859 resultados para meio de cultura WPM
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Objetivo: O presente trabalho, dividido em três estudos, teve como objetivo geral identificar e quantificar a liberação de componentes e avaliar a citotoxicidade e a biocompatibilidade de cimentos de ionômero de vidro (CIVs). Método: Para o estudo 1, extratos dos CIVs Vitrebond (VB), Fuji Lining LC (FL), Vitremer (VM), Fuji II LC (FII), Ketac Fil Plus (KF) e Ketac Molar Easymix (KM) foram obtidos pela imersão de corpos-de-prova em meio de cultura celular (DMEM). Esses extratos (n=9 por grupo) foram analisados por eletrodo específico quanto à presença de flúor e por espectrometria de absorção atômica quanto à presença de alumínio e zinco. HEMA e iodobenzeno foram identificados por CG/EM (n=6). Para o estudo 2, células MDPC-23 foram colocadas em contato com os extratos dos CIVs por 24 horas. Em seguida, foram avaliadas a atividade da desidrogenase succínica (SDH) (n=8), a produção de proteína total (PT) (n=8), a atividade da fosfatase alcalina (FAL) (n=8) e a morfologia celular (n=2). Para o estudo 3, tubos de polietileno (n=24 por grupo) foram preenchidos com os CIVs e implantados no tecido subcutâneo de 42 ratos. Como grupo controle foi utilizada a guta-percha. Após 7 ou 15 dias de pós-operatório, metade dos espécimes de cada grupo e período (n=6) foi preparada para análise histológica, e os demais (n=6) para análise da expressão de genes que codificam para IL-1? e TNF-?. Resultados: Os extratos de todos os CIVs apresentaram uma concentração de flúor significativamente maior do que o meio de cultura DMEM (controle), tendo o VB liberado maior quantidade, estatisticamente significante, do que os demais CIVs. O VB foi, também, o único material que liberou quantidades relativamente altas de alumínio e de zinco. O HEMA foi identificado nos extratos de todos os CIVs modificados por resina (VB, FL, VM e FII), e o iodobenzeno... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)
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Herbicides are chemical agents most consumed for agricultural production and of these, glyphosate (N-(phosphonomethyl) glycine) represents more than half of world consumption of non-selective herbicides, use of systemic action and post-emergent. The present study aims to analyze the interference of different concentrations of glyphosate in the development of micro algae, unicellular species Pseudokirchneriella subcapitata, with supplementary analysis of the interference of green algae concentrations in the artificial lake Instituto de Biociências Universidade Estadual Paulista in Rio Claro, SP. To identify the effect of glyphosate on the development of microalgae concentrations: 0.118; 0.236; 0.472; 0.944; 1.888 and 3.776 mg of product (all in rejoinders), maintaining control without glyphosate, were inoculated into flasks containing 150mL of medium culture and 5mL of suspension inoculum levels. Each test was continued for 96 hours in a shaker rotating at 150 rpm at 25 / - 2 ° C and constant light of 3200 lux. At baseline and 48; 72 and 96 hours samples were taken for testing for absorbance. The final dry weight was measured and the tests with P. subcapitata cell number was quantified at the beginning and end of the tests using the Neubauer chamber under optical microscope. For algae of the artificial lake of the diversity of microalgae cells was identified through photographic documentation. The analysis of variance comparing treatments for dry biomass showed no significant differences in the tests with P. subicapitata as for the algae to the lake.The analysis of variance MANOVA showed significant differences between the treatments over time but there was no significant difference between the interactions of treatment for tests with P. subicapitata There were significant differences in the tests with microalgae of the artificial lake. With respect to cell quantification, it was found... (Complete abstract click electronic acces below)
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The gene encoding TCTP (Translationally Controlled Tumour Protein) is present in all eukaryotes and its product is involved in various cellular processes. Although well characterized in mammals, there are only few works available in the literature related to the analysis of this protein in plants. In this present work, the expression of the gene encoding TCTP was analyzed in different organs/tissues of tomato plants (Solanum lycopersicum cv. Santa Clara). A quantification performed by RT-qPCR revealed the presence of TCTP transcript in all tissues/organs analyzed, with the highest expression level found in leaves. With the exception of fruits in intermediate stage of