Associação deagentes patogênicos isolados emanálise microbiológica da água, coma presença de mastite clínica ou subclínica, em vacas de propriedades leiteiras da região de Cerqueira César - SP

Objetivou-se, neste trabalho, pesquisar a relação entre os microrganismos patogênicos isolados e identificados em água utilizada na ordenha, com o isolamento e identificação dos mesmos em amostras de leite, de quartos mamários apresentando mastite clínica ou subclínica nas mesmas propriedades. Foram utilizadas 16 propriedades rurais leiteiras, escolhidas aleatoriamente, na região de Cerqueira César - SP, que utilizavam ordenha mecânica. A água utilizada na ordenha foi classificada em relação à presença de coliformes totais e fecais, como dentro dos padrões ou fora dos padrões de potabilidade humana. Nos resultados obtidos, 94% das amostras foram classificadas como fora dos padrões em relação a coliformes totais e fecais. Os microrganismos identificados foram: Escherichia coli (51%), Enterobacter spp. (25%), Enterobacter cloacae (8%) Edwardsiella tarda (8%) e Klebsiella oxytoca (8%). em relação ao leite, foram analisadas 373 amostras provenientes de vacas em lactação, com mastite clínica (n=19; 5%) e subclínica (n=354; 95%). Os animais com mastite subclínica foram identificados pela contagem de células somáticas (CCS), utilizando-se o aparelho eletrônico (Somacount 300, Bentley), onde a média observada foi de 1.631 x 10³ células/mL. Os principais microrganismos identificados foram: Staphylococcus aureus (30%), Corynebacterium bovis (23%) e Staphylococcus spp. (15%). Conforme os dados obtidos, os agentes coliformes encontrados na água, utilizada na ordenha, não estavam presentes nas análises das amostras de leite dos quartos mamários com mastite clínica ou subclínica das respectivas propriedades, demonstrando não haver associação entre a qualidade da água e a ocorrência de mastite.

Utilização da enrofloxacina (Baytril®) no tratamento da mastite bovina estafilocócica

A ação da enrofloxacina pela administração via intramamária e sistêmica na mastite bovina subclínica por Staphylococcus aureus foi avaliada. Como tratamento local, infundiram-se, após as ordenhas da manhã e da tarde, 250mg do produto, diluídos em água estéril, a um volume final de 10ml, durante três dias. O tratamento sistêmico constituiu na aplicação de 5mg/kg do produto, pela via intramuscular, uma vez ao dia, durante o mesmo período. A estimativa de cura deu-se através da realização do California Mastitis Test (CMT) e do cultivo bacteriano em agar sangue e MacConkey, três semanas após o término do tratamento. Dos 184 quartos acometidos por Staphylococcus aureus, a droga mostrou-se eficiente em 72,0% e 75,0%, pelas vias intramamária e sistêmica, respectivamente. A análise dos resultados mostrou não haver diferença estatística significante, com p<0,50 para as duas formas de tratamento.

Molecular detection of Streptococcus agalactiae in bovine raw milk samples obtained directly from bulk tanks

Mastitis is the most common infectious disease affecting dairy cattle; in addition, it remains the most economically important disease of dairy industries around the world. Streptococcus agalactiae, a contagious pathogen associated with subclinical mastitis, is highly infectious. This bacterium can cause an increase in bulk tank bacterial counts (BTBC) and bulk tank somatic cell counts (BTSCC). The microbiological identification of S. agalactiae in samples from bulk tanks is an auxiliary method to control contagious mastitis. Thus, there are some limitations for time-consuming cultures or identification methods and additional concerns about the conservation and transport of samples. Bulk tank samples from 247 dairy farms were cultured and compared through polymerase chain reaction (PCR), directed to 16S rRNA genes of S. agalactiae, followed by BTBC and S. agalactiae isolation. The mean value of BTBC was 1.08 x 10(6) CFU mL(-1) and the bacterium was identified through the microbiological method in 98 (39.7%; CI95% = 33.8-45.9%) and through PCR in 110 (44.5%; CI95% = 38.5-50.8%) samples. Results indicated sensitivity of 0.8571 +/- 0.0353 (CI95% = 0.7719-0.9196) and specificity of 0.8255 +/- 0.0311 (CI95% = 0.7549-0.8827). The lack of significant difference between microbiological and molecular results (kappa = 0.6686 +/- 0.0477 and CI95% = 0.5752-0.7620) indicated substantial agreement between the methods. This suggests that PCR can be used for bulk tank samples to detect contagious mastitis caused by S. agalactiae. (C) 2011 Elsevier Ltd. All rights reserved.

