Papel reparador e imunomodulador das células-tronco mesenquimais (CTMs) deficientes de receptor para interferon-gamma (IFNy) em modelos renais agudos

A insuficiência renal aguda (IRA) é uma patologia que apresenta alta incidência na população e elevada morbimortalidade. Apesar de todos os avanços terapêuticos já obtidos, essas taxas ainda continuam elevadas. Uma possível alternativa, atualmente sugerida, seria o transplante de células-tronco. O processo regenerativo das células-tronco mesenquimais (CTMs) já foi demonstrado em diversos modelos experimentais e em alguns ensaios clínicos. O mecanismo de ação mais sugerido é a ação parácrina das CTMs na área lesada. Ainda, sabe-se que nesse ambiente, citocinas pró-inflamatórias, como TNF-α e IFNγ, ativam as CTMs para seu papel reparador. O presente estudo busca analisar o papel do IFNγ na ativação das CTMs em modelos renais. As CTMs de animais nocautes para receptor de IFNγ (IFNγR KO) e de animais selvagens (controle/ C57/Bl6) foram isoladas do tecido adiposo. Essas células foram caracterizadas por imunofenotipagem e diferenciação em adipócitos e osteócitos. A lesão renal aguda foi obtida através do clampeamento dos pedículos renais de camundongos machos C57/Bl6, por 45 min. Após 4hs da lesão isquêmica, as CTMs IFNγR KO e CTMs controles foram administradas intraperitonealmente, e 24hs após a cirurgia os animais foram sacrificados. O tratamento com CTMs selvagens apresentou significativa redução dos níveis de uréia e creatinina sérica. No entanto, a redução desses níveis séricos com CTMs IFNγR KO foi menos intensa. Com relação à análise da resposta inflamatória do rim, os dados demonstram que a expressão de RNAm de IL-6 é maior nos animais tratados com CTMs IFNγR KO quando comparada ao tratamento com CTMs selvagens; porém, os dois tratamentos apresentam expressão reduzida em comparação aos animais não tratados. Já a expressão de RNAm de IL-10 é maior em animais tratados com CTMs em comparação aos não tratados... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)

Determinação de adenosina deaminase, fator de necrose tumoral-alfa e interleucina-1 em gestantes portadoras de pré-eclâmpsia

Preeclampsia is a specific disorder of pregnancy, characterized by arterial hypertension and proteinuria detected after 20 weeks of gestation. This pathology is associated with hyperuricemia, higher levels of pro-inflammatory cytokines, enhanced leukocyte activation and oxidative stress. Adenosine deaminase (ADA) is an enzyme present in all human tissues and, it is involved with the maturation of the immune system. Although its function is not fully understood, ADA is considered an indicator of cellular inflammation and, its increased serum concentration is observed in inflammatory diseases, such as tuberculosis and rheumatoid arthritis. This study aimed to assess serum ADA levels in preeclamptic patients (PE) compared with normotensive pregnant (NT) and non-pregnant women (NP), and to correlate these values with TNF-α and IL-1β production. Ninety pregnant women were included: 60 were pre-eclamptic and 30 were normotensive matched for gestational age. As control group 20 healthy non-pregnant women matched with pregnant for age were included. Peripheral blood mononuclear cells (PMMC) obtained from the three groups studied were cultured with or without lipopolysaccharide (LPS) for 18h at 37oC, and TNF-α and IL-1β production was assessed in the supernatant of cultures by enzyme immunoassay (ELISA). ADA plasmatic concentration was determined by colorimetric method. The results show that ADA plasma levels were significantly higher in PE group compared with NT and NP groups. A positive correlation between ADA and uric acid levels was detected in preeclamptic women. There was no significant difference in relation to ADA levels when PE patients were classified in early and late-onset PE. The endogenous production of IL-1β and TNF-α by PBMC was significantly higher in PE group than in NT and NP women, showing the activation state of these cells in PE. LPS induced...(Complete abstract click electronic access below)

Atividade antioxidante e anti-inflamatória da hesperidina glicosilada em camundongos submetidos a dieta indutora do estado pró-inflamatório

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Síndromes paraneoplásicas hematológicas em cães