maturation, for which a small increase on the expression was detected, there was minimal variation in the relative expression of TCTP in other organ/tissues. In parallel, the effects of the constitutive expression of TCTP were investigated using transgenic tobacco lines able to overexpress this protein at different levels (T1, T2 and T3). Seedlings of these lines, and of a non-transgenic control line, were grown in MS culture medium for 21 days. At the end of this period, the length of roots and leaves was taken and the seedlings were photographed. According to Tukey's test, the analysis of the mean root length revealed a significant difference between T1 and T3 lines when compared to the control, although the same was not observed for the T2 line. For leaves, according to Kruskal-Wallis test, there was a statistical difference between the averages of leaf growth obtained for the different lines evaluated. According to these results, we can conclude that TCTP shows an ubiquitous expression in tomato plants, with the highest expression detected in leaves, and also that its overexpression promoted a higher root and leaf development in two of three transgenic tobacco lines tested
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O objetivo deste trabalho foi identificar o micro-organismo Y15C previamente isolado no laboratório de microbiologia industrial, da UNESP de Rio Claro, utilizando técnicas bioquímicas, além de otimizar a produção de ácido lático por meio de fermentação batelada simples e batelada alimentada. Considerando o potencial do micro-organismo para a produção de D(-) ácido lático, com 100% de pureza, isômero usado na síntese de polímeros empregados na produção de diversos materiais resistentes e biodegradáveis, foi feita a otimização do meio de cultura, tendo como fonte de carbono a manipueira. A manipueira por ser um resíduo do processamento da mandioca que contém grande quantidade de amido e quando hidrolisado pode ser uma fonte de carbono de baixo custo, quando utilizado pelo micro-organismo. O isolado Y15C foi identificado como Lactobacillus delbrueckii ssp delbrueckii, por meio de testes bioquímicos. Em relação à otimização dos parâmetros de fermentação, usando planejamento experimental, observou-se que a adição de componentes ao meio de cultivo, assim como a variação da temperatura não aumentou significamente a produção de ácido lático. Desta forma optou-se por trabalhar com as menores concentrações de AMM (1,6 mL/L) e citrato (0,96 g/L) e maior temperatura (43,4ºC). Para que haja aumento na produção de ácido lático podem ser realizados diversos tipos de fermentações, no caso deste trabalho foram comparados dois tipos de fermentação, batelada simples e batelada com alimentação constante. A maior concentração de ácido lático (41,6 g/L) foi observada que quando utilizada fermentação do tipo de fermentação em batelada... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)
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Apoptosis is a form of programmed cell death selectively removes abnormal cells, and thus contributes to maintaining the balance of the dynamics of cell reproduction. Therefore the verification of the occurrence of apoptotic cell death after a pathological stimulus is crucial for the analysis of the maintenance of normal cell cycle of a given tissue or organ. In this experiment were used cells lines human mammary tumor MDAMB231, T47, MCF7, which were irradiated with X-rays at a dose of 5 Gy in a time interval of 15 seconds, and filtration of 1mm aluminum. Samples containing the cells were grown in a specific culture medium, containing fetal bovine serum and growth factor, and two samples were prepared with each of the cell lines, one to be irradiated, and another that has not been irradiated, which denoted by negative control of the irradiation. The primary goal of the experiment was to verify and compare the rates of apoptosis in each cell lines, in which were irradiated and that were not irradiated, using flow cytometry as a method for detecting apoptotic cell death in together with specific markers annexin V and propidium iodide. Data from the readings made by flow cytometry were analyzed and interpreted using the software WinMDI statistical graph. By comparing the indices relating to the readings of positive and negative for specific markers of apoptosis, based on differences in the statistical data presented lectures regarding the cellular irradiated and not irradiated, collude cells in question once... (Complete abstract click electronic access below)
