Lutzomyia diamantinensis sp. nov., a new phlebotomine species (Diptera: Psychodidae) from a quartzite cave in Diamantina, state of Minas Gerais, Brazil

A new species of Brazilian phlebotomine sandfly found in Brazil, municipality of Diamantina, state of Minas Gerais, is described based on males and females collected in a quartzite cave. The body of spermathecae is continuous to the individual duct, lanky and tapering at the end, with conical shaped, not striated and presenting the head with dense setae. The male presents gonostyle with four spines and a small subterminal seta and gonocoxite with one group of persistent setae. The paramere is simple with a group of small setae on the dorsal apex. The morphological features of this new species permit its inclusion in the migonei group.

Seasonal variation and natural infection of Lutzomyia antunesi (Diptera: Psychodidae: Phlebotominae), an endemic species in the Orinoquia region of Colombia

Lutzomyia antunesi has been commonly reported in outbreaks of cutaneous leishmaniasis (CL) in the Orinoquia region of Colombia. The bionomics of this species were studied in the municipality of Villavicencio (Meta, Colombia). Sandflies were captured over the course of one week per month for one year in intradomiciliary, peridomiciliary and extradomiciliary housing areas. The captures were performed from 06:00 pm-06:00 am using CDC light traps and the females were processed for polymerase chain reaction (PCR) to detect Leishmania spp. A total of 22,097 specimens and 19 species were captured of which Lu. antunesi (89%) and Lutzomyia walkeri (5%) were the most abundant. Other species recognised as anthropophilic (Lutzomyia panamensis, Lutzomyia gomezi, Lutzomyia flaviscutellata and Lutzomyia fairtigi) were present in very low abundance (< 2%). Natural infection with Leishmania spp was detected using PCR in Lu. antunesi, Lu. panamensis and Lu. flavicutellata, showing infection rates of 1%, 4.8% and 7.5%, respectively. The present paper provides information on various ecological aspects of Lu. antunesi. An analysis of seasonality shows that this species increases in abundance in the hottest months (December, January and February), directly correlating with the maximum temperature and inversely correlating with precipitation. The natural infection rate is associated with the peaks of highest abundance.

Repeated exposure to Lutzomyia intermedia sand fly saliva induces local expression of interferon-inducible genes both at the site of injection in mice and in human blood.

During a blood meal, Lutzomyia intermedia sand flies transmit Leishmania braziliensis, a parasite causing tegumentary leishmaniasis. In experimental leishmaniasis, pre-exposure to saliva of most blood-feeding sand flies results in parasite establishment in absence of any skin damages in mice challenged with dermotropic Leishmania species together with saliva. In contrast, pre-immunization with Lu. intermedia salivary gland sonicate (SGS) results in enhanced skin inflammatory exacerbation upon co-inoculation of Lu. intermedia SGS and L. braziliensis. These data highlight potential unique features of both L. braziliensis and Lu. intermedia. In this study, we investigated the genes modulated by Lu. intermedia SGS immunization to understand their potential impact on the subsequent cutaneous immune response following inoculation of both SGS and L. braziliensis. The cellular recruitment and global gene expression profile was analyzed in mice repeatedly inoculated or not with Lu. intermedia. Microarray gene analysis revealed the upregulation of a distinct set of IFN-inducible genes, an immune signature not seen to the same extent in control animals. Of note this INF-inducible gene set was not induced in SGS pre-immunized mice subsequently co-inoculated with SGS and L. braziliensis. These data suggest the parasite prevented the upregulation of this Lu. intermedia saliva-related immune signature. The presence of these IFN-inducible genes was further analyzed in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) sampled from uninfected human individuals living in a L. braziliensis-endemic region of Brazil thus regularly exposed to Lu. intermedia bites. PBMCs were cultured in presence or absence of Lu. intermedia SGS. Using qRT-PCR we established that the IFN-inducible genes induced in the skin of SGS pre-immunized mice, were also upregulated by SGS in PBMCs from human individuals regularly exposed to Lu. intermedia bites, but not in PBMCs of control subjects. These data demonstrate that repeated exposure to Lu. intermedia SGS induces the expression of potentially host-protective IFN-inducible genes.

