Multicentric carpotarsal osteolysis is caused by mutations clustering in the amino-terminal transcriptional activation domain of MAFB.

Multicentric carpotarsal osteolysis (MCTO) is a rare skeletal dysplasia characterized by aggressive osteolysis, particularly affecting the carpal and tarsal bones, and is frequently associated with progressive renal failure. Using exome capture and next-generation sequencing in five unrelated simplex cases of MCTO, we identified previously unreported missense mutations clustering within a 51 base pair region of the single exon of MAFB, validated by Sanger sequencing. A further six unrelated simplex cases with MCTO were also heterozygous for previously unreported mutations within this same region, as were affected members of two families with autosomal-dominant MCTO. MAFB encodes a transcription factor that negatively regulates RANKL-induced osteoclastogenesis and is essential for normal renal development. Identification of this gene paves the way for development of novel therapeutic approaches for this crippling disease and provides insight into normal bone and kidney development.

Exendin-4 protects beta-cells from interleukin-1 beta-induced apoptosis by interfering with the c-Jun NH2-terminal kinase pathway.

OBJECTIVE: The pro-inflammatory cytokine interleukin-1 beta (IL-1 beta) generates pancreatic beta-cells apoptosis mainly through activation of the c-Jun NH(2)-terminal kinase (JNK) pathway. This study was designed to investigate whether the long-acting agonist of the hormone glucagon-like peptide 1 (GLP-1) receptor exendin-4 (ex-4), which mediates protective effects against cytokine-induced beta-cell apoptosis, could interfere with the JNK pathway. RESEARCH DESIGN AND METHODS: Isolated human, rat, and mouse islets and the rat insulin-secreting INS-1E cells were incubated with ex-4 in the presence or absence of IL-1 beta. JNK activity was assessed by solid-phase JNK kinase assay and quantification of c-Jun expression. Cell apoptosis was determined by scoring cells displaying pycnotic nuclei. RESULTS: Ex-4 inhibited induction of the JNK pathway elicited by IL-1 beta. This effect was mimicked with the use of cAMP-raising agents isobutylmethylxanthine and forskolin and required activation of the protein kinase A. Inhibition of the JNK pathway by ex-4 or IBMX and forskolin was concomitant with a rise in the levels of islet-brain 1 (IB1), a potent blocker of the stress-induced JNK pathway. In fact, ex-4 as well as IBMX and forskolin induced expression of IB1 at the promoter level through cAMP response element binding transcription factor 1. Suppression of IB1 levels with the use of RNA interference strategy impaired the protective effects of ex-4 against apoptosis induced by IL-1 beta. CONCLUSIONS: The data establish the requirement of IB1 in the protective action of ex-4 against apoptosis elicited by IL-1 beta and highlight the GLP-1 mimetics as new potent inhibitors of the JNK signaling induced by cytokines.

The N-terminal domain of Plasmodium falciparum circumsporozoite protein represents a target of protective immunity.

The N-terminal domain of the circumsporozoite protein (CSP) has been largely neglected in the search for a malaria vaccine in spite of being a target of inhibitory antibodies and protective T cell responses in mice. Thus, in order to develop this region as a vaccine candidate to be eventually associated with other candidates and, in particular, with the very advanced C-terminal counterpart, synthetic constructs representing N- and C-terminal regions of Plasmodium falciparum and Plasmodium berghei CSP were administered as single or combined formulations in mice. We show that the antisera generated against the combinations inhibit sporozoite invasion of hepatocytes in vitro better than antisera against single peptides. Furthermore, two different P. falciparum CSP N-terminal constructs (PfCS22-110 and PfCS65-110) were recognized by serum samples from people living in malaria-endemic regions. Importantly, recognition of the short N-terminal peptide (PfCS65-110) by sera from children living in a malaria-endemic region was associated with protection from disease. Taken together, these results underline the potential of using such fragments as malaria vaccine candidates.

