Molecular Identification and Characterization of Ileal and Cecal Fungus Communities in Broilers Given Probiotics, Specific Essential Oil Blends, and Under Mixed Eimeria Infection

Broiler digestive tract fungal communities have gained far less scrutiny than that given corresponding bacterial communities. Attention given poultry-associated fungi have focused primarily on feed-associated toxin-producers, yeast, and yeast products. The current project focused on the use of pyrosequencing and denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) to identify and monitor broiler digestive fungal communities. Eight different treatments were included. Four controls were an Uninfected-Unmedicated Control, an Unmedicated-Infected Control, the antibiotic bacitracin methylene disalicylate plus the ionophore monensin as Positive Control, and the ionophore monensin alone as a Negative Control. Four treatments were two probiotics (BC-30 and Calsporin) and two specific essential oil blends (Crina Poultry Plus and Crina Poultry AF). All chickens except the Unmedicated-Uninfected Control were given, at 15 days of age, a standard oral Eimeria inoculum of sporulated oocysts. Ileal and cecal digesta were collected at pre-Eimeria infection at 14 days of age and at 7 days post-Eimeria infection at 22 days of age. Extracted cecal DNA was analyzed by pyrosequencing to examine the impact of diet supplements and Eimeria infection on individual constituents in the fungal community, while DGGE was used to compare more qualitative changes in ileal and cecal communities. Pyrosequencing identified three phyla, seven classes, eight orders, 13 families, 17 genera, and 23 fungal species. Ileal and cecal DGGE patterns showed fungal communities were clustered mainly into pre- and post-infection patterns. Post-infection Unmedicated-Uninfected patterns were clustered with pre-infection groups demonstrating a strong effect of Eimeria infection on digestive fungal populations. These combined techniques offered added versatility towards unraveling the effects of enteropathogen infection and performance enhancing feed additives on broiler digestive microflora.

Involvement of nitric oxide in the gastroprotective effects of an aqueous extract of Pfaffia glomerata (Spreng) Pedersen, Amaranthaceae, in rats

The plants belonging to Pfaffia genus are used in folk medicine to treat gastric disturbances. This study examined the effects of an aqueous extract of Pfaffia glomerata (Spreng) Pedersen (AEP) on the gastrointestinal tract. Wistar rats were pretreated orally (p.o.) with the AEP (125, 250, 500 and 1000 mg.kg(-1)) before induction of ulcers by hypothermic restraint stress (HRS, 3 h restraint stress at 4 degreesC), ethanol (ET, 70%; 0.5 ml/animal; p.o.) or indomethacin (IND, 20 mg.kg(-1); s.c.). Control animals received water (C) or ranitidine (60 mg.kg(-1)) p.o. The AEP protected rats against HRS and ET-induced ulcers, but was not able to protect the gastric mucosa against IND-induced ulcers. When injected into the duodenal lumen, the AEP reduced total acidity and both basal and histamine-stimulated acid secretion in pylorus-ligated rats. In addition, gastric secretion from AEP-treated animals exhibited increased concentrations of nitrite and nitrate. Treatment of animals with L-NAME (120 mg.kg(-1), p.o.) prevented both the reduction of total acidity and the increase in NO, levels promoted by AEP treatment. In conclusion, AEP effectively protected the gastric mucosa and inhibited gastric acid secretion in rats, probably by involving the histaminergic pathway and an enhanced production of nitric oxide in the stomach. (C) 2003 Elsevier B.V. All rights reserved.

Microbiota intestinal de indivíduos que sofreram acidente ocupacional com materiais biológicos e que realizaram profilaxia anti-retroviral

Avaliar a microbiota intestinal de indivíduos que sofreram acidente ocupacional com materiais biológicos e receberam anti-retrovirais foi o objetivo deste estudo. O grupo de estudo constou de 23 indivíduos com idade entre 18-45 anos, sendo 13 doadores de sangue e 10 que sofreram acidente ocupacional. Foram avaliados a microbiota intestinal, antropometria e exames laboratoriais pré, pós e 30 dias após o término da medicação. Zidovudina mais lamivudina foi utilizada em 70% dos indivíduos associado ao nelfinavir, 20% ao efavirenz e 10% ao ritonavir. As alterações nutricionais e dietéticas-laboratoriais e de microbiota intestinal foram analisadas em três momentos. M1: até dois dias do início da profilaxia; M2: no último dia da profilaxia e M3: 30 dias após o término da profilaxia. Náuseas, vômitos e diarréia estiveram presentes em 50% no segundo momento do estudo. Sobrepeso em 70%, desnutrição e eutrofia em 10%, dos indivíduos, não se modificaram durante o estudo. Transaminases, triglicérides, LDL-colesterol se elevaram no segundo momento e normalizaram 30 dias após término da medicação. Houve redução significativa dos Lactobacillus, Bifidobacterium e Bacteróides nos três momentos. Uso de anti-retrovirais provocou impacto significativo na microbiota intestinal dos indivíduos, sem recuperação em 30 dias.