Tumoral masses can cause several direct problems in the organism, such as invading organs and altering their functions, leading to other problems such as the Paraneoplastic syndrome. The paraneoplastic syndrome is an alteration in the structure and function of the body due to the non-invasive actions of the tumor, for example, liberating hormones, peptides, cytokines and leading to cross reactions between normal tissues. The syndrome can affect different locations in the body, being that some are indicative of specific tumors, however the interpretation of the clinical and pathological findings referring to this syndrome should be utilized in the diagnostic and treatment. In the hematological paraneoplastic syndrome, there are alterations that occur due to indirect actions of the tumor on the blood cellular elements and the coagulation system, and that are generally detected in routine clinical and laboratorial exams. This study objective is to aboard some hematological paraneoplastic syndromes in dogs such as: anemia, thrombocytopenia, neutrophilic leukocytosis, hypergammaglobulinemia and erythrocytosis, emphasizing the different etiologies that may assist in differential diagnosis and the principal neoplasm related to this syndrome. Besides this, the early discovery and treatment of the paraneoplatic syndrome is important as the tumor itself, as it improves the prognostic and quality of life of the patient

Efeito da opsonização de células leveduriformes de Paracoccidioides brasiliensis com soro humano sobre a atividade fungicida de monócitos

Monócitos e macrófagos são células da imunidade inata que desempenham importante papel na defesa contra infecções fúngicas, através do reconhecimento dos fungos, ativação e desenvolvimento de atividade fungicida. A função das células fagocitárias depende do seu estado de ativação, induzido principalmente pelo ambiente de citocinas, presentes durante a interação com o microrganismo. O presente projeto teve por objetivo avaliar o efeito da opsonização de células leveduriformes de Paracoccidioides brasiliensis com soro humano sobre a produção de peróxido de hidrogênio (H2O2) e atividade fungicida de monócitos humanos, estimulados ou não com Interferon-gama (IFN-γ), contra P. brasiliensis. Monócitos de sangue periférico, obtidos de indivíduos saudáveis, foram cultivados na ausência ou presença de IFN-γ por 24h a 37oC. A seguir, essas células foram desafiadas com a amostra Pb18 de P. brasiliensis por 60 min para determinação da produção de H2O2 e por 4h para a avaliação da atividade fungicida nas proporções fungomonócito de 1:50. A suspensão fúngica foi previamente incubada por 30 min a 37oC na ausência de soro (SS) ou na presença de pool de soro humano normal, inativado (SI) por aquecimento a 56oC ou soro humano fresco (SF) não submetido à inativação do sistema complemento, nas concentrações de 5%, 10%, 20% e 30% em meio de cultura RPMI. A atividade fungicida de monócitos contra a amostra Pb18 foi avaliada por plaqueamento dessas co-culturas em meio de cultivo BHIágar e determinação da recuperação de fungos viáveis após 14 dias de incubação a 36oC. A produção de H2O2 por monócitos foi determinada através da técnica de redução do vermelho de fenol. Os resultados mostraram que a adição de SF ou SI em diferentes concentrações a culturas de P. brasiliensis não interfere com a viabilidade... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)

Síntese de pró-fármaco recíproco com potencial atividade anti-psoríase

A psoríase é uma doença inflamatória crônica da pele caracterizada pela hiperproliferação dos queratinócitos. Apesar de não se conhecer a causa da doença, sabe-se que ela envolve uma série de alterações no sistema imune inato e adquirido, principalmente. Entre essas alterações estão o aumento da produção de citocinas pró-inflamatórias como a interleucina 1 e o fator de necrose tumoral α (TNF- α). O metotrexato é um antinéoplásico análogo do ácido fólico, mas que tem seu uso consolidado no tratamento da psoríase. Sua ação principal está na inibição indireta de células em crescimento exponencial, como células tumorais e em proliferação. A modulação dos níveis de TNF-α vem a ser uma boa alternativa para o controle da psoríase. A talidomida foi o primeiro fármaco que desempenhava tal atividade, mas devido a sua teratogenicidade deixou de ser utilizada. Descobriu-se que a função antiinflamatória estava relacionada à parte ftalimídica da molécula. Então, a partir daí passou-se a sintetizar derivados que pudessem ter a mesma atividade, porém com toxicidade reduzida. Esse trabalho visa a síntese de um pró-fármaco recíproco, com a finalidade de uso tópico, unindo as atividades antiinflamatórias e antiproliferativa do metotrexato e imunomoduladora do derivado ftalimídico, o cloreto de 4-(1,3-dioxo-1,3-diidro-2H-isoindol-2-il)benzenosulfonil, para a redução de efeitos adversos e toxicidade decorrente do tratamento, visando a melhora da qualidade de vida do paciente

