Caracterização de um modelo experimental de Diabetes Mellitus, induzido pela aloxana em ratos: estudo clínico e laboratorial

OBJETIVO: O presente estudo teve por objetivo caracterizar as alterações clínicas e laboratoriais do rato portador de Diabetes Mellitus induzido pela administração endovenosa de aloxana. MÉTODOS: Os animais foram distribuídos, por sorteio, em dois grupos experimentais: Grupo Controle Normal (G1), constituído de 25 animais sadios, e Grupo Diabético (G2), formado por 25 animais diabéticos graves, que foram avaliados em cinco momentos (1, 3, 6, 9 e 12 meses) de seguimento, tendo sido estudados os seguintes parâmetros: evolução clínica (peso, ingestão hídrica, ingestão alimentar e diurese) e exames bioquímicos (glicemia de jejum, glicose urinária, glicosúria, cetonúria, colesterol total, colesterol HDL, triglicérides e lipídios). RESULTADOS: A injeção de aloxana 2% na via endovenosa do rato acompanhou-se de um índice de mortalidade de 39%, tendo produzido diabetes grave também em 39% dos animais. O diabetes foi caracterizado por queda progressiva do peso corporal, elevação substancial da ingestão hídrica, ingestão alimentar e da diurese, com valores glicêmicos acima de 300 mg/dl, glicosúria 3+ e, eventualmente, cetonúria. O diabetes não altera o perfil de colesterol e lípides de ratos a longo prazo. CONCLUSÃO: Nossos estudos revelam que a aloxana produz, no rato, alterações clínicas e laboratoriais características de diabetes grave, as quais possibilitam estudos a longo prazo do diabetes.

Efeitos da ligadura do ducto pancreático e da secção ductal com livre drenagem de secreções para o peritônio sobre as funções endócrina e exócrina do pâncreas: estudo clínico e laboratorial em coelhos

As ressecções pancreáticas seguidas de anastomoses acompanham-se de altas taxas de morbidade, que incluem: surtos de pancreatite e, principalmente, fístulas digestivas. Nos transplantes pancreáticos a drenagem da parte exócrina do enxerto para o intestino ou para a bexiga, além das peculiaridades técnicas, também não é isenta de diversas complicações. Visando evitar ou atenuar tais conseqüências e simplificar a técnica cirúrgica, têm sido usadas outras abordagens para o tratamento ductal do coto/enxerto pancreático, tais como: drenagem livre de secreções para o peritônio, com o ducto pancreático aberto, ligadura ductal e oclusão do ducto com polímeros sintéticos. OBJETIVO: O presente estudo visa avaliar clínica e laboratorialmente as funções endócrina e exócrina do pâncreas de coelhos com o ducto aberto e ligado. MÉTODOS: Foram realizadas 150 operações, divididas em 3 grupos: N - manipulação/controle (n=50), A - grupo aberto (n=50), e L - ligado (n=50). Os momentos de observação foram pré-operatório, dia 0 (dia da operação) e pós-operatório (observação e sacrifício): 7 dias, 14 dias, 28 dias, 90 dias e 180 dias. Os parâmetros analisados foram: estado geral, atividade, controles do peso corporal, ingestão hídrica, ingestão alimentar e dosagens da amilase sangüínea, glicemia, glicose urinária e insulina plasmática. RESULTADOS: Todos os grupos tiveram evolução clínica similar, com bom estado geral, ganho ponderal progressivo e valores normais da ingestão hídrica e ingestão alimentar. Exceto uma significativa elevação da amilase sangüínea nas primeiras 24-48h para os 2 grupos com interferência ductal, não houve qualquer alteração dos níveis basais da glicemia, glicosúria e insulinemia entre os 3 grupos experimentais, em todos os momentos de observação. CONCLUSÃO: À exceção da amilase sangüínea, cujos níveis basais foram significativamente elevados no 1º e 2º dias de pós-operatório, as duas modalidades técnicas de abordagem da secreção exócrina do pâncreas, utilizadas em coelhos, não determinaram quaisquer alterações clínicas, bem como dos níveis basais de glicose sangüínea, glicose urinária e insulina plasmática, durante 6 meses de seguimento.

