cells binding tumor targets. We utilized two experimental models where NK cell-mediated cytotoxicity was fully inhibited by the recognition of specific MHC class I molecules. NK cell binding to either class I-deficient or class I-transfected target cells initiated rapid protein tyrosine kinase activation. In contrast, whereas NK cell binding to class I-deficient targets led to inositol phosphate release and increased intracellular free calcium ([Ca2+]i), NK recognition of class I-bearing targets did not induce the activation of these phospholipase C-dependent signaling events. The recognition of class I by NK cells clearly had a negative regulatory effect since blocking this interaction using anti-class I F(ab')2 fragments increased inositol 1,4,5-trisphosphate release and [Ca2+]i and increased the lysis of the targets. These results suggest that one of the mechanisms by which NK cell recognition of specific MHC class I molecules can block the development of cell-mediated cytotoxicity is by inhibiting specific critical signaling events.

General requirement for RNA polymerase II holoenzymes in vivo.

Yeast RNA polymerase II holoenzymes have been described that consist of RNA polymerase II, a subset of general transcription factors, and nine SRB regulatory proteins. The feature that distinguishes the RNA polymerase II holoenzymes from other forms of RNA polymerase II in the cell is their tight association with SRB proteins. We investigated the fraction of genes that require SRB proteins in vivo by examining the effect of temperature-sensitive mutations in SRB genes on transcription by RNA polymerase II. Upon transfer to the restrictive temperature, there is a rapid and general shutdown of mRNA synthesis in srb mutant cells. These data, combined with the observation that essentially all of the SRB protein in cells is tightly associated with RNA polymerase II molecules, argue that SRB-containing holoenzymes are the form of RNA polymerase II recruited to most promoters in the cell.

Variabilidade intratípica de HPV 16 em relação à origem étnica e HLA de uma população de alto risco para o câncer do colo do útero

A infecção por papilomavirus é a principal causa de desenvolvimento de neoplasias intraepiteliais cervicais (NIC) e câncer do colo do útero (CCU). Estudos epidemiológicos têm demonstrado que a persistência do genoma viral encontra-se associado a variantes moleculares específicas de papilomavirus humano (HPV) de alto risco. As moléculas HLA de classe II têm um importante papel na resposta imune. Associações entre HLA e CCU ou infecção por HPV tem sido demonstrado em diferentes populações. O nosso objetivo foi verificar se a variabilidade de HLA-DRB1 e DQB1 estavam associada ao CCU e NIC III em mulheres de Belém, uma população formada pelos 3 principais grupos étnicos humanos e uma área de alto risco para o CCU no Norte do Brasil. Foi investigada a existência de diferenças na distribuição de alelos HLA entre mulheres com CCU e NIC III portadoras de diferentes variantes de HPV-16 e mulheres citologicamente normais. Os genes HLA DQB1 e DRB1 foram tipados pelo método de PCR-SSO em 95 casos e 287 controles de mulheres com citologia normal atendidas em um centro de prevenção do colo do útero na mesma cidade. As variantes de HPV-16 foram tipadas por sequenciamento de um fragmento da região controladora do genoma viral (LCR). O polimorfismo na posição 350 do gene E6 foi tipado baseado em um protocolo de hibridização em pontos, para identificar a alteração na posição 350T→G. A magnitude das associações foi estimada por odds ratio (OR) e os respectivos intervalos de confiança (IC), ajustados para potenciais fatores de confusão. Uma associação positiva foi observada entre CCU e os haplótipos DRB1* 150 l-DQB1*0602, DRB1*04-DQB1*0301 e DRB1*1602-DQB1*0301. Ao contrário, DRB1*01-DQB1*0501 mostrou um efeito protetor. Os alelos DRB1*0804, DQB1*0402 apresentaram efeito protetor contra positividade por HPV. O alelo DQB1*0502 e o grupo DRB1*15 foram positivamente associados. Os nossos resultados mostram que as associações positivas de DRB1*1501 e DRB1*1602 podem ser atribuídas a variantes asiático-americanas quando comparado a variantes européias. O risco conferido a DRB1*1501 foi encontrado associado tanto a variantes E6350G quanto a variantes E6350T, entretanto, o maior efeito foi devido às variantes E6250T. A associação positiva de DRB1*1602 foi significativa somente no grupo de mulheres positivas para E6350G. Estes resultados estão de acordo com a composição étnica da população estudada bem como um maior potencial oncogênico de certas variantes. Nossos dados sugerem que a contribuição dos alelos HLA na susceptibilidade genética ao CCU difere de acordo com a distribuição das variantes de HPV em uma dada região geográfica ou grupo étnico.