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A frequência de micoses invasivas causadas por fungos oportunistas, incluindo leveduriformes, vem aumentando significativamente nas últimas décadas e atinge principalmente indivíduos imunocomprometidos. A tribo Attini possui cerca de 230 espécies de formigas e todas possuem o hábito de cultivar e se alimentar de fungos. Algumas espécies cultivam o fungo mutualista em nódulos poligonais sólidos com 0,25 a 0,50mm de diâmetro, aproximadamente. No interior desses nódulos, encontram-se células na forma de leveduras, que quando semeadas em meio de cultura se desenvolvem como fungo filamentoso. Este tipo de fungicultura está restrito a algumas espécies do gênero Cyphomyrmex. Neste trabalho, isolamos 30 leveduras dos nódulos de oito ninhos de Cyphomyrmex transversus da região de Ilhéus (BA), e analisamos a susceptibilidade aos seguintes antifúngicos: Anfotericina B (AMB), Fluconazol (FCZ), Voriconazol (VCZ) e Itraconazol (ITZ). A caracterização das estirpes foi feita através de métodos morfológicos e moleculares, incluindo-se o sequenciamento dos domínios D1/D2 do rDNA. A avaliação da atividade antifúngica foi realizada através do método de microdiluição, de acordo com a norma M27-A2 (CLSI, 2002). Candida parapsilosis ATCC 22019 e Candida krusei ATCC 6258 foram utilizadas como controle. Os resultados foram interpretados segundo os pontos de corte (breakpoints) aplicados ao gênero Candida. As estirpes foram identificadas como Trichosporon asahii (18), T. coremiiforme (4), Candida carpophila (syn. C. guilliermondii) (4), Galactomyces candidum (syn. Geotrichum candidum) (3) e Cryptococcus laurentii (1). Todas as espécies são conhecidas por possuírem representantes que já foram relatados como patógenos oportunistas. Elas foram sensíveis aos azóis FCZ, VCZ e ITZ, com exceção de G. candidus, cujas estirpes apresentaram sensibilidade dose-dependente a FCZ e ITZ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)
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Combining the characteristics of good adhesion and sealing of the AH Plus sealer the biological properties of the MTA, zinc oxide and calcium hydroxide, the purpose of this study was to evaluate the cytotoxicity of these associations. The specimens of the sealers and their associations were mixed and exposure to culture medium (82.4 mm2surface/mL) after the manipulation and incubated in a humidified incubator (37°C and 100% humidity) for 24 h. Chinese hamster lung fibroblasts (V79) were exposed to different dilutions of this extracts for 24 h and cell viability was measured by MTT test. The differences between the cell survival rates were statistically analyzed for Kruskal-Wallis and Dunn (p≤0.05). All sealers showed a significant difference with the group control, except the MTA. Cytotoxicity with the control group increased in the following order: AH Plus < AH Plus + Ca(OH) 2 < AH Plus + OxZn< AH Plus + MTA < MTA (p≤ 0,05). It was concluded that the addition of biological materials in order to improve the consistency of AH Plus for use in retro cavities its toxicity has not decreased significantly
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O nitrato de fenticonazol é um derivado imidazólico de amplo espectro de ação contra patógenos dermatófitos, como Malassezia furfur e leveduras, a principal delas Candida albicans. É necessário que se possa garantir a qualidade dos medicamentos produzidos. O controle de qualidade é uma ferramenta que assegura a qualidade, eficácia e segurança desses produtos até o momento de sua utilização e faz-se necessário que métodos analíticos sejam desenvolvidos e validados para o doseamento desses fármacos. A grande importância dos métodos microbiológicos utilizados no controle de qualidade de fármacos com atividade antimicrobiana é demonstrar sua atividade biológica por meio de seu efeito inibitório no crescimento de micro-organismo. A diminuição da atividade antimicrobiana ou potência pode indicar alguma alteração sutil na molécula, que é pouco detectável em um método analítico físico-químico. O objetivo deste trabalho foi desenvolver e validar o método microbiológico difusão em ágar para o produto nitrato de fenticonazol creme vaginal. O método de difusão em ágar foi desenvolvido utilizando meio de cultura ágar Sabouraud e cepa de Candida albicans ATCC 64548 como micro-organismo teste. Para o ensaio foi utilizado o delineamento 3 x 3, conforme preconiza a Farmacopeia Brasileira (2010). A validação do método proposto demonstrou linearidade entre os diâmetros dos halos de inibição e o logaritmo da concentração na faixa de 50,0 a 200,0 μg/mL. O método obteve resultados precisos e lineares com r2=1. A exatidão foi comprovada pelo intervalo de tolerância de 98,83%, dentro dos limites permitidos. O método foi validado de maneira satisfatória, podendo ser utilizado em análises do Controle de Qualidade deste fármaco.
