Are myotonic dystrophy and peripheral neuropathy associated? : morphological, morphometric and electrophysiological analysis in DM1 transgenic mice

Abstract: Myotonic dystrophy (DM1), also known as Steinert disease, is an inherited autosomal dominant disease. It is characterized by myotonia, muscular weakness and atrophy, but DM1 may have manifestations in other organs such as eyes, heart, gonads, gastrointestinal and respiratory tracts, as well as brain. In 1992, it was demonstrated that this complex disease results from the expansion of CTG repeats in the 3' untranslated region of the DM protein kinase (DMPK) gene on chromosome 19. The size of the inherited expansion is critically linked to the severity of the disease and the age of onset. Although several electrophysiological and histological studies have been carried out to verify the possible involvement of peripheral nerve abnormality with DM1, the results have not been univocal. Therefore, at present the possible association between peripheral neuropatliy and DM1 remains debated. Recently, transgenic mice have been generated, that carry the human genomic DM1 region with 300 CTG repeats, and display the human DMl phenotype. The generation of these DM1 transgenic mice provides a useful tool to investigate the type and incidence of structural abnormalities in the peripheral nervous system associated with DM1 disease. By using the DM1 transgenic mice, we investigated the presence/absence of the three major peripheral neuropathies: axonal degeneration, axonal demyelination and neuronopathy. The morphological and morphometric analysis of sciatic, sural and phrenic nerves demonstrated the absence of axonal degeneration or demyelination. The morphometric analysis also ruled out any loss in the numbers of sensory or motor neurons in lumbar dorsal root ganglia and lumbar spinal cord enlargement respectively. Moreover, the éxamination of serial hind limb muscle sections from DMl mice showed a normal intramuscular axonal arborization as well as the absence of changes in the number and structure of endplates. Finally, the electrophysiological tests performed in DM1 transgenic mice showed that the compound muscle axon potentials (CMAPs) elicited in the hind limb digits in response to a stimulation of the sciatic nerve with anear-nerve electrode were similar to thosé obtained in wild type mice. On the basis of all our results, we hypothesized that 300 CTG repeats are not sufficient to induce disorder in the peripheral nervous system of this DM1 transgenic mouse model. Résumé La dystrophie myotonique (DM1), connue aussi sous le nom de maladie de Steinert, est une maladie héréditaire autosornale dominante. Elle est caractérisée par une myotonie, une faiblesse et une atrophie musculaires, mais peut aussi se manifester dans d'autres organes tels que les yeux, les voies digestive et respiratoire, ou le cerveau. En 1992, il a été montré que cette maladie complexe résultait de l'expansion d'une répétition de CTG dans une partie non traduite en 3' du gène codant pour la protéine kinase DM (DMPK), sur le chromosome 19. La taille de l'expansion héritée est étroitement liée à la sévérité et l'âge d'apparition de DM1. Bien que plusieurs études électrophysiologiques et histologiques aient été menées, pour juger d'une implication possible d'anomalies au niveau du système nerveux périphérique dans la DM1, les résultats n'ont jusqu'ici pas été univoques. Aujourd'hui, la question d'une neuropathie associée avec la DM1 reste donc controversée. Des souris transgéniques ont été élaborées, qui portent la séquence DM1 du génome humain avec 300 répétitions CTG et expriment le phénotype des patients DM1: Ces souris transgéniques DMl procurent un outil précieux pour l'étude du type et de l'incidence d'éventuelles anomalies du système nerveux périphérique dans la DM1. En utilisant ces souris transgéniques DM1, nous avons étudié la présence ou l'absence des trois principaux types de neuropathies périphériques: la dégénération axonale, la démyélinisation axonale et la neuronopathie. Les études morphologiques et morphométrique des nerfs sciatiques, suraux et phréniques ont montré l'absence de dégénération axonale ou de démyélinisation. L'analyse du nombre de cellules neuronales n'a pas dévoilé de diminution des nombres de neurones sensitifs dans les ganglions des racines dorsales lombaires ou de neurones moteurs dans la moëlle épinière lombaire des souris transgéniques DMl. De plus, l'examen de coupes sériées de muscle des membres postérieurs de souris DM1 a montré une arborisation axonale intramusculaire normale, de même que l'absence d'irrégularité dans le nombre ou la structure des plaques motrices. Enfin, les tests électrophysiologiques effectués sur les souris DMl ont montré que les potentiels d'action de la composante musculaire (CMAPs) évoqués dans les doigts des membres postérieurs, en réponse à une stimulation du nerf sciatique à l'aide d'une électrode paranerveuse, étaient identiques à ceux observées chez les souris sauvages. Sur la base de l'ensemble de ces résultats, nous avons émis l'hypothèse que 300 répétitions CTG ne sont pas suffisantes pour induire d'altérations dans le système nerveux périphérique du modèle de souris transgéniques DM 1.

