Efecto de los hits de un cribado HTS en la estructura y función de mutantes de nucleofosmina asociados a leucemia mieloide aguda

Validación térmica de un compuesto estabilizador de nucleofosmina seleccionado en un estudio HTS y análisis de dicho compuesto en células HeLa portadoras de la mutación que más comunmente causa la leucemia mieloide aguda.

Estudio de la unión de la calmodulina al canal de potasio Eag I y el efecto de esta unión en la tetramerización del canal.

Estudio de la unión de la calmodulina al canal de potasio Eag I y el efecto de esta unión en la tetramerización del canal.

Papel de E2F1 y E2F2 en la instauración de esteatosis inducida por dieta rica en grasa

Los factores de transcripción E2F son cruciales en la transición G1/S del ciclo celular. El factor de transcripción E2F1 regula el metabolismo oxidativo y su falta genera resistencia a obesidad. Se desconoce si E2F1 y E2F2 están implicados en la regulación de la homeostasis metabólica hepática. Por ello, el objetivo fue investigar el papel de E2F1 y E2F2 en la modulación del metabolismo lipídico hepático y su repercusión a nivel orgánico. Se utilizaron ratones macho de 3 meses E2F1-/-, E2F2-/- y sus controles que serán alimentados con dieta control o rica en grasa (HFD) durante 10 semanas. Se analizaron parámetros séricos en estado de alimento y tras 13 horas de ayuno. Se investigaron in vivo los flujos metabólicos hepáticos implicados en la disponibilidad de fosfolípidos, diglicéridos y triglicéridos (TG) tras administración de sustratos radiactivos.

Papel de la N-nervonil esfingomielina en la organización lateral y la estabilidad nanomecánica de bicapas lipídicas

Los lípidos de las membranas biológicas no son perfectamente miscibles entre sí, con frecuencia dan origen a “dominios” bidimensionales separados lateralmente cuando se resuspenden en agua. Las mezclas esfingomielina/dioleilfosfatidilcolina/colesterol dan origen con frecuencia a dominios, pero esto no ocurre cuando la esfingomielina es insaturada (p. ej. N-nervonil esfingomielina). En este trabajo se han aplicado técnicas calorimétricas y estructurales para estudiar el comportamiento de mezclas N-nervonil esfingomielina/dioleilfosfatidilcolina/colesterol/ceramida. En presencia de ceramida y de N-nervonil esfingomielina se observa formación de dominios laterales, al contrario de lo que ocurría en ausencia de ceramida.

Actividad de receptores muscarínicos y cannabinoides tras un tratamiento subcrónico con el agonista cannabinoide WIN55,212-2

La enfermedad de Alzheimer es el desorden neurológico relacionado con la edad más común en la actualidad que se caracteriza por la neuroinflamación y por la pérdida de neuronas colinérgicas asociada a una disfunción progresiva de la memoria y de la cognición. Este trabajo estudia la relación entre el sistema cannabinoide y la enfermedad de Alzheimer, para demostrar que lo cannabinoides sintéticos se muestran como potenciales herramientas farmacológicas para el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas, sobre todo asociadas a déficits cognitivos, como podría ser la enfermedad de Alzheimer.

Caracterización celular y funcional del receptor para colágeno DDR1 en la respuesta del microambiente al tumor metastásico.

El cáncer se ha considerado una enfermedad definida y dirigida por la inestabilidad genómica, las alteraciones cromosómicas y las mutaciones genéticas. Sin embargo, en la actualidad, la influencia de las células estromales no malignas del microambiente tumoral está claramente establecida. Los tumores son tejidos complejos, compuestos no sólo por las células malignas, sino también, por células estromales genéticamente estables, incluyendo a fibroblastos y macrófagos además de la matriz extracelular que producen. Al igual que en órganos sanos, estos compartimentos del microambiente no son meros espectadores, sino que regulan críticamente la iniciación tumoral, la progresión maligna y la metástasis. Más aún, los diferentes tipos estromales en diferentes contextos pueden exhibir capacidades promotoras u opuestas al tumor.

Caracterización del estado oligomérico y de los potenciales ligandos del dominio cNMP del transportador de magnesio CNNM4

El proyecto se centra en la sobreexpresión y purificación de dominios intracelulares del transportador de magnesio humano CNNM4, con la finalidad de determinar la interacción del dominio cNMP con diferentes ligandos potencialmente implicados en su regulación y transporte.

Estudio de la interacción entre los canales Kv7.2 y la calmodulina utilizando la técnica Bimolecular Fluorescence Complementation (BiFC)

Empleo de la técnica BiFC para estudiar la interacción entre los canales Kv7.2 y la CaM. Para ello se realizan clonajes, se co-transfectan distintas combinaciones de éstos en células de mamífero y se analiza y cuantifica la intensidad de fluorescencia obtenida mediante microscopía confocal.