Produção de forragem e valor nutritivo do capim-elefante, irrigado durante a época seca

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da irrigação, na época seca do ano, sobre as características produção de matéria seca, altura das plantas, cobertura do solo e a qualidade de forragem do capim-elefante (Pennisetum purpureum). O experimento foi realizado em Coronel Pacheco, MG, de junho /2004 a janeiro/2007, e os tratamentos foram: irrigações a partir de 15/7, 1º/8, 15/8, 1º/9, 15/9 e 1º/10, com adubação de 300 kg ha-1 de N por ano; com dois tratamentos sem irrigação, adubados com 300 e 200 kg ha-1 de N por ano. Foram usados dois métodos de colheita: corte a 10 cm do solo e pastejo simulado, realizado acima da altura de resíduo (80-100 cm). A produção de matéria seca e a altura das plantas aumentaram com as irrigações iniciadas em julho e agosto. As pastagens irrigadas a partir de julho e agosto atingiram condições de pastejo quatro a seis semanas antes que as dos tratamentos não irrigados. A produção de matéria seca obtida pelo método do corte foi duas vezes superior àquela obtida pelo pastejo simulado. Os teores de proteína bruta e a digestibilidade in vitro da matéria seca foram maiores no pastejo simulado do que no corte, mas os teores de fibra em detergente neutro foram semelhantes.

Valor nutritivo da forragem e produção animal em pastagens de Brachiaria brizantha

O objetivo deste trabalho foi avaliar a produção animal e sua relação com as características dos pastos de Brachiaria brizantha cultivares Marandu, Xaraés e Piatã. O delineamento experimental foi o de blocos ao acaso, com três tratamentos e duas repetições. Os piquetes com 2 ha foram subdivididos em dois e submetidos ao pastejo alternado, com 28 dias de utilização e 28 dias de descanso. Foram utilizados três novilhos teste, por piquete, e novilhos reguladores para manter resíduos pós pastejo em torno de 3 Mg ha-1 de matéria seca. Mensalmente, os pastos foram avaliados para se estimar o valor nutritivo da forragem. Os animais foram pesados, e as taxas de lotação foram ajustadas duas vezes por semana. No pasto da cv. Xaraés, apesar do menor ganho médio diário (GMD) dos animais, a taxa de lotação foi maior, o que resultou em maior produtividade da cv. Xaraés, em comparação às cvs. Marandu e Piatã. No pasto da cv. Piatã, houve aumento do GMD, o que indica que as cvs. Xaraés e Piatã são novas alternativas para a diversificação dos pastos no Cerrado. Assim, a escolha da forragem deve se dar em razão da meta do sistema de produção, ou seja, a produção por animal ou por área.

Visualització i control d'un pont de rentat de vehicles mitjançant un terminal HMI

Aquest treball pretén fer una anàlisi per millorar el control d'una màquina de rentar vehicles fent ús d'un terminal HMI junt a un autòmat. La realització de l'estudi d'usabilitat s'ha portat a terme seguint les etapes del disseny centrat en l'usuari, així com la identificació dels avantatges o inconvenients que pugui aportar aquest nou sistema.

Communication with terminal cancer patients in palliative care: are there differences between nurses and physicians?

The aim of this study was to find whether there were interprofessional differences in specific elements of communication with terminal cancer patients and decision-making processes that concern such patients. Given that interdisciplinary team work is one of the basic values in palliative care, if there are conflicting views between professions on such important issues it is most important to know about these and to understand them. A questionnaire utilized in an earlier survey of palliative care physicians and addressing their attitudes to and beliefs about specific elements of communication and decision making was sent to a sample of palliative care nurses working in the same regions, i.e. the French-speaking parts of Switzerland, Belgium and France. After a second mailing (reminder), 135 of the 163 questionnaires (83%) were returned. There was general agreement between nurses and physicians on questions dealing with perceptions of patients' knowledge of their diagnosis and stage of disease, patients' need for information, "do not resuscitate" orders and ethical principles in decision-making processes. Statistically significant, but small, differences between professional groups were only observed for a minority of the questions. Interprofessional differences in specific elements of communication with terminal cancer patients and decision-making processes affecting these patients were not so marked that they could be called "conflicting interprofessional views."