CDX2, a highly sensitive and specific marker of adenocarcinomas of intestinal origin - An immunohistochemical survey of 476 primary and metastatic carcinomas

CDX2 is a recently cloned homeobox gene that encodes an intestine-specific transcription factor, expressed in the nuclei of epithelial cells throughout the intestine, from duodenum to rectum. While expression of CDX2 protein in primary and metastatic colorectal carcinomas has been previously documented, neither the sensitivity nor the specificity of CDX2 expression, as determined by immunohistochemistry, for colorectal adenocarcinoma has been determined. We performed an immunohistochemical survey of 476 tumors with a monoclonal antibody, CDX2-88, including 89 tumors from the colon and duodenum and 95 tumors from other gastrointestinal sites, including the esophagus, stomach, pancreatobiliary system, gastrointestinal carcinoids, and liver. CDX2 was expressed uniformly (that is, in 76-100% of tumor cells) in all but one of the evaluated colorectal and duodenal tumors. High-level expression of CDX2 was also found, however, in mucinous ovarian carcinomas and adenocarcinomas primary to the urinary bladder of which 64% and 100% were positive, respectively. Gastric, gastroesophageal, and pancreatic adenocarcinomas and cholangiocarcinomas all showed similar, heterogeneous patterns of CDX2 expression. Most tumors in each group showed CDX2 expression by a minority of cells, whereas a substantial minority of cases in each group was completely negative and a smaller minority was uniformly positive. Gastrointestinal carcinoids gave similarly varied results, but the majority (58%) was negative. Hepatocellular carcinomas showed no expression of CDX2. Only very rare examples of carcinomas of the genitourinary and gynecologic tracts, breast, lung, and head and neck showed significant levels of CDX2 expression. In this study of primary and metastatic epithelial tumors, uniform CDX2 expression is demonstrated to be an exquisitely sensitive and highly, but incompletely, specific marker of intestinal adenocarcinomas. Compared with villin, a previously described marker of GI adenocarcinomas, CDX2 demonstrated superior sensitivity and comparable specificity. CDX2 expression can be seen, however, in selected non-GI adenocarcinomas such as mucinous ovarian carcinomas and adenocarcinomas of the urinary bladder.

Biological differences between reflux stimulated proliferative stomal lesions and N-methyl-N '-nitro-N-nitrosoguanidine induced carcinomas in Wistar rats.

The morphology and evolution of epithelial lesions that developed at a gastrojejunal stoma due to reflux of duodenal contents were compared with MNNG-induced carcinomas in the pyloric mucosa of rats in a long term experiment. Random bred male Wistar rats were given MNNG in drinking water (100 mg/l) for 12 weeks and then one group was submitted to a gastrojejunal anastomosis at the greater curvature in the oxyntic mucosa, Untreated rats underwent either gastrojejunostomy or gastrotomy. The animals were killed at the 24th and 66th weeks of the experiment. The lesions obtained in the pyloric mucosa and in the mucosa of the gastrojejunal stoma were analyzed histologically using hematoxylin and eosin staining and immunohistochemistry for pepsinogen isoenzyme 1. Duodenal reflux induced proliferative lesions at the gastrojejunal junction that increased in incidence and size with time. Histologically they consisted of benign epithelial proliferation of gastric type. No evidence of malignant transformation within the gastric components of the proliferative lesions at the gastrojejunal stoma was observed even at the 66th week, Adenocarcinomas induced by MNNG in the pyloric mucosa increased in size during the experiment and were morphologically and histochemically distinct from the proliferative lesions at the gastrojejunal junction. In conclusion, proliferative lesions at the gastrojejunal stoma stimulated by duodenal reflux are biologically distinct from adenocarcinomas induced by MNNG in the pyloric mucosa. They do not seem to be precursor lesions of gastric carcinogenesis, as they do not undergo malignant transformation even after long-term, up to 66 weeks, follow-up. (C) 1999 Elsevier B.V. Ireland Ltd. All rights reserved.

