Alterations in the steroid hormone receptor co-chaperone FKBPL are associated with male infertility: a case-control study

Background: Male infertility is a common cause of reproductive failure in humans. In mice, targeted deletions of the genes coding for FKBP6 or FKBP52, members of the FK506 binding protein family, can result in male infertility. In the case of FKBP52, this reflects an important role in potentiating Androgen Receptor (AR) signalling in the prostate and accessory glands, but not the testis. In infertile men, no mutations of FKBP52 or FKBP6 have been found so far, but the gene for FKBP-like (FKBPL) maps to chromosome 6p21.3, an area linked to azoospermia in a group of Japanese patients.

Differential expression of steroid 5 alpha-reductase isozymes and association with disease severity and angiogenic genes predict their biological role in prostate cancer

The biological role of steroid 5 alpha-reductase isozymes (encoded by the SRD5A1 and SRD5A2 genes) and angiogenic factors that play important roles in the pathogenesis and vascularization of prostate cancer (PC) is poorly understood. The sub-cellular expression of these isozymes and vascular endothelial growth factor (VEGF) in PC tissue microarrays (n=62) was examined using immunohistochemistry. The effect of SRD5A inhibition on the angiogenesis pathway genes in PC was also examined in prostate cell lines, LNCaP, PC3, and RWPE-1, by treating them with the SRD5A inhibitors finasteride and dutasteride, followed by western blot, quantitative PCR, and ELISA chip array techniques. In PC tissues, nuclear SRD5A1 expression was strongly associated with higher cancer Gleason scores (P=0.02), higher cancer stage (P=0.01), and higher serum prostate specific antigen (PSA) levels (P=0.01), whereas nuclear SRD5A2 expression was correlated with VEGF expression (P=0.01). Prostate tumor cell viability was significantly reduced in dutasteride-treated PC3 and RWPE-1 cells compared with finasteride-treated groups. Expression of the angiogenesis pathway genes transforming growth factor beta 1 (TGFB1), endothelin (EDN1), TGF alpha (TGFA), and VEGFR1 was upregulated in LNCaP cells, and at least 7 out of 21 genes were upregulated in PC3 cells treated with finasteride (25 mu M). Our findings suggest that SRD5A1 expression predominates in advanced PC, and that inhibition of SRD5A1 and SRD5A2 together was more effective in reducing cell numbers than inhibition of SRD5A2 alone. However, these inhibitors did not show any significant difference in prostate cell angiogenic response. Interestingly, some angiogenic genes remained activated after treatment, possibly due to the duration of treatment and tumor resistance to inhibitors. Endocrine-Related Cancer (2010) 17 757-770

Steroid injection for inferior heel pain: a randomised controlled trial

BACKGROUND:

Plantar fasciitis is a common cause of heel pain. The aim of this study was twofold: to compare steroid injection with placebo injection and to compare ultrasound guided with unguided steroid injection in the management of this condition.

METHODS:

65 patients with inferior heel pain were recruited between November 2008 and June 2011. Heel pain was measured using a visual analogue scale (VAS) at baseline and follow-up 6 and 12 weeks after injection.

RESULTS:

22 patients were randomised to ultrasound guided steroid injection, 21 patients to palpation guided steroid injection and 22 to ultrasound guided placebo injection. There was a significant difference in VAS scores between the groups at 6 and 12 weeks (p=0.018 and p=0.004, respectively). There was a 19.7 (95% CI 2.5 to 37.0) difference in mean VAS scores at 6 weeks between the ultrasound guided steroid group and the placebo group and a 24.0 (95% CI 6.6 to 41.3) difference between the unguided steroid group and the placebo group at 6 weeks. At 12 weeks, the mean difference was 25.1 (95% CI 6.5 to 43.6) and 28.4 (95% CI 11.1 to 45.7) respectively between both steroid injection groups and the placebo group. There was no difference in VAS scores following steroid injection between the ultrasound guided and the unguided groups at either time point. Plantar fascia thickness was significantly reduced after injection in both active treatment groups (p=0.00).

CONCLUSIONS:

In this study, steroid injection showed a clear benefit over placebo at 6 weeks and this difference was maintained at 12 weeks.Trial Registration No ISRCTN79628180 (www.controlled-trials.com).

Interventions to prevent steroid-induced osteoporosis and osteoporotic fractures in Duchenne muscular dystrophy (Protocol)

This is the protocol for a review and there is no abstract. The objectives are as follows:

Primary objective: To assess the effects of interventions to delay or treat osteoporosis in DMD patients treated with glucocorticoid steroids.

Secondary objectives: To assess the effects of interventions to delay or treat osteoporosis in DMD on the frequency of vertebral fragility fractures and long bone fractures in DMD patients treated with glucocorticoid steroids.