Influence of rutin treatment on biochemical alterations in experimental diabetes

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Comparação entre dois testes de rastreamento do diabetes gestacional e o resultado perinatal

OBJETIVO: comparar dois testes de rastreamento para diabetes e seus resultados com o resultado da gestação. MÉTODOS: no total, 279 pacientes foram submetidas a dois testes de rastreamento do diabetes gestacional - associação glicemia de jejum e fatores de risco (GJ + FR) e o teste de tolerância à glicose simplificado (TTG50g). O rastreamento pela associação GJ + FR caracterizou-se pela dosagem da glicemia de jejum e anamnese para identificação dos fatores de risco na primeira consulta de pré-natal. O TTG50g foi realizado entre a 24ª e a 28ª semana de gestação e caracterizou-se pela dosagem das glicemias plasmáticas em jejum e uma hora após a sobrecarga oral com 50 g de glicose. Os resultados, positivo e negativo, foram relacionados ao resultado da gestação. Foram consideradas variáveis dependentes: via de parto, idade gestacional, peso e índice ponderal ao nascimento, índices de Apgar <7 no 1º e 5º minutos, necessidade de Unidade de Terapia Intensiva (UTI), tempo de permanência hospitalar e óbito neonatal. Empregou-se o teste t de Student, admitindo-se 5% como limite de significância para calcular a diferença de proporção de das médias. RESULTADOS: apenas dois resultados perinatais estudados foram diferenciados pelos testes. O TTG50g alterado esteve associado à maior proporção de cesárea (58,7 versus 34,3%) e a associação GJ + FR positiva, maior taxa de prematuridade (15,4 versus 5,4%). As demais variáveis não foram diferentes nas pacientes com testes de rastreamento positivo e negativo. CONCLUSÕES: Apesar da relação entre a prematuridade e associação GJ + FR positiva e aumento de cesárea e TTG50g alterado, seria falha crítica aceitá-los como definitivos. Entre outras explicações, múltiplos fatores intercorrentes e as características próprias dos testes de rastreamento devem ser consideradas.

Short- and long-term reproductive effects of prenatal and lactational growth restriction caused by maternal diabetes in male rats

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Neonatally Induced Mild Diabetes in Rats and Its Effect on Maternal, Placental, and Fetal Parameters

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Associação glicemia de jejum e fatores de risco como teste para rastreamento do diabete gestacional

OBJETIVOS: comparar dois testes de rastreamento do diabete gestacional. MÉTODOS: estudo prospectivo no qual foram avaliadas 356 gestantes, sem diagnóstico prévio do diabete melito, submetidas, de modo independente, a dois testes de rastreamento: associação glicemia de jejum e fator de risco (GJ+FR) e teste oral simplificado de tolerância à glicose (TTG50g). A comparação entre os métodos foi realizada pelos índices de sensibilidade (S), especificidade (E) e valores preditivos positivo (VPP) e negativo (VPN), resultados falsos, positivos (FP) e negativos (FN) e pela diferença dos resultados observados e esperados, avaliada pelo teste do Qui-quadrado (p<0,05). RESULTADOS: a associação GJ+FR determinou a confirmação diagnóstica em maior número de gestantes (187; 52,5%) que o TTG50g (49; 13,8%). Esta diferença foi significativa (p<0,05). A associação GJ+FR apresentou sensibilidade de 83,7% e valor preditivo negativo (VPN) de 95,3% em relação ao TTG50g. CONCLUSÕES: os índices elevados de sensibilidade e VPN da associação GJ+FR em relação ao TTG50g, sua simplicidade, praticidade, baixo custo e fácil replicação permitem sua indicação no rastreamento do diabete gestacional.

Pressão arterial e freqüência cardíaca avaliadas pela MAPA em primigestas durante o trabalho de parto e puerpério imediato