Microbiological characteristics and inflammatory cytokines associated with preterm labor

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Comparison of wildlife and captivity rattlesnakes (Crotalus durissus terrificus) microbiota

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Lesions (ulcers and/or erosions) and desquamations location in the gastric mucosa from asymptomatic Quarter Horse foals: endoscopic survey

A úlcera gástrica figura como uma importante causa de desconforto abdominal em eqüinos jovens. de acordo com a localização das lesões na mucosa gástrica, a presença ou ausência de sinais clínicos e possíveis complicações resultantes de sua ocorrência, quatro síndromes clínicas são freqüentemente descritas em potros: 1) Úlceras assintomáticas ou silenciosas; 2) Úlceras sintomáticas ou ativas; 3) Úlceras perfuradas; e 4) Obstruções gástrica ou duodenal. Com o objetivo de se verificar a distribuição de lesões gástricas (úlceras e/ou erosões) e descamações do epitélio aglandular no estômago de eqüinos jovens assim como uma possível relação entre as alterações mencionadas (lesão/descamação) sessenta potros da raça Quarto de Milha não-portadores de sinais clínicos compatíveis com úlceras gástricas foram submetidos à gastroscopia. Os potros foram divididos em quatro faixas etárias de 15 animais cada uma, sendo: 1 a 30 dias, 31 a 60 dias, 61 a 90 dias e 91 a 120 dias de idade. As lesões ocorreram em ordem decrescente de freqüência nas regiões aglandular próximo ao margo plicatus ao longo da curvatura maior, aglandular próximo à cárdia ao longo da curvatura menor, fundo glandular e aglandular e antro. As descamações do epitélio aglandular ocorreram de forma similar nas regiões de fundo e margo plicatus. Não houve associação entre a ocorrência de lesões e descamações.

Efeito protetor da microbiota cecal congelada e liofilizada sobre a infecção experimental de frangos de corte por Salmonella enterica sorovar Enteritidis

Estudaram-se os efeitos do tratamento de frangos de corte com microbiota cecal anaeróbia liofilizada (MCL) e congelada (MCC) sobre a infecção do trato digestivo das aves por Salmonella enterica sorovar Enteritidis. Foi usada microbiota intestinal sem prévia identificação bacteriana. A infecção foi persistente, em ordem, no ceco, inglúvio e duodeno. A infecção também foi autolimitante nos grupos tratados e no controle. Não ocorreu diferença entre o grupo-controle positivo e os tratados com MCL ou MCC. Houve redução da colonização do ceco no período de 12 dias após o desafio nos grupos tratados com MCL e MCC, o que não ocorreu no grupo-controle positivo. Não houve variação entre os tratamentos com MCL e MCC quanto às características pesquisadas. A S. Enteritidis reduziu o ganho de peso médio nas aves inoculadas. Os tratamentos com MCL e MCC minimizaram a redução de peso nos grupos infectados.

Efeito da vacina contra coccidiose sobre a colonização de Salmonella enteritidis em frangos de corte tratados com microbiota cecal anaeróbia

Avaliou-se o efeito da vacina contra coccidiose sobre a habilidade da microbiota cecal anaeróbia (MCA), administrada por diferentes vias (aves tratadas), em proteger pintos de corte da colonização por Salmonella enteritidis (Se). Utilizaram-se 120 aves assim divididas: grupo A, pulverização de MCA em aves vacinadas contra coccidiose e desafiadas com Se, grupo B, inoculação endoesofágica de MCA em aves vacinadas e desafiadas, grupo C, MCA na água de bebida de aves vacinadas e desafiadas, grupo D, aves não tratadas, vacinadas e desafiadas, grupo E, aves não tratadas, não vacinadas e desafiadas e, grupo F, aves não tratadas, não vacinadas e não desafiadas (controle negativo). Utilizaram-se como parâmetros a colonização do trato digestivo por Se e sua presença nas fezes, bem como o peso corporal das aves, avaliados aos dois, sete e 12 dias após o desafio. Nas aves tratadas com MCA, especialmente por meio de pulverização e inoculação endoesofágica, a colonização do ceco por Se e sua presença nas fezes foram menores, mostrando que a ação da MCA contra a colonização de ceco e excreção fecal não foi afetada pelo uso da vacina contra coccidiose em pintos de corte e que a associação MCA/vacina contra coccidiose pode ser utilizada sem que haja comprometimento na eficácia da MCA. Nos grupos que não receberam MCA, vacinados ou não contra coccidiose, houve aumento da colonização cecal, bem como excreção fecal da amostra desafio. O ceco foi o local de maior presença e persistência da Se. O resultado de administração de MCA pela água de bebida não foi tão eficiente, mas somente este tratamento resultou em peso corporal das aves significativamente superior ao das aves do grupo não tratado, não vacinado e desafiado, indicando que a presença de salmonelas paratifóides não interfere na produtividade de frangos de corte. Não se observou diferença no peso das aves dos grupos D (vacinados contra coccidiose) e E (não vacinadas) desafiadas com Se, demonstrando que a vacina não influenciou negativamente o ganho de peso das aves desafiadas com Salmonela enteriditis.

Efeito da microbiota cecal e do Lactobacillus salivarius inoculados in ovo em aves desafiadas com Salmonella enterica sorovar Enteritidis

Ovos embrionados provenientes de matrizes pesadas foram inoculados na câmara de ar com microbiota cecal total, microbiota cecal diluída e cultura de Lactobacillus salivarius, no 18º dia de incubação. Dois dias após o nascimento, as aves foram desafiadas com Salmonella enterica sorovar Enteritidis (SE) e, cinco dias após o desafio, avaliou-se a presença da bactéria no fígado e ceco. O efeito de exclusão competitiva, após o desafio com SE, somente foi observado pela ausência da bactéria no fígado das aves tratadas in ovo com L. salivarius. A inoculação in ovo de microbiota cecal indefinida ou diluída não reduziu a colonização de SE no fígado e no ceco das aves, incluindo, neste último, também o tratamento com L. salivarius. Nenhum dos tratamentos in ovo determinou índice de eclodibilidade superior a 65%.

Study on Cranial and Caudal Mesenteric Arteries in Opossum (Didelphis albiventris)

The objective of this study is to describe the cranial and caudal mesenteric arteries in 10 opossuns after Neoprene latex injection. The cranial mesenteric artery arises from the abdominal aorta, caudally to the celiac trunk, originating the caudal duodenal pancreatic artery, middle and right colic, jejunal and ileocecocolic arteries. The caudal mesenteric artery arises from the aorta, cranially to the external iliac arteries, originating the cranial rectal and left colic arteries.

Dietary Polydextrose Prevents Inflammatory Bowel Disease in Trinitrobenzenesulfonic Acid Model of Rat Colitis

Inflammatory bowel disease (IBD) is a multifactorial intestinal disorder that involves interactions among the immune system, genetic susceptibility, and environmental factors, especially the bacterial flora. Polydextrose, a polysaccharide constituted by 90% nondigestible and nonabsorbable soluble fibers, has several physiological effects consistent with those of dietary fibers, including proliferation of colon microflora. Because sulfasalazine presents serious side effects through long-term use at high doses, the aim of the present study was to evaluate the preventative effect of polydextrose on trinitrobenzenesulfonic acid-induced intestinal inflammation and its effects on the intestinal anti-inflammatory activity of sulfasalazine. Results indicated that polydextrose and its association with sulfasalazine present an anti-inflammatory effect that reduces myeloperoxidase activity, counteracts glutathione content, and promotes reductions in lesion extension and colonic weight/length ratio.

Dietary intervention with green dwarf banana flour (Musa sp AAA) prevents intestinal inflammation in a trinitrobenzenesulfonic acid model of rat colitis

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Multiple bradykinin-related peptlides from the capture web of the spider Nephila clavipes (Araneae, Tetragnatidae)

Three bradykinin-related peptides (nephilakinins-I to -III) and bradykinin itself were isolated from the aqueous washing extract of the capture web of the spider Nephila clavipes by gel permeation chromatography on a Sephacryl S-100 column, followed by chromatography in a Hi-Trap Sephadex-G25 Superfine column. The novel peptides occur-red in low concentrations and were sequenced through ESI-MS/MS analysis: nephilakinin-I (G-P-N-P-G-F-S-P-F-R-NH2), nephilakinin-Il (E-A-P-P-G-F-S-P-F-R-NH2) and nephilakinin-III (P-S-P-P-G-F-S-P-F-R-NH2)- Synthetic peptides replicated the novel bradykinin-related peptides, which were submitted to biological characterizations. Nephilakinins were shown to cause constriction on isolated rat ileum preparations and relaxation on rat duodenum muscle preparations at amounts higher than bradykinin; apparently these peptides constitute B-2-type agonists of ileal and duodenal smooth muscles. All peptides including the bradykinin were moderately lethal to honeybees. These bradykinin peptides may be related to the predation of insects by the webs of N. clauipes. (c) 2005 Elsevier B.V. All rights reserved.