Células satélite e regeneração muscular

Embora os núcleos das fibras musculares esqueléticas não se dividam, o músculo tem uma pequena capacidade de reconstituição. As células satélites são as responsáveis pela regeneração do músculo esquelético e ajustes induzidos pelo exercício. Células satélites são pequenas células miogênicas mononucleadas, fusiformes, dispostas paralelamente às fibras musculares dentro da lâmina basal que envolve as fibras e só podem ser identificadas no microscópio eletrônico. Essas células contribuem para o crescimento do músculo no embrião e no período pósnatal e são quiescentes no adulto. Têm potencial para, quando ativadas, se diferenciarem em mioblastos, se duplicarem ou migrarem para região lesionada e fundirem-se às células musculares acelerando o processo regenerativo. Vários são os fatores que estimulam essas funções (IGF-I, FGF, citocinas, etc.), sendo que o exercício pode potencializar a produção deles. A regeneração é uma adaptação que ocorre no músculo esquelético em resposta ao traumatismo. Este processo tem sido descrito desde o final do século XIX, mas somente nos últimos trinta anos foi realmente compreendida a capacidade regenerativa das fibras musculares esqueléticas. O reparo tecidual é comum a todos os tecidos do organismo e envolve ações integradas entre células, matriz e mensageiros químicos, visando restaurar, no menor período de tempo possível, a integridade do tecido e o equilíbrio biológico. A regeneração pode ser divida em três fases: fase inflamatória, fase proliferativa e fase de remodelagem. Este trabalho tem como objetivo realizar uma revisão sobre as células satélite e seu papel na regeneração muscular a fim de sistematizar o que pesquisadores de diversas tem publicado sobre o tema atualmente.

Síndromes Paraneoplásicas em Pequenos Animais

Paraneoplastic syndromes are being increasingly recognized in dogs and cats in veterinary medicine as they often are oncological emergencies and may help in early diagnosis of primary neoplasm, performing a more effective treatment, which usually is the removal of the tumor, and thereby improving the quality of life of the animal and perhaps prognosis. The syndrome is caused by the tumor through the production of substances such as hormones and cytokines that are released into circulation and are responsible for the appearance of distant signals from the primary neoplasm. These syndromes can involve multiple systems of the body, among them we mention: the hematology, the dermatologist, the neurologist, endocrine and musculoskeletal

Aspectos gerais da síndrome anorexia caquexia do câncer em pequenos animais

The cancer anorexia-cachexia syndrome is the most common paraneoplastic syndrome in Veterinary Medicine. It is characterized by severe loss of muscle mass and adipose tissue resulting in severe unintentional weight loss, anemia, fatigue, negative nitrogen balance, immune dysfuntion and other metabolic disturbances. The SAC is not only a result of inadequate intake of nutrients. The tumor requires large amounts of nutrients to allow growth and causes changes in pacient metabolism to get this energy. Recent studies suggest that the metabolic changes by cancer can be measured by hormones and cytokines produced or by the patient or the tumor, but this not completely understood. Animals with SAC have lower survival time, the greater chance of complications during treatment and lower quality of life. With the increase in the number of cancer cases in domestic animals and longer lifespan after diagnosis of malignant disease through the use of antineoplastics drugs, diagnosis and treatment of cancer anorexia-cachexia syndrome has shown great importance in that patients may have higher survival then better quality of life. This paper aims to provide information about this complex and multifunctional syndrome and its possible treatments

Avaliação do potencial anti-inflamtório de extratos isolados de microrganismos marinhos

O Brasil possui cerca de 8.000 quilômetros de costa litorânea, a segunda maior do mundo depois da Austrália. Apesar do território marítimo brasileiro apresentar 3,6 milhões de quilômetros quadrados de extensão, as pesquisas relacionadas ao levantamento de potenciais recursos brasileiros obtidos a partir de espécies marinhas ainda são incipientes. O interesse de empresas farmacêuticas por compostos isolados de microrganismos vem crescendo lentamente devido às dificuldades até então encontradas para o isolamento e cultivo dos mesmos. No entanto, com o avanço destas técnicas, recentes estudos demonstram que compostos isolados de microrganismos marinhos representam uma rica e ainda pouco explorada fonte de novos compostos bioativos (estima-se que apenas 1% dos microrganismos marinhos foram cultivados e identificados). Recentes estudos que apontam para o potencial farmacológico de compostos isolados de microrganismos nos instigaram à busca de novos fármacos com potencial imunoestimulador não apenas a partir de invertebrados, mas também de microrganismos marinhos e seus metabólitos secundários bioativos. Neste trabalho, após avaliação do potencial imunomodulador de extratos brutos derivados de microrganismos marinhos, obteve-se a substância pura Pirenocine A, isolada do fungo Penicillium paxilli, que mostrou-se promissora devido sua capacidade de diminuir a produção de óxido nítrico e citocinas pró-inflamatórias em macrófagos estimulados com LPS tanto no protocolo profilático quanto terapêutico ...