Estudo do leite de éguas sadias ou portadoras de mastite subclínica, pelo teste de Whiteside, análise microbiológica e contagem de células somáticas

Com o objetivo de identificar a microbiota existente no leite de éguas normais ou portadoras de mastite subclínica, coletaram-se amostras (10 a 15 ml) de leite de 38 animais, que foram examinadas pelo teste de Whiteside, após a homogeneização das amostras dos dois tetos de cada animal. Os resultados foram negativos. Os exames microbiológicos realizados em meios de ágar sangue bovino 10% e ágar MacConkey revelaram presença de bactérias do gênero Staphylococcus spp. e Streptococcus spp. A contagem de células somáticas de amostras individuais de cada teto revelou números superiores a 500.000 células/ml de leite em somente 9,3% das 73 amostras de leite examinadas. Os resultados sugerem a realização de novos estudos objetivando-se a padronização do número de células somáticas no leite de éguas.

Importância do Staphylococcus aureus nas mastites subclínicas: pesquisa de enterotoxinas e toxina do choque tóxico, e a relação com a contagem de células somáticas

O Staphylococcus aureus é um dos principais agentes das mastites consideradas contagiosas, apresentando elevada incidência na maioria dos rebanhos leiteiros em vários países. Além de perdas econômicas é importante salientar o aspecto de saúde pública para cepas produtoras de enterotoxinas e da toxina do choque tóxico. A enterotoxina A, relacionada com maior ênfase nos casos de toxinfecções alimentares, pode ser veiculada pelo leite cru, pasteurizado e subprodutos lácteos. A síndrome do choque tóxico é determinada mais freqüentemente pela toxina do choque tóxico, porém as enterotoxinas do tipo B e C também podem ser implicadas. O objetivo deste estudo foi verificar a ocorrência de S.aureus produtores de enteroxinas e da toxina do choque tóxico em amostras de leite de animais com mastite subclínica, e correlacionar estes resultados com a contagem de células somáticas; utilizando a técnica de celofane over agar para detecção da TNAase, kit comercial para identificação das enterotxinas e contagem eletrônica de células somáticas. Avaliod]MORENO, B.[u-se 209 amostras de leite oriundas de vacas com mastite subclínica por S.aureus, e dentre estas, 209 (98,86%) produziram TNAse, nove amostras (4,39%) foram produtoras de enterotoxinas, sendo que uma (0,49%) dentre elas foi produtora de EED, três (1,46%) de EEC, e três (1,46%) de EEB. em uma amostra (0,49%), detectou-se concomitantemente EEA e EEB e em outra EEB e EEC. A toxina do choque tóxico não foi encontrada nas cepas avaliadas neste estudo, assim como não houve aumento estatisticamente significativo, na contagem de células somáticas, das amostras de cepas produtoras de enteroxinas.

Variabilidades fenotípica e genotípica de estirpes de Staphylococcus aureus isoladas em casos de mastite subclínica bovina

Foram submetidas a PCR-Ribotipagem e aos testes de sensibilidade in vitro frente a 12 antimicrobianos 77 estirpes de Staphylococcus aureus isoladas em amostras de leite procedentes de 40 vacas da raça holandesa que apresentaram mastite subclínica, em uma propriedade rural localizada no Estado de São Paulo, Brasil. Os resultados obtidos revelaram quatro diferentes padrões de resistência a antimicrobianos, sendo observada a predominância de resistência à lincomicina entre 19 (24,7%) estirpes de S.aureus. As 58 (75,3%) estirpes restantes foram sensíveis aos 12 antimicrobianos testados. A PCR-ribotipagem revelou a ocorrência de nove padrões genotípicos distintos, além de apresentar uma capacidade discriminatória maior (D = 0,82) que a obtida nos antibiogramas (D = 0,42). Entre as 19 estirpes resistentes aos antimicrobianos, 14 (73,7%) foram agrupadas em três padrões de ribotipagem e, destas, 13 (92,9%) apresentaram resistência à eritromicina e à lincomicina, isoladamente ou em associação. O grande número de ribotipos e de padrões de resistência a antimicrobianos observados nesta propriedade demonstrou que há grande heterogeneidade genética em populações naturais de S. aureus, fato este que deve ser levado em consideração em programas de controle da mastite bovina.