Valor nutritivo do colmo de híbridos de milho colhidos em três estádios de maturidade

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da maturidade da planta sobre a qualidade nutricional do colmo de híbridos de milho, para definir critérios de seleção em programas de melhoramento de milho para ensilagem. Foram avaliados 15 híbridos de milho, do programa de melhoramento do Instituto Agronômico, em Campinas, SP, colhidos com 90, 120 e 150 dias após a germinação, em experimento com delineamento de blocos ao acaso, com três repetições. O quarto e o quinto internódios do colmo foram retirados para determinação da composição bromatológica e digestibilidade in vitro. Com o avanço da maturidade, houve queda no teor de fibra e aumento no de lignina de ambos os internódios. Observou-se aumento na digestibilidade da matéria seca do quinto internódio, mas não houve mudanças na do quarto internódio. A maturidade também reduziu a digestibilidade da fibra em detergente neutro (DIVFDN) do quarto internódio, mas não a do quinto. A DIVFDN do quarto internódio pode ser utilizada como parâmetro de seleção para aumento da qualidade nutricional de híbridos de milho. Nas três idades de corte, houve grande variabilidade genética dos parâmetros de qualidade, o que realça a possibilidade de implantação de programas de melhoramento genético para qualidade nutricional do milho para ensilagem.

Nuclear localization of mouse fibroblast growth factor 2 requires N-terminal and C-terminal sequences.

In vertebrates, different isoforms of fibroblast growth factor 2 (FGF2) exist, which differ by their N-terminal extension. They show different localization and expression levels and exert distinct biological effects. Nevertheless, genetic inactivation of all FGF2 isoforms in the mouse results in only mild phenotypes. Here, we analyzed mouse FGF2, and show that, as in the human, mouse FGF2 contains CTG-initiated high molecular-weight (HMW) isoforms, which contain a nuclear localization signal, and which mediate localization of this isoform to the nucleus. Using green fluorescent protein-FGF2 fusions, we furthermore observed, that C-terminal deletions disable nuclear localization of the short low-molecular-weight (LMW) 18-kDa isoform. This loss of specific localization is accompanied by a loss in heparin binding. We therefore suggest that, first, localization of mouse FGF2 is comparable to that in other vertebrates and, second, FGF2 contains at least two sequences important for nuclear localization, a nuclear localization sequence at the N terminus which is only contained in the HMW isoform, and another sequence at the C terminus, which is only required for localization of the LMW 18-kDa isoform.

Metodologias de avaliação do valor nutricional do farelo de arroz desengordurado para suínos

O objetivo deste trabalho foi comparar o método de substituição com o de análise de regressão, na determinação do valor nutricional do farelo de arroz desengordurado, em dietas para suínos, nas fases de crescimento e terminação. Foram conduzidos dois ensaios de digestibilidade com 16 suínos machos castrados na fase de crescimento, com peso vivo inicial de 50,0±3,1 kg, e 16 suínos machos castrados na fase de terminação, com peso vivo inicial de 95,0±3,8 kg, alojados em gaiolas metabólicas. Utilizou-se o delineamento inteiramente casualizado com quatro tratamentos - 0, 15, 30 e 45% de substituição da dieta-referência por farelo de arroz desengordurado - e quatro repetições, com um animal como unidade experimental. A análise de regressão foi mais precisa para estimar o valor nutricional do farelo de arroz desengordurado do que o método de substituição. Por esta análise, os coeficientes de digestibilidade aparente da matéria seca, matéria orgânica, proteína bruta e o valor de energia metabolizável do farelo de arroz desengordurado foram, respectivamente: 57,7, 64,8, 56,6% e 2.429 kcal kg-1, na fase de crescimento, e 57,7, 64,7, 62,6% e 2.233 kcal kg-1, na fase de terminação.