B cell chronic lymphocytic leukaemia cells have reduced capacity to upregulate expression of MHC class I in response to interferon-gamma

Aims: An important consideration in the design of a tumour vaccine is the ability of tumour-specific cytotoxic T lymphocytes (CTL) to recognise unmanipulated tumour cells in vivo. To determine whether B-CLL might use an escape strategy, the current studies compared B-CLL and normal B cell MHC class I expression. Methods: Flow cytometry, TAP allele PCR and MHC class I PCR were used. Results: While baseline expression of MHC class I did not differ, upregulation of MHC class I expression by B-CLL cells in response to IFN-gamma was reduced. No deletions or mutations of TAP 1 or 2 genes were detected. B-CLL cells upregulated TAP protein expression in response to IFN-gamma. Responsiveness of B-CLL MHC class I mRNA to IFN-gamma was not impaired. Conclusions: The data suggest that MHC class I molecules might be less stable at the cell surface in B-CLL than normal B cells, as a result of the described release of beta(2)m and beta(2)m-free class I heavy chains from the membrane. This relative MHC class I expression defect of B-CLL cells may reduce their susceptibility to CTL lysis in response to immunotherapeutic approaches.

Either interleukin-12 or interferon-gamma can correct the dendritic cell defect induced by transforming growth factor beta(1) in patients with myeloma

The poor response to immunotherapy in patients with multiple myeloma (MM) indicates that a better understanding of any defects in the immune response in these patients is required before effective therapeutic strategies can be developed. Recently we reported that high potency (CMRF44(+)) dendritic cells (DC) in the peripheral blood of patients with MM failed to significantly up-regulate the expression of the B7 co-stimulatory molecules, CD80 and CD86, in response to an appropriate signal from soluble trimeric human CD40 ligand. This defect was caused by transforming growth factor beta(1) (TGFbeta(1)) and interleukin (IL)-10, produced by malignant plasma cells, and the defect was neutralized in vitro with anti-TGFbeta(1). As this defect could impact on immunotherapeutic strategies and may be a major cause of the failure of recent trials, it was important to identify a more clinically useful agent that could correct the defect in vivo. In this study of 59 MM patients, the relative and absolute numbers of blood DC were only significantly decreased in patients with stage III disease and CD80 up-regulation was reduced in both stage I and stage III. It was demonstrated that both IL-12 and interferon-gamma neutralized the failure to stimulate CD80 up-regulation by huCD40LT in vitro. IL-12 did not cause a change in the distribution of DC subsets that were predominantly myeloid (CD11c+ and CDw123-) suggesting that there would be a predominantly T-helper cell type response. The addition of IL-12 or interferon-gamma to future immunotherapy trials involving these patients should be considered.

MULTIPRED: A computational system for prediction of promiscuous HLA binding peptides

MULTIPRED is a web-based computational system for the prediction of peptide binding to multiple molecules ( proteins) belonging to human leukocyte antigens (HLA) class I A2, A3 and class II DR supertypes. It uses hidden Markov models and artificial neural network methods as predictive engines. A novel data representation method enables MULTIPRED to predict peptides that promiscuously bind multiple HLA alleles within one HLA supertype. Extensive testing was performed for validation of the prediction models. Testing results show that MULTIPRED is both sensitive and specific and it has good predictive ability ( area under the receiver operating characteristic curve A(ROC) > 0.80). MULTIPRED can be used for the mapping of promiscuous T-cell epitopes as well as the regions of high concentration of these targets termed T-cell epitope hotspots. MULTIPRED is available at http:// antigen.i2r.a-star.edu.sg/ multipred/.