A randomised controlled clinical trial and gait analysis of fixed- and mobile-bearing total knee replacements with a five-year follow-up.

This study compared the outcome of total knee replacement (TKR) in adult patients with fixed- and mobile-bearing prostheses during the first post-operative year and at five years' follow-up, using gait parameters as a new objective measure. This double-blind randomised controlled clinical trial included 55 patients with mobile-bearing (n = 26) and fixed-bearing (n = 29) prostheses of the same design, evaluated pre-operatively and post-operatively at six weeks, three months, six months, one year and five years. Each participant undertook two walking trials of 30 m and completed the EuroQol questionnaire, Western Ontario and McMaster Universities osteoarthritis index, Knee Society score, and visual analogue scales for pain and stiffness. Gait analysis was performed using five miniature angular rate sensors mounted on the trunk (sacrum), each thigh and calf. The study population was divided into two groups according to age (≤ 70 years versus > 70 years). Improvements in most gait parameters at five years' follow-up were greater for fixed-bearing TKRs in older patients (> 70 years), and greater for mobile-bearing TKRs in younger patients (≤ 70 years). These findings should be confirmed by an extended age controlled study, as the ideal choice of prosthesis might depend on the age of the patient at the time of surgery.

Efficacy of in-hospital multidimensional interventions of secondary prevention after acute coronary syndrome: a systematic review and meta-analysis

BACKGROUND: Secondary prevention programs for patients experiencing an acute coronary syndrome have been shown to be effective in the outpatient setting. The efficacy of in-hospital prevention interventions administered soon after acute cardiac events is unclear. We performed a systematic review and meta-analysis to determine whether in-hospital, patient-level interventions targeting multiple cardiovascular risk factors reduce all-cause mortality after an acute coronary syndrome. METHODS AND RESULTS: Using a prespecified search strategy, we included controlled clinical trials and before-after studies of secondary prevention interventions with at least a patient-level component (ie, education, counseling, or patient-specific order sets) initiated in hospital with outcomes of mortality, readmission, or reinfarction rates in acute coronary syndrome patients. We classified the interventions as patient-level interventions with or without associated healthcare provider-level interventions and/or system-level interventions. Twenty-six studies met our inclusion criteria. The summary estimate of 14 studies revealed a relative risk of all-cause mortality of 0.79 (95% CI, 0.69 to 0.92; n=37,585) at 1 year. However, the apparent benefit depended on study design and level of intervention. The before-after studies suggested reduced mortality (relative risk [RR], 0.77; 95% CI, 0.66 to 0.90; n=3680 deaths), whereas the RR was 0.96 (95% CI, 0.64 to 1.44; n=99 deaths) among the controlled clinical trials. Only interventions including a provider- or system-level intervention suggested reduced mortality compared with patient-level-only interventions. CONCLUSIONS: The evidence for in-hospital, patient-level interventions for secondary prevention is promising but not definitive because only before-after studies suggest a significant reduction in mortality. Future research should formally test which components of interventions provide the greatest benefit.

Cytogenetic and molecular analysis of the Pantaneiro cattle breed

The objective of this work was to characterize Pantaneiro cattle genetically through its paternal ancestry by the morphology of the Y chromosome, whether submetacentric or acrocentric, as well as to identify the maternal ancestry through mitochondrial DNA. The karyotype and mitochondrial DNA of 12 bulls of Pantaneiro breed were analyzed. The Y chromosome was analyzed in lymphocyte metaphases and the mitochondrial DNA by diagnosing its haplotype (Bos taurus and Bos indicus). Among Pantaneiro animals analyzed three had a taurine (submetacentric) Y and nine had a zebuine (acrocentric) Y chromosome, suggesting breed contamination by Zebu cattle, once Pantaneiro is considered to be of European origin. The mitochondrial DNA was exclusively of taurine origin, indicating that the participation of zebuines in the formation of the breed occurred entirely through the paternal line.

Childhood socioeconomic position and objectively measured physical capability levels in adulthood: a systematic review and meta-analysis.