Description of Lutzomyia chotensis, a new species of Peruvian Phlebotominae (Diptera, Psychodidae)

Lutzomyia chotensis sp. nov. (Diptera, Psychodidae, Phlebotominae) from Cajamarca Department, Peru, is described and its taxonomic position discussed.

Description of Lutzomyia (Helcocyrtomyia) herreri sp. nov. (Diptera, Psychodidae, Phlebotominae) from the South Peruvian Andes

A new species of phlebotomine, Lutzomyia (Helcocyrtomyia) herreri sp. nov., belonging to the series osornoi, from the Department of Puno, Peru, is described. Identification keys for both sexes of the species of this series are presented.

Flebotomíneos (Diptera, Psychodidae) em reservas florestais da área metropolitana de São Luís, Maranhão, Brasil

Estudou-se a diversidade, a abundância relativa e a sazonalidade das espécies de flebotomíneos em duas reservas de floresta primária alterada, a reserva florestal do Sacavém (RFS) e reserva florestal do Itaqui (RFI), localizadas na área metropolitana de São Luís, capital do estado do Maranhão. Os flebotomíneos foram capturados com armadilhas luminosas tipo CDC, instaladas na borda e no centro da mata, a 1,5 metros de altura, das 18h00 às 6h00, uma vez por mês, durante um ano. No total foram capturados 1.356 indivíduos de 23 espécies dos gêneros Lutzomyia (21) e Brumptomyia (2). Na RFS foram capturados 1.061 espécimes, resultando num esforço de captura de 2,5 indivíduos/hora/armadilha e o predomínio de L. longipalpis (44,8%), seguida por L. antunesi (36,4%), L. sordelli (5,9%), L. flaviscutellata (3,9%) e L. whitmani (2,1%). O maior número de espécies (11) e indivíduos (60,1%) ocorreu na estação chuvosa. Na RFI foram obtidos 295 espécimes, o esforço de captura foi 0,2 indivíduos/hora/armadilha, com o predomínio de L. flaviscutellata (58,6%), L. sordelli (14,6%), L. longipalpis (7,1%), L. evandroi (6,4%), L. longipennis (3%), L. trinidadensis (2,7%) e L. whitmani (1,7%). As espécies foram mais numerosas na estiagem (11) e os espécimes durante a estação chuvosa (54,6%).

Descripción del ARN de transferencia mitocondrial para Serina (UCN) de Lutzomyia columbiana (Diptera, Psychodidae)

Lutzomyia columbiana es un flebotomíneo considerado como vector sospechoso de Leishmania mexicana y Leishmania braziliensis en Colombia. Este insecto pertenece al grupo verrucarum, que incluye algunos taxones isomórficos, lo que ha estimulado la búsqueda de marcadores moleculares que permitan, además de diferenciar las especies, estudiar sus relaciones de parentesco. En este artículo se describe por primera vez la estructura putativa del ARN de transferencia mitocondrial para serina que reconoce el codón UCN (ARNtSer) de Lu. columbiana. El ADN genómico fue extraído, amplificado y secuenciado a partir de seis especímenes colectados con cebo humano. La estructura secundaria del ARNtSer fue inferida con el programa tRNAscan-SE 1.21. El gen ARNts consistió de 67 pares de bases (pb), encontrándose un solo haplotipo en los seis individuos secuenciados. El ARNtSer de Lu. columbiana mostró 7 apareamientos intracatenarios en el brazo aceptor del aminoácido, 3 en el brazo dihidrouridina (DHU), 5 en el brazo del anticodón y 5 en el brazo ribotimidina-pseudouridina-citosina (TøC). El tamaño de las lupas correspondió a 5 nucleótidos en la DHU, 7 en la anticodón, 4 en la variable y 7 en la TøC. Lu. columbiana se distingue del resto de especies de Lutzomyia y Phlebotomus secuenciadas a la fecha por la presencia de una guanina en la posición nucleotídica 64, que produce un apareamiento no canónico tipo uracilo-guanina en el brazo aceptor. Se necesitan más estudios para confirmar la utilidad del ARNtSer como marcador molecular para la discriminación de especies de flebotomíneos.

Bionomía de Lutzomyia spp. (Diptera: psychodidae) vectores de Leishmaniasis cutánea localizada en el área endémica del ejido La Libertad, Escárcega, Campeche, México [por] Eduardo Alfonso Rebollar Téllez

Tesis (Maestro en Ciencias con Especialidad en Entomología Médica ) U.A.N.L.