Dinuclear cyano-bridged Co-III-Fe-II complexes as precursors for molecular mixed-valence complexes of higher nuclearity

The preparation and characterization of a series of trinuclear mixed-valence cyano-bridged Co-III-Fe-II-Co-III compounds derived from known dinuclear [{LnCoIII(mu-NC)}Fe-II(CN)(5)](-) complexes (L-n = N-5 or N3S2 n-membered pendant amine macrocycle) are presented. All of the new trinuclear complexes were fully characterized spectroscopically (UV-vis, IR, and C-13 NMR). Complexes exhibiting a trans and cis arrangement of the Co-Fe-Co units around the [Fe(CN)(6)](4-) center are described (i.e., cis/trans-[{LnCoIII(mu-NC)}(2)Fe-II(CN)(4)](2+)), and some of their structures are determined by X-ray crystallography. Electrochemical experiments revealed an expected anodic shift of the Fe-III/II redox potential upon addition of a tripositively charged {(CoLn)-L-III} moiety. The Co-III/II redox potentials do not change greatly from the di- to the trinuclear complex, but rather behave in a fully independent and noncooperative way. In this respect, the energies and extinction coefficients of the MMCT bands agree with the formal existence of two mixed-valence Fe-II-CN-Co-III units per molecule. Solvatochromic experiments also indicated that the MMCT band of these compounds behaves as expected for a class II mixed-valence complex. Nevertheless, its extinction coefficient is dramatically increased upon increasing the solvent donor number.

AVALIAÇÃO CEFALOMÉTRICA DO ESPAÇO AÉREO NASO E BUCOFARÍNGEO E SUA IMPORTÂNCIA SOBRE O PADRÃO DE CRESCIMENTO E FUNÇÃO RESPIRATÓRIA EM INDIVÍDUOS COM MÁ OCLUSÃO CLASSE II, DIVISÃO 1 DE ANGLE

O objetivo deste estudo foi avaliar o tamanho do espaço aéreo naso e bucofaríngeo em indivíduos com má oclusão Classe II, divisão 1 de Angle. A metodologia constou da mensuração do espaço aéreo naso e bucofaríngeo em 122 telerradiografias laterais de indivíduos na faixa etária dos 12 aos 21 anos, brasileiros leucodermas. Desses indivíduos, 62 apresentavam respiração nasal e 60 respiração bucal, não sendo submetidos a tratamento ortodôntico prévio. Os resultados demonstraram a ausência de dimorfimo sexual; os indivíduos respiradores nasais apresentaram maiores dimensões dos limites superior e inferior e da menor secção transversal do espaço aéreo quando comparado aos respiradores bucais. O tamanho médio da adenóide foi maior nos pacientes respiradores bucais. Quando comparamos as variáveis estudadas com os padrões faciais não foram observadas diferenças entre os mesmos, porém quando associamos padrão facial com o tipo de respiração foi encontrada maior proporção de indivíduos respiradores bucais nos padrões dolicofacial e mesofacial em relação ao padrão braquifacial.

AVALIAÇÃO DAS ALTERAÇÕES DENTOESQUELÉTICAS DE PACIENTES COM MÁ OCLUSÃO DE CLASSE II DE ANGLE, TRATADOS COM O APARELHO REGULADOR DE FUNÇÃO DE FRÄNKEL (RF-2).

