Investigação de genes de resistência a carbapenêmicos, cefalosporinas e quinolonas e tipagem molecular de Enterobacter spp isolados de pacientes internados em um hospital terciário do Estado de São Paulo

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Investigação de genes de resistência a carbapenêmicos, cefalosporinas e quinolonas e tipagem molecular de Enterobacter spp isolados de pacientes internados em um hospital terciário do Estado de São Paulo

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Bacteriocinogenic and virulence potential of Enterococcus isolates obtained from raw milk and cheese

Aims To provide molecular and phenotypical characterization of Enterococcus isolates obtained from raw milk and cheese, regarding their bacteriocinogenic and virulence activity. Methods and Results Forty-three bacteriocinogenic enterococci isolates were identified by 16s rDNA, fingerprinted by RAPD-PCR analysis and tested by PCR for the presence of genes for lantibiotics (lanM, lanB and lanC) and enterocins (entA, entB, entP, entL50AB and entAS48) and by phenotypical methods for bacteriocin production and inhibitory spectrum. Also, the virulence of the isolates was evaluated by PCR for genes gelE, hyl, asa1, esp, cylA, efaA, ace, vanA, vanB, hdc1, hdc2, tdc and odc and by phenotypical tests for gelatinase, lipase, DNAse and a- and beta-haemolysis. Most isolates (93.0%) harboured at least one lantibiotic or enterocin gene and were positive for several tested virulence genes, mainly asa1 (100%), gelE (93.0%) and efaA (83.7%). 53.5% of the isolates presented beta-haemolysis. Conclusions Enterococcus spp. isolates presented an interesting potential application for food preservation because of bacteriocin production; however, virulence-related genes were identified in all RAPD profiles. Significance and Impact of the Study The study demonstrated the contradictory characteristics of the tested Enterococcus isolates: they presented a good potential for application in food biopreservation but contained several virulence factors.

Construction of improved temperature-sensitive and mobilizable vectors and their use for constructing mutations in the adhesin-encoding acm gene of poorly transformable clinical Enterococcus faecium strains.

Inactivation by allelic exchange in clinical isolates of the emerging nosocomial pathogen Enterococcus faecium has been hindered by lack of efficient tools, and, in this study, transformation of clinical isolates was found to be particularly problematic. For this reason, a vector for allelic replacement (pTEX5500ts) was constructed that includes (i) the pWV01-based gram-positive repAts replication region, which is known to confer a high degree of temperature intolerance, (ii) Escherichia coli oriR from pUC18, (iii) two extended multiple-cloning sites located upstream and downstream of one of the marker genes for efficient cloning of flanking regions for double-crossover mutagenesis, (iv) transcriptional terminator sites to terminate undesired readthrough, and (v) a synthetic extended promoter region containing the cat gene for allelic exchange and a high-level gentamicin resistance gene, aph(2'')-Id, to distinguish double-crossover recombination, both of which are functional in gram-positive and gram-negative backgrounds. To demonstrate the functionality of this vector, the vector was used to construct an acm (encoding an adhesin to collagen from E. faecium) deletion mutant of a poorly transformable multidrug-resistant E. faecium endocarditis isolate, TX0082. The acm-deleted strain, TX6051 (TX0082Deltaacm), was shown to lack Acm on its surface, which resulted in the abolishment of the collagen adherence phenotype observed in TX0082. A mobilizable derivative (pTEX5501ts) that contains oriT of Tn916 to facilitate conjugative transfer from the transformable E. faecalis strain JH2Sm::Tn916 to E. faecium was also constructed. Using this vector, the acm gene of a nonelectroporable E. faecium wound isolate was successfully interrupted. Thus, pTEX5500ts and its mobilizable derivative demonstrated their roles as important tools by helping to create the first reported allelic replacement in E. faecium; the constructed this acm deletion mutant will be useful for assessing the role of acm in E. faecium pathogenesis using animal models.