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With the emergence of new filling materials with different properties and behaviors, the approach of endodontic treatment must be readjusted so that the appropriate result can be achieved. New endodontic sealers include methacrylate resin-based, plant resin-based and the evolution of epoxy-based sealers. This study verified the behavior of new materials that presents controversial results in the literature, about coronal bacterial leakage. That for, 56 single-rooted human teeth were prepared in the direction crown-apex and filled with gutta-percha points with taper of 4% using the single cone technique. Roots were divided randomly into 4 groups according to the sealer (Apexit Plus, AH Plus, EndoREZ and Polifil). After filling, the roots were incorporated in a leakage model, which upper chamber contained a suspension of Streptococcus mutans, and lower chamber a broth, leaving 3 mm of root apical portion immersed. Leakage was assessed for turbidity in lower chamber every day for 60 days. Survival analysis was performed using the nonparametric Kaplan- Meier method (p<0,05). All experimental groups presented leakage during the study’s period, however the maximum time achieve was 22 days. The medium time of leakage was: Apexit Plus 6,3 days, AH Plus 6,3 days and Polifil 5,1 days, but in EndoREZ all specimens infiltrated in the first day, presenting shorter capacity of impermeabilization compared to the other groups. Concluding that none of the sealers tested was able to prevent coronal bacterial leakage
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Embora a doença de Chagas seja amplamente estudada, ainda não se conhece todos os interferentes que modulam a relação parasitária Trypanosoma cruzi- vetor- hospedeiro vertebrado. Sabe-se que as aves são refratárias ao T. cruzi, ou seja, o parasito não consegue estabelecer parasitismo nas mesmas, enquanto que nos camundongos a infecção ocorre. Essa refratariedade representa um exemplo de resistência natural do hospedeiro a uma infecção parasitária. Originalmente, acreditava-se que isso ocorria devido à presença de um anticorpo natural contra o T. cruzi no sangue das aves, porém estudos atuais atribuem tal atividade ao sistema complemento presente no sangue das mesmas. Pretendeu-se avaliar neste projeto se a referida característica peculiar do sangue das aves interfere no processo e no nível de infecção dos triatomíneos, em especial de Rhodnius neglectus, espécie de comprovada importância epidemiológica. Para tanto, utilizou-se a cepa Y de T. cruzi e ninfas de 4º estádio de R. neglectus. Avaliou-se também a capacidade lítica do soro de galinha em formas epimastigotas e tripomastigotas em meio de cultura LIT, utilizando a cepa Y. Referente à influência de diferentes fontes alimentares na infecção de R. neglectus por T. cruzi, observou-se um decréscimo no número de exemplares infectados após alimentação em patos , apresentando Índice de Infecção médio de 19,74%. Por outro lado, exemplares infectados após alimentação em camundongos não apresentaram diferença significante na parasitemia total. Os testes in vitro demonstraram que a adição de soro de galinha em meio de cultura LIT, com formas epimastigotas e tripomastigotas, foi capaz de diminuir notoriamente a contagem de parasitos móveis até a contagem zero, uma hora após a adição. O conjunto desses resultados sugere que a refratariedade das aves ao T. cruzi influencia a infecção de R. neglectus pelo flagelado e foi demonstrada, in vitro, pela ...