Esta pesquisa objetivou estudar retrospectivamente por meio de radiografias em norma frontal e modelos de gesso as alterações dentoesqueléticas de pacientes com má oclusão de Classe II, 1ª divisão, divididos em dois grupos: Grupo Tratado, constituído de 28 pacientes, sendo 13 pacientes do sexo masculino e 15 do sexo feminino, tratados com aparelho regulador de função de Fränkel - 2 (RF-2), por um período ativo de 1,5 anos; Grupo Controle: constituído de 28 pacientes, sendo 12 do sexo masculino e 16 do sexo feminino, sem nenhum tipo de tratamento durante o acompanhamento longitudinal de 1,5 anos. A amostra deste estudo consistiu de 112 telerradiografias em norma frontal e 112 pares de modelos de gesso, 56 obtidos ao início (T1) e 56 ao final da observação (T2). Após a análise estatística das mensurações obtidas, concluiu- se que houve como resultado alterações estatisticamente significantes em todas as medidas analisadas e o aparelho RF-2 teve atuação direta nas variáveis: distância intermolares superio res e inferiores (radiografias e modelos),profundidade palatina, largura maxilar e altura facial ântero-inferior.

ANÁLISE COMPARATIVA DO NÚMERO DE CONTATOS OCLUSAIS AO FINAL DA FASE DE CONTENÇÃO, E APÓS UM PERÍODO DE 5 ANOS, EM PACIENTES COM MÁ-OCLUSÃO DE CLASSE II, TRATADOS COM EXTRAÇÕES DE 4 PRÉ- MOLARES.

Realizou-se um estudo comparativo do número de pontos de contato oclusais na posição de máxima intercuspidação habitual em uma amostra composta por 14 pacientes leucodermas, sendo 9 do sexo feminino e 5 do sexo masculino, com máoclusão de Classe II, divisão 1a de Angle, tratados ortodonticamente pela técnica de Edgewise, com extrações dos 4 primeiros pré-molares. Estes pontos foram registrados em dois tempos: T1 - ao final da fase de contenção superior e T2 - após um período médio de 5,2 anos. A contagem dos contatos oclusais foram realizadas nos arcos superior e inferior, separadamente, para as regiões anterior e posteriores. Depois da análise estatística, pôde-se concluir que não houve diferença estatisticamente significante entre o número médio de contatos oclusais nos diferentes períodos estudados.(AU)

Avaliação de assimetria nas arcadas dentárias de indivíduos com oclusão normal e má oclusão de Classe II

A assimetria das arcadas dentárias constitui um assunto de grande importância estudado por profissionais de Ortodontia na elaboração de um diagnóstico correto, planejamento e execução de um tratamento ortodôntico bem sucedido. O objetivo deste estudo foi avaliar o grau de assimetria das arcadas dentárias em indivíduos com oclusão normal e má oclusão de Classe II, divisão 1 e 2, bem como o dimorfismo sexual existente. Foram avaliados 180 pares de modelos de estudo de indivíduos do sexo masculino e feminino, na faixa etária de 12 a 21 anos, divididos em 3 grupos de 60 pares de modelos, de acordo com a má oclusão. Os grupos foram classificados em: Grupo 1 - indivíduos com oclusão normal, Grupo 2 - indivíduos com má oclusão de Classe II divisão 1 (Cl II 1), e Grupo 3 - indivíduos com má oclusão de Classe II divisão 2 (Cl II 2). Os modelos foram medidos utilizando-se um aparelho inédito, idealizado e fabricado exclusivamente para a análise de assimetria das arcadas dentárias. Para a análise de assimetria foram realizadas 2 medições angulares desvio de linha média (DLM), posicionamento dos caninos (PC) e 3 lineares distância dos caninos à rafe palatina (DC), distância inter-caninos (DIC), posicionamento dos primeiros molares no sentido ântero-posterior (PM). Concluiu-se que a ocorrência de assimetria nas arcadas dentárias independe da má oclusão. O Grupo 1 apresentou um menor grau de assimetria nas arcadas dentárias em relação aos grupos 2 e 3, os quais apresentaram um grau de assimetria semelhante. O grau de assimetria nas arcadas dentárias inferiores, nos 3 grupos, foi maior do que nas arcadas dentárias superiores. A direção do desvio da linha média apresentou uma correlação inversamente proporcional do lado em que o molar se apresentava mesializado, nas arcadas superior e inferior dos três grupos, com exceção da arcada superior no Grupo 2 (Classe II divisão 1). Houve dimorfismo sexual estatisticamente significante para algumas medidas, porém é importante considerar os baixos valores e a disposição, destas diferenças, entre as medidas realizadas, a qual revela ter se tratado de dados obtidos ao acaso.