Dinámica de infección de Leishmaniasis y fluctuación poblacional de Lutzomyia spp. ( Díptera: Psychodidae) en cafetales de Nayarit, México

Tesis ( Doctorado en Ciencias Biológicas con Especialidad en Entomología Médica) UANL

Establecimiento, mantenimiento y productividad de una colonia de laboratorio de Lutzomyia spinicrassa Morales, Osorno-Mesa, Osorno y Hoyos, 1969 (Diptera: Psychodidae) en Colombia

El flebótomo Lutzomyia spinicrassa es vector de Leishmania braziliensis y tiene amplia distribución en plantaciones de café en Colombia y Venezuela. Metodología: Se estableció una colonia en condiciones de laboratorio a partir de 600 hembras de L. spinicrassa capturadas en el campo y mantenidas a temperatura de 23º C y humedad relativa de 70%. El tiempo de desarrollo desde huevo hasta adulto osciló entre 58 y 78 días, en promedio 11 semanas. Se compararon parámetros poblacionales de la especie obtenidos a partir de cinco generaciones sucesivas mantenidas en grupos, con una generación criada individualmente. Resultados: Se obtuvieron los siguientes parámetros en cada condición experimental: tasa neta de reproducción (6,92 y 7 hembras por hembra por generación), tasa intrínseca de incremento poblacional (0,17 y 0,18 hembras por hembra por semana) y tasa finita de incremento poblacional (1,06 y 1,19 individuos por hembra por semana). Conclusión: Estos datos sugieren que la colonia de L. spinicrassa tuvo un incremento constante durante las seis generaciones analizadas.

Avaliação da relevância da gp63 de Leishmania braziliensis e Leishmania infantum na interação com o hospedeiro invertebrado

A gp63, metalopeptidase altamente abundante na superfície de Leishmania, contribui para uma infinidade de funções bem estabelecidas na interação deste parasito com o hospedeiro mamífero. No entanto, apesar desta molécula ser abundantemente expressa na superfície das formas promastigotas, encontradas no inseto vetor, pouco é conhecido sobre as funções desempenhadas por essa metalopeptidase no flebotomíneo. Nosso grupo de pesquisa, utilizando abordagens bioquímicas, tem demonstrado que moléculas de gp63 de vários tripanosomatídeos não patogênicos ao homem estão implicadas na adesão ao intestino de insetos hospedeiros. Aqui, nós analisamos o papel da gp63 na interação de Leishmania braziliensis e Leishmania infantum, com os seus respectivos insetos hospedeiros, Lutzomyia intermedia e Lu. longipalpis e com a linhagem celular derivada de Lu. longipalpis (LL5). Os intestinos dissecados de insetos foram prétratados ou não com o fosfoglicano (PG) puro derivado do lipofosfoglicano e colocados para interagir com os parasitos. Em paralelo, promastigotas de L. braziliensis e L. infantum foram pré-tratados com anticorpo anti-gp63 ou com inibidores da metalopeptidase. Depois disso, os parasitos foram colocados para interagir com os intestinos dissecados de insetos ou com as células LL5 Como esperado, o PG praticamente elimina a capacidade dos parasitos de se ligarem ao intestino dos insetos. Todos os tratamentos relacionados com a gp63 também provocaram uma diminuição acentuada nestes ensaios de ligação. Além disso, o sobrenadante de cultura de L. braziliensis foi concentrado por precipitação com sulfato de amônio e analisado por SDS-PAGE e SDS-PAGE-gelatina. Observamos uma degradação proteolítica, por volta de 63 kDa, que corresponde à enzima gp63 já identificada e caracterizada em várias espécies de Leishmania. Esses resultados em conjunto demonstram uma possível participação da gp63 na interação com o inseto vetor e nos estimulam a continuar estudando o papel dessa metalopeptidase no ciclo de vida de Leishmania

Spatial and temporal patterns of occurrence of Lutzomyia sand fly species in an endemic area for cutaneous leishmaniasis in the Atlantic Forest region of northeast Brazil

