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Festkörperunterstützte Lipid-Modellmembranen auf Goldzur Rekonstitution von Membranproteinen Ziel der Arbeit war der Aufbau von Lipid-Modellmembranen auf Goldelektroden in welchen die funktionelle Aktivität von rekonstituierten Membranproteinen über elektrochemische Methoden nachgewiesen werden kann.Im Rahmen der Arbeit wurden Lipidbilayer mit und ohne hydrophile Ethylenglykol-Spacer durch Kombination von Selbstorganisation, Langmuir-Blodgett-Kuhn-Techniken und Vesikelfusion aufgebaut. Dabei dienten Thiolipide zur Verankerung der Membranen auf der Goldelektrode und es wurden diverse Wege verfolgt, deren Ankerdichte auf dem Substrat einzustellen.Eine Studie zum Aufbau von festkörperunterstützten Lipidbilayern durch Fusion von Vesikeln auf binäre Alkanthiol-/Hydroxythiol-Monolagen mit definierter Oberflächenenergie zeigte, daß eine minimale Grenzflächenenergie (Monolayer/Wasser) existiert, unterhalb welcher die Fusion nicht mehr zu einer zusätzlichen Monolage, sondern lediglich zur Ausbildung von adsorbierten oder teilgespreiteten Vesikeln führt.Zur Charakterisierung der Membranen wurden Oberflächenplasmonenresonanz, Impedanzspektroskopie, zyklische Voltammetrie, elektrochemische reduktive Desorption, Rasterkraftmikroskopie und Kontaktwinkelmessungen herangezogen.In die Modellmembranen wurden Membranproteine (Porin, Annexin V, H+-ATPase) sowie ganze Membranfragmente (Bande 3 aus roten Blutzellen) rekonstituiert und mittels elektrochemischer Methoden auf ihre funktionelle Aktivität überprüft.
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Auszug Im November 2006 stellten die Vereinten Nationen (UN) den jüngsten von einem unabhängigen Experten erstellten internationalen Bericht zu Gewalt an Kindern vor, wonach im Jahre 2002 weltweit schätzungsweise 53.000 Kinder durch Totschlag starben sowie 150 Mio. Mädchen und 73 Mio. Jungen unter 18 Jahren Opfer sexueller Misshandlungen wurden. In 31 von 200 Staaten sind körperliche Strafen von Auspeitschen bis Amputationen erlaubt und in knapp der Hälfte der Staaten ist die Körperstrafe an Schulen erlaubt (Pinheiro 2006). In Deutschland und Großbritannien sterben pro Woche zwei, in Frankreich drei, in Japan vier und in USA 27 Kinder an Misshandlung und Vernachlässigung. In einer vorangegangen Studie der UNICEF, dem Kinderhilfswerk der Vereinten Nationen, wurde festgestellt, dass in den reichen Ländern auf 100.000 Kinder jährlich zwischen 0, 1 und 3, 7 Kinder unter 15 Jahren als Folge von Misshandlung oder Vernachlässigung sterben (⊡ Abb. 48.1 ). Schätzungen gehen davon aus, dass auf einen Todesfall rund 150 Fälle von Kindesmisshandlung ohne Todesfolge kommen (UNICEF 2003).
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Budding and vesiculation of erythrocyte membranes occurs by a process involving an uncoupling of the membrane skeleton from the lipid bilayer. Vesicle formation provides an important means whereby protein sorting and trafficking can occur. To understand the mechanism of sorting at the molecular level, we have developed a micropipette technique to quantify the redistribution of fluorescently labeled erythrocyte membrane components during mechanically induced membrane deformation and vesiculation. Our previous studies indicated that the spectrin-based membrane skeleton deforms elastically, producing a constant density gradient during deformation. Our current studies showed that during vesiculation the skeleton did not fragment but rather retracted to the cell body, resulting in a vesicle completely depleted of skeleton. These local changes in skeletal density regulated the sorting of nonskeletal membrane components. Highly mobile membrane components, phosphatidylethanolamine- and glycosylphosphatidylinositol-linked CD59 with no specific skeletal association were enriched in the vesicle. In contrast, two components with known specific skeletal association, band 3 and glycophorin A, were differentially depleted in vesicles. Increasing the skeletal association of glycophorin A by liganding its extrafacial domain reduced the fraction partitioning to the vesicle. We conclude that this technique of bilayer/skeleton uncoupling provides a means with which to study protein sorting driven by changes in local skeletal density. Moreover, it is the interaction of particular membrane components with the spectrin-based skeleton that determines molecular partitioning during protein sorting.
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Contiene: Band 1 -- Band 2 -- Band 3.
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"Supplement-Band" (3 v.; issued in 25 fasc.), issued in 1928-1936.
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7322 Pritzel.
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"Namen-, sach-, und wortverzeichnis in jedem band."
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Band 3, pts. 1 & 2 published in Bonn by Adolph Marcus.