BACKGROUND: Grip strength, walking speed, chair rising and standing balance time are objective measures of physical capability that characterise current health and predict survival in older populations. Socioeconomic position (SEP) in childhood may influence the peak level of physical capability achieved in early adulthood, thereby affecting levels in later adulthood. We have undertaken a systematic review with meta-analyses to test the hypothesis that adverse childhood SEP is associated with lower levels of objectively measured physical capability in adulthood. METHODS AND FINDINGS: Relevant studies published by May 2010 were identified through literature searches using EMBASE and MEDLINE. Unpublished results were obtained from study investigators. Results were provided by all study investigators in a standard format and pooled using random-effects meta-analyses. 19 studies were included in the review. Total sample sizes in meta-analyses ranged from N = 17,215 for chair rise time to N = 1,061,855 for grip strength. Although heterogeneity was detected, there was consistent evidence in age adjusted models that lower childhood SEP was associated with modest reductions in physical capability levels in adulthood: comparing the lowest with the highest childhood SEP there was a reduction in grip strength of 0.13 standard deviations (95% CI: 0.06, 0.21), a reduction in mean walking speed of 0.07 m/s (0.05, 0.10), an increase in mean chair rise time of 6% (4%, 8%) and an odds ratio of an inability to balance for 5s of 1.26 (1.02, 1.55). Adjustment for the potential mediating factors, adult SEP and body size attenuated associations greatly. However, despite this attenuation, for walking speed and chair rise time, there was still evidence of moderate associations. CONCLUSIONS: Policies targeting socioeconomic inequalities in childhood may have additional benefits in promoting the maintenance of independence in later life.

Development of LRFD Design Procedures for Bridge Piles in Iowa – Field Testing of Steel H-Piles in Clay, Sand, and Mixed Soils and Data Analysis (Volume II), TR-583, 2011

In response to the mandate on Load and Resistance Factor Design (LRFD) implementations by the Federal Highway Administration (FHWA) on all new bridge projects initiated after October 1, 2007, the Iowa Highway Research Board (IHRB) sponsored these research projects to develop regional LRFD recommendations. The LRFD development was performed using the Iowa Department of Transportation (DOT) Pile Load Test database (PILOT). To increase the data points for LRFD development, develop LRFD recommendations for dynamic methods, and validate the results of LRFD calibration, 10 full-scale field tests on the most commonly used steel H-piles (e.g., HP 10 x 42) were conducted throughout Iowa. Detailed in situ soil investigations were carried out, push-in pressure cells were installed, and laboratory soil tests were performed. Pile responses during driving, at the end of driving (EOD), and at re-strikes were monitored using the Pile Driving Analyzer (PDA), following with the CAse Pile Wave Analysis Program (CAPWAP) analysis. The hammer blow counts were recorded for Wave Equation Analysis Program (WEAP) and dynamic formulas. Static load tests (SLTs) were performed and the pile capacities were determined based on the Davisson’s criteria. The extensive experimental research studies generated important data for analytical and computational investigations. The SLT measured load-displacements were compared with the simulated results obtained using a model of the TZPILE program and using the modified borehole shear test method. Two analytical pile setup quantification methods, in terms of soil properties, were developed and validated. A new calibration procedure was developed to incorporate pile setup into LRFD.

Computational and statistical analysis of copy number variants in normal and cancer genomes

