Stable and high-level production of recombinant Factor IX in human hepatic cell line

Hemophilia B is a genetic disease of the coagulation system that affects one in 30,000 males worldwide. Recombinant human Factor IX (rhFIX) has been used for hemophilia B treatment, but the amount of active protein generated by these systems is inefficient, resulting in a high-cost production of rhFIX. In this study, we developed an alternative for rhFIX production. We used a retrovirus system to obtain two recombinant cell lines. We first tested rhFIX production in the human embryonic kidney 293 cells (293). Next, we tested a hepatic cell line (HepG2) because FIX is primarily expressed in the liver. Our results reveal that intracellular rhFIX expression was more efficient in HepG2/rhFIX (46%) than in 293/rhFIX (21%). The activated partial thromboplastin time test showed that HepG2/rhFIX expressed biologically active rhFIX 1.5 times higher than 293/rhFIX (P = 0.016). Recovery of rhFIX from the HepG2 by reversed-phase chromatography was straightforward. We found that rhFIX has a pharmacokinetic profile similar to that of FIX purified from human plasma when tested in hemophilic B model. HepG2/rhFIX cell line produced the highest levels of rhFIX, representing an efficient in vitro expression system. This work opens up the possibility of significantly reducing the costs of rhFIX production, with implications for expanding hemophilia B treatment in developing countries.

Erythroid differentiation and protoporphyrin IX down-regulate frataxin expression in Friend cells: characterization of frataxin expression compared to molecules involved in iron metabolism and hemoglobinization

Friedreich ataxia (FA) Is caused by decreased frataxin expression that results in mitochondrial iron (Fe) overload. However, the role of frataxin in mammalian Fe metabolism remains unclear. In this investigation we examined the function of frataxin in Fe metabolism by implementing a well-characterized model of erythroid differentiation, namely, Friend cells induced using dimethyl sulfoxide (DMSO). We have characterized the changes in frataxin expression compared to molecules that play key roles in Fe metabolism (the transferrin receptor [TfR] and the Fe transporter Nramp2) and hemoglobinization (beta-globin). DMSO induction of hemoglobinization results in a marked decrease in frataxin gene (Frda) expression and protein levels. To a lesser extent, Nramp2 messenger RNA (mRNA) levels were also decreased on erythroid differentiation, whereas TfR and beta-globin mRNA levels increased. Intracellular Fe depletion using desferrioxamine or pyridoxal isonicotinoyl hydrazone, which chelate cytoplasmic or cytoplasmic and mitochondrial Fe pools, respectively, have no effect on frataxin expression. Furthermore, cytoplasmic or mitochondrial Fe loading of induced Friend cells with ferric ammonium citrate, or the heme synthesis inhibitor, succinylacetone, respectively, also had no effect on frataxin expression. Although frataxin has been suggested by others to be a mitochondrial ferritin, the lack of effect of intracellular Fe levels on frataxin expression is not consistent with an Fe storage role. Significantly, protoporphyrin IX down-regulates frataxin protein levels, suggesting a regulatory role of frataxin in Fe or heme metabolism. Because decreased frataxin expression leads to mitochondrial Fe loading in FA, our data suggest that reduced frataxin expression during erythroid differentiation results in mitochondrial Fe sequestration for heme biosynthesis. (C) 2002 by The American Society of Hematology.

Avaliação preliminar do Serviço de Saúde Escolar da IX Região Administrativa, Rio de Janeiro: estudo da população coberta e análise operacional de um subprograma

Foi realizada uma avaliação preliminar do Serviço de Saúde Escolar da IX Região Administrativa do Estado do Rio de Janeiro, como resultado do convênio firmado entre o Instituto de Medicina Social da Universidade do Estado do Rio de Janeiro e a Secretaria de Saúde do Estado. Através de estudo do nível de saúde entre os escolares e da análise operacional do subprograma de Registro de Saúde, diagnosticaram-se elevados índices de morbidade e pequena proporção de crianças com assistência médica prévia, além de determinar-se a efetividade do programa e de identificar-se problemas no processo técnico-administrativo do Serviço. Dentre as conclusões destaca-se a necessidade de completar a avaliação do Serviço, através da determinação dos critérios de eficiência, eficácia e rendimento, tendo em vista o fornecimento de subsídios para as tarefas de planejamento e administração. É enfatizada a necessidade de ampliação das medidas integradoras dos serviços universitários com os serviços da comunidade, no sentido de fornecer aos primeiros as condições de realizar, através de prestação de serviços, uma formação dos recursos humanos de acordo com a situação de saúde da comunidade, e aos segundos a necessária implementação de novas técnicas e modelos de assistência.

Aspectos ecológicos da tripanossomíase americana: IX - Variação e mobilidade de Panstrongylus megistus em ecótopos artificiais

Nas colônias de Panstrongylus megistus desenvolvidas espontaneamente em galinheiros experimentais foram observadas a variação, a permanência e a mobilidade de seus componentes. Observou-se certo antagonismo entre adultos e formas imaturas aqueles apresentando-se com maior abundância no segundo semestre do ano. A permanência, para a maioria dos indivíduos, foi maior para as ninfas de 5º estádio sendo que certo número de fêmeas tenderam a permanecer nas colônias por tempo superior a quatro meses. Alguns indivíduos mostraram certo grau de mobilidade, transferindo-se de um galinheiro para o outro ou reaparecendo no mesmo ecótopo após ausências de até oito meses. Esses achados evidenciam apreciável valência ecológica dessa população e a tendência à invasão de ecótopos artificiais que apresentem condições microclimáticas comparáveis às dos naturais.