Correlação entre presença de Mycoplasma hominis e Ureaplasma urealyticum e níveis IL-6 e IL-10 no líquido amniótico de gestantes com trabalho de parto prematuro

O trabalho de parto prematuro (TPP) é uma intercorrência obstétrica com etiologia multifatorial, que tem como principal complicação a prematuridade. A infecção da cavidade amniótica (CA) é um fator associado ao TPP e, nos últimos anos, inúmeros trabalhos têm demonstrado a presença de diferentes espécies bacterianas no líquido amniótico (LA) de pacientes em TPP. Dentre essas, destacam-se duas espécies de micoplasmas genitais, Mycoplasma hominis e Ureaplasma urealyticum, que embora sejam freqüentemente detectadas no LA ainda são pouco estudadas quanto à sua relação com essa complicação obstétrica. Avaliar a infecção na cavidade amniótica por M. hominis e U. urealyticum bem como determinar os níveis de IL-6 e IL-10 no líquido amniótico de gestantes com trabalho de parto prematuro. Foi realizado estudo prospectivo com 20 gestantes em TPP, atendidas no Serviço de Obstetrícia do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Botucatu, UNESP. O grupo controle foi constituído de 20 gestantes com indicação para amniocentese transabdominal para avaliação da maturidade fetal. Foram obtidas amostras do líquido amniótico e das membranas corioamnióticas de todas as pacientes incluídas no estudo. A pesquisa de M.hominis e U.urealyticum no LA foi realizada empregando-se a técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) e os níveis de IL-6 e IL-10 quantificados por ensaio imunoenzimático (ELISA). Os dados obtidos referentes às características maternas, infecção da cavidade amniótica e concentração de citocinas no LA foram submetidos ao teste z de proporção e ao teste de Mann-Whitney e o nível de significância adotado foi de 5%. A incidência de TPP no período do estudo foi de 5,8%. No grupo TPP, a pesquisa de invasão microbiana da CA foi positiva para... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)

Ação dos inotrópicos e vasopressores na estabilização hemodinâmica em cães com choque séptico

Septic shock remains one of the most common challenges for the small animal practicing, presenting high mortality rates frequently associated with late identification of this syndrome, as well as an inappropriate treatment. In general, disruption of homeostasis occurs with an intense activation of inflammatory cascade, which leads to a damage to endothelial cells and an exposure to these cytokines, which will result in vasodilation and increased capillary permeability. Thus, there is a drop in blood pressure, even after aggressive fluid resuscitation. Therefore, drugs such as vasopressors, which act by increasing systemic vascular resistance, and inotropes, which have an effect on heart pump, should be administered in order to raise blood pressure, ensuring adequate tissue perfusion. The objective of this review was to gather information about the various drugs used in vasopressors/inotropes therapy, trying to explain the role of each one in different situations, in order to increase the survival rate in dogs affected with septic shock

Associação entre expressão de receptores TLR2 e TLR4 e produção de TNF-alpha e IL-10 por monócitos de gestantes portadoras de pré-eclâmpsia

Preeclampsia (PE) is a pregnancy specific syndrome characterized by a systemic inflammatory response, with higher intensity than that observed in normal pregnancy. Cells of the immune system, such as monocytes and granulocytes are endogenously activated and secrete high levels of free radicals and inflammatory cytokines. The objective of this study was to assess the activation state of monocytes from pregnant women with preeclampsia by endogenous expression of TLR2 e TLR4 receptors and to correlate the expression of TLR2 and TLR4 on monocytes surface of pregnant women with PE with the production of tumor necrosis factor-alpha (TNF- and interleukin-10 (IL-10) by these cells stimulated or not with peptidoglycan (PG) and lipopolysaccharide (LPS), as agonists agents of TLR2 and TLR4, respectively. We evaluated 15 pregnant women with PE, 15 normotensive pregnant women (NT) and 15 non-pregnant (NP). Peripheral blood monocytes were incubates in the presence or absence of LPS or PG. The supernatant obtained after 18h of culture was aspirated and used for TNF- and IL-10 determination by enzyme immunoassay (ELISA). The endogenous expression of TLR2 and TLR4 receptors was evaluated by flow cytometry. Our results showed significant highly concentrations of TNF- and TLR4 expression in monocytes of preeclamptic women when compared with NT and NP. Normal pregnant women presented higher levels of IL-10 in comparison with PE and NP groups. TLR2 expression was similar in the three groups studied. Therefore, our study highlights the important role of TLR4 in PE and the consequent high production of TNF- by monocytes of these patients, as well as the potential mechanism involving low levels of IL-10 in the pathophysiology of the disease. These observations demonstrate the strong link between the pathology of PE and the immune system of these patients