AbstractAlthough the genomes from any two human individuals are more than 99.99% identical at the sequence level, some structural variation can be observed. Differences between genomes include single nucleotide polymorphism (SNP), inversion and copy number changes (gain or loss of DNA). The latter can range from submicroscopic events (CNVs, at least 1kb in size) to complete chromosomal aneuploidies. Small copy number variations have often no (lethal) consequences to the cell, but a few were associated to disease susceptibility and phenotypic variations. Larger re-arrangements (i.e. complete chromosome gain) are frequently associated with more severe consequences on health such as genomic disorders and cancer. High-throughput technologies like DNA microarrays enable the detection of CNVs in a genome-wide fashion. Since the initial catalogue of CNVs in the human genome in 2006, there has been tremendous interest in CNVs both in the context of population and medical genetics. Understanding CNV patterns within and between human populations is essential to elucidate their possible contribution to disease. But genome analysis is a challenging task; the technology evolves rapidly creating needs for novel, efficient and robust analytical tools which need to be compared with existing ones. Also, while the link between CNV and disease has been established, the relative CNV contribution is not fully understood and the predisposition to disease from CNVs of the general population has not been yet investigated.During my PhD thesis, I worked on several aspects related to CNVs. As l will report in chapter 3, ! was interested in computational methods to detect CNVs from the general population. I had access to the CoLaus dataset, a population-based study with more than 6,000 participants from the Lausanne area. All these individuals were analysed on SNP arrays and extensive clinical information were available. My work explored existing CNV detection methods and I developed a variety of metrics to compare their performance. Since these methods were not producing entirely satisfactory results, I implemented my own method which outperformed two existing methods. I also devised strategies to combine CNVs from different individuals into CNV regions.I was also interested in the clinical impact of CNVs in common disease (chapter 4). Through an international collaboration led by the Centre Hospitalier Universitaire Vaudois (CHUV) and the Imperial College London I was involved as a main data analyst in the investigation of a rare deletion at chromosome 16p11 detected in obese patients. Specifically, we compared 8,456 obese patients and 11,856 individuals from the general population and we found that the deletion was accounting for 0.7% of the morbid obesity cases and was absent in healthy non- obese controls. This highlights the importance of rare variants with strong impact and provides new insights in the design of clinical studies to identify the missing heritability in common disease.Furthermore, I was interested in the detection of somatic copy number alterations (SCNA) and their consequences in cancer (chapter 5). This project was a collaboration initiated by the Ludwig Institute for Cancer Research and involved other groups from the Swiss Institute of Bioinformatics, the CHUV and Universities of Lausanne and Geneva. The focus of my work was to identify genes with altered expression levels within somatic copy number alterations (SCNA) in seven metastatic melanoma ceil lines, using CGH and SNP arrays, RNA-seq, and karyotyping. Very few SCNA genes were shared by even two melanoma samples making it difficult to draw any conclusions at the individual gene level. To overcome this limitation, I used a network-guided analysis to determine whether any pathways, defined by amplified or deleted genes, were common among the samples. Six of the melanoma samples were potentially altered in four pathways and five samples harboured copy-number and expression changes in components of six pathways. In total, this approach identified 28 pathways. Validation with two external, large melanoma datasets confirmed all but three of the detected pathways and demonstrated the utility of network-guided approaches for both large and small datasets analysis.RésuméBien que le génome de deux individus soit similaire à plus de 99.99%, des différences de structure peuvent être observées. Ces différences incluent les polymorphismes simples de nucléotides, les inversions et les changements en nombre de copies (gain ou perte d'ADN). Ces derniers varient de petits événements dits sous-microscopiques (moins de 1kb en taille), appelés CNVs (copy number variants) jusqu'à des événements plus large pouvant affecter des chromosomes entiers. Les petites variations sont généralement sans conséquence pour la cellule, toutefois certaines ont été impliquées dans la prédisposition à certaines maladies, et à des variations phénotypiques dans la population générale. Les réarrangements plus grands (par exemple, une copie additionnelle d'un chromosome appelée communément trisomie) ont des répercutions plus grave pour la santé, comme par exemple dans certains syndromes génomiques et dans le cancer. Les technologies à haut-débit telle les puces à ADN permettent la détection de CNVs à l'échelle du génome humain. La cartographie en 2006 des CNV du génome humain, a suscité un fort intérêt en génétique des populations et en génétique médicale. La détection de différences au sein et entre plusieurs populations est un élément clef pour élucider la contribution possible des CNVs dans les maladies. Toutefois l'analyse du génome reste une tâche difficile, la technologie évolue très rapidement créant de nouveaux besoins pour le développement d'outils, l'amélioration des précédents, et la comparaison des différentes méthodes. De plus, si le lien entre CNV et maladie a été établit, leur contribution précise n'est pas encore comprise. De même que les études sur la prédisposition aux maladies par des CNVs détectés dans la population générale n'ont pas encore été réalisées.Pendant mon doctorat, je me suis concentré sur trois axes principaux ayant attrait aux CNV. Dans le chapitre 3, je détaille mes travaux sur les méthodes d'analyses des puces à ADN. J'ai eu accès aux données du projet CoLaus, une étude de la population de Lausanne. Dans cette étude, le génome de plus de 6000 individus a été analysé avec des puces SNP et de nombreuses informations cliniques ont été récoltées. Pendant mes travaux, j'ai utilisé et comparé plusieurs méthodes