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Monócitos e macrófagos são células da imunidade inata que desempenham importante papel na defesa contra infecções fúngicas, através do reconhecimento dos fungos, ativação e desenvolvimento de atividade fungicida. A função das células fagocitárias depende do seu estado de ativação, induzido principalmente pelo ambiente de citocinas, presentes durante a interação com o microrganismo. O presente projeto teve por objetivo avaliar o efeito da opsonização de células leveduriformes de Paracoccidioides brasiliensis com soro humano sobre a produção de peróxido de hidrogênio (H2O2) e atividade fungicida de monócitos humanos, estimulados ou não com Interferon-gama (IFN-γ), contra P. brasiliensis. Monócitos de sangue periférico, obtidos de indivíduos saudáveis, foram cultivados na ausência ou presença de IFN-γ por 24h a 37oC. A seguir, essas células foram desafiadas com a amostra Pb18 de P. brasiliensis por 60 min para determinação da produção de H2O2 e por 4h para a avaliação da atividade fungicida nas proporções fungomonócito de 1:50. A suspensão fúngica foi previamente incubada por 30 min a 37oC na ausência de soro (SS) ou na presença de pool de soro humano normal, inativado (SI) por aquecimento a 56oC ou soro humano fresco (SF) não submetido à inativação do sistema complemento, nas concentrações de 5%, 10%, 20% e 30% em meio de cultura RPMI. A atividade fungicida de monócitos contra a amostra Pb18 foi avaliada por plaqueamento dessas co-culturas em meio de cultivo BHIágar e determinação da recuperação de fungos viáveis após 14 dias de incubação a 36oC. A produção de H2O2 por monócitos foi determinada através da técnica de redução do vermelho de fenol. Os resultados mostraram que a adição de SF ou SI em diferentes concentrações a culturas de P. brasiliensis não interfere com a viabilidade... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)
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O uso indiscriminado dos medicamentos sintéticos e a própria evolução dos micro-organismos selecionou espécies extremamente resistentes aos agentes químicos utilizados. Para contornar tal situação e ampliar o arsenal de compostos ativos contra micro-organismos, o estudo de plantas tornou-se uma necessidade crescente. A utilização de fitoterápicos na prevenção e/ou cura de doenças são necessários estudos prévios relativos a aspectos botânicos, farmacognósticos, fitoquímicos, farmacológicos e toxicológicos. Neste trabalho, foram estudados extratos obtidos com as folhas de Plinia cauliflora (Mart.) Kausel e de cascas pulverizadas de Endopleura uchi (Huber) Cuatrec., quanto às propriedades antimicrobianas frente a diferentes linhagens de fungos: Aspergillus niger, Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae, Trichoderma reesei e Trichophyton rubrum. Foram avaliadas as atividades antifúngicas dos materiais vegetais determinando sua Concentração Inibitória Mínima (CIM). Com base nesses dados foi realizada a avaliação da atividade antifúngica observando o crescimento radial dos fungos em placas de Petri contendo meio de cultura incorporado com os materiais vegetais nas concentrações de CIM e 1%, sendo após realizada a mensuração dos diâmetros formados. Trichophyton rubrum foi o micro-organismo que apresentou maior sensibilidade frente ao extrato e as frações de P. cauliflora, com valores de CIM baixos, enquanto que a cepa industrial de Aspergillus niger mostrou-se totalmente resistente a todos os extratos testados. A determinação da atividade antifúngica em placas contendo meio sólido, mostrou uma confirmação dos resultados pois o extrato etanólico, a fração butanólica e a fração aquosa de P. cauliflora, tanto na concentração 1% quanto na obtida pelo CIM, inibiram o crescimento T. rubrum
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O objetivo do presente estudo foi verificar o efeito da adição de um prebiótico nas características de crescimento, resistência às condições do trato gastrintestinal e remoção de colesterol in vitro, das cepas de Enterococcus faecium CRL183 e Lactobacillus helveticus 416. A fonte de prebiótico foi composta por Inulina GR – Orafti, sendo testadas as seguintes concentrações: 1,0%, 2,0%, 3,0%; 4,0%; 5,0% e 6,0% p/v). Para a avaliação da resistência às condições do trato gastrintestinal, os microrganismos foram colocados em contato com um fluido gástrico simulado por 2 horas (9g/L de NaCl, 3g/L de pepsina, pH 1,8) e com um fluido intestinal simulado por 3 horas (0,9g/L de