Avaliação da contaminação microbiológica de drogas vegetais e potencial descontaminação por plasma

A qualidade, eficácia e segurança no emprego de drogas vegetais dependem, entre outras questões, de sua qualidade sanitária. Sua origem e manuseio, em condições no geral inadequadas, propiciam biocarga elevada e abrangente, o que implica riscos para saúde. O presente trabalho objetivou conhecimento da microbiota das plantas estudadas e o desenvolvimento de estudos de sua descontaminação por plasma, tendo-se analisado os parâmetros físicos que influenciaram este processo. O projeto possibilitou a descontaminação de drogas vegetais com alta carga microbiana. Estudou-se a alcachofra (Cynara scolymus L.), camomila (Chamomilla recutita (L.) Rauschert.), ginco (Ginkgo biloba L.) e guaraná (Paullinia cupana Kunth), adotando parâmetros de processo que alegadamente permitem a integridade dos princípios ativos termossensíveis. Para isso, foi empregado reator disponível no Laboratório de Sistemas Integráveis, pertecente à Escola Politécnica da Universidade de São Paulo, em sistema com acoplamento capacitivo modo RIE (Reactive Ion Etching). Neste sistema, trabalhou-se com oxigênio adicionado de peróxido de hidrogênio. Todos os processos de descontaminação foram desenvolvidos a temperatura ambiente, sob diferentes parâmetros físicos complementares. A eficácia do processo foi investigada, empregando-se contagem de microrganismos heterotróficos, assim como pesquisa de indicadores de patogênicos (Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella spp, Escherichia coli). As avaliações microbiológicas, quantitativas e qualitativas, assim como os estudos decorrentes dos dados obtidos, foram desenvolvidos no Laboratório de Controle Biológico da Faculdade de Ciências Farmacêuticas - USP. Os resultados obtidos após a descontaminação por plasma de oxigênio (100%), a potência de 150 W, evidenciaram redução de até 4 ciclos de aeróbicos totais. No processo por plasma peróxido de hidrogênio (20%) e oxigênio (80%), a uma potência de 150 W, observou-se a redução de até 4 ciclos log de aeróbios totais para as drogas vegetais deste estudo. A presença de substâncias químicas complexas da camomila, que contêm óleo volátil, flavonóides, aminoácidos, ácidos graxos, sais minerais, cumarinas, mucilagens e ácidos orgânicos, interferem no processo por plasma provavelmente em decorrência de a mucilagem formar um filme protetor, impedindo a difusão gasosa em ambos os processos por plasma. Assim, não só a camomila mas também o guaraná, com biocargas iniciais respectivamente de 6,6x106 UFC/g e 2,7x106 UFC/g, mantiveram-se com níveis de contaminação da mesma ordem de grandeza, após os desafios com plasma. A contagem bacteriana da alcachofra (fornecedor B), que foi submetida ao processo de descontaminação através do plasma O2 (100%), (potência de 150 W, pressão de 100 mTorr e vazão de 200 sccm), sofreu redução de dez vezes, independentemente do tempo do processo. Possivelmente este resultado, que aparenta inconsistência, decorre da ação apenas superficial do plasma. A descontaminação por processo de plasma de oxigênio e de peróxido de hidrogênio para a alcachofra (fornecedor B) não foi eficaz, devido à predominância de elementos lignificados. As amostras de alcachofra (fornecedor C), com baixa percentagem de vasos de xilema lignificados e fibras lignificadas evidenciaram a maior eficácia do processo por plasma, pois possibilitou grande difusão gasosa sobre as amostras. O estudo permitiu ainda concluir que à aplicabilidade do plasma na descontaminação de drogas vegetais depende da resistência dos microrganismos, mas igualmente das características da planta, sejam aquelas de natureza morfoanatômica, enzimática ou química. Estudos específicos devem ser desenvolvidos para cada situação.

Jovens: a relação com o álcool e drogas na cidade de São João da Mata-MG

O uso abusivo dos jovens que utilizam substâncias psicoativas e álcool começa precocemente, sendo imprescindível a Equipe de Saúde da Família tomar ciência e conhecimento acerca do assunto, a fim de diminuir e a adesão a este tipo de uso, preservando a saúde, atuando na educação das famílias e consequentes gerações a surgirem. Este estudo teve como objetivo elaborar uma proposta de intervenção para efetivar a ação da Equipe da Saúde da Família no controle, conscientização, baixa adesão dos adolescentes e jovens de São João da Mata MG quanto ao uso abusivo de substâncias psicoativas e álcool no município. A metodologia do estudo é a Qualitativa, Descritiva e Transversal, do tipo Intervenção, que constatou o uso e consumo de álcool e substâncias psicoativas entre os adolescentes e jovens na faixa de 12- 16 anos, da Escola Estadual da cidade, percebido pela vivência comum na vida escolar e social, utilizando-se também dos resultados semelhantes de um trabalho desenvolvido anteriormente com o mesmo tema em 2012. O fator tido como precursor para o uso de tais substâncias após análise da Equipe da ESF, aponta diretamente para a falta de ações e espaços sociais, atividades de lazer e entretenimento para a população mais jovem, adicionado à resistência da população mais velha. As ações aqui propostas buscarão conscientizar os jovens as famílias, a escola e os profissionais de saúde do município a atuarem de forma a diminuir o alto consumo destas substâncias entre os jovens, promovendo saúde e qualidade de vida para a população