OBJETIVO: analisar os valores da pressão arterial e da freqüência cardíaca durante o trabalho de parto e puerpério imediato de primigestas normais. MÉTODOS: foram incluídas no estudo 60 parturientes, às quais foi aplicada a monitorização ambulatorial da pressão arterial (MAPA) com uso do aparelho modelo SpaceLabs 90207, durante o trabalho de parto e nas primeiras 12 horas após o mesmo. A pressão arterial e a freqüência cardíaca foram registradas a cada 15 minutos durante o trabalho de parto e na primeira hora após o parto, e a cada 30 minutos até a 12ª hora após o parto. Esses parâmetros foram avaliados em três momentos do trabalho de parto (com dilatação cervical até 7 cm, entre 8 cm e dilatação total e durante o período expulsivo) e em dois momentos do puerpério (na primeira e décima segunda hora). Primeiramente os resultados foram analisados sem levar em consideração o tipo de procedimento anestésico, e depois, dividindo-os em grupos conforme o tipo de procedimento realizado: anestesia local, analgesia peridural lombar e anestesia subaracnóidea. Para comparação dentro de cada grupo foram realizados análise de variância (ANOVA) e teste t de Student pareado e, entre os grupos, o teste t não-pareado. Foi considerado o limite de significância estatística de 5%. RESULTADOS: quando os resultados foram avaliados sem levar em consideração o procedimento anestésico, os valores médios da pressão arterial sistólica, registrados durante o trabalho de parto, foram significativamente mais elevados que no puerpério. Durante o trabalho de parto esses valores foram significativamente mais elevados nos períodos de dilatação final e expulsivo que no período de dilatação inicial e, na 12ª hora, inferiores ao da primeira hora após o parto. Os valores médios da pressão arterial diastólica registrados durante o trabalho de parto foram significativamente mais altos que no puerpério. Estes valores não apresentaram alteração durante os diferentes períodos do trabalho de parto ou durante as primeiras doze horas do puerpério. A freqüência cardíaca aumentou progressivamente durante o trabalho de parto, diminuindo nas primeiras 12 horas após o parto. Quando a pressão arterial e a freqüência cardíaca foram avaliadas conforme o tipo de procedimento anestésico empregado, ambas mostraram-se com mesmo comportamento na anestesia local e peridural, embora naquelas submetidas à anestesia subaracnóidea, tanto a pressão arterial sistólica como a diastólica não apresentaram alteração durante o trabalho de parto. CONCLUSÕES: o trabalho de parto determinou aumento da pressão arterial sistólica e da freqüência cardíaca. Durante o trabalho de parto os valores das pressões arteriais sistólica e diastólica foram mais altos que nas primeiras 12 horas do puerpério, havendo queda significativa entre a primeira e a décima segunda hora do mesmo. Diferentes procedimentos anestésicos não interferiram nos valores das pressões arteriais sistólica e diastólica ou da freqüência cardíaca, durante o trabalho de parto e nas primeiras doze horas após o parto.

The influence of short-term diabetes mellitus and insulin therapy on alveolar bone loss in rats

Background: It is well known that the multiple direct and indirect consequences of hyperglycemia in diabetic individuals have been linked to a number of abnormal host effector mechanisms that could lead to an increased risk of developing periodontal disease.Objective: the aim of this study was to investigate the effect of short-term experimental diabetes and insulin therapy on the severity of alveolar bone loss in rats, and the effect of experimental periodontitis on glycemic control.Methods: Seventy-two male Wistar rats were divided into four groups: group I animals were submitted to dental ligature around lower right first molars (ligated); group II consisted of streptozotocin (STZ)-diabetic, ligated rats; group III represented STZ-diabetic, unligated rats; and group IV consisted of insulin-treated (6 U/day), STZ-diabetic, ligated rats. Blood glucose of all diabetic rats was monitored at regular intervals. Standardized digital radiographs were taken after killing at 7, 15 and 30 days to measure the amount of bone loss about the mesial root surface of the first molar tooth in each rat.Results: No significant (p < 0.05) changes in plasma glucose levels of insulin-treated diabetic rats were found among the different examinations after the beginning of insulin therapy. Rats from group II showed significantly greater increases in mean plasma glucose levels at 15 and 30 days after ligature placement compared with rats from group III (p < 0.05). Furthermore, in spite of the significant alveolar bone loss progression that was observed in groups I, II and IV (p < 0.00001; two-way ANOVA), no significant differences among these groups regarding the severity of bone loss (p = 0.77) and no significant interaction between treatment group and time (p = 0.81) were found.Conclusions: Within the limits of this study, it can be suggested that the severity of periodontal disease was not affected by short-term diabetes, and that experimental periodontitis increased blood glucose levels in uncontrolled diabetic rats.

Evaluation of lipid profile and oxidative stress in STZ-induced rats treated with antioxidant vitamin

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Suplementação nutricional com antioxidantes naturais: efeito da rutina na concentração de colesterol-HDL

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Diabetes evolution in rats after neonatal treatment with alloxan