Sand fly populations of different ecological niches in the Amaraji endemic American Cutaneous Leishmaniasis (ACL) focus of the Pernambuco Atlantic Forest region of northeastern Brazil were monitored spatiotemporally. Lutzomyia whitmani was dominant in all niches but occurred in smaller numbers in forested locations. L. whitmani was significantly less seasonal than the other species, being present throughout the year while other species were more abundant between February and April. These results suggest that L. whitmani may potentially be the principal vector of ACL in the region, even though the sand fly fauna was diverse: 88% were L.whitmani and 12% belonged to 11 other species. Two other species, L. complexa (1.3%) and L. migonei (0.8%), considered to be ACL vectors in other regions, were also present. This detailed picture of the sand fly population`s abundance and spatiotemporal distribution provides a basis for future modeling studies of forecasting sand fly activity patterns and ACL occurence.

Quatro novos registros da fauna flebotomínica do gênero Lutzomyia França (Diptera: Psychodidae, Phlebotominae) do distrito rural de Brejo do Mutambal, Varzelândia, MG

During April and May 2006, experiments were carried out in Brejo do Mutambal, Varzelandia Town, Minas Gerais State, to evaluate the attractiveness of phlebotomine sandflies to CDC light traps, baited with kairomones. of the 19 species of Lutzomyia already registered for the region, L. lutziana (Costa Lima), L. longipennis (Barreto), L. goiana (Martins, Falcao & Silva) and L. brasiliensis (Costa Lima) were recorded for the first time, thus increasing the diversity of phlebotomine sandflies fauna in this area to 23 species. The new registered species and distribution are shown and discussed herein.

Identification of blood meal sources of Lutzomyia longipalpis using polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism analysis of the cytochrome B gene

An analysis of the dietary content of haematophagous insects can provide important information about the transmission networks of certain zoonoses. The present study evaluated the potential of polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) analysis of the mitochondrial cytochrome B (cytb) gene to differentiate between vertebrate species that were identified as possible sources of sandfly meals. The complete cytb gene sequences of 11 vertebrate species available in the National Center for Biotechnology Information database were digested with Aci I, Alu I, Hae III and Rsa I restriction enzymes in silico using Restriction Mapper software. The cytb gene fragment (358 bp) was amplified from tissue samples of vertebrate species and the dietary contents of sandflies and digested with restriction enzymes. Vertebrate species presented a restriction fragment profile that differed from that of other species, with the exception of Canis familiaris and Cerdocyon thous. The 358 bp fragment was identified in 76 sandflies. Of these, 10 were evaluated using the restriction enzymes and the food sources were predicted for four: Homo sapiens (1), Bos taurus (1) and Equus caballus (2). Thus, the PCR-RFLP technique could be a potential method for identifying the food sources of arthropods. However, some points must be clarified regarding the applicability of the method, such as the extent of DNA degradation through intestinal digestion, the potential for multiple sources of blood meals and the need for greater knowledge regarding intraspecific variations in mtDNA.

Estabelecimento de colônia de Lutzomyia neivai (Diptera:Psychodidae) e construção de túnel de vento para avaliação de substâncias atrativas para flebotomíneos

Os flebotomíneos (Diptera, Psychodidae) são insetos transmissores de leishmanioses e arboviroses. O estabelecimento de colônias em laboratório para o estudo comportamental da espécie Lutzomyia neivai, transmissor da leishmaniose tegumentar, requer manutenção e cuidados especiais. Os insetos hematófagos são atraídos por substâncias voláteis liberadas pelos hospedeiros e o estudo dessas substâncias é denominado “ecologia química”. A capacidade atrativa das substâncias pode ser medida em laboratório por meio de aparatos como túneis de vento. Entretanto, muitas variáveis interferem na eficácia de um túnel de vento, como por exemplo: tamanho do túnel, forma de liberação e captura dos insetos, velocidade e forma da pluma de odor e altura da fonte de liberação de odor (meio ou base do túnel). Este estudo tem como finalidade o estabelecimento de uma colônia de Lutzomyia neivai e a construção de um túnel de vento, desenvolvido e modificado a partir de literatura de referência, para avaliação de substâncias atrativas. Os espécimes foram coletados na região de Araraquara, nos municípios de Rincão e Santa Eudóxia. Após a coleta, os insetos capturados foram levados para a Faculdade de Ciências Farmacêuticas – Campus Araraquara onde a colônia foi mantida e os experimentos realizados