Resistência mecânica de hidrogéis termo-sensíveis constituídos de Alginato-Ca2+ / PNIPAAm, tipo Semi-IPN

Thermosensitive hydrogels were synthesized using alginate-Ca2+ in association with a thermosensitive polymer, such as PNIPAAm. The mechanical properties of the hydrogels were determined measuring the maximum tension of deformation. With the increase of the temperature by 25 to 40 ºC above the LCST the chains of PNIPAAm collapsed, dragging the alginate net and diminishing the size of the pores. The decrease in the size of the pores of the hydrogel was followed by an increase in the mechanicals resistance of the material.

Química forense: perspectivas sobre novos métodos analíticos aplicados à documentoscopia, balística e drogas de abuso

In this review recent methods developed and applied to solve criminal occurences related to documentoscopy, ballistic and drugs of abuse are discussed. In documentoscopy, aging of ink writings, the sequence of line crossings and counterfeiting of documents are aspects to be solved with reproducible, fast and non-destructive methods. In ballistic, the industries are currently producing ''lead-free'' or ''nontoxic'' handgun ammunitions, so new methods of gunshot residues characterization are being presented. For drugs analysis, easy ambient sonic-spray ionization mass spectrometry (EASI-MS) is shown to provide a relatively simple and selective screening tool to distinguish m-CPP and amphetamines (MDMA) tablets, cocaine and LSD.

Resistência à compressão e remoção de folhas da cana-de-açúcar visando à colheita mecânica

Sugarcane holds an important place in the Brazilian economy. Grate part of the sugarcane harvested still accomplished largely manually. Sugarcane harvesters available in Brazil use the technology to chop the cane into 200 to 300 mm billets to allow on the go cane transferring to transport, contradicting the traditional method of whole stalk sugarcane harvesting system. In order to make whole stalk mechanical harvesting system possible, one of the barriers to be expired is the mechanical removal of the straw. The design of a mechanism that accomplishes this operation depends directly on the knowledge of the mechanical properties of the sugarcane related to its resistance to compression and the forces necessary to remove the leaves from the stalk. Compression tests were conducted using the universal testing machine. For leaves removal test by friction, a special apparatus was designed to allow the registration of the normal and traction force. The sugarcane stalk can resist up to 4.9 MPa. With a normal pressure of 0.8 MPa, which correspond to a friction force of 315 N, it is possible to remove the leaves, independent of its location in the sugarcane stalk.

Avaliação térmica de placas de argamassa de cimento e casca de arroz aquecidas por resistência elétrica

An alternative proposal for floor heating system by means of electric resistance for both chick and piggy installation is presented in this work. Several formulations of rice husk and cement mortar boards were used. An electronic device controlled all board temperature. This system presented a good efficiency design. The conventional cement mortar mixed with rice husk showed a better performance.

Levotiroxina e o problema da permutabilidade de drogas de estreito intervalo terapêutico

The exchange of a prescribed drug by other similar, by generic products and even by custom products has become common practice in our country, often ignoring basic tenets of bioequivalence, interchangeability, stability and characteristics of the pharmaceutical compounds. In the case of drugs of narrow therapeutic index, such as levothyroxine, these problems are intensified, putting the effectiveness of treatment and patient health at serious risk. We review the pertinent legislation, emphasizing the characteristics of levothyroxine and adverse effects that limit the interchangeability of the compound.

