Survival of Trypanosoma cruzi in sugar cane used to prepare juice

Chagas disease can be transmitted to man by many different means, including contact with infected triatomine feces, blood transfusion, laboratory accidents, organ transplants, and congenital or oral routes. The latter mode has received considerable attention recently. In this assay, we evaluate the survival of Trypanosoma cruzi contaminating sugar cane used to prepare juice, as well as the viability and capacity for infection by the parasite after recovery. Thirty triatomines were contaminated with T. cruzi Y strain and 45 days later pieces of sugar cane were contaminated with the intestinal contents of the insects. The pieces were ground at different intervals after contamination (time = 0, 1, 4, 6, 12 and 24 hours) and the juice extracted and analyzed. Different methods were used to show T. cruzi in the juice: direct analysis, hematocrit tube centrifugation and QBC, and experimental inoculation in 47 female BALB/c mice (five control mice and seven mice for each interval examined (five inoculated orally and two intraperitoneally). Positive results were found using the direct analysis and QBC methods for juice prepared up to 12 hours after initial contamination. However, by the centrifugation technique, positivity was found only up to four hours after contamination of the sugar cane. Inoculated animals showed parasitemia during a 14 day observation period, demonstrating the high survival rate of T. cruzi in sugar cane.

Methylene blue vital staining for Trypanosoma cruzi trypomastigotes and epimastigotes

The morphological identification of Trypanosoma cruzi is currently considered to have a high specificity, but its sensitivity, which depends on the volume of the sample examined, is rather low. Trypanosome developmental stages suspended in blood, reduviid feces, and culture media are routinely searched for by means of fresh film examination (about 2 µL). High speed centrifugation of blood samples separates the buffy coat, where most trypomastigotes concentrate. As the parasites are transparent and colorless, their detection is mostly dependent on their motility. The fluorescent vital stain acridine orange has been used to enhance image contrast, as exemplified by the QBC (Quantitative Buffy Coat) technique. Staining blood, buffy coat, reduviid feces, and culture media samples with methylene blue (also a vital dye) is a means of producing sharp, well contrasted images of motile or non-motile T. cruzi developmental stages, only standard laboratory microscopes being required. Slides previously coated with a thin layer of methylene blue are used to stain fresh blood films. Photomicrographs exemplify the results of methylene blue staining applied to living and fixed parasites.

Detection of Trypanosoma cruzi and Trypanosoma rangeli infection in triatomine vectors by amplification of the histone H2A/SIRE and the sno-RNA-C11 genes

Trypanosoma rangeli is non pathogenic for humans but of important medical and epidemiological interest because it shares vertebrate hosts, insect vectors, reservoirs and geographic areas with T. cruzi, the etiological agent of Chagas disease. Therefore, in this work, we set up two PCR reactions, TcH2AF/R and TrFR2, to distinguish T. cruzi from T. rangeli in mixed infections of vectors based on amplification of the histone H2A/SIRE and the small nucleolar RNA Cl1 genes, respectively. Both PCRs were able to appropriately detect all T. cruzi or T. rangeli experimentally infected-triatomines, as well as the S35/S36 PCR which amplifies the variable region of minicircle kDNA of T. cruzi. In mixed infections, whereas T. cruzi DNA was amplified in 100% of samples with TcH2AF/R and S35/S36 PCRs, T. rangeli was detected in 71% with TrF/R2 and in 6% with S35/S36. In a group of Rhodnius colombiensis collected from Coyaima (Colombia), T. cruzi was identified in 100% with both PCRs and T. rangeli in 14% with TrF/R2 and 10% with S35/S36 PCR. These results show that TcH2AF/R and TrF/R2 PCRs which are capable of recognizing all T. cruzi and T. rangeli strains and lineages could be useful for diagnosis as well as for epidemiological field studies of T. cruzi and T. rangeli vector infections.

NATURAL INFECTION BY Trypanosoma cruzi IN ONE DOG IN CENTRAL WESTERN BRAZIL: A CASE REPORT

SUMMARY It is estimated that about 10 million people are infected with Trypanosoma cruzi worldwide, mostly in Latin America and more than 25 million are at risk of acquiring this infection in endemic areas. Dogs are an important reservoir for this pathogen and thus, considered a risk factor for human populations. This report describes one case of Chagas disease in a dog from Cuiabá, Mato Grosso State, Brazil. The diagnosis was obtained by direct examination of trypomastigote forms in blood smears. Amastigotes forms were visualized in microscopy of the bone marrow, lymph nodes, kidneys, liver and brain. The T. cruzi (ZIII) infection was confirmed by Polymerase Chain Reaction, and sequencing. The animal presented multisystemic failure and died. Although acute Chagas disease in humans is not reported in Cuiabá, this is the first report of a canine case in this region. This case represents a warning, to health professionals and authorities, to the possibility of transmission of this zoonosis in Cuiabá.

