Production of xylo-oligosaccharides by immobilized-stabilized derivatives of endo-xylanase from Streptomyces halstedii

An endoxylanase from Streptomyces halstedii was stabilized by multipoint covalent immobilization on glyoxyl-agarose supports. The immobilized enzyme derivatives preserved 65% of the catalytic activity corresponding to the one of soluble enzyme that had been immobilized. These immobilized derivatives were 200 times more stable 200 times more stable than the one-point covalently immobilized derivative in experiments involving thermal inactivation at 60 °C. The activity and stability of the immobilized enzyme was higher at pH 5.0 than at pH 7.0. The optimal temperature for xylan hydrolysis was 10 °C higher for the stabilized derivative than for the non-stabilized derivative. On the other hand, the highest loading capacity of activated 10% agarose gels was 75 mg of enzyme per mL of support. To prevent diffusional limitations, low loaded derivatives (containing 0.2 mg of enzyme per mL of support) were used to study the hydrolysis of xylan at high concentration (close to 1% (w/v)). 80% of the reducing sugars were released after 3 h at 55 °C. After 80% of enzymatic hydrolysis, a mixture of small xylo-oligosaccharides was obtained (from xylobiose to xylohexose) with a high percentage of xylobiose and minimal amounts of xylose. The immobilized-stabilized derivatives were used for 10 reaction cycles with no loss of catalytic activity. © 2013 Elsevier Ltd. All rights reserved.

Caracterização biofísica e estrutural da metaloproteinase não-hemorrágica do veneno de Bothrops moojeni e da endo-β-glicanase do Bacillus subtilis

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Produção de xilanases por Aspergillus niger utilizando planejamento experimental: purificação de xilanase

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Clonagem e expressão heteróloga do gene de uma xilanase de Thermoascus aurantiacus em Pichia pastoris

Pós-graduação em Microbiologia - IBILCE

Produção de xilanase por fungos filamentosos isolados de solo de área de caatinga

Pós-graduação em Ciências Biológicas (Microbiologia Aplicada) - IBRC

Xilanase de Penicillium chrysogenum: produção em um resíduo agroindustrial, purificação e propriedades bioquímicas

Pós-graduação em Ciências Biológicas (Microbiologia Aplicada) - IBRC

Avaliação da biocompatibilidade e citotoxicidade dos cimentos: Endo-CPM-Sealer, Sealapex e Ângelus MTA

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Isolamento e seleção de micro-organismos produtores de xilanase

Pós-graduação em Agronomia - FEIS

Aplicação de xilanase e/ou ciclodextria glicotransferase (CGTase) na produção de pães

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Isolamento de fungo produtor de enzimas xilanolíticas: produção e caracterização de xilanase

Pós-graduação em Alimentos e Nutrição - FCFAR

Avaliação da biocompatibilidade e do processo de reparo dos cimentos endodônticos: MTA Fillapex, Endo-CPM-Sealer e Sealapex

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Modular Hyperthermostable Bacterial Endo-beta-1, 4-Mannanase: Molecular Shape, Flexibility and Temperature-Dependent Conformational Changes

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

ENDO-OLIGOPEPTIDASE-A, A PUTATIVE ENKEPHALIN-GENERATING ENZYME, IN THE VERTEBRATE RETINA

Endo-oligopeptidase A, EC 3.4.22.19, converts small enkephalin-containing peptides into the corresponding enkephalins in vitro. We investigated the presence of endooligopeptidase A in the retina and its possible colocalization with enkephalins in retinal neurons. The specific activity of endo-oligopeptidase A found in pigeon retinae (30.3 +/- 7.3 mU/mg, mean +/- standard deviation) was four times higher than in rabbit retinae (7.0 +/- 1.1 mU/mg). The enzyme activity was not modified by EDTA, but it was enhanced by dithiothreitol and inhibited by zinc and 5,5'-dithiobis(2-nitrobenzoic acid). Immunohistochemical experiments with a purified antiserum against rabbit endo-oligopeptidase A revealed labeled neurons in both the inner nuclear layer and the ganglion cell layer of pigeon and rabbit retinae. Double-labeling immunofluorescence experiments demonstrated that about 90% of neurons containing endo-oligopeptidase A-like immunoreactivity also contained [Leu5]-enkephalin-like immunoreactivity. These colocalization results may represent an important step toward the demonstration of the possible involvement of endo-oligopeptidase A in enkephalin generation in vivo.

Produção de xilanase e xilosidase por Aspergillus versicolor

Os fungos são microrganismos heterótrofos e desenvolvem-se bem sobre os mais variados substratos orgânicos. O fungo filamentoso Aspergillus versicolor foi utilizado nesse trabalho para a produção das enzimas xilanase e xilosidase. Essas enzimas são importante para algumas indústrias tais como: indústria de papel, sucos e cervejarias. Os esporos e conídios foram obtidos em meio sólido ágar-aveia e foram inóculados em meio líquido, nos quais as fontes de carbono foram xilana, pó sabugo de milho e pó bagaço de cana-de-açúcar. Houve uma maior produção de proteínas no meio intracelular (0,21 mg/mL) em relação ao meio extracelular (0,0171 mg/mL). A atividade da enzima xilanase foi maior no meio extracelular (0,177 U/mL) e em relação a enzima xilosidase foi maior no meio intracelular (0,034 U/mL). Foi possível mostrar através da cromatografia ascendente em sílica gel os produtos hidrolíticos formados. Também foi avaliado as diferenças nos perfis protéicos das amostras contendo as enzimas extracelulares e intracelulares. A boa atividade de xilosidade obtida do micélio traz perspectivas para estudos de imobilização multipontual em suportes sólidos objetivando a produção de xilose