Estudo in vitro da resistência ao cisalhamento da colagem direta de tubos ortodônticos em molares

INTRODUÇÃO: apesar da colagem direta despender menor tempo clínico, com maior preservação da integridade gengival, ainda hoje se observa uma alta incidência de bandagem dos molares. Portanto, torna-se interessante a idealização de recursos para o aumento da eficiência desse procedimento para dentes submetidos a maiores impactos mastigatórios, como, por exemplo, os molares. OBJETIVO: esse estudo teve o propósito de avaliar se a resistência à adesão com a aplicação de uma camada de resina adicional na região oclusal da interface tubo/dente aumenta a qualidade do procedimento de colagem direta de tubos em molares. MÉTODOS: selecionou-se uma amostra composta por 40 terceiros molares inferiores, que foram aleatoriamente divididos em 2 grupos: Grupo 1 - colagem direta convencional, seguida pela aplicação de uma camada de resina na oclusal da interface tubo/dente; e Grupo 2 - colagem direta convencional. O teste de resistência ao cisalhamento foi realizado 24 horas após a colagem, utilizando-se uma máquina de ensaio universal, operando a uma velocidade de 0,5mm/min. Os resultados foram analisados por meio do teste t independente. RESULTADOS: os valores médios obtidos nos testes de cisalhamento foram: 17,08MPa para o Grupo 1 e 12,60MPa para o Grupo 2. O Grupo 1 apresentou uma resistência ao cisalhamento estatisticamente significativa mais alta do que o Grupo 2. CONCLUSÃO: a aplicação de uma camada adicional de resina na oclusal da interface tubo/dente aumenta a qualidade da adesão do procedimento de colagem direta de tubos ortodônticos em molares.

Isolation of Pseudomonas aeruginosa strains from dental office environments and units in Barretos, state of São Paulo, Brazil, and analysis of their susceptibility to antimicrobial drugs

A wide variety of opportunistic pathogens has been detected in the tubing supplying water to odontological equipment, in special in the biofilm lining of these tubes. Among these pathogens, Pseudomonas aeruginosa, one of the leading causes of nosocomial infections, is frequently found in water lines supplying dental units. In the present work, 160 samples of water, and 200 fomite samples from forty dental units were collected in the city of Barretos, State of São Paulo, Brazil and evaluated between January and July, 2005. Seventy-six P. aeruginosa strains, isolated from the dental environment (5 strains) and water system (71 strains), were tested for susceptibility to six antimicrobial drugs most frequently used against P. aeruginosa infections. Susceptibility to ciprofloxacin, followed by meropenem was the predominant profile. The need for effective means of reducing the microbial burden within dental unit water lines is emphasized, and the risk of exposure and cross-infection in dental practice, in special when caused by opportunistic pathogens like P. aeruginosa, are highlighted.

Isolation of extraintestinal pathogenic Escherichia coli from diarrheic dogs and their antimicrobial resistance profile

From January to December 2006, 92 Escherichia coli isolates from 25 diarrheic dogs were analyzed by screening for the presence of adhesin-encoding genes (pap, sfa, afa), hemolysin and aerobactin genes. Virulence gene frequencies detected in those isolates were: 12% pap, 1% sfa, 10% hemolysin and 6.5% aerobactin. Ten isolates were characterized as extraintestinal pathogenic E. coli (ExPEC) strains; all showed a multidrug resistance phenotype that may represent a reason for concern due the risk of dissemination of antimicrobial resistant genes to the microbiota of human beings.

Antimicrobial susceptibility of coagulase-negative Staphylococci isolated from mastitic cattle in Brazil

Um total de 109 cepas de Staphylococci coagulase-negativa foi isolado de leite de vacas com mastite clínica e subclínica, em 35 fazendas, situadas em nove estados brasileiros, no período de fevereiro a maio de 2005. Os isolados foram investigados em relação a susceptibilidade in vitro a diversos agentes antimicrobianos. A resistência à penicilina foi a observação mais freqüente (93,5%), seguida por sulfonamida (88,9%), novobiocina (88,6%) e ampicilina (85,3%). Todas as cepas examinadas mostraram resistência a pelo menos uma das drogas antimicrobianas testadas. Cepas apresentando resistência múltipla foram extremamente comuns, com 10,0% dos microrganismos isolados apresentando resistência a todas as drogas antimicrobianas. Os resultados obtidos indicaram que as cepas de Staphylococci coagulase-negativas, isoladas no Brasil, apresentaram um alto grau de resistência a antimicrobianos. Estes resultados são, provavelmente, uma conseqüência da pressão devida ao uso intensivo de drogas antimicrobianas.