CHICKEN COOPS, Triatoma dimidiata INFESTATION AND ITS INFECTION WITH Trypanosoma cruzi IN A RURAL VILLAGE OF YUCATAN, MEXICO

This study longitudinally investigated the association between Triatoma dimidiata infestation, triatomine infection with Trypanosoma cruzi and household/backyard environmental characteristics in 101 homesteads in Molas and Yucatan, Mexico, between November 2009 (rainy season) and May 2010 (dry season). Logistic regression models tested the associations between insect infestation/infection and potential household-level risk factors. A total of 200 T. dimidiata were collected from 35.6% of the homesteads, mostly (73%) from the peridomicile. Of all the insects collected, 48% were infected with T. cruzi. Infected insects were collected in 31.6% of the homesteads (54.1% and 45.9% intra- and peridomiciliary, respectively). Approximately 30% of all triatomines collected were found in chicken coops. The presence of a chicken coop in the backyard of a homestead was significantly associated with both the odds of finding T. dimidiata (OR = 4.10, CI 95% = 1.61-10.43, p = 0.003) and the presence of triatomines infected with T. cruzi (OR = 3.37, CI 95% = 1.36-8.33, p = 0.006). The results of this study emphasize the relevance of chicken coops as a putative source of T. dimidiata populations and a potential risk for T. cruzi transmission.

Um foco de doença de Chagas transmitida pelo Triatoma infestans na Baixada Fluminense, Município de Caxias, Estado do Rio de Janeiro, Brasil

Descreve-se neste trabalho um foco de doença de Chagas transmitida pelo Triatoma infestans na Baixada Fluminénse, Município de Caxias, Estado do Rio de Janeiro, onde de 33 casas investigadas em 18 foi referida a presença de triatomineos, vários deles infectados com T. cruzi. Um inquérito sorológico realizado em 110 pessoas residentes nesta área revelou a positividade da reação de fixação do complemento para doença de Chagas em 6, três dos quais tiveram xenodiagnóstico positivo para T. cruzi. Dos 6 pacientes com R.F.C. positiva 3 são naturais da área do foco, inclusive 1 com xenodiagnóstico positivo, comprovando-se assim a transmissão autóclone da doença. Os autores chamam a atenção para a quebra da "barreira ecológica" na dispersão conhecida do Triatoma infestans com adaptação ao domicilio humano numa região onde as condições climátitcas (temperatura, umidade, etc.) deveriam ser desfavoráveis ao desenvolvimento da espécie. Fato da maior importância epidemiológica foi considerada a adaptação de uma espécie de grande capacidade vetora da doença de Chagas, numa área de grande densidade populacional e baixas condições sócio-econômicas sanitárias. Apesar do T. cruzi isolado parecer de baixa patogenicidade consideram os autores uma maior necessidade de "quantificação" no estudo experimental das mostras isoladas.

Tentativa de tratamento específico da fase aguda da doença de Chagas com nitrofuranos em esquema de duração prolongada

Os autores apresentam, sua experiência com o emprêgo áe nitrofuranos em esquemas de duração prolongada em 37 pacientes na fase aguda da doença de Chagas, parasitològicamente comprovada através do exame direto. A atividade terapêutica foi avaliada, fundamentalmente, através do xeno-diagnóstico e da reação de Guerreiro e Machado, repetidos o maior número de vêzes possível ou necessário, cuidando os Autores de não interromper tal prática enquanto resultassem negativos. Os resultados obtidos demonstraram que os nitrofuranos, especialmente a nitrofurazona e o derivado nitrofurfurilidinico "Bayer" 2502, são ativos contra o T. cruzi, exercendo manifesta diminuição da parasitemia, apreciada através do xenodiagnóstieo, negativando a reação de Guerreiro e Machado e abreviando o tempo de duração de certas manifestações clínicas. Uma estreita concordância foi notada entre os resultados do xenodiagnóstieo e da reação de Guerreiro e Machado, após o tratamento. Na maioria dos pacientes pôde ser constatado um efeito supressivo e, em 8, aparente efeito curativo. Chamamos a atenção para o cuidado que se deve ter na avaliação dos efeitos terapêuticos e, também, para a necessidade de vigilância médica durante o tratamento, em vista da ocorrência de efeitos colaterais. Concluem que, presentemente, em casos agudos, deve ser empregado o derivado nitrofurfurilidinico "Bayer" 2502.