Novas alternativas quimioterápicas para o tratamento do câncer através de compostos organometálicos de paládio

O câncer, manifestação originada pelo crescimento descontrolado de células, afeta milhões de indivíduos. Os macrófagos são as primeiras células a serem ativadas para participar de uma resposta imunológica propriamente dita, são células capazes de secretar mais de cem produtos biologicamente ativos, entre esses, espécies reativas de nitrogênio e citocinas que atuam no contexto da resposta imunológica e/ou inflamatória. Sabendo que compostos de paládio (II) podem apresentar potenciais atividades antitumorais, neste trabalho foram testado os compostos de fórmula geral PdI2 (tdmPz) e Pd (SCN)2 (tdmPz), quanto a atividade anti-inflamatória e antitumoral. Como droga padrão das reações realizadas foi utilizada a cisplatina. Foi determinada a ação destes compostos frente ao sistema imunológico através, de ensaios de determinação de índice de citotoxicidade mediano (IC50) pela técnica de MTT, óxido nítrico (NO) e determinação das citocinas pró-inflamatórias TNF- e IL-12. Além disso, foi determinada a atividade antitumoral dos compostos frente à célula tumoral de Ehrlich. Os resultados não mostraram produção de NO e das citocinas IL-12 e TNF- pelos macrófagos peritoneais de animais normais e animais portadores do tumor de Ehrlich na sua forma sólida. No que se referem à atividade tóxica dos compostos testados, estes mostraram efeito citotóxico sobre os macrófagos e sobre a linhagem tumoral testada. Sendo assim mesmo não havendo a produção de mediadores próinflamatórios, os compostos apresentaram uma considerável citotoxicidade frente às células tumorais de Ehrlich e macrófagos peritoneais

Produção de PGE2 por células dendríticas mediante fagocitose de células apoptóticas infectadas

A fagocitose de células apoptóticas é um processo dinâmico e de fundamental importância para homeostase dos tecidos após uma injúria. A fagocitose de células apoptóticas promove a síntese de mediadores anti-inflamatórios como PGE2, TGF-β e IL-10, podendo resultar na supressão da resposta imune do hospedeiro contra agentes infecciosos. Entretanto, um elegante estudo utilizando células apoptóticas infectadas demonstrou que a fagocitose destas células promove a geração não apenas de citocinas anti-inflamatórias como TGF-β mas também de IL-6 e IL-23, promovendo um efeito imunoestimulador, a diferenciação de células Th17. A atuação da PGE2 na imunidade adaptativa vem sendo investigada quanto à diferenciação e ativação de linfócitos Th1, Treg e Th17. Os resultados aqui apresentados demonstram que o protocolo de diferenciação de células dendríticas utilizado foi capaz de gerar em torno de 85% de CD imaturas evidenciado pela expressão de um perfil fenotípico CD11c+CD11b+MHCIIlowCD80lowCD86low. Quanto à produção de PGE2, a fagocitose de AC+PAMP por células dendríticas foi capaz de induzir níveis elevados deste mediador lipídico nas diferentes proporções de células apoptóticas utilizadas. Os níveis de PGE2 encontrados no sobrenadante de cultura foi proporção dependente evidenciando uma relação direta entre fagocitose de AC+PAMP e a produção de PGE2. A fim de mimetizar a cinética da carga bacteriana durante uma infecção, ou seja, inicialmente uma menor carga bacteriana que tende a aumentar conforme ocorre a colonização, os animais foram inoculados com alta (high - 106 UFC de E. coli) e baixa (low - 105 UFC de E. coli) cargas bacterianas, gerando desta forma o que chamamos de AC+PAMPhigh e AC+PAMPlow, respectivamente. Os resultados aqui apresentados demonstram que diante de uma alta carga bacteriana há uma maior produção dos mediadores