AVALIAÇÃO DA PROPORÇÃO DENTAL DE BOLTON EM INDIVÍDUOS COM OCLUSÃO NORMAL NATURAL E MALOCLUSÕES DE CLASSE I E CLASSE II DIVISÃO 1 DE ANGLE.

Introdução: A análise de Bolton, análise que quantifica o tamanho dentário, é uma referência importante para profissionais que buscam finalizações ortodônticas adequadas. Objetivo: O objetivo deste trabalho é verificar se há discrepância entre os indivíduos com oclusão normal natural e maloclusões de Classe I e de Classe II divisão 1 de Angle pertencentes a amostra selecionada, em relação aos valores encontrados por Bolton, bem como verificar também se há dimorfismo sexual. Metodologia: 3 grupos contendo 35 pares e modelos em gesso cada, separados pelo tipo de oclusão, pertencentes ao acervo do programa de pós-graduação em Ortodontia da Universidade Metodista de São Paulo foram medidos com paquímetro digital em sua maior distância mésiodistal desde 1º molar direito a 1º molar esquerdo, dos arcos superiores e inferiores, com dentição permanente. Os valores foram tabulados e a proporção de Bolton foi aplicada. Resultados: Respectivamente para os grupos 1, 2 e 3, a proporção total encontrada foi de 90,36 (DP±1,70), 91,17 (DP±2,58) e 90,76 (DP±2,45), e a proporção anterior foi de 77,73 (DP±2,39), 78,01 (DP±2,66) e 77,30 (DP±2,65). Conclusão: não houve dimorfismo sexual nem diferença estatisticamente significante comparando os valores aos sugeridos por Bolton.

AVALIAÇÃO DAS ALTERAÇÕES DENTOESQUELÉTICAS DECORRENTES DO TRATAMENTO DA MALOCLUSÃO DE CLASSE II COM O APARELHO FORSUS POR MEIO DE TOMOGRAFIA COMPUTADORIZADA

Este estudo teve como objetivo avaliar cefalometricamente as alterações dentoesqueléticas decorrentes do tratamento da maloclusão de Classe II, divisão 1, com o aparelho Forsus®, por meio de Tomografia Computadorizada de Feixe Cônico (TCFC). O grupo avaliado foi composto por 10 pacientes, sendo 7 do sexo masculino e 3 do sexo feminino, com idade média de 16,1 anos, maloclusão com severidade mínima de 1/2 Classe II, trespasse horizontal mínimo de 5 mm, padrão facial meso ou braquifacial. Estes jovens se encontravam no estágio IV ou V de maturação óssea, verificada pelas vértebras cervicais. O tempo de uso do aparelho Forsus foi de 7,16 meses (média), período de avaliação compreendido entre a aquisição da primeira teleradiografia gerada através da TCFC (T1 - pré-Forsus) e da segunda teleradiografia (T2 - pós-Forsus). Para análise estatística foi utilizado o teste-t pareado. Os resultados mostraram um pequeno crescimento mandibular que, juntamente com uma diminuição do SNA levaram a uma melhora da relação maxilomandibular. Houve uma rotação no sentido anti-horário da mandíbula e do plano oclusal no sentido horário. Os incisivos superiores foram retruídos, verticalizados e extruídos e os molares superiores distalizaram por inclinação. Houve vestibularização, protrusão e intrusão dos incisivos inferiores, além de mesialização e extrusão dos molares inferiores. Desta maneira, conclui-se que o aparelho Forsus foi efetivo na correção da maloclusão de Classe II, propiciando maiores alterações dentoalveolares do que esqueléticas.(AU)

BENEFÍCIOS DO TRATAMENTO TARDIO DA MÁ OCLUSÃO DE CLASSE II COM OS APARELHOS FORSUS E TWIN FORCE

O objtivo deste estudo pros