Fatores de risco associados à mastite bovina causada por Prototheca zopfii

Este trabalho teve como objetivo o estudo de fatores de risco associados à mastite bovina causada por Prototheca zopfii. Foram analisadas 13 propriedades leiteiras dos Estados do Paraná e de São Paulo, segundo os seguintes critérios de seleção: confirmação prévia de casos de mastite por Prototheca spp., triagem pela pesquisa de Prototheca spp. em tanques de expansão e latões e rebanhos com contagem de células somáticas acima de 5x105cel mL-1. As amostras coletadas consistiram de: leite, água, solo, fezes e swab de teteiras. Prototheca spp. foi isolada de amostras de leite dos quartos mamários com mastite clínica ou subclínica em uma propriedade e de amostras de leite e do ambiente em quatro propriedades, nas quais foi isolada em amostras de: água de bebedouro, abastecimento, esgoto, empoçada no piso de estábulo e sala de ordenha, solo de piquete e pasto, teteiras, fezes de bezerros e suínos. do total de 383 vacas examinadas, Prototheca spp. foi isolada em 20 (5,2%) vacas, sendo caracterizada como P. zopfii em 18. Os fatores de risco associados à mastite causada por P. zopfii foram: criação das vacas a pasto, alimentação dos animais com pasto e silagem, realização de ordenha mecânica em estábulo, permanência das vacas após ordenha em piquete sem alimento, criação de suínos próxima às instalações dos bovinos, existência de cães, gatos e roedores, falta de higienização dos tetos com água, pré-imersão dos tetos em aplicador com retorno e sem a troca do anti-séptico, alimentação dos bezerros com leite de vacas com mastite clínica e serem as vacas da raça holandesa.

Isolation of Candida spp. from mastitic bovine milk in Brazil

The purpose of this study was to isolate yeast (Candida) from the quarter milk of cow udders from 37 dairy farms in Brazil and to identify the different species involved in mastitis. The samples were collected between October 2002 and February 2003. Two-hundred-and-sixty milk samples from cows with clinical and subclinical mastitis were examined. Milk samples were plated onto Blood agar, Mac Conkey agar and Sabouraud dextrose agar. Forty-five (17.3%) samples were positive for the genus Candida. The Candida species isolated were C. krusei (44.5%), C. rugosa (24.5%), C. albicans (8.9%), C. guilliermondii (8.9%), and others (13.2%). We also isolated Escherichia coli (26.5%), coagulase-positive Staphylococcus (25.0%), Streptococcus spp. (8.1%), Enterobacter spp. (8.1%), and other fungi (8.1%), among others.

Estudo preliminar das mastites bovinas nos rebanhos leiteiros da região de Ilha Solteira

Estudaram-se os resultados obtidos no exame clínico da glândula mamária de 3.191 vacas mestiças e no "California Mastitis Test" (CMT) em 12.764 amostras de leite colhidas destes animais, relacionando-os com o estádio de lactação, o número de partos e a localização das afecções. O exame clínico revelou que 50 quartos apresentavam mastite e 231 mostravam-se atrofiados ou afuncionais. A aplicação do CMT indicou alterações de secreção em 1.741 quartos. A localização das afecções nos quartos foi estatisticamente semelhante, o mesmo ocorrendo com a incidência de mastite clínica com relação ao estádio de lactação. Quanto ao número de partos, não houve diferença significativa em relação à incidência de mastite clínica, porém a ocorrência de casos subclínicos foi estatisticamente superior em animais de uma a seis crias. O percentual de quartos afuncionais foi significativamente maior nos animais, acima de quatro partos.

Mastite subclínica bubalina por Aspergillus fumigatus

This research aimed to report the occurrence of subclinical mastitis in a buffalo from a study carried out with 548 milk samples of 137 Murrah and Mediterranean buffalos from seven milk properties, located in the cities of Jau, Botucatu and Sorocaba, State of São Paulo. The animals of the study were submitted to a clinical examination of the mammary gland by the inspection and to the diagnosis of clinical and subclinical mastitis by California Mastitis Test (CMT), being the milk samples later directed to the laboratory for microbiological studies and also to the test of Whiteside Modified (WSM). The isolated agents were identified by the morphological characteristics of its colonies and through microcultive staining with blue cotton. Two (02) pure fungi samples were isolated representing 2.86% of the total isolated microorganism, corresponding to two mammary rooms in one animal, and were classified as pertaining to the Aspergillus fumigatus specie. The animal in question showed reaction of ++ to the CMT in both affected rooms and negative reaction to the WSM. In this way it is concluded that the Aspergillus fumigatus participates in a discrete way as a determinant agent of bubaline subclinical mastitis, however it is important because the affected animals can act as potential reservoirs and may be able to generate the infection in human beings.

