Efeitos da administração de vitamina E na infecção mamária e na contagem de células somáticas de cabras primíparas desafiadas experimentalmente com Staphylococcus aureus

O trabalho teve por objetivo estudar os efeitos da administração de vitamina E sobre a contagem de células somáticas e a infecção da glândula mamária de cabras primíparas desafiadas com a inoculação intramamária de Staphylococcus aureus ao 10º dia pós-parto. Vinte e oito animais foram divididos em quatro grupos, cada um composto por sete cabras primíparas da raça Saanen, como segue: grupo-controle, grupo de animais suplementados com vitamina E, grupo de animais desafiados com S.aureus inoculados na glândula mamária e grupo de animais suplementados com vitamina E e desafiados com S.aureus na glândula mamária. Na segunda e terceira semanas de lactação, a inoculação de S.aureus na glândula mamária permitiu a recuperação do microrganismo no leite e elevou a contagem de células somáticas (CCS). A liberação de S.aureus no leite ocorreu de maneira intermitente. em animais suplementados com vitamina E, o desafio com S.aureus resultou em CCS mais baixa e menor número de microrganismos no leite. Sugere-se que a CCS possa ser utilizada para a detecção da mastite caprina, devendo-se utilizar contagens superiores a 1,0x10(6)células/ml de leite como critério para a realização de exames microbiológicos.

Atividade funcional neutrofílica em cabras com mastite induzida experimentalmente por Staphylococcus aureus e suplementadas com vitamina E (acetato DL-α-tocoferol)

Avaliou-se a função neutrofílica em cabras com mastite por Staphylococcus aureus, induzida experimentalmente, suplementadas com vitamina E (acetato DL-α-tocoferol). Foram utilizadas 14 cabras gestantes da raça Saanen, com idades entre 8 e 12 meses e com cultura bacteriológica do leite negativa. Sete cabras receberam 2000UI de vitamina E, via intramuscular, no dia do parto e no sétimo dia pós-parto. As outras sete não foram medicadas. No 10º dia pós-parto, os dois grupos foram inoculados com 300 unidades formadoras de colônias de Staphylococcus aureus, cepa ATCC 25923, diluídas em 10ml de solução fisiológica, na glândula mamária esquerda. A função de neutrófilos sangüíneos foi medida pelo teste nitroazul tetrazólio (NBT), antes da inoculação, no momento da infecção e 12, 24, 48 e 72 horas pós-infecção, quando foi instituído o tratamento intramamário com antimicrobiano, por três dias consecutivos. A colheita final de sangue foi realizada 48 horas após a última aplicação do medicamento. Amostras de sangue para determinação da vitamina E foram colhidas no dia do parto, no momento da infecção, 48 horas pós-infecção e 48 horas pós-tratamento e analisadas por cromatografia líquida de alta performance. Na prova não estimulada do NBT não foram verificadas diferenças entre grupos e entre momentos. Na prova estimulada do NBT (NBT-E) houve diferença entre tratamentos às 12 e 72 horas pós-infecção, com valores mais elevados de NBT-E nos animais sem suplementação. Conclui-se que a suplementação com vitamina E reduz o percentual de neutrófilos NBT-E positivos.

Staphylococcus aureus: portadores entre manipuladores de alimentos

Foram colhidas amostras de mãos e fossas nasais de 48 manipuladores de alimentos das principais casas comerciais da cidade de Araraquara, Estado de São Paulo (Brasil), e de 20 estudantes universitários. Dentre os indivíduos foram encontrados 44,1% e 34,8% que portavam Staphylococcus aureus em fossas nasais e mãos, respectivamente. Observou-se predomínio de fagotipos dos grupos I e III. Dos 12 portadores do microrganismo, concomitantemente em mãos e fossas nasais, 75,0% apresentaram cepas com vínculo epidemiológico. Os achados mostram o risco potencial representado pelas mãos nas intoxicações alimentares.

Evaluation of survival of Staphylococcus aureus and Clostridium botulinum in charqui meats

Charqui meats were prepared in laboratory conditions in order to carry out experiments to observe the possibility of development of enterotoxigenic Staphylococcus aureus and Clostridium bottilinum proteolytic type B spores and their toxins. Results demonstrated that the harsh processing conditions, high salt concentration, relative high temperature, a, values, inhibited the growth of both bacteria. Under our experimental conditions, S. aureus would survive throughout the sequence of salting steps i.e. brine followed by rock salting and the sunshine drying step. However, at final a(w) value of 0.70-0.75 would create conditions to inhibit its development. The other experiment revealed that C. botulinum spores germination also was impaired because of these low a(w) values. Under these conditions, charqui meats revealed to be safe products in relation to toxins from both enterotoxigenic S. aureus and C. botulinum. (C) 2003 Elsevier B.V. Ltd. All rights reserved.