de détection des CNVs. Les résultats n'étant pas complètement satisfaisant, j'ai implémenté ma propre méthode qui donne de meilleures performances que deux des trois autres méthodes utilisées. Je me suis aussi intéressé aux stratégies pour combiner les CNVs de différents individus en régions.Je me suis aussi intéressé à l'impact clinique des CNVs dans le cas des maladies génétiques communes (chapitre 4). Ce projet fut possible grâce à une étroite collaboration avec le Centre Hospitalier Universitaire Vaudois (CHUV) et l'Impérial College à Londres. Dans ce projet, j'ai été l'un des analystes principaux et j'ai travaillé sur l'impact clinique d'une délétion rare du chromosome 16p11 présente chez des patients atteints d'obésité. Dans cette collaboration multidisciplinaire, nous avons comparés 8'456 patients atteint d'obésité et 11 '856 individus de la population générale. Nous avons trouvés que la délétion était impliquée dans 0.7% des cas d'obésité morbide et était absente chez les contrôles sains (non-atteint d'obésité). Notre étude illustre l'importance des CNVs rares qui peuvent avoir un impact clinique très important. De plus, ceci permet d'envisager une alternative aux études d'associations pour améliorer notre compréhension de l'étiologie des maladies génétiques communes.Egalement, j'ai travaillé sur la détection d'altérations somatiques en nombres de copies (SCNA) et de leurs conséquences pour le cancer (chapitre 5). Ce projet fut une collaboration initiée par l'Institut Ludwig de Recherche contre le Cancer et impliquant l'Institut Suisse de Bioinformatique, le CHUV et les Universités de Lausanne et Genève. Je me suis concentré sur l'identification de gènes affectés par des SCNAs et avec une sur- ou sous-expression dans des lignées cellulaires dérivées de mélanomes métastatiques. Les données utilisées ont été générées par des puces ADN (CGH et SNP) et du séquençage à haut débit du transcriptome. Mes recherches ont montrées que peu de gènes sont récurrents entre les mélanomes, ce qui rend difficile l'interprétation des résultats. Pour contourner ces limitations, j'ai utilisé une analyse de réseaux pour définir si des réseaux de signalisations enrichis en gènes amplifiés ou perdus, étaient communs aux différents échantillons. En fait, parmi les 28 réseaux détectés, quatre réseaux sont potentiellement dérégulés chez six mélanomes, et six réseaux supplémentaires sont affectés chez cinq mélanomes. La validation de ces résultats avec deux larges jeux de données publiques, a confirmée tous ces réseaux sauf trois. Ceci démontre l'utilité de cette approche pour l'analyse de petits et de larges jeux de données.Résumé grand publicL'avènement de la biologie moléculaire, en particulier ces dix dernières années, a révolutionné la recherche en génétique médicale. Grâce à la disponibilité du génome humain de référence dès 2001, de nouvelles technologies telles que les puces à ADN sont apparues et ont permis d'étudier le génome dans son ensemble avec une résolution dite sous-microscopique jusque-là impossible par les techniques traditionnelles de cytogénétique. Un des exemples les plus importants est l'étude des variations structurales du génome, en particulier l'étude du nombre de copies des gènes. Il était établi dès 1959 avec l'identification de la trisomie 21 par le professeur Jérôme Lejeune que le gain d'un chromosome supplémentaire était à l'origine de syndrome génétique avec des répercussions graves pour la santé du patient. Ces observations ont également été réalisées en oncologie sur les cellules cancéreuses qui accumulent fréquemment des aberrations en nombre de copies (telles que la perte ou le gain d'un ou plusieurs chromosomes). Dès 2004, plusieurs groupes de recherches ont répertorié des changements en nombre de copies dans des individus provenant de la population générale (c'est-à-dire sans symptômes cliniques visibles). En 2006, le Dr. Richard Redon a établi la première carte de variation en nombre de copies dans la population générale. Ces découvertes ont démontrées que les variations dans le génome était fréquentes et que la plupart d'entre elles étaient bénignes, c'est-à-dire sans conséquence clinique pour la santé de l'individu. Ceci a suscité un très grand intérêt pour comprendre les variations naturelles entre individus mais aussi pour mieux appréhender la prédisposition génétique à certaines maladies.Lors de ma thèse, j'ai développé de nouveaux outils informatiques pour l'analyse de puces à ADN dans le but de cartographier ces variations à l'échelle génomique. J'ai utilisé ces outils pour établir les variations dans la population suisse et je me suis consacré par la suite à l'étude de facteurs pouvant expliquer la prédisposition aux maladies telles que l'obésité. Cette étude en collaboration avec le Centre Hospitalier Universitaire Vaudois a permis l'identification d'une délétion sur le chromosome 16 expliquant 0.7% des cas d'obésité morbide. Cette étude a plusieurs répercussions. Tout d'abord elle permet d'effectuer le diagnostique chez les enfants à naître afin de déterminer leur prédisposition à l'obésité. Ensuite ce locus implique une vingtaine de gènes. Ceci permet de formuler de nouvelles hypothèses de travail et d'orienter la recherche afin d'améliorer notre compréhension de la maladie et l'espoir de découvrir un nouveau traitement Enfin notre étude fournit une alternative aux études d'association génétique qui n'ont eu jusqu'à présent qu'un succès mitigé.Dans la dernière partie de ma thèse, je me suis intéressé à l'analyse des aberrations en nombre de copies dans le cancer. Mon choix s'est porté sur l'étude de mélanomes, impliqués dans le cancer de la peau. Le mélanome est une tumeur très agressive, elle est responsable de 80% des décès des cancers de la peau et est souvent résistante aux traitements utilisés en oncologie (chimiothérapie, radiothérapie). Dans le cadre d'une collaboration entre l'Institut Ludwig de Recherche contre le Cancer, l'Institut Suisse de Bioinformatique, le CHUV et les universités de Lausanne et Genève, nous avons séquencés l'exome (les gènes) et le transcriptome (l'expression des gènes) de sept mélanomes métastatiques, effectués des analyses du nombre de copies par des puces à ADN et des caryotypes. Mes travaux ont permis le développement de nouvelles méthodes d'analyses adaptées au cancer, d'établir la liste des réseaux de signalisation cellulaire affectés de façon récurrente chez le mélanome et d'identifier deux cibles thérapeutiques potentielles jusqu'alors ignorées dans les cancers de la peau.