Expresión y exportación del fragmento formador de poros de colicina A: Formación de un complejo inactivo con su proteína de inmunidad

La colicinas son bacteriocinas producidas por cepas de Escherichia coli y letales para otras cepas relacionadas. Este trabajo está enfocado a la interacción proteína-proteína del complejo funcional caa-cai. Las interacciones proteína-proteína dentro de la membrana han sido tradicionalmente muy difíciles de cuantificar. Sin embargo, publicaciones anteriores han demostrado que el sistema caa-cai representa un complejo eficaz a la hora de inhibir la actividad tóxica de caa. Además, este complejo posee dos ventajas principales que facilitan su estudio: la interacción debe tener una alta afinidad y se debe poder medir in vivo de forma indirecta. El objetivo principal de esta memoria reside en la optimización de las condiciones de sobreexpresión del complejo funcional caa-cai. La formación del complejo en el sistema natural implica el acceso de ambas proteínas desde lados opuestos de la IM de la bacteria. Con el fin de mimetizar este escenario es necesario inducir la exportación del fragmento pf-caa al periplasma celular tras su sobreexpresión.

Variantes genéticas en ANRIL y longevidad

[ES] En este trabajo se ha analizado el efecto de 4 tag-SNPs localizados en la región promotora del ARN no codificante ANRIL en la población longeva. Se cree que la desregulación de ANRIL podría estar asociada a la longevidad, considerando que esta desregulación podría ser debida a variantes genéticas en la región promotora del mismo. Idioma: Español.

Molecular epidemiology of the heterosexual HIV-1 transmission in Kunming, Yunnan Province of China suggests origin from the local IDU epidemic

Molecular epidemiological investigation was conducted among injecting drug users (IDUs) (n = 11) and heterosexuals (n = 15) in Kunming, Yunnan Province of China. HIV-1 genotypes were determined based on the nucleotide sequences of 2.6-kb gag-RT region. The distribution of genotypes among IDUs was as follows: CRF07_BC (5/11) and CRF08_BC (5/11); subtype B' (1/11). Similarly, a majority of Kunming heterosexuals (14/15) were infected with CRF07_BC (4/15), CRF08_BC (6/15), or subtype B' (4/15), known to predominate among IDUs in China. This contrasts with trends in the coastal regions of China and surrounding southeastern Asian countries, where CRF01_AE predominates among heterosexuals. The heterosexual HIV-1 epidemic in Kunming thus appears to derive from the local IDU epidemic. Of note, subtype B' was the most prevalent strain among heterosexuals before 1997, while CRF07_BC and CRF08_BC became predominant in 2002, indicating a transition of HIV-1 genotype distribution between the early and the more recent samples from Kunming heterosexuals.

Molecular phylogeny of three subspecies of common carp Cyprinus carpio, based on sequence analysis of cytochrome b and control region of mtDNA

The complete cytochrome b and the control region of mtDNA (about 2070 bp in total) of 10 strains belonging to three subspecies of the common carp, including three wild subspecies (the Yangtze River wild common carp - Cyprinus carpio haematopterus, Yuanjiang River wild common carp Cyprinus carpio rubrofuscus and Volga River wild common carp - Cyprinus carpio carpio) and seven domestic strains (Xingguo red carp, Russian scattered scaled mirror carp, Qingtian carp, Japanese Koi carp, purse red carp, Big-belly carp, German mirror carp) were sequenced. Phylogenetic analysis indicated that the 10 strains form three distinct clades, corresponding to C. c. haematopterus, C. c. rubrofuscus and C. c. carpio respectively. Purse red carp, an endemic domestic strain in Jiangxi province of China, showed a higher evolution rate in comparison with the other strains of C. c. haematopterus, most probably because of intensive selection and a long history of domestication. Base variation ratios among the three subspecies varied from 0.78% (between C. c. haematopterus and C. c. rubrofuscus) to 1.47%(between C. c. carpio and C. c. rubrofuscus). The topography of the phylogenetic tree and the geographic distribution of three subspecies closely resemble each other. The divergence time between C. c. carpio and the other two subspecies was estimated to be about 0.9 Myr and about 0.5 Myr between C. c. haematopterus and C. c. rubrofuscus. Based on phylogenetic analysis, C. c. rubrofuscus might have diverged from C. c. haematopterus.

Molecular characterization and expression of the M6 gene of grass carp hemorrhage virus (GCHV), an aquareovirus - Brief report

7The complete nucleotide sequence of M6 gene of grass carp hemorrhage virus (GCHV) was determined. It is 2039 nucleotides in length and contains a single large open reading frame that could encode a protein of 648 amino acids with predicted molecular mass of 68.7 kDa. Amino acid sequence comparison revealed that the protein encoded by GCHV M6 is closely related to the protein mul of mammalian reovirus. The M6 gene, encoding the major outer-capsid protein, was expressed using the pET fusion protein vector in Escherichia coli and detected by Western blotting using chicken anti-GCHV immunoglobulin (IgY). The result indicates that the protein encoded by M6 may share a putative Asn-42-Pro-43 proteolytic cleavage site with mul.

Molecular dynamics simulation of observed c(4x4) and c(4x3) C60 alignments on the Si(100) reconstructed surface.

We have implemented a large-scale classical molecular dynamics simulation at constant temperature to provide a theoretical insight into the results of a recently performed experiment on the monolayer and multi-layer formations of molecular films on the Si(100) reconstructed dimerized surface. Our simulation has successfully reproduced all of the morphologies observed on the monolayer film by this experiment. We have obtained the formation of both c(4 4) and c(4 3) structures of the molecules and have also obtained phase transitions of the former into the latter.