Staphylococcus aureus: Resistance patterns to antimicrobials and Penicillinase among strains isolated from apparently healthy lactating cows

Ninety-two strains of Staphylococcus aureus isolated from the nasal fossa and udder skin of apparently healthy lactating cows were analyzed for resistance to antibiotics and production of penicillinase.The results showed a greater frequency of resistance patterns to penicillin and ampicillin.All strains were sensitive to oxacyllin and gentamicin.The most frequent Barber and Burston model was SSSS (60.90%), followed by RSSS (18.50%).With respect to the production of penicillinase although the Lucas method indicated a larger number of positive samples, we suggest the use of the Haight and Finland method due to a greater consistency of data obtained with it.

COMPARATIVE INVITRO ACTIVITY OF 3 CEPHALOSPORINS AGAINST STAPHYLOCOCCUS-AUREUS ISOLATED FROM BOVINE MASTITIS

This report compares the in vitro activity of three cephalosporins (cephalothin, cefoxitin and ceftriaxone) against 57 Staphylococcus aureus strains isolated from cows with clinical mastitis on the basis of the minimal inhibitory (MIC) and minimal bactericidal concentrations (MBC). The majority of the S aureus strains showed resistance to cefoxitin and ceftriaxone and sensitivity to cephalothin. The highest MICs and MBCs were found for cefoxitin and ceftriaxone. Antimicrobial tolerance (MBC/MIC greater-than-or-equal-to 32:1) was observed in relation to cephalothin and ceftriaxone. The data suggest that these cephalosporins may not be effective for the treatment of staphylococcal bovine mastitis. The precise definition of their antimicrobial efficacies requires more detailed in vitro and in vivo studies.

IDENTIFICATION OF A PUTATIVE MEMBRANE-INSERTED SEGMENT IN THE ALPHA-TOXIN OF STAPHYLOCOCCUS-AUREUS

To gain a fuller understanding of the regions of the Staphylococcus aureus alpha-toxin important in pore formation, we have used Forster dipole-dipole energy transfer to demonstrate that a central glycine-rich region of alpha-toxin (the so-called ''hinge'' region) inserts deeply into the bilayer on association of toxin with liposomes. Mutant alpha-toxins with unique cysteine (C) residues at positions 69 and 130 [Palmer, M., et al. (1993) J. Biol. Chem. 268, 11959) were reacted with the C-specific fluorophore acrylodan, which acted as an energy donor. The chosen acceptor was N-(7-nitrobenz-2-oxa-13-diazol-4-yl)-1,2-bis(hexadecanoyl) -sn-glycero-3-phosphoethanolamine (NBD-PE). Measurement of the degree of donor quenching with increasing NBD-PE in the inner bilayer leaflet enables the distance of closest approach between donor and acceptor to be estimated. For toxin labeled with acrylodan at position 130 (in the hinge region), this distance is approximately 5 +/- 2 Angstrom, showing that the probe is close to the inner surface of the liposomes. A second probe labeled at position 69 (in the N-terminal domain) shows negligible energy transfer, indicating a distance of closest approach >40 Angstrom. This implies that this N-terminal region remains ''outside'' the liposome. We propose a model in which the central region of the alpha-toxin inserts into the membrane and possibly participates in forming the wall of the pore.

Análise fenotípica e molecular da produção de biofilmes por estirpes de staphylococcus aureus isoladas de casos de mastite subclínica bovina

Biofilm formation is considered an advantage for Staphylococcus aureus mastitis isolates, facilitating bacterial persistence in the udder. It requires attachment to mammary epithelium, proliferation and accumulation of cells in multilayers and enclosing in a polymeric matrix known as exopolysaccharide. The objective of this study was to evaluate the ability of Staphylococcus aureus isolated from bovine subclinical mastitis for formation of biofilms. A total of 94 Staphylococcus aureus strains obtained from milk samples of cows suffering from subclinical mastitis in dairy herds on two properties in the state of São Paulo were evaluated. These strains were characterized by in vitro biofilm formation, and by the presence of icaA and icaD genes which are responsible for intercellular adhesion. The results revealed that 98.9% of the isolates produced biofilm in vitro by adherence in sterile 96-well "U" bottom polystyrene tissue culture plates; 95.7% of the isolates possessed the icaA and icaD genes. These bacterial isolates biofilm producers may impair eradication of chronic mastitis, rendering antibiotherapy less effective. The detection of biofilm forming ability in mastitis isolates may provide useful information for more adequate therapeutic regimen and for preventive actions in the control of those bacterial isolates in bovine herds.

Characterization of Staphylococcus aureus isolates in milk and the milking environment from small-scale dairy farms of São Paulo, Brazil, using pulsed-field gel electrophoresis

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)