Efficacity of in-hospital multidimensional interventions of secondary prevention after acute coronary syndrome : a systematic review and meta-analysis

RAPPORT DE SYNTHÈSE : Contexte Les programmes de prévention cardiovasculaire secondaire après un événement coronarien aigu ont pu démontrer leur efficacité dans le contexte des soins ambulatoires. L'hospitalisation pour une maladie aiguë peut être considérée comme un «instant charnière», particulièrement adapté à un changement de comportement de santé et où des interventions de prévention secondaire, telle l'éducation du patient, pourraient être particulièrement efficaces. De plus, la prescription de médicaments de prévention cardiovasculaire durant l'hospitalisation semble augmenter la proportion des patients traités selon les recommandations sur le long terme. Récemment, plusieurs études ont évalué l'efficacité de programmes de prévention ayant pour but l'éducation des patients et/ou une augmentation du taux de prescription de médicaments prouvés efficaces par les médecins en charge. L'article faisant l'objet du travail de thèse synthétise la littérature existante concernant l'efficacité en termes de mortalité des interventions multidimensionnelles de prévention cardiovasculaire après un syndrome coronarien aigu, débutées à l'hôpital, centrées sur le patient et ciblant plusieurs facteurs de risque cardiovasculaire. MÉTHODE ET RÉSULTATS : En utilisant une stratégie de recherche définie à l'avance, nous avons inclus des essais cliniques avec groupe contrôle et des études avant-après, débutées à l'hôpital et qui incluaient des résultats cliniques de suivi en terme de mortalité, de taux de réadmission et/ou de récidive de syndrome coronarien aigu. Nous avons catégorisé les études selon qu'elles ciblaient les patients (par exemple une intervention d'éducation aux patients par des infirmières), les soignants (par exemple des cours destinés aux médecins-assistants pour leur enseigner comment prodiguer des interventions éducatives) ou le système de soins (par exemple la mise en place d'itinéraires cliniques au niveau de l'institution). Globalement, les interventions rapportées dans les 14 études répondant aux critères montraient une réduction du risque relatif (RR) de mortalité après un an (RR= 0.79; 95% intervalle de confiance (IC), 0.69-0.92; n=37'585). Cependant, le bénéfice semblait dépendre du type d'étude et du niveau d'intervention. Les études avant-après suggéraient une réduction du risque de mortalité (RR, 0.77; 95% IC, 0.66-0.90; n=3680 décès), tandis que le RR était de 0.96 (95% IC, 0.64-1.44; n=99 décès) pour les études cliniques contrôlées. Seules les études avant-après et les études ciblant les soignants et le système, en plus de cibler les patients, semblaient montrer un bénéfice en termes de mortalité à une année. CONCLUSIONS ET PERSPECTIVES : Les preuves d'efficacité des interventions de prévention secondaires débutées à l'hôpital, ciblant le patient, sont prometteuses, mais pas définitives. En effet, seules les études avant-après montrent un bénéfice en termes de mortalité. Les recherches futures dans ce domaine devraient tester formellement quels éléments des interventions amènent le plus de bénéfices pour les patients.