Ecologia de triatomíneos e transmissão do Trypanosoma cruzi, com especial referência ao Brasil

Com base em seu comportamento ecológico e seu grau de relacionamento com o homem e os mamíferos domésticos, comensais e sinantrópicos, os triatomíneos são distribuídos em seis grupos: 1) Triatomíneos tipicamente silvestres, isto é, espécies só encontradas em ecótopos naturais e que nunca freqüentam as habitações humanas e suas dependências. Conseqüentemente, nunca entram em contacto com o homem e os mamíferos domésticos, a não ser acidentalmente quando estes penetram nos focos naturais. Entretanto, podem ter papel maior ou menor na manutenção da enzootia tripanossômica silvestre. Exemplos: Psammolestes coreodes, Psammolestes tertius, Cavernicola pilosa, Triatoma dispar, Triatoma delpontei e muitas outras espécies cujos hábitos são pouco conhecidos. 2) Triatomíneos essencialmente silvestres cujos adultos invadem, com maior ou menor freqüência, as habitações humanas e suas dependências, sem, todavia, aqui se colonizar. Além do papel que têm no ciclo silvestre de transmissão do T. cruzi, podem, ao entrar em contacto com o homem e os mamíferos domésticos e domiciliados suscetíveis, transmitir-lhes a infecção, tanto em áreas silvestres quanto em ecótopos artificiais. Exemplos: Panstrongylus geniculatus, Triatoma rubrovaria,Triatoma arthumeivai, Triatoma patagonica, Triatoma eratyrusiforme, Rhodnius domesticus e muitas outras espécies cujos hábitos são poucos conhecidos. 3) Triatomíneos silvestres em fase inicial de adaptação aos ecótopos artificiais, formando pequenas colônias principalmente no peridomicílio e, mais raramente, na própria habitação humana. Além da importância que têm no ciclo silvestre do T. cruzi, podem trazer a infecção para os ecótopos artificiais e, em determinadas instâncias, participar do ciclo domiciliário do parasita. Exemplos: Rhodnius neglectus, Triatoma vitticeps. Triatoma platensis e outras espécies pouco estudadas. 4) Triatomíneos que se criam indiferentemente em ecótopos naturais e artificiais. Embora tenham conseguido adaptar-se com maior ou menor sucesso à habitação humana e suas dependências, são encontradas também em diferentes ecótopos naturais. Além de participar do ciclo silvestre do T. cruzi têm importância no transporte do parasita para os ecótopos artificiais e na infestação inicial ou na reinfestação destes ecótopos livres de insetos pelo expurgo, constituindo também elos na cadeia de transmissão domiciUária da infecção. Exemplos: Panstrongylus megistus, Rhodnius prolixus, Rhodnius pallenscens, Triatoma sórdida, Triatoma brasiliensis, Triatoma maculata, Triatoma pseudomaculata, Triatoma quasayana etc. 5) Triatomíneos bem adotados aos ecótopos artificiais, mas, às vezes, ainda encontrados em focos residuais naturais. São os insetos mais importantes no ciclo domiciiiário do T.cruzi, mas podem, pelo menos em certas áreas, participar do ciclo silvestre da infecção. Exemplo: Triatoma infestans. 6) Triatomíneos estritamente domiciliados. Apesar disto, parecem ter menor importância no ciclo domiciiiário, especialmente na transmissão do T. cruzi ao homem, porque convivem mais com ratos comensais, embora também entrem em contacto com o homem. Exemplo: Triatoma rubrofasciata.

Epidemiologia da doença de Chagas no Ceará IX - estudo de vetores numa área endêmica (Morada Nova)

Os autores apresentaram informações sobre 6.556 triatomíneos capturados na área pela SUCAM, de 1964 a 1974, os quais apresentavam T. cruzi em 4,7%. O estudo atual revelou 1.290 exemplares em 69 localidades trabalhadas, 63,8% com triatomíneos, das quais 52,3% apresentavam triatomíneos infectados, o que significa 33,3% da área. Foram pesquisados ecótopos artificiais distante até 200 metros das casas. Dos 37 ecótopos naturais pesquisados, 73,6% eram habitados por morcegos, 23,7% por preás e 5,2% por punarés, espécies que apresentam variáveis taxas de infecção por T. cruzi. O T. brasiliensis corresponde a 65,5% dos triatomíneos capturados e 942% dos triatomíneos infectados são desta espécie, considerada a principal transmissora de Doença de Chagas na região. Em ecótopos naturais é a única espécie encontrada (10 vezes em 55, os triatomíneos estavam infectados). Dentro das habitações a espécie é menos abundante e menos infectada (2,7%). A segunda espécie é o T. pseudomaculata, (34,3%) considerada sem importância na transmissão da Doença de Chagas; a terceira espécie é o P. megistus, da qual foram capturados apenas 2 exemplares (0,2%).