Physical exercises have been recommended in the prevention of non-insulin dependent diabetes mellitus (NIDDM), but the mechanisms involved in this intervention are not yet fully understood. Experimental models offer the opportunity for the study of this matter. The present study was designed to analyze the diabetes evolution in rats submitted to neonatal treatment with alloxan with the objective of verifying the suitability of the model to future studies with exercises. For this, newly born rats (6 days old) received intraperitoneal alloxan (A = 200 mg/kg of body weight). Rats injected with vehicle (citrate buffer) were used as controls (C). The fasting blood glucose level (mg/dL) was higher in the alloxan group at the day 28 (C=47.25 +/- 5.08; A=54.51 +/- 7.03) but not at the 60 day of age (C=69.18 +/- 8.31; A=66.81 +/- 6.08). The alloxan group presented higher blood glucose level during glucose tolerance test (GTT) (mg/dL. 120 min) in relation to the control group both at day 28 (C=16908.9 +/- 1078.8; A=21737,7 +/- 1106.4) and at day 60 (C=11463.45 +/- 655.30; A=15282.21 +/- 1221.84). Insulinaemia during GTT (ng/mL.120 min) was lower at day 28 (C=158.67 +/- 33.34; A=123.90 +/- 19.80), but presented no difference at day 60 (C=118.83 +/- 26.02; A=97.8 +/- 10.88). At day 60, the glycogen concentration in the soleus muscle (mg/100mg) was lower in the alloxan group (0.3 +/- 0.13) in relation to the control group (0.5 +/- 0.07). No difference was observed between groups in relation to (mu mol/g.h): Glucose Uptake (C = 5.8 +/- 0.63; A = 5.2 +/- 0.73); Glucose Oxidation (C= 4.3 +/- 1.13; A= 3.9 +/- 0.44); Glycogen Synthesis (C= 0.8 +/- 0.18; A= 0.7 +/- 0.18) and Lactate Production (C= 3.8 +/- 0.8; A= 3.8 0.7) by the isolated soleus muscle. The glucose-stimulated insulin secretion (16.7mM) by the isolated islets (ng/5 islets. h) of the alloxan group was lower (14.3 +/- 4.7) than the control group (32.0 +/- 7.9). Thus, we may conclude that this neonatal diabetes induction model gathers interesting characteristics and may be useful for further studies on the role of the exercise in the diabetes mellitus appearance.

Respostas do lactato sanguíneo e da freqüência cardíaca em duas diferentes provas do automobilismo

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Alterações bioquímicas e hepáticas em ratos submetidos à uma dieta hiperlipídica/hiperenergética

OBJETIVO: O presente estudo teve como objetivo analisar as alterações bioquímicas hepáticas decorrentes da administração de uma dieta hiperlipídica/hiperenergética em ratos. MÉTODOS: Foram utilizados 20 ratos (Wistar) com 90 dias de idade divididos em dois grupos, grupo-controle constituída por ratos eutróficos alimentados com dieta comercial para roedores e grupo-dieta constituída por ratos submetidos a uma dieta hiperlipídica/hiperenergética semi purificada feita com 35% de gordura sendo 31% de origem animal a qual possui 39% de gordura saturada e 4% de origem vegetal (óleo de soja). Os animais do grupo-controle foram mantidos com dieta comercial Purina® e o grupo-dieta com uma dieta hiperlipídica/hiperenergética constituída por 35% de gordura. Após 60 dias de administração de uma dieta hiperlipídica/hiperenergética, analisou-se massa corporal, sensibilidade à insulina, concentração sérica de glicose, insulina e ácidos graxos livres e medida do nível de triglicerídeos, lipídeos totais e atividade lipogênica hepática. RESULTADOS: O grupo-dieta apresentou maior massa corporal e resistência à insulina. No sangue não foram encontradas diferenças entre os grupos para os níveis de glicose. Foi evidenciada maior concentração de insulina e de ácidos graxos livres no soro para o grupo-dieta. No fígado o nível de lipídeos totais, triglicerídeos e taxa lipo-gênica foram superiores às do grupo-controle. CONCLUSÃO: Portanto, nossos achados demonstram que dois meses de ingestão de dieta hiperlipídica/hiperenergética por ratos adultos eleva o peso corporal, ácidos graxos livres hepáticos, diminui a sensibilidade à insulina, demostrando sinais típicos de doença hepática gordurosa não-alcoólica.

Effects of physical training on the immune system in diabetic rats

Aims: This study aims to investigate the influence of physical training on the immune system of diabetic rats. Materials and Methods: Adult male Wistar rats were distributed into Sedentary Control (SC), Trained Control (TC), Sedentary Diabetic (SD) and Trained Diabetic (TD) groups were used. Diabetes was induced by alloxan (32 mg/bw-i.v.). Training protocol consisted of swimming, at 32 18C, one hour/day, five days/week, supporting an overload equivalent to 5 of the body weight, during four weeks. At the end of the experiment the rats were sacrificed by decapitation and blood samples were collected for glucose, insulin, albumin, hematocrit determinations, total and differential leukocyte counting. Additionally, liver samples for glycogen analyses were obtained. Results: The results were analyzed by one way at a significance level of 5. Diabetes reduced blood insulin, liver glycogen stores and increased blood glucose and neutrophil count. Physical training restored glycemia, liver glycogen levels, neutrophils and lymphocytes count in diabetic rats. Conclusions: In summary, physical training was able to improve metabolic and immunological aspects in the experimental diabetic rats.