Análise fenotípica e molecular da produção de biofilmes por estirpes de staphylococcus aureus isoladas de casos de mastite subclínica bovina

Biofilm formation is considered an advantage for Staphylococcus aureus mastitis isolates, facilitating bacterial persistence in the udder. It requires attachment to mammary epithelium, proliferation and accumulation of cells in multilayers and enclosing in a polymeric matrix known as exopolysaccharide. The objective of this study was to evaluate the ability of Staphylococcus aureus isolated from bovine subclinical mastitis for formation of biofilms. A total of 94 Staphylococcus aureus strains obtained from milk samples of cows suffering from subclinical mastitis in dairy herds on two properties in the state of São Paulo were evaluated. These strains were characterized by in vitro biofilm formation, and by the presence of icaA and icaD genes which are responsible for intercellular adhesion. The results revealed that 98.9% of the isolates produced biofilm in vitro by adherence in sterile 96-well "U" bottom polystyrene tissue culture plates; 95.7% of the isolates possessed the icaA and icaD genes. These bacterial isolates biofilm producers may impair eradication of chronic mastitis, rendering antibiotherapy less effective. The detection of biofilm forming ability in mastitis isolates may provide useful information for more adequate therapeutic regimen and for preventive actions in the control of those bacterial isolates in bovine herds.

Influência da mastite subclínica estafilocócica sobre as características físico-químicas e celulares do leite

One hundred twenty-six milk samples from 63 apparently healthy cows, but positive in the California Mastitis Test were submitted to determinations of pH, acidity, density, butter-fat, total solids, non-fat solids, cryoscopic point, caseine level, chloride level and polymorphonuclear leukocytes. Forty-one cows were infected by coagulase-positive Staphylococcus and 22 by coagulase-negative Staphylococcus. The results obtained in the milk sample analysis from the healthy quarters and infected by coagulase-positive Staphylococcus showed variations of all constituents investigated. However only the pH values (F=4.17*) and the polymorphonuclear leukocytes (F=11.35**) showed significant differences. On the other hand, between the milk samples from healthy quarters and infected quarters by coagulase-negative Staphylococcus, only the polymorphonuclear leukocytes (F=16.29**) showed significant differences.

Ocorrência de mastite clínica e subclínica causada por Trichosporon beigelii em um rebanho leiteiro

Trichosporon beigelii was isolated from four and three Holstein heifers with clinical and subclinical mastitis respectively, during the extension activities of Nucleus of Mastitis Research - NUPEMAS - FMVZ - UNESP - BOTUCATU - BRAZIL. This fungus is considered extremely important because it is responsible for superficial skin infections, known as white piedra. According with literature, there is no record of isolation of this agent from mastitis in Brazil. This fact confirms the importance of microbiological studies to lead the treatment correctly to prevent the increase of bacterial resistance and secondary fungal infections that uses the inefficient antimicrobial as substratum for its development.

Mastite subclínica causada por Staphylococcus aureus: Custo-benefício da antibioticoterapia de vacas em lactação

Economic evaluation of the treatment bovine subclinical mastitis caused by S. aureus was evaluated. Two hundred and seventy udder quarters with or without subclinical mastitis were distributed into four groups, in conformity to lactational stage and treatments. Group 1 included animals treated between 10 and 60 days of lactation; group 2 included animals treated from 61 days of lactation to two months before drying; group 3 included animals no treated between 10 and 60 days of lactation; group 4 included animals no treated from 61 days of lactation to two months before drying. Treatment with gentamicin (150mg) was accomplished by intramammary doses, once a day, after performing sensitivity tests. The mammary quarters were re-evaluated after 30 days. The costs with the treatment were calculated considering a S. aureus prevalence of 5% as well as expenses with antibiotic, milk disposal, tests of drug sensitivity and workload. There was loss of income of 2% and 14% in the groups 1 and 2, respectively, when compared with the values before the treatment. In such case, the treatment of bovine subclinical mastitis caused by S. aureus in the lactation was economically unviable.

Avaliação colostral e de níveis séricos imunes de bezerros holandezes oriundos de vacas acometidas ou não por mastite

Pós-graduação em Ciência Animal - FMVA