Epidemiologia da doença de Chagas no Ceará XIII - persistência da transmissão em área desinsetizada

Foi estudado o Município de Morada Nova, desinsetizado de 1972 a 1974, verificando-se aí os seguintes fenômenos: manutenção do ciclo de transmissão em ecótopos artificiais domésticos e peridomésticos e estudados ecótopos naturais onde se desenvolve uma intensa transmissão de T. cruzi. Nesses ecótopos foram capturados triatomíneos que sugaram homem, cão e gato, mostrando a relação que pode existir entre ele e o ciclo doméstico. Os triatomíneos da região são no entanto pouco antropófilos, justificando assim a baixa densidade da endemia chagásica (2,4%).

Uso prévio do Ro 7-1051 na doença de Chagas experimental em camondongos

No presente estudo camondongos "Swiss" foram submetidos a tratamento com a droga Ro 7-1051 (N-Benzil-2-Nitro-imidazolacetamida) antes de sua inoculação com a cepa Colombiana do T. cruzi e comparados com animais inocuiados com a mesma cepa e tratados em fase inicial de infecção. Com avaliação feita por parasitemia periférica, xenodiagnõstico, sub-inoculação em camondongos recém-nascidos e exame histopatológico foram obtidos melhores resultados com os animais submetidos a tratamento prévio, tendo-se verificado que 55,5% dos animais permaneceram negativados durante o curso da experiência, enquanto os tratados precocemente tiveram um índice de cura de 28,5%.

Estudos sobre a epidemiologia da doença de Chagas no Ceará. XXII - ecologia de triatomineos em Pereiro

Foi escolhida, para demolição, uma casa no município de Pereiro, território de prevalência de Triatoma, pseudo maculata, onde raros exemplares de Triatoma, braziliensis são encontrados. Numa área de 13 casas, onde vivem 74 pessoas, foram capturados 41 T., pseudo maculata que apresentaram taxas de infecção de 2,4%. Em Pereiro a infecção hümana é de 2,2% e é baixa a infecção de animais: 2,0% pelo xenodiagnóstico. A casa selecionada foi desinsetizada mais de um ano antes da demolição e 20 dias antes da demolição uma captura mostrou 20 T., pseudo maculata, sendo 50% infectados. Durante a domolição estavam presentes: 6 pessoas, 1 cão. 1 gato, 1 porco e 30 galinhas; na ocasião foram capturados 221 triatomíneos, no teto (0,5 por m²); e nas paredes internas e externas (14 por m²); 180 exemplares foram examinados e apresentaram 7,2% de infecção. Concluiu-se que os métodos normais de captura mostram pequena parte da colônia de triatomíneos numa casa habitada e a taxa de infecção do T. pseudomaculata observada revela sua capacidade de transmissão do Trypanossoma cruzi, pois 20% dos exemplares infectados foram encontrados no quarto.

Ultrastructural alterations of intracellular stages and effects on blood forms of Trypanosoma cruzi induced in vivo by 2-amino-5-(1-methyil-5-nitro-2-imidazolyl)-1,3,4 - Thiadiazole

An electron microscopy study shows that the administration of a single dose (500 mg/kg, p.o.) of 2-amino-5-(1-methyl-5-nitro-2-imidazolyl)-1, 3, 4-thiadiazole induces in mice infected with Trypanosoma cruzi results in degenerative lesions of the intracellular stages. Ultrastructural alterations are detected as early as 6 hours after the drug administration and destruction of the parasites occurs within 18 - 36 hours. Trypomastigotes are cleared from the bloodstream 4 to 6 hours after treatment. The combined effect on both developmental stages is apparently responsible for the in vivo ejfects of this drug which is the most active drug ever tested in our laboratory in experimental Chagas' disease.

Schistosoma mansoni: immunodepression of hepatic schistosome granuloma formation in mice infected by Trypanosoma cruzi

Infection by Trypanosoma cruzi in mice depresses hepatic granuloma formation around Schistosoma mansoni eggs. This immunodepressive effect occurred in mice with Chagas' disease at the acute and/or chronic phases, granulomas being signijicantly smaller than those in Controls. Data suggest that Chagas ' disease depresses the delayed hypersensitivity immune response directly.

Effects of betamethasone on the course of experimentai. Infection with Trypanosoma cruzi

In this experiment, the effect of betamethasone administered in the early post- acute infection of mice by Trypanosoma cruzi was studied. This drug was administered during 30 days after the 42nd day of infection in a dose of 0.15 mg/day. The betamethasone treatment did not cause fresh outbreaks of parasitemia and the histopathological findings in the chronic phase were not different from those in the control group. The higher cumulative mortality after treatment in the experimental group was due to superimposed bacterial infections. Outbred albino mice infected with low numbers ofY strain Trypanosoma cruzi trypomastigotes were not suitable models for Chagas' disease, since after 7 months of observation only mild histological lesions developed in all the animais. Prolonged betamethasone treatment of mice infected with low numbers o/Trypanosoma cruzi of the Y strain, during the post-acute phase did not aggravate the course of infection.