Methionine-321 in the C-terminal alpha-helix of catabolic ornithine carbamoyltransferase from Pseudomonas aeruginosa is important for positive homotropic cooperativity.

Pseudomonas aeruginosa has a pair of distinct ornithine carbamoyltransferases. The anabolic ornithine carbamoyltransferase encoded by the argF gene catalyzes the formation of citrulline from ornithine and carbamoylphosphate. The catabolic ornithine carbamoyltransferase encoded by the arcB gene promotes the reverse reaction in vivo; although this enzyme can be assayed in vitro for citrulline synthesis, its unidirectionality in vivo is determined by its high concentration at half maximum velocity for carbamoylphosphate ([S]0.5) and high cooperativity toward this substrate. We have isolated mutant forms of catabolic ornithine carbamoyltransferase catalyzing the anabolic reaction in vivo. The corresponding arcB mutant alleles on a multicopy plasmid specifically suppressed an argF mutation of P. aeruginosa. Two new mutant enzymes were obtained. When methionine 321 was replaced by isoleucine, the mutant enzyme showed loss of homotropic cooperativity at physiological carbamoylphosphate concentrations. Substitution of glutamate 105 by lysine resulted in a partial loss of the sigmoidal response to increasing carbamoylphosphate concentrations. However, both mutant enzymes were still sensitive to the allosteric activator AMP and to the inhibitor spermidine. These results indicate that at least two residues of catabolic ornithine carbamoyltransferase are critically involved in positive carbamoylphosphate cooperativity: glutamate 105 (previously known to be important) and methionine 321. Mutational changes in either amino acid will affect the geometry of helix H2, which contains several residues required for carbamoylphosphate binding.

Valor nutricional e energia metabolizável de subprodutos do trigo utilizados para alimentação de suínos em crescimento

O objetivo deste trabalho foi avaliar o valor nutricional e energético de subprodutos do trigo, em dietas para suínos em crescimento, e obter equações de predição da energia metabolizável. Foram utilizados 36 suínos machos, castrados, alojados em gaiolas metabólicas individuais. Realizou-se a coleta total de fezes e urina em dois períodos de dez dias: cinco para adaptação e cinco para coleta. Utilizou-se o delineamento de blocos ao acaso, tendo-se considerado o período de coleta como bloco, com seis tratamentos e seis repetições. A dieta referência foi substituída em 30% por um dos subprodutos testados: farinheta, farelo fino, farelo de trigo, farelo grosso e farelo grosso moído; este último usado para avaliar a influência da granulometria na digestibilidade. A fibra bruta foi a variável que proporcionou a melhor estimativa da energia metabolizável. O farelo fino foi superior em energia digestível e metabolizável, em comparação ao farelo grosso moído. O farelo grosso moído apresentou os menores coeficientes de digestibilidade, e a diminuição de seu diâmetro geométrico médio não aumentou a digestibilidade dos nutrientes e da energia. Entre os subprodutos avaliados, a farinheta apresenta maior energia digestível, energia metabolizável e proteína digestível, o que mostra elevado potencial para utilização em dietas para suínos em crescimento.

Estimação de parâmetros genéticos e predição de valor genético aditivo de trigo utilizando modelos mistos

O objetivo deste trabalho foi estimar os parâmetros genéticos e predizer o valor genético de populações e indivíduos oriundos de populações segregantes de trigo, com o uso da metodologia de modelos mistos ("restricted maximum likelihood"/"best linear unbiased prediction", REML/BLUP). Trinta e seis populações segregantes de trigo e quatro controles foram avaliados na geração F3, em delineamento de blocos ao acaso, com informações de indivíduo retiradas de dentro das parcelas. Os caracteres avaliados foram: produção de grãos, índice de colheita, número de perfilhos e altura de planta. Observou-se a existência de variabilidade genética entre populações em todos os caracteres avaliados. A herdabilidade média variou de 39,15 a 92,78%, e a acurácia, de 62,57 a 96,32%, na seleção de populações. A herdabilidade individual no sentido restrito foi baixa dentro das populações, em todos os caracteres. A acurácia na seleção individual apresentou magnitude média, quanto ao caráter altura de plantas, e baixa quanto aos demais caracteres. A herdabilidade individual contribui para maior ganho nos caracteres altura de planta e índice de colheita com o uso do BLUP individual, em comparação ao BLUP de populações. As populações segregantes Embrapa22/BRS207, Embrapa22/VI98053, Embrapa22/IVI01041, BRS254/BRS207, BRS254/VI98053, BRS254/UFVT1Pioneiro e BRS264/BRS207 destacam-se por apresentar valor genético aditivo elevado em dois ou mais caracteres.