Thermal properties and eutectic behaviour of dapivirine in combination with steroid hormones and other antiretrovirals

Background: Combination drug products can display thermal behaviour that is more complex than for the corresponding single drug products. For example, the contraceptive vaginal ring (VR) Nuvaring contains a eutectic (lowest melting) composition of etonogestrel (ETN) and ethinyl estradiol. Here we report the predisposition of dapivirine (DPV) to form reduced melting/eutectic mixtures when combined with other contraceptive hormones and antiretrovirals, and discuss the implications for development of combination microbicide and multipurpose prevention technology (MPT) products.
Methods: Binary mixtures of DPV with darunavir (DRV), levonorgestrel (LNG), ETN or maraviroc (MVC) were prepared either by physical mixing or by solvent evaporation. Selected binary mixtures were also incorporated into silicone elastomer (SE) VR devices. Thermal behavior of the mixtures was analyzed using differential scanning calorimetry (DSC) operating in standard heating ramp mode (10 °C/min). DSC data were used to construct two component phase diagrams for each binary system.
Results: Drug mixtures typically showed reduced melting transitions for both drug components, with clear evidence for a eutectic mixture at a well-defined intermediate composition. Eutectic temperatures and compositions for the various mixtures were: 40% DPV / 60% ETN - 170°C; 25% DPV / 75% MVC - 172°C; 65% DPV / 35% LNG - 192°C. In each case, the eutectic composition was also detected when the drug mixtures were incorporated into SE VRs. For the DPV/DRV system, the thermal behaviour is complicated by desolvation from the darunavir ethanolate polymorph.
Conclusions: When DPV is combined with small molecular weight hydrophobic drugs, the melting temperature for both drugs is typically reduced to a degree dependent on the composition of the mixture. At specified compositions, a low melting eutectic system results. The formation of eutectic behavior in binary drug systems needs to be carefully characterised in order to define product performance and drug release.

Investigating the role of potential genetic markers that can predict risk for steroid refractory inflammatory bowel disease