Estudo das condições de saúde das crianças do Município de São Paulo (Brasil), 1984/1985: IX - Cobertura e qualidade da assistência materno-infantil

Como parte de investigação epidemiológica sobre condições de saúde na infância, foram estudadas a cobertura e a qualidade da assistência materno-infantil prestada à população do Município de São Paulo. Todas as estimativas do estudo baseiam-se em dados obtidos através de inquérito recordatório aplicado a uma amostra representativa de crianças menores de cinco anos residentes no Município (n = 1.016). A cobertura da assistência pré-natal foi estimada em 92,9%, sendo que em cerca de 70% dos casos a assistência foi iniciada no primeiro trimestre de gestação e o número de consultas realizadas foi de seis ou mais. A cobertura da assistência hospitalar ao parto foi estimada em 99,0%, observando-se que 47,1% das crianças nasceram através de cesareanas. A cobertura da assistência de puericultura foi estimada em 98,0%, sendo que em dois terços das vezes a assistência foi iniciada nos primeiros dois meses de vida. Ainda com relação à puericultura, pôde-se observar: grande concentração de consultas no primeiro ano de vida (em média 7,7 consultas), percentagem relativamente alta de crianças vacinadas (Sabin = 86,7%, Tríplice = 85,1%, BCG = 89,0%, Anti-sarampo = 85,9%), decréscimo expressivo de consultas após a idade de doze meses e pequena proporção de crianças com assistência odontológica (19,5%). A estratificação social da população revelou diferenciais sócio-econômicos mínimos quanto à cobertura geral da assistência materno-infantil, observando-se, entretanto, diferenças expressivas quanto a aspectos qualitativos da assistência. Comparando-se o presente inquérito com outros realizados no país, observa-se que a situação de São Paulo apresenta-se mais favorável do que a observada no conjunto das áreas urbanas brasileiras. Verifica-se também que tem sido positiva a evolução recente da assistência materno-infantil no Município. As principais deficiências ainda encontradas dizem respeito a características relacionadas à qualidade da assistência, sendo imprescindível, sobretudo nos estratos populacionais de pior nível sócio-econômico, elevar a cobertura da assistência pré-natal precoce e a cobertura de puericultura após o primeiro ano de vida. Um item especialmente preocupante relacionado à assistência ao parto foi a alta incidência de cesareanas, uma das maiores já registrada em uma população.

IX International conference on Remote Engineering and Virtual instrumentation REV 2012

THE ninth edition of the International Conference on Remote Engineering and Virtual Instrumentation (REV) [1] was held at the Faculty of Engineering of the University of Deusto, Bilbao (Spain), from the 4th to the 6th of July, 2012. A world-class research community in the subject of remote and virtual laboratories joined the event.

Fucosyltransferase IX: characterization and biological role

α3/4-Fucosyltransferases (α3/4-FUTs) are glycosyltransferases (GTs) that catalyze the transfer of fucose in an α3/4-linkage onto the N-acetylglucosamine residue from acceptors containing the type II or type I (Galβ4/3GlcNAc, respectively) structures, thus synthesizing the fucosylated Lewis (Le) carbohydrate determinants. Fucosyltransferase IX (FUT9), the most recently identified member of the family, presents the higher divergence from the other FUTs and its sequence is the only highly conserved among species. FUT9 synthesizes the Lewisx (Lex) epitope (Galβ4(Fucα3)GlcNAc). Recent evidence has suggested that it is the enzyme responsible for the synthesis of Lex in the mouse brain. Lex expression has been described in glycoproteins, proteoglycans and glycolipids from the central nervous system (CNS) of diverse species, including rodents and humans.

Análise do uso da energia na FCT-UNL (edifícios II, VII, VIII, IX e X) e estudo dos comportamentos relativos ao uso da energia

Dissertação apresentada na Faculdade de Ciências e Tecnologia da Universidade Nova de Lisboa para a obtenção do grau de Mestre em Engenharia do Ambiente, perfil Gestão e Sistemas Ambientais

Epidemiologia da doença de Chagas no Ceará IX - estudo de vetores numa área endêmica (Morada Nova)

Os autores apresentaram informações sobre 6.556 triatomíneos capturados na área pela SUCAM, de 1964 a 1974, os quais apresentavam T. cruzi em 4,7%. O estudo atual revelou 1.290 exemplares em 69 localidades trabalhadas, 63,8% com triatomíneos, das quais 52,3% apresentavam triatomíneos infectados, o que significa 33,3% da área. Foram pesquisados ecótopos artificiais distante até 200 metros das casas. Dos 37 ecótopos naturais pesquisados, 73,6% eram habitados por morcegos, 23,7% por preás e 5,2% por punarés, espécies que apresentam variáveis taxas de infecção por T. cruzi. O T. brasiliensis corresponde a 65,5% dos triatomíneos capturados e 942% dos triatomíneos infectados são desta espécie, considerada a principal transmissora de Doença de Chagas na região. Em ecótopos naturais é a única espécie encontrada (10 vezes em 55, os triatomíneos estavam infectados). Dentro das habitações a espécie é menos abundante e menos infectada (2,7%). A segunda espécie é o T. pseudomaculata, (34,3%) considerada sem importância na transmissão da Doença de Chagas; a terceira espécie é o P. megistus, da qual foram capturados apenas 2 exemplares (0,2%).

Lista das espécies e gêneros de Culicídeos encontrados nos estados do Brasil. IX. Maranhão (Diptera, Culicidae)

RESUMOA distribuição dos culicídeos, faz-se representar por 8 tribos, 14 gêneros e 65 espécies em 54 localidades pertencentes a 29 dos 130 municípios existentes no Estado (IBGE, 1980).

Tropical American plants, IX / Louis O. Williams.

v.31:no.18(1968)

Austral Hepaticae IX : Anastrophyllum tristanianum, a new species from Tristan da Cunha / John J. Engel.

v.38:no.7(1977)