A peptide inhibitor of c-Jun N-terminal kinase protects against both aminoglycoside and acoustic trauma-induced auditory hair cell death and hearing loss.

Hearing loss can be caused by a variety of insults, including acoustic trauma and exposure to ototoxins, that principally effect the viability of sensory hair cells via the MAP kinase (MAPK) cell death signaling pathway that incorporates c-Jun N-terminal kinase (JNK). We evaluated the otoprotective efficacy of D-JNKI-1, a cell permeable peptide that blocks the MAPK-JNK signal pathway. The experimental studies included organ cultures of neonatal mouse cochlea exposed to an ototoxic drug and cochleae of adult guinea pigs that were exposed to either an ototoxic drug or acoustic trauma. Results obtained from the organ of Corti explants demonstrated that the MAPK-JNK signal pathway is associated with injury and that blocking of this signal pathway prevented apoptosis in areas of aminoglycoside damage. Treatment of the neomycin-exposed organ of Corti explants with D-JNKI-1 completely prevented hair cell death initiated by this ototoxin. Results from in vivo studies showed that direct application of D-JNKI-1 into the scala tympani of the guinea pig cochlea prevented nearly all hair cell death and permanent hearing loss induced by neomycin ototoxicity. Local delivery of D-JNKI-1 also prevented acoustic trauma-induced permanent hearing loss in a dose-dependent manner. These results indicate that the MAPK-JNK signal pathway is involved in both ototoxicity and acoustic trauma-induced hair cell loss and permanent hearing loss. Blocking this signal pathway with D-JNKI-1 is of potential therapeutic value for long-term protection of both the morphological integrity and physiological function of the organ of Corti during times of oxidative stress.

Perspectiva bayesiana na seleção de genótipos de feijão-caupi em ensaios de valor de cultivo e uso

Resumo:O objetivo deste trabalho foi selecionar, sob a perspectiva bayesiana, genótipos de feijão-caupi (Vigna unguiculata) que reúnam alta adaptabilidade e estabilidade fenotípicas, no Estado do Mato Grosso do Sul. Foram utilizados dados de quatro experimentos, conduzidos em delineamento de blocos ao acaso, em que a produtividade de grãos de 20 genótipos de feijão-caupi semiprostrado foi avaliada. Para representar as distribuições a priori pouco informativas, utilizaram-se distribuições de probabilidade com grande variância; e, para representar distribuições a priori informativas, adotou-se o conceito de metanálise, com uso de informações de trabalhos anteriores. A comparação entre as distribuições a priori foi realizada por meio do fator de Bayes. A abordagem bayesiana proporciona maior acurácia na seleção de genótipos de feijão-caupi semiprostrado, com elevadas adaptabilidade e estabilidade fenotípicas avaliadas por meio da metodologia de Eberhart & Russell. Com base nas prioris informativas, os genótipos MNC99-507G-4, TE97-309G-24, MNC99-542F-7 e BR 17-Gurguéia são classificados como de alta adaptabilidade a ambientes favoráveis. Já os genótipos TE96-290-12G, MNC99-510F-16, MNC99-508G-1, MNC99-541F-21, MNC99-542F-5 e MNC99-547F-2 apresentam alta adaptabilidade a ambientes desfavoráveis.