Contexte - La variation interindividuelle de la réponse aux corticostéroïdes (CS) est un problème important chez les patients atteints de maladies inflammatoires d’intestin. Ce problème est bien plus accentué chez les enfants avec la prévalence de la corticodépendance extrêmement (~40 %) élevée. La maladie réfractaire au CS a des répercussions sur le développement et le bien-être physique et psychologique des patients et impose des coûts médicaux élevés, particulièrement avec la maladie active comparativement à la maladie en rémission, le coût étant 2-3 fois plus élevé en ambulatoire et 20 fois plus élevé en hôpital. Il est ainsi primordial de déterminer les marqueurs prédictifs de la réponse aux CS. Les efforts précédents de découvrir les marqueurs cliniques et démographiques ont été équivoques, ce qui souligne davantage le besoin de marqueurs moléculaires. L'action des CS se base sur des processus complexes déterminés génétiquement. Deux gènes, le ABCB1, appartenant à la famille des transporteurs transmembraneaux, et le NR3C1, encodant le récepteur glucocorticoïde, sont des éléments importants des voies métaboliques. Nous avons postulé que les variations dans ces gènes ont un rôle dans la variabilité observée de la réponse aux CS et pourraient servir en tant que les marqueurs prédictifs. Objectifs - Nous avons visé à: (1) examiner le fardeau de la maladie réfractaire aux CS chez les enfants avec la maladie de Crohn (MC) et le rôle des caractéristiques cliniques et démographiques potentiellement liés à la réponse; (2) étudier l'association entre les variantes d'ADN de gène ABCB1 et la réponse aux CS; (3) étudier les associations entre les variantes d'ADN de gène NR3C1 et la réponse aux CS. Méthodes - Afin d’atteindre ces objectifs, nous avons mené une étude de cohorte des patients recrutés dans deux cliniques pédiatriques tertiaires de gastroentérologie à l’Ottawa (CHEO) et à Montréal (HSJ). Les patients avec la MC ont été diagnostiqués avant l'âge de 18 ans selon les critères standard radiologiques, endoscopiques et histopathologiques. La corticorésistance et la corticodépendance ont été définies en adaptant les critères reconnus. L’ADN, acquise soit du sang ou de la salive, était génotypée pour des variations à travers de gènes ABCB1 et NR3C1 sélectionnées à l’aide de la méthodologie de tag-SNP. La fréquence de la corticorésistance et la corticodépendance a été estimée assumant une distribution binomiale. Les associations entre les variables cliniques/démographiques et la réponse aux CS ont été examinées en utilisant la régression logistique en ajustant pour des variables potentielles de confusion. Les associations entre variantes génétiques de ABCB1 et NR3C1 et la réponse aux CS ont été examinées en utilisant la régression logistique assumant différents modèles de la transmission. Les associations multimarqueurs ont été examinées en utilisant l'analyse de haplotypes. Les variantes nongénotypées ont été imputées en utilisant les données de HAPMAP et les associations avec SNPs imputés ont été examinées en utilisant des méthodes standard. Résultats - Parmi 645 patients avec la MC, 364 (56.2%) ont reçu CS. La majorité de patients étaient des hommes (54.9 %); présentaient la maladie de l’iléocôlon (51.7%) ou la maladie inflammatoire (84.6%) au diagnostic et étaient les Caucasiens (95.6 %). Huit pourcents de patients étaient corticorésistants et 40.9% - corticodépendants. Le plus bas âge au diagnostic (OR=1.34, 95% CI: 1.03-3.01, p=0.040), la maladie cœxistante de la région digestive supérieure (OR=1.35, 95% CI: 95% CI: 1.06-3.07, p=0.031) et l’usage simultané des immunomodulateurs (OR=0.35, 95% CI: 0.16-0.75, p=0.007) ont été associés avec la corticodépendance. Un total de 27 marqueurs génotypés à travers de ABCB1 (n=14) et NR3C1 (n=13) ont été en l'Équilibre de Hardy-Weinberg, à l’exception d’un dans le gène NR3C1 (rs258751, exclu). Dans ABCB1, l'allèle rare de rs2032583 (OR=0.56, 95% CI: 0.34-0.95, p=0.029) et génotype hétérozygote (OR=0.52, 95% CI: 0.28-0.95 p=0.035) ont été négativement associes avec la dépendance de CS. Un haplotype à 3 marqueurs, comprenant le SNP fonctionnel rs1045642 a été associé avec la dépendance de CS (p empirique=0.004). 24 SNPs imputés introniques et six haplotypes ont été significativement associés avec la dépendance de CS. Aucune de ces associations n'a cependant maintenu la signification après des corrections pour des comparaisons multiples. Dans NR3C1, trois SNPs: rs10482682 (OR=1.43, 95% CI: 0.99-2.08, p=0.047), rs6196 (OR=0.55, 95% CI: 0.31-0.95, p=0.024), et rs2963155 (OR=0.64, 95% CI: 0.42-0.98, p=0.039), ont été associés sous un modèle additif, tandis que rs4912911 (OR=0.37, 95% CI: 0.13-1.00, p=0.03) et rs2963156 (OR=0.32, 95% CI: 0.07-1.12, p=0.047) - sous un modèle récessif. Deux haplotypes incluant ces 5 SNPs (AAACA et GGGCG) ont été significativement (p=0.006 et 0.01 empiriques) associés avec la corticodépendance. 19 SNPs imputés ont été associés avec la dépendance de CS. Deux haplotypes multimarqueurs (p=0.001), incluant les SNPs génotypés et imputés, ont été associés avec la dépendance de CS. Conclusion - Nos études suggèrent que le fardeau de la corticodépendance est élevé parmi les enfants avec le CD. Les enfants plus jeunes au diagnostic et ceux avec la maladie coexistante de la région supérieure ainsi que ceux avec des variations dans les gènes ABCB1 et NR3C1 étaient plus susceptibles de devenir corticodépendants.

Transforaminal versus intra-articular facet steroid injections for the treatment of cervical radiculopathy : a randomized, double-blinded, controlled study.

Cette étude a été subventionnée par le Fonds de recherche du Québec - Santé (FRQ-S, grant # 21230 – 2)

Integration of steroid hormone initiated membrane action to genomic function in the brain

Estrogen is a ligand for the estrogen receptor (ER), which on binding 17beta-estradiol, functions as a ligand-activated transcription factor and regulates the transcription of target genes. This is the slow genomic mode of action. However, rapid non-genomic actions of estrogen also exist at the cell membrane. Using a novel two-pulse paradigm in which the first pulse rapidly initiates non-genomic actions using a membrane-limited estrogen conjugate (E-BSA), while the second pulse promotes genomic transcription from a consensus estrogen response element (ERE), we have demonstrated that rapid actions of estrogen potentiate the slower transcriptional response from an ERE-reporter in neuroblastoma cells. Since rapid actions of estrogen activate kinases, we used selective inhibitors in the two-pulse paradigm to determine the intracellular signaling cascades important in such potentiation. Inhibition of protein kinase A (PKA), PKC, mitogen activated protein kinase (MAPK) or phosphatidylinositol 3-OH kinase (PI-3K) in the first pulse decreases potentiation of transcription. Also, our data with both dominant negative and constitutive mutants of Galpha subunits show that Galpha(q) initiates the rapid signaling cascade at the membrane in SK-N-BE(2)C neuroblastoma cells. We discuss two models of multiple kinase activation at the membrane Pulses of estrogen induce lordosis behavior in female rats. Infusion of E-BSA into the ventromedial hypothalamus followed by 17beta-estradiol in the second pulse could induce lordosis behavior, demonstrating the applicability of this paradigm in vivo. A model where non-genomic actions of estrogen couple to genomic actions unites both aspects of hormone action.