pancreatina, 12,5g/L de bicarbonato de sódio e 6,0 g/L de Oxgall). Após o período de contato com os fluidos, foram realizadas diluições seriais e plaqueamento em meios específicos. No estudo de redução de colesterol, meios de cultura contendo inulina e colesterol (1%) foram inoculados com as cepas probióticas e incubados em anaerobiose a 37°C/24h. A capacidade de redução do colesterol foi determinada pela diferença entre a concentração de colesterol adicionada ao meio de cultura e a de colesterol residual. Os resultados foram submetidos à análise de variância e teste de médias de Tukey (p≤0,05). A adição de inulina não resultou em alteração no ciclo logarítmico de crescimento dos microrganismos. Porém, quando os dados foram submetidos à análise estatística, constatou-se que a adição de 1% a 4% de inulina inibiu o crescimento de Lactobacillus helveticus 416, sendo que para as concentrações de 5% a 6% estas alterações não foram perceptíveis. A cepa de Enterococcus faecium CRL 183 apresentou crescimento superior na presença de 2% e 4% de inulina. Após o contato com o fluido gástrico simulado, observou-se redução de 1 ciclo logarítmico no crescimento da cepa... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)
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This work aimed to develop a biological system for removal of ammonia nitrogen operating at low concentrations of dissolved oxygen. Thus, a biological upflow vertical reactor was built, in which the affluent pass through the support media until the top. Sludge from an anaerobic stabilization pond of a slaughterhouse unit in the city of Presidente Prudente - SP was used as inoculum. Initially the system operated in batch and afterwards in a continuous flow with different HRT. For feeding the reactor, an initial phases was adopted a synthetic culture media, described by Martins (2007), in order to establish the ideal conditions for the development of Anammox bacteria and subsequently, submitted to the system a slugde effluent of slaughterhouse. The results showed significant removal efficiency of N-NH4+, especially in the phase without recirculation of culture media, with an average of 71% removal, with the proportion of removal of N-NH4 +:N-NO2- average 1: 1,69. For the period of operation with effluent from the slaughterhouse, were not obtained satisfactory results, without confirmation of the proliferation of Anammox bacteria in the system, due to the high presences of organic matter in the same confirmed by high concentrations of COD
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Malformations and possible damages to the urogenital system can be originated in the embryonic period. Moreover, fire guns, knives and accidents, where there is the disruption of the urethra, also cause these lesions. The objective was to analyze the contribution of tissue engineering in the construction of neo-urethra, developed by bioengineering. We performed an urothelial ex vivo expansion of cells in 3D scaffolds (platelet gel matrix and acellular porcine aorta) to assess the contribution of this technique in the construction of a neo-urethra. Mechanical dissociation was made of the inner wall of 10 North Folk rabbit’s bladder, weighing 2.5 to 3.0 kg. After dissociation the cell content was centrifuged and obtained a pellet of urothelial cells. The pellet was ressuspended in culture medium DMEM F12 and cells were maintained in culture for 15 days. Immunohistochemical analysis characterized the urothelial culture. The cells were then implanted in the scaffold - platelet gel. In a second experiment using aortic porcine acellular matrix were implanted urothelial cells alone and urothelial cells on platelet gel, on the inner wall of the scaffold - aorta, with space for setting bordered by a urethral probe. The complex probe - cells - aorta and probe - cells in platelet gel - aorta, were sealed with suture material and culture were maintained in a humidified 37ºC incubator with 5% CO2 in air for 12 days to subsequent histological analysis of urothelium cell adhesion to the scaffolds. By observation under an optical microscope, we could see the growth of cells in the scaffold platelet gel, from a monolayer in to a three-dimensional structure. In the acellular porcine aortic matrix containing the platelet gel, we could observe a few quantity of urothelial cells adhered. However with the acellular porcine aortic matrix in which was implanted only the urothelial cells, we have obtained adhesion to the wall