Rural Expressway Intersection Synthesis of Practice and Crash Analysis, 2004

This report presents a national synthesis of rural expressway, two-way stop -controlled (TWSC) intersection safety strategies and intersection designs and an analysis of Iowa expressway TWSC intersection crash characteristics. A rural expressway is a multi-lane highway with a divided median and with mostly at -grade intersections, although some intersections may be grade separated. The synthesis of intersection strategies is conducted in two parts. The first is a literature review and the second part is a national survey of strategies currently being applied by state transportation agencies. The characterization of crash patterns at TWSC expressway intersections is examined through the analysis of 5 years of crash data at 644 intersections.

Total hip replacement with a collarless polished cemented anatomic stem: clinical and gait analysis results at ten years follow-up.

PURPOSE: The aim of this study was to determine outcomes of total hip replacement (THR) with the Lemania cemented femoral stem. METHODS: A total of 78 THR patients were followed and compared to 17 "fit", healthy, elderly and 72 "frail" elderly subjects without THR, using clinical outcome measures and a portable, in-field gait analysis device at five and ten years follow-up. RESULTS: Forty-one patients (53%), mean age 83.4 years, available at ten years follow-up, reported very good to excellent satisfaction. Mean Harris Hip and Western Ontario and McMaster Universities Osteoarthritis Index (WOMAC) scores were 81.2 and 10.5 points, respectively, with excellent radiological preservation of proximal femur bone stock. Spatial and temporal gait parameters were close to the fit group and better than the frail group. CONCLUSIONS: Lemania THR demonstrated very good, stable clinical and radiological results at ten years in an older patient group, comparable to other cemented systems for primary THR. Gait analysis confirmed good walking performance in a real-life environment.

Phenotypic and functional analysis of human fetal liver hematopoietic stem cells in culture.

Steady-state hematopoiesis and hematopoietic transplantation rely on the unique potential of stem cells to undergo both self-renewal and multilineage differentiation. Fetal liver (FL) represents a promising alternative source of hematopoietic stem cells (HSCs), but limited by the total cell number obtained in a typical harvest. We reported that human FL nonobese diabetic/severe combined immunodeficient (NOD/SCID) repopulating cells (SRCs) could be expanded under simple stroma-free culture conditions. Here, we sought to further characterize FL HSC/SRCs phenotypically and functionally before and following culture. Unexpanded or cultured FL cell suspensions were separated into various subpopulations. These were tested for long-term culture potential and for in vivo repopulating function following transplantation into NOD/SCID mice. We found that upon culture of human FL cells, a tight association between classical stem cell phenotypes, such as CD34(+) /CD38(-) and/or side population, and NOD/SCID repopulating function was lost, as observed with other sources. Although SRC activity before and following culture consistently correlated with the presence of a CD34(+) cell population, we provide evidence that, contrary to umbilical cord blood and adult sources, stem cells present in both CD34(+) and CD34(-) FL populations can sustain long-term hematopoietic cultures. Furthermore, upon additional culture, CD34-depleted cell suspensions, devoid of SRCs, regenerated a population of CD34(+) cells possessing SRC function. Our studies suggest that compared to neonatal and adult sources, the phenotypical characteristics of putative human FL HSCs may be less strictly defined, and reinforce the accumulated evidence that human FL represents a unique, valuable alternative and highly proliferative source of HSCs for clinical applications.

Effectiveness of pharmacist care in the improvement of adherence to antidepressants: a systematic review and meta-analysis

BACKGROUND: Pharmacists can play a decisive role in the management of ambulatory patients with depression who have poor adherence to antidepressant drugs. OBJECTIVE: To systematically evaluate the effectiveness of pharmacist care in improving adherence of depressed outpatients to antidepressants. METHODS: A systematic review and meta-analysis of randomized controlled trials (RCTs) was conducted. RCTs were identified through electronic databases (MEDLINE, Cochrane Central Register of Controlled Trials, Institute for Scientific Information Web of Knowledge, and Spanish National Research Council) from inception to April 2010, reference lists were checked, and experts were consulted. RCTs that evaluated the impact of pharmacist interventions on improving adherence to antidepressants in depressed patients in an outpatient setting (community pharmacy or pharmacy service) were included. Methodologic quality was assessed and methodologic details and outcomes were extracted in duplicate. RESULTS: Six RCTs were identified. A total of 887 patients with an established diagnosis of depression who were initiating or maintaining pharmacologic treatment with antidepressant drugs and who received pharmacist care (459 patients) or usual care (428 patients) were included in the review. The most commonly reported interventions were patient education and monitoring, monitoring and management of toxicity and adverse effects, adherence promotion, provision of written or visual information, and recommendation or implementation of changes or adjustments in medication. Overall, no statistical heterogeneity or publication bias was detected. The pooled odds ratio, using a random effects model, was 1.64 (95% CI 1.24 to 2.17). Subgroup analysis showed no statistically significant differences in results by type of pharmacist involved, adherence measure, diagnostic tool, or analysis strategy. CONCLUSIONS: These results suggest that pharmacist intervention is effective in the improvement of patient adherence to antidepressants. However, data are still limited and we would recommend more research in this area, specifically outside of the US.

Interferon-gamma release assays for the diagnosis of tuberculosis and tuberculosis infection in HIV-infected adults: a systematic review and meta-analysis.

Background: Despite the widespread use of interferon-gamma release assays (IGRAs), their role in diagnosing tuberculosis and targeting preventive therapy in HIV-infected patients remains unclear. We conducted a comprehensive systematic review to contribute to the evidence-based practice in HIV-infected people. Methodology/Principal Findings: We searched MEDLINE, Cochrane, and Biomedicine databases to identify articles published between January 2005 and July 2011 that assessed QuantiFERON H -TB Gold In-Tube (QFT-GIT) and T-SPOT H .TB (T-SPOT.TB) in HIV-infected adults. We assessed their accuracy for the diagnosis of tuberculosis and incident active tuberculosis, and the proportion of indeterminate results. The search identified 38 evaluable studies covering a total of 6514 HIV-infected participants. The pooled sensitivity and specificity for tuberculosis were 61% and 72% for QFT-GIT, and 65% and 70% for T-SPOT.TB. The cumulative incidence of subsequent active tuberculosis was 8.3% for QFT-GIT and 10% for T-SPOT.TB in patients tested positive (one study each), and 0% for QFT-GIT (two studies) and T-SPOT.TB (one study) respectively in those tested negative. Pooled indeterminate rates were 8.2% for QFT-GIT and 5.9% for T-SPOT.TB. Rates were higher in high burden settings (12.0% for QFT-GIT and 7.7% for T-SPOT.TB) than in low-intermediate burden settings (3.9% for QFT-GIT and 4.3% for T-SPOT.TB). They were also higher in patients with CD4 + T-cell count, 200 (11.6% for QFT-GIT and 11.4% for T-SPOT.TB) than in those with CD4 + T-cell count $ 200 (3.1% for QFT-GIT and 7.9% for T-SPOT.TB). Conclusions/Significance: IGRAs have suboptimal accuracy for confirming or ruling out active tuberculosis disease in HIV-infected adults. While their predictive value for incident active tuberculosis is modest, a negative QFT-GIT implies a very low short- to medium-term risk. Identifying the factors associated with indeterminate results will help to optimize the use of IGRAs in clinical practice, particularly in resource-limited countries with a high prevalence of HIV-coinfection.

Obtaining interspecific hybrids, and molecular analysis by microsatellite markers in grapevine

The objective of this work was to assess the potential of interspecific hybridization of Vitis labruscana and Muscadinia rotundifolia by using artificial cross-pollinations. Microsatellite markers were used to confirm interspecific hybridizations and the identity of the parental genotypes. In crosses in which M. rotundifolia was used as the female parent, no true hybrids were obtained. In the reciprocal crosses, 114 seedlings were identified as true V. labruscana x M. rotundifolia hybrids. Self pollination occurred in direct and in reciprocal crosses. The crossings between 'Bordo' x 'Carlos', 'Magnolia', 'Regale' and' Roanoke', and between' Isabel' x 'Bountiful', 'Carlos', 'Magnolia', 'Regale' and 'Roanoke' were confirmed. The 15 markers evaluated showed that two M. rotundifolia parental genotypes had the same fingerprint profile, indicating a like lyplanting error. The success of hybridization depends mainly on the species and on the cultivar used as the female parent. Microsatellite markers are efficient to confirm the paternity of interspecific F1 hybrids and to determine the